TIMPs与肝纤维化

肝纤维化的主要病理变化就是ＥＣＭ (细胞外基质 ,ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｒｍａｔｒｉｘ)在肝脏中过多沉积。肝脏ＥＣＭ的代谢主要由ＭＭＰｓ(基质金属蛋白酶 ,ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｐｒｏ ｔｅａｓｅ)及其抑制因子ＭＭＰｓ(基质金属蛋白酶的组织抑制因子 ,ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｐｒｏｔｅａｓｅ)所调节 ,ＭＭＰｓ促进ＥＣＭ的降解 ,而ＴＩＭＰｓ通过抑制ＭＭＰｓ,阻止ＥＣＭ的降解 ,从而形成或促进肝纤维化。肝脏受损后 ,一方面ＥＣＭ合成增多 ,另一方面ＴＩＭＰｓ表达上调 ,发挥对ＭＭＰｓ的普遍抑制作用 ,使Ｅ…     

实验性肝纤维化间质胶原酶酶原表达的研究

肝纤维化实质是Ⅰ、Ⅲ型为主的胶原纤维等细胞外基质(ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ)合成与降解失衡 ,在肝内过度沉积而形成的病理性疾病。基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ)是一组参与降解ＥＣＭ的主要水解蛋白酶 ,目前肝内发现了 8种 ,其中间质胶原酶 (ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｃｏｌｌａ ｇｅｎａｓｅ,ＭＭＰ 1ｉｎｈｕｍａｎ ,ＭＭＰ 13ｉｎｒａｔ)主要参与Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解 ,与肝纤维化的发生发展紧密相关[1] 。既往研究表明 ,肝损伤或肝纤维化早期间质胶原酶活性常…     

基质金属蛋白酶表达与调控

肝纤维化是肝脏慢性损伤后细胞外基质（ｅｘｔｒａ－ｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ）数量增加和／或成分改变，目前认为，ＥＣＭ在肝脏累积是其合成和降解失去平衡的结果，因此研究ＥＣＭ降解及其调控日益受到人们重视［１］。Ｉｒｅｄａｌｅ等［２］发现肝纤维化，甚至肝硬化有ＥＣＭ降解发生逆转的可能，基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ，ＭＭＰｓ）是 ＥＣＭ降解的主要酶系，为防治肝纤维化提出了新的策略，本文就这方面的进展作一综述。１ ＭＭＰｓ与ＥＣＭ降解 ＭＭＰｓ是一类锌或钙依赖…     

实验性肝纤维化过程中明胶酶A基因表达的动态变化

肝纤维化的实质是Ⅰ，Ⅲ型为主胶原纤维等细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ）合成与降解失衡，导致在ＥＣＭ肝内过度沉积而形成的．基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ，ＭＭＰｓ）是一族参与降解ＥＣＭ的主要水解蛋白酶，目前为止该家族至少已有２０个成员，肝内发现了８种．其中明胶酶Ａ（ＭＭＰ２），即Ⅳ型胶原酶，主要参与基底膜Ⅳ型胶原的代谢，与肝纤维化的发生发展紧密相关［１］．为了了解肝纤维化过程中ｍｍｐ２基因变化，我们应用四氯化碳（ＣＣｌ４）中毒性方法…     

基质金属蛋白酶-2与肝纤维化

肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展的共同病理过程 ,其实质是以Ⅰ、Ⅲ型为主的胶原纤维等细胞外基质 (ＥＣＭ )合成与降解失衡 ,导致ＥＣＭ在肝内过度沉积而形成的。研究表明 ,参与ＥＣＭ降解的主要是基质金属蛋白酶类 (ＭＭＰｓ) ,其中基质金属蛋白酶 2 (ＭＭＰ 2 )在ＥＣＭ的降解与重塑中起着非常重要的作用 ,并有其独特的性质。本文就ＭＭＰ 2的来源、性质、结构及其在肝纤维化的发生、发展中的作用等作一介绍。一、ＭＭＰ 2的来源、结构ＭＭＰ 2又名明胶酶Ａ ,为Ⅳ型胶原酶的一种。相对分子质量为 72× 10 3 ,无糖基形式 ,主要由各种…     

基质金属蛋白酶及其抑制剂TIMPs在心肌间质重塑中的作用

心脏重塑是各种病因的进展性充血性心力衰竭的共同病理机制。心脏重塑不仅表现为心肌细胞的凋亡、坏死、肥大、延长和心肌肥厚 ,还表现为心肌间质纤维胶原合成和降解之间动态平衡的破坏。基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ)是降解细胞外基质 (ＥＣＭ)成分的最主要酶系 ,金属蛋白酶组织抑制因子 (ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＴＩＭＰｓ)是基质金属蛋白酶的内源性特异性抑制剂。近年的研究发现 ,ＭＭＰｓ和ＴＩＭＰｓ在调节心肌细胞外基质的更新中…     

逆转录定量PCR检测实验性肝纤维化组织中金属蛋白酶抑制因子-1的表达

肝纤维化是Ⅰ,Ⅲ型胶原为主的细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ）成分过度沉积导致的病理性疾病．基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ）是一族依赖Ｚｎ离子降解ＥＣＭ成分的水解蛋白．目前为止该家族肝内发现８个成员,它们的抑制因子１（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ１,ＴＩＭＰ１）可以抑制其活化和活性,因此,ＴＩＭＰ１与肝纤维化的发生发展紧密相关．我们应用大鼠ＣＣｌ４肝纤维化模型,通过逆转录定量ＰＣ…     

肝纤维化的基因治疗

肝纤维化是多种慢性肝病的共同病理基础与特征 ,表现为以胶原为主的肝脏细胞外基质 (ＥＣＭ )各成分合成增多 ,降解相对不足 ,过多沉积在肝内。若进一步发展引起肝小叶改建、假小叶与结节形成 ,则进入肝硬化。目前认为肝纤维化是可逆性病变 ,而肝硬化则不可逆转。但在实际工作中 ,对肝纤维化治疗仍缺乏有效办法 ,因此如何从抑制ＥＣＭ过度合成 ,或从促进ＥＣＭ降解的角度 ,积极寻找肝纤维化治疗的新方法 ,具有重要的现实意义与社会意义。基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｉｎａｓｅｓ,简称ＭＭＰｓ)是一组重要的锌离子依赖的蛋白水解酶 ,参与多种组织的病理和生理性基质溶解和重建过程。目前认为 ,ＭＭＰｓ在肝内ＥＣＭ降解过程中发挥重要作用。肝内ＭＭＰｓ来源主要为肝星状细胞 (ＨＳＣ) ,其在早期肝损伤等条件下被激活 ,由静态转为肌纤维样细胞 ,合成ＭＭＰ 1、ＭＭＰ 2、ＭＭＰ 3等参与肝内ＥＣＭ降解。其中肝内间质胶原酶 (大鼠为ＭＭＰ 13,人为ＭＭＰ 1)主要分解Ⅰ、Ⅲ型胶原 ,在阻止肝脏ＥＣＭ过度沉积中起着重要作用。从已进行的研究表明 ,ＭＭＰ 1在肝纤维化过程中表达数量上并无显著改变 ,但其降解胶原的...     

实验性肝纤维化过程中间质胶原酶表达的研究

肝纤维化是多种慢性肝损伤的不良结局,为慢性肝病向肝硬变发展的病理过程．其实质是Ⅰ,Ⅲ为主的胶原纤维等细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ）合成与降解失衡,导致在ＥＣＭ肝内过度沉积而形成的．基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ）是一族参与降解ＥＣＭ的主要水解蛋白酶,目前为止该家族至少已有２０个成员,肝内发现了８种,其中间质胶原酶（ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ,ｍｍｐ１ｉｎｈｕｍａｎ,ｍｍｐ１３ｉｎｒａｔ）主要参与Ⅰ,…     

鼠肝纤维化基质金属蛋白酶及其抑制因子的表达

基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ）是一族依赖Ｚｎ离子而降解各种细胞外基质的蛋白酶．肝内主要基质金属蛋白酶ＭＭＰ１,ＭＭＰ２和组织金属蛋白酶抑制因子１（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ１,ＴＩＭＰ１）表达不平衡与肝纤维化的发生发展紧密相关．１　材料和方法清洁型Ｗｉｓｔａｒ♂大鼠１４０只,分肝纤维化模型组和正常对照组各７０只．两组动物按预定处死时间点各分为７个亚组．应用４０％（Ｖ／Ｖ）ＣＣｌ４纯花生油溶液予肝纤维…     

基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1在肺间质纤维化实验中的

细胞外基质 (ＥＣＭ)合成和降解失衡是引起ＥＣＭ积聚导致肺间质纤维化的重要病理生理因素。基质金属蛋白酶(ＭＭＰｓ)及其抑制物 (ＴＩＭＰｓ)是调节ＥＣＭ降解的重要体系。我们以博莱霉素诱导的肺间质纤维化大鼠为模型 ,观察肺间质纤维化发生过程中基质金属蛋白酶 2、9(ＭＭＰ 2、ＭＭＰ 9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子 1(ＴＩＭＰ 1)基因表达的变化 ,探讨ＭＭＰ 2、9和ＴＩＭＰ 1在肺间质纤维化发病中的作用。材料与方法　 (1)动物模型制备 :雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 6 0只(沈阳军区医学专科学校动物实验中心提供 ) ,体重 (2 15±2 0 )ｇ,…     

基质金属蛋白酶—2在肝纤维化时的表达

基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ）特异性地分解细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ）,对胶原的沉积和组织结构的改建具有重要作用。肝星形细胞（ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ,又称ｆａｔｓｔｏｒｉｎｇｃｅｌｌ,ｌｉｐｏｃｙｔｅ）不仅是肝纤维化时合成ＥＣＭ的主要来源［１］,而且能表达和分泌基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）［２］,直接参与ＥＣＭ的代谢。本文分别测定了正常与ＣＣｌ４诱导的肝纤维化大鼠肝组织和ＨＳＣ的ＭＭＰ…     

明胶酶与脑血管疾病的血管损伤及保护

细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ)是细胞之间的物质 ,由多种蛋白质和非蛋白成分组成 ,构成细胞生活的微环境 ,具有支持、连结、营养和防御的作用。他们处在不断代谢、更新、降解、重塑的动态平衡中 ,这种平衡的失调与体内多种病理过程密切相关[1] 。基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ,ＭＭＰｓ)是降解ＥＣＭ的最重要的蛋白酶[2 ] ,其中 ,明胶酶Ａ和明胶酶Ｂ与脑血管疾病发生、发展的病理生理机制密切相关。1　基质金属蛋白酶及其组织抑制剂　ＭＭＰｓ是一组含Ｚｎ2 + 的降解细…     

MMPs／TIMPs与肝脏疾病

基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)是一组蛋白酶类 ,具有降解细胞外基质 (ＥＣＭ )作用 ,其活性受金属蛋白酶组织抑制剂 (ＴＩＭＰｓ)调节 ,近年发现在许多肝脏疾病如各种原因的肝纤维化和肝细胞癌中ＭＭＰｓ和ＴＩＭＰｓ起重要作用 ,本文对它们的组成、特性、生物学功能及临床意义等方面的进展作一综述。1　ＭＭＰｓ和ＴＩＭＰｓ组成、特性与生物学功能　　ＭＭＰｓ是含有Ｃａ2 + -Ｚｎ2 + 的一组酶类 ,具有降解各型胶原 ,蛋白聚糖等ＥＣＭ成分作用 ,现今发现有 16种 ,按作用底物不同分五大类 :(1)胶原酶(ＭＭＰ - 1,- 8,- 13) ,降解Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型…     

重视肝纤维化细胞外基质降解中TIMPs的研究

在正常肝脏纤维组织中存在着细胞外基质(ＥＣＭ)的合成与降解的动态平衡 ,肝纤维化及肝硬化时纤维结缔组织的形成 ,是各种不同致病因子导致ＥＣＭ合成与降解的失衡所致。纤维组织的形成不是一个静止过程 ,而是一个动态过程 ,因此 ,研究肝纤维化及早期肝硬化的可逆性 ,在注意胶原合成过程的同时 ,应加强胶原降解过程的研究。1　胶原降解主要由基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)介导既往对肝纤维化ＥＣＭ合成与沉积的研究比较深入。ＥＣＭ主要由胶原以及蛋白多糖、糖蛋白等组成 ,肝星状细胞 (ＨＳＣ)是其主要来源。处于“静止”期的ＨＳＣ主要合成Ⅳ…     

纤溶酶原激活物抑制剂-1与肾脏疾病

肾小球硬化与肾间质纤维化归根到底是细胞外基质（ＥＣＭ）合成与降解失衡导致ＥＣＭ过度积聚的结果。目前已经知道参与ＥＣＭ降解的酶主要有三类：①基质金属蛋白酶（ＭＭＰ）；②丝氨酸蛋白酶；③半胱氨酸蛋白酶。其中主要的是前二类。ＥＣＭ的蛋白质成分降解均需要ＥＣ...     

非小细胞肺癌中MMP-9、TIMP-1表达与转移和预后的关系

恶性肿瘤的浸润和转移是一个多阶段、多步骤、多种成分参与的序贯连续过程 ,肿瘤组织对细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ)的降解是肿瘤细胞能否形成转移的关键步骤。目前研究证实基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ,ＭＭＰ)与金属蛋白酶组织型抑制因子 (ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ,ＴＩＭＰ)是参与和调控此过程的重要胶原酶系统[1] 。材料与方法　 65例非小细胞肺癌 (ＮＳＣＬＣ)组织蜡块来自中国医科大学附属第一医院 1989～ 1992年…     

基质金属蛋白酶-2在肝纤维化发生发展过程中的研究进展

肝纤维化是多种慢性肝损伤的共同后果 ,进一步则发展为肝硬化 ,其特征是细胞外基质产生和降解不平衡导致间质胶原及其它基质成分积聚。与基质降解有关的金属蛋白酶近年得到较深入研究 ,特别是 (Ｍａ ｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ 2 ,ＭＭＰ 2 )与肝纤维化的关系越来越受到重视。ＭＭＰ 2初次发现于小鼠转移性肿瘤和兔骨培养中[1- 4] ,研究表明肿瘤源性Ⅳ型胶原酶和源于兔骨培养的明胶酶乃同一种酶。故ＭＭＰ 2属于Ⅳ型胶原酶 ,又名明胶酶Ａ。Ⅳ型胶原酶 /明胶酶Ａ(72ｋＤ)在Ｈａ ｒａｓ转化的支气管上皮中被克隆出来并作…     

人尿激酶型纤溶酶原激活剂重组腺病毒的构建及其在肝星状细胞中的表达

抑制ＨＳＣ激活和ＥＣＭ合成 ,促进ＥＣＭ降解已成为抗肝纤维化治疗的重要途径。基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)是抑制ＥＣＭ在肝脏内沉积的主要蛋白酶。研究证实 ,纤溶酶原由尿激酶型纤溶酶原激活剂 (ｕＰＡ)激活形成纤溶酶后 ,可将以酶原形式分泌的ＭＭＰｓ裂解而激活。此外 ,纤溶酶也可直接降解ＥＣＭ。本实验利用细菌内的同源重组机制构建以ＣＭＶ驱动并同时表达绿色荧光蛋白 (ＧＦＰ)的非分泌型ｕＰＡ复制缺陷型重组腺病毒 (ＡｄｕＰＡ) ,并研究其在ＨＳＣ中的表达和降解胶原的作用 ,为肝纤维化基因治疗研究提供新的手段。设计引物 ,ＰＣＲ获取氨基端以ＲＲ固定信号序列修饰和羧基端经ＫＤＥＬ信号修饰的ｕＰＡｃＤＮＡ片段 ,同时加入ＫｐｎⅠ和ＨｉｎｄⅢ的限制性酶切位点。通过体外连接构建 ｐＡｄＴｒａｃｋ ＣＭＶ ｕＰＡ穿梭载体 ;酶切线性化后与骨架载体ｐＡｄＥａｓｙ 1电穿孔共转化ＢＪ5 183感受态细菌 ,经同源重组得到重组腺病毒质粒ｐＡｄｕＰＡ ,然后在 2 93细胞内包装得到非分泌型重组腺病毒ＡｄｕＰＡ ;以一定滴度的ＡｄｕＰＡ感染ＨＳＣ ,ＲＴ ＰＣＲ法测定其在ＨＳＣ中的表达 ;同时检测ＭＭＰｓ活性并利用免疫细胞化学技术测定...     

金属蛋白酶组织抑制因子1与肝纤维化

近年来,有关胶原降解方面的改变在肝纤维化形成中的作用日益引起重视。金属蛋白酶组织抑制因子(ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＴＩＭＰ)是一组胶原酶抑制物,通过与相应的胶原酶结合而抑制其对胶原的分解。ＴＩＭＰ1主要特异性地结合激活的间质胶原酶(ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ1,ＭＭＰ1),从而抑制其对Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解[1]。肝脏星形细胞(ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ,ＨＳＣ)在体外培养时能够表达和分泌ＴＩＭＰ1[2]。为了研究ＴＩＭＰ1在肝纤维化过程中…