放射免疫结合外照射对实体瘤的实验研究

目的 探讨放射免疫结合外照射对实体瘤的外照射剂量、二者最佳的应用时机与顺序。方法 TS1是一种抗细胞角蛋白8的单克隆抗体，它可以与肿瘤坏死区域中的细胞角蛋白(CKs)8特异地结合，用^131I标记单克隆抗体形成放射性螫合物。60只荷瘤(人宫颈鳞癌)小鼠用于研究：24只做预实验，观察肿瘤的退缩情况，决定合适的外照射剂量；36只做正式实验，分为6个组，分别给不同的治疗方案后比较肿瘤中放射活度比、平均累积吸收剂量、累积吸收总量以及全身放射性螯合物药代动力学。结果 预实验中，当肿瘤接受20Gy外照射时生长明显受抑，增加剂量肿瘤受抑幅度减小。正式实验中，给药前进行外照射组，肿瘤放射活度比、平均累积吸收剂量、累积吸收总量最高，与其他组相比有显著性差异。结论 ^131I-TS1放射免疫导向结合外照射治疗实体瘤，在给药前行20Gy的外照射组中，肿瘤放射活度比、平均累积吸收剂量、累积吸收总量最高，疗效最佳。     

131I-chTNT放射免疫治疗晚期肺癌的疗效观察

目的:观察131I肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体注射液(131I-chTNT)对晚期肺癌的临床疗效,探讨晚期肺癌治疗的新方法. 方法: 选取2006年6月- 2007年6月我院收治的13例经病理证实的晚期肺癌,予以131I-chTNT抗体放射免疫治疗.每次静滴131I-chTNT抗体50mCi,3周-4周后再用1次,每次治疗10天后行ECT检查131I-chTNT在体内的分布.对照组为16例行普通化疗的患者. 结果: 完全缓解(CR) 1例,部分缓解(PR)3例,无变化(NR)8例,进展(PD)1例,总有效率30.76%.与对照组有显著性差异(P<0.05). 结论: 131I-chTNT作为一种新型放射免疫治疗药物,毒副作用较小,对晚期难治性肺癌治疗有一定的疗效.     

~(131)I-chTNT放射免疫治疗晚期肺癌的初步临床体会

背景与目的分析并评价131I肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体(131I-chTNT)对晚期肺癌的治疗作用及其不良反应,探讨治疗晚期肺癌的新方法。     

CAR-NK在实体瘤治疗中的研究进展

瘤免疫细胞治疗近年来备受瞩目。嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor engineered T-cell,CAR-T)细胞用于治疗血液系统恶性肿瘤已经颇见成效,但在实体瘤治疗方面却存在不足。由于具有不同于T细胞的非特异性杀伤肿瘤细胞的能力,CAR修饰的自然杀伤(nature killer,NK)细胞逐渐成为研究热点。目前,广泛的临床前研究证明了CAR-NK细胞疗法的安全性和有效性,尤其在实体瘤治疗方面,展现出了优于CAR-T细胞的应用前景。然而,CAR-NK细胞疗法仍存在一些局限性,需要进一步研究以期实现其临床转化。     

核素标记不同性质单抗瘤内注射治疗大肠癌的研究

目的：探讨核素标记抗细胞膜抗原单克隆抗体联合核素标记抗细菌核单克隆抗体瘤内注射治疗荷人大肠癌裸鼠移植瘤的可行性和优越性,为临床应用核素标记多种不同性质的单克隆抗体进行放射免疫治疗提供实验依据。方法：在裸鼠荷人大肠癌Lovo移植瘤生长至1cm左右时,瘤内分别或同时注射^131I标记的抗大肠癌细胞膜抗原CL3单克隆抗体（^131I-CL3)和^131I标记人／鼠嵌合抗细胞核的单克隆抗体chTNT(^131I-chTNT),治疗后行SPECT显像观察标记抗体在肿瘤内的浓聚,并进行疗效观察。结果：研究发现2种标记抗体联合应用组的肿瘤抑制率为82．3％,明显高于131I－CL3－IT组的57．9％或131I－chTNT组的53．1％,联合应用组标记抗体在肿瘤组织／非肿瘤组织内的放射活度比值（T／NT值）大于单独应用组。结论：131I－CL3联合131I－chTNT瘤内注射放射免疫治疗可增加标记抗体在肿瘤组织内的浓聚,并能提高放射免疫治疗效果。     

肝癌^188Re放射免疫治疗的实验研究

目的研究新型核素188Re标记的抗人肝癌单抗片段HAb18F(ab′)2对荷肝癌移植瘤裸鼠的抑瘤效应.方法建立荷人肝癌移植瘤裸鼠模型.选择肿瘤体积为(30～150)mm3的动物随机分5组,其中3组分别尾静脉注射188Re-HAb18F(ab′)23.7、11.1和18.5MBq,给药2次,观察动物体重和肿瘤体积变化.处死动物,摘取瘤体,石蜡包埋,进行HE染色.结果3组剂量均有不同程度的抑瘤作用,且随着剂量的增加,抑瘤效应增加.低剂量组和中剂量组动物平均体重和生理盐水对照组相比无显著性差异(P＞0.05).组织学检查表明,随着剂量的增加,肿瘤细胞核形态发生明显的变化,从凝固、核碎裂直至溶解.结论188Re-HAb18F(ab′)2是一种新型核素的肝癌导向治疗剂,具有潜在的临床应用前景,本文的研究可为其过渡到临床研究提供参考依据.     

肝癌188Re放射免疫治疗的实验研究

目的：研究新型核素188Re标记的抗人肝癌单抗片段HAb18 F（ab′）2对荷肝癌移植瘤裸鼠的抑瘤效应。方法：建立荷人肝癌移植瘤裸鼠模型。选择肿瘤体积为（30～150）mm3的动物随机分5组，其中3组分别尾静脉注射188Re－HAb18 F（ab′）2 3．7、11．1和18．5MBq，给药2次，观察动物体重和肿瘤体积变化。处死动物，摘取瘤体，石蜡包埋，进行HE染色。结果：3组剂量均有不同程度的抑瘤作用，且随着剂量的增加，抑瘤效应增加。低剂量组和中剂量组动物平均体重和生理盐水对照组相比无显著性差异(P＞0．05)。组织学检查表明，随着剂量的增加，肿瘤细胞核形态发生明显的变化，从凝固、核碎裂直至溶解。结论：188Re－HAb18 F（ab′）2是一种新型核素的肝癌导向治疗剂，具有潜在的临床应用前景，本文的研究可为其过渡到临床研究提供参考依据。     

嵌合抗原受体T细胞治疗实体瘤的研究进展和挑战

随着嵌合抗原受体疗法在血液系统癌症中的惊人疗效,研究者们也在实体瘤方面展开探索。我们将回顾近年来嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）治疗卵巢癌、肺癌、肝癌等实体瘤的研究进展;还将对CAR-T细胞治疗实体瘤的局限性,即抗原特异性问题、CAR-T细胞贩运问题以及肿瘤微环境问题结合相应对策进行综述。     

抗肺癌单克隆抗体LC-1结合90钇对荷肺癌裸鼠的放射免疫治疗实验研究

目的将抗肺癌单克隆抗体LC-1 IgM与90钇结合,制备成放射免疫导向药物,观察其治疗效果.方法取35只裸鼠皮下接种肺癌瘤块,待肿瘤长至5mm左右,随机分成七组.药物经裸鼠尾静脉注射.按每只裸鼠注入的放射免疫导向药物剂量分成空白对照组、单纯单抗组、单纯核素组、50μCi组、150μCi组、300μCi、400μCi治疗组,进行荷肺癌裸鼠的放射免疫治疗研究.每周测量裸鼠荷瘤大小一次,4周后处死裸鼠,取瘤称重.结果与对照组比较,各治疗组的肿瘤生长减慢,肿瘤生长抑制率具有剂量时间依赖性,300μCi组和400μCi组的肿瘤抑制率有显著性差异(P＜0.05).组织病理学检测显示治疗组肿瘤细胞核固缩、结构不清或破裂,部分区域肿瘤细胞全部坏死、消失.结论抗肺癌单克隆抗体LC-1与90钇制成的放射免疫药物可特异性地定位于肿瘤组织,并发挥放射免疫导向治疗作用,具有潜在的临床应用价值.     

肿瘤代谢在嵌合抗原受体T细胞治疗实体瘤中的应用

嵌合抗原受体(CAR)-T细胞疗法是一种前沿的、有效的、快速发展的过继细胞免疫疗法。CAR-T细胞可以独立识别肿瘤细胞的表面抗原,而不受主要组织相容性复合体的限制,从而减少了肿瘤细胞主要组织相容性复合体(MHC)相关抗原呈递缺失导致的免疫逃逸。尽管它已经被应用于血液系统恶性肿瘤并取得了令人瞩目的成果,但其在实体瘤的治疗应用上仍然受到一些不利因素的影响。其中一个因素是新陈代谢,这是一组基本的细胞过程,不仅维持细胞的生存和增殖,还作为细胞适应其局部环境的手段。肿瘤微环境内肿瘤细胞代谢会产生对碳水化合物和氨基酸等营养素的大量竞争,加上免疫抑制,会导致CAR-T细胞线粒体功能障碍、衰竭和随后的CAR-T细胞耗竭,进而导致CAR-T细胞疗法的失败。阐明抑制实体瘤中CAR-T细胞功能的细胞内在和外在因素将促进免疫治疗的发展,从而在患者体内建立更持久有效的反应。本文简要介绍了肿瘤代谢相关的免疫抑制因素在CAR-T细胞疗法中的应用,并且介绍了在体内外提高CAR-T细胞代谢适应性和抗肿瘤活性的最新进展和策略。     

131I标记抗CD20单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内动态分布的实验研究

目的:探讨131I-anti-CD20 McAb经瘤内注射后在荷人Burkitts淋巴瘤细胞系Raji细胞移植瘤裸鼠体内的动态分布。方法:131I标记物的标记采用IODO-GEN碘化标记;注射标记物后第1、3、7、15天将荷瘤裸鼠活杀,定标器测量并计算瘤组织、血液等12种器官或组织的瘤/非瘤(T/NT)比值以及%ID/g值(每克组织摄入注入量的百分数)。结果:131I-anti-CD20 McAb瘤内注射组血液及其他组织器官T/NT比值在给药后第1、3和7天均显著高于腹腔注射组和131I-IgG瘤内注射组(P<0.05);该组肿瘤%ID/g值在给药后第1、3和7天分别为后两组的1.4~17倍和1.7~3.7倍;各非瘤组织和器官的%ID/g值低于后两组。结论:131I-anti-CD20 McAb经瘤内途径给药可以使肿瘤获得最高的放射性药物摄取率和最高的瘤/非瘤组织放射性药物摄取比,为下一步运用该途径进行放射免疫治疗提供了实验依据。     

实体肿瘤免疫治疗的关键问题与对策

近年来,肿瘤免疫治疗取得重大突破性进展,以CAR-T为代表的细胞免疫治疗在血液肿瘤的治疗中取得了令人鼓舞的临床疗效,免疫卡控点抑制剂CTLA4和PD-1/PD-L1单抗也相继获批用于临床.然而,大多数实体肿瘤患者并不能从免疫治疗中获益.本文从个体化新抗原表位的筛选、免疫细胞活力的维持、免疫细胞趋化与浸润、临床治疗模式和评价标准等方面总结了实体肿瘤免疫治疗难以见效的关键问题,并且从临床应用角度阐述其应对策略.     

CAR-T细胞治疗实体肿瘤的新策略

[摘要] 嵌合型抗原受体修饰T(chimeric antigen receptor modified T,CAR-T)细胞治疗作为一种新的过继性免疫疗法在血液肿瘤中已取得了较好的疗效。在实体肿瘤中,肿瘤微环境中存在大量免疫抑制细胞、免疫抑制分子以及胞外基质,对迁移的CAR-T细胞的细胞毒性效应产生抑制作用,在实体肿瘤内严重抑制CAR-T细胞的抗肿瘤效力。同时,大多数实体肿瘤存在肿瘤异质性且缺乏相对特异性肿瘤抗原,CAR-T细胞在实体肿瘤部位的归巢能力差并伴随着脱靶效应,使其在实体瘤中的疗效欠佳。与血液肿瘤相比,实体瘤具有复杂的生物学特性,需要针对性的策略才能保证CAR-T细胞抗肿瘤长期有效。本文就CAR-T 细胞的发展、在实体瘤治疗中的困惑及治疗策略的研究进展作一阐述。     

小剂量放射免疫治疗的可行性及安全性的实验研究

目的　研究多次小剂量放射免疫治疗 (RIT )对肿瘤小体积转移灶的预防和治疗作用及使用安全性。方法　采用高转移率的LA 795肺腺癌小鼠模型。比较在第 8天或第 15天施行肿瘤原发灶切除后分别给予分次小剂量RIT、化疗、单次大剂量RIT的抑瘤效果。观察正常小鼠放射免疫治疗后体重、外周血白细胞和血小板的改变及主要器官组织病理改变。结果　不同手术时间的综合治疗均显示 ,分次小剂量RIT组小鼠生存期延长 ,肺转移灶数减少 (分别有 3例和 2例无转移 ) ,疗效优于其它各组 (P<0 .0 5 )。提早手术并分次小剂量放射免疫治疗的疗效更佳 (P <0 .0 5 )。大、小 2种剂量131I C5 0对小鼠的白细胞、血小板的数量无显著影响 ;对骨髓及其它重要器官无明显的抑制和辐射损伤。结论　分次小剂量RIT优于化疗 ;提前手术加分次小剂量RIT疗效更优 ;131I C5 0小剂量放射免疫治疗是安全的。     

人肝癌移植瘤多药耐药模型的建立及耐药机制的探讨

背景与目的肿瘤多药耐药是肿瘤化疗的主要障碍和研究热点,本研究拟建立人肝癌裸小鼠皮下及肝原位移植多药耐药模型,探讨其生物学特性和耐药机制的异同,为研究体内逆转肿瘤多药耐药提供理想的动物模型。方法人肝癌细胞系HepG2裸鼠肝原位、皮下移植后,用阿霉素腹腔注射诱导耐药。MTT法检测耐药细胞对抗肿瘤药的敏感性,流式细胞仪检测癌细胞膜蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)的表达和细胞对罗丹明(R123)的外排作用,逆转录PCR检测耐药细胞中三种膜蛋白mRNA的表达。结果肝原位和皮下移植瘤耐药细胞形态及生物学行为符合人肝癌特征;对多种药物产生较明显的耐药性,其中对阿霉素的耐药倍数分别为26.4和24.6;肝皮下移植和原位移植组耐药细胞膜蛋白P-gp、MRP和LRP的阳性率均增高,分别为(77.3±2.1)%和(78.1±1.9)%,(72.1±4.3)%和(72.7±5.1)%,(31.1±1.0)%和(32.2±1.4)%。多药耐药基因的阳性率也明显增高,细胞对R123的外排作用增强;肝原位移植瘤组与皮下移植瘤组比较,多药耐药性差异没有统计学意义(P>0.05)。结论所建立的裸鼠肝原位及皮下移植瘤多药耐药模型符合人肿瘤多药耐药特征,为研究体内逆转多药耐药提供了理想的动物模型。     

放射性碘-131在荷乳腺癌裸鼠体内分布与显像的实验研究

背景与目的近年发现约85%的雌激素受体阳性乳腺癌及其转移组织细胞表面存在大量碘转运体(sodium/iodidesymporter,NIS),可主动将血液中的碘转运到乳腺癌组织,其碘浓度远高于其他组织。本实验观察放射性131I在乳腺癌荷瘤裸鼠体内生物分布及核素显像,探讨131I对雌激素受体阳性乳腺癌的特异性亲和作用。方法制备MCF-7/ER(+)与MCF-7/ER(-)人乳腺癌裸鼠模型,当肿瘤长至0.8～1.0cm时腹腔注射131I37～55.5MBq,分别于注射后6、12、24h处死裸鼠,取血标本和心、肺、肝、肾、胃、小肠、肌肉、肿瘤组织,分别测量每克组织每分钟的放射性计数,计算每克组织摄取的放射性占总注入量的百分比(%ID/g)及肿瘤与非肿瘤组织之比(T/NT)。同时于不同时段对裸鼠行核素显像,观察131I在裸鼠体内的分布。结果注射131I后6hMCF-7/ER(+)组裸鼠肿瘤组织放射性浓度已较高,与MCF-7/ER(-)组相比有显著性差异(P<0.05),甲状腺、血液、肝脏、胃、肾放射性浓度也相对较高。12h时MCF-7/ER(+)组血、心、肺、小肠、肌肉的T/NT分别为2.39、3.06、3.94、7.69、7.60,24h时分别为5.15、5.47、5.29、11.44、10.99,而12h时放射性较高的肝、肾、胃T/NT也达到1.82、2.65、2.60。显像结果示12h时MCF-7/ER(+)裸鼠肿瘤部位可看到明显的放射性浓聚灶,24h仍可清