β-细辛醚对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的探讨β-细辛醚对Aβ25-35所致PC12细胞凋亡的抑制作用。方法以Aβ25-35建造体外PC12细胞损伤模型,观察β-细辛醚对其细胞存活率、细胞形态、乳酸脱氢酶(LDH)的含量和Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9 mRNA表达的影响。结果 10μmol/L的Aβ25-35与PC12细胞共培养24 h出现明显损伤,细胞活力下降,培养液中LDH含量增多,Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9 mRNA表达水平增高。15 mg/L、30 mg/L、60 mg/Lβ-细辛醚可有效改善Aβ25-35引起的PC12细胞形态改变,提高细胞存活力,减少LDH渗漏,明显降低Aβ25-35引起的PC12细胞Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9 mRNA表达水平。结论β-细辛醚对Aβ25-35所致PC12细胞损伤有保护作用。     

β-细辛醚对谷氨酸所致脑皮层神经元损伤的保护作用

目的:研究β-细辛醚对谷氨酸所诱导的离体培养皮层神经细胞损伤的保护作用。方法:运用新生乳鼠皮层神经细胞体外原代培养技术建立神经细胞谷氨酸损伤模型,观察β-细辛醚对其细胞形态、损伤程度、存活力、细胞内钙离子浓度和细胞凋亡的影响。结果:40 mmol/L谷氨酸作用皮层神经细胞16h,出现明显损伤,凋亡率和死亡率升高,培养上清液中LDH含量增加;7.5、15、30μg/mlβ-细辛醚可有效改善谷氨酸损伤引起的神经细胞形态改变,提高细胞存活力、减少LDH渗漏、降低细胞凋亡率;15、30μg/mlβ-细辛醚能降低由谷氨酸引起的细胞内钙离子含量。结论:β-细辛醚对谷氨酸所致的皮层神经细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与钙拮抗作用有关。     

石菖蒲有效成分配伍对Aβ损伤PC12细胞的保护作用

目的观察石菖蒲有效成分β-细辛醚和丁香酚组合对β-淀粉样蛋白毒性损伤PC12细胞的保护作用,探讨中药有效成分配伍的优越性。方法观察给药后PC12细胞形态、细胞存活率、细胞内Ca2 浓度和NO的变化。结果β-细辛醚10μmol/L 丁香酚3μmol/L组合能有效减少细胞内Ca2 浓度,抑制NO的产生,提高细胞存活率。结论石菖蒲有效成分的配伍,能更好地发挥保护PC12细胞免受β淀粉样蛋白毒性损伤的作用。     

二氮嗪对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用

近来研究表明 ,二氮嗪是一种选择性线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂 ,它不仅是血管扩张剂 ,还是耐缺血缺氧损伤的心脏保护药物。本研究的目的旨在从体外培养的PC12细胞水平初步探讨二氮嗪的神经保护作用。1　材料和方法1.1　细胞、药品和试剂大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤株PC12细胞 (南京医科大学胡刚教授惠赠 )。二氮嗪 (军事医学科学院毒物药物研究所合成 ,MTTFluka) ,DMEM培养基 (Gibco) ,新牛血清 (杭州四季青生物工程材料研究所 ) ,乳酸脱氢酶 (LDH)试剂盒 (北京中生生物工程高科技公司 )。1.2　方法1.2 .1　PC12细胞的培养及谷氨酸…     

β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响

目的:观察β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响。方法:用免疫细胞化学方法检测皮层神经细胞特异性标志物NSE、GFAP的表达;在体外将不同浓度β-细辛醚与PC12细胞和皮层神经细胞各作用24 h,用相差显微镜观察细胞形态的改变,并用MTT比色法检测细胞活力的变化。结果:原代培养的乳鼠皮层神经细胞大多数NSE呈阳性表达,少量GFAP呈阳性表达;β-细辛醚与PC12细胞作用24 h,低浓度β-细辛醚(7.5、15、30、60μg/ml)有促增殖作用,高浓度β-细辛醚(120、140、2480μg/ml)则可抑制其增殖,且随药物浓度的增加而增强;β-细辛醚与皮层神经细胞作用24 h,7.5、15、30、60、120μg/mlβ-细辛醚对其细胞形态和活力无明显影响,240μg/mlβ-细辛醚对其有促增殖作用,而480μg/mlβ-细辛醚对其则有损伤作用。结论:β-细辛醚可能有抗肿瘤和保护神经细胞的作用。     

盐酸川芎嗪对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用

目的:探讨盐酸川芎嗪对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法:以谷氨酸损伤的PC12细胞为模型,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活状况,测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性来反映细胞损伤程度。结果:用谷氨酸(25mmol/L)和PC12细胞共同孵育24h后,细胞活性明显下降,不同浓度的盐酸川芎嗪(19.5、39.0、78.0μg/mL)预处理1h后可明显提高谷氨酸诱导的PC12细胞还原MTT的能力,抑制该细胞LDH的释放。结论:盐酸川芎嗪能明显减轻PC12细胞的谷氨酸损伤,对神经细胞的损伤有一定的保护作用。     

β-细辛醚对Aβ_(1-42)诱导PC12细胞炎症因子表达的影响

目的:探讨β-细辛醚对Aβ_(1-42)诱导PC12细胞炎症因子表达的影响。方法:(1)将对数生长期PC12细胞随机分为正常对照组、Aβ_(1-42)3.3μM、Aβ_(1-42)10μM、Aβ_(1-42)30μM。采用实时无标记动态细胞分析技术(Real Time Cell Analusis,RTCA)和MTT法检测各组PC12细胞存活率;Western blotting检测PC12细胞的IL-1β和TNF-α蛋白表达的变化。(2)将对数生长期PC12细胞随机分为正常对照组、Aβ_(1-42)模型组、β-细辛醚18.5μg·mL~(-1)、β-细辛醚55.5μg·mL~(-1)、β-细辛醚166.7μg·mL~(-1)。采用Western blotting检测PC12细胞的IL-1β和TNF-α蛋白表达的变化。结果:(1)3.3μM Aβ_(1-42)能显著增加PC12细胞IL-1β和TNF-α的蛋白表达(P<0.05),对PC12细胞的存活率无显著影响(P>0.05)。(2)与正常对照组相比,Aβ_(1-42)模型组细胞的IL-1β和TNF-α的表达明显增加(P<0.01)。与Aβ_(1-42)模型组相比,β-细辛醚(55.5μg·mL~(-1)、166.7μg·m L~-1)能显著降低PC12细胞IL-1β、TNF-α的表达(P<0.01),β-细辛醚(18.5μg·mL~(-1))能降低PC12细胞IL-1β的表达(P<0.05),但对TNF-α的表达无显著影响(P>0.05)。结论:β-细辛醚可以有效地抑制Aβ_(1-42)诱导的PC12细胞分泌IL-1β、TNF-α的蛋白表达。     

β-细辛醚对Aβ_(1-42)诱导星形胶质细胞活化所致PC12细胞损伤的保护作用研究

该文探讨β-细辛醚对Aβ1-42诱导星形胶质细胞活化所致PC12细胞损伤的保护作用及其机制,为β-细辛醚在阿尔兹海默病(Alzheimer’s diease,AD)防治中的应用提供实验依据。首先,采用实时无标记动态细胞分析技术(Real time cell analysis,RTCA)构建RA-h/PC12共培养体系,实时动态观察Aβ1-42诱导星形胶质细胞损伤后对共培养体系中PC12细胞存活率的影响,根据系统自动生成的存活率曲线和参数选出最佳的药物干预时间,采用不同浓度的β-细辛醚对星形胶质细胞进行干预,观察共培养体系中PC12细胞存活率的改变;其次,采用MTT法检测Aβ1-42作用于RA-h对PC12细胞存活率的影响以及β-细辛醚的干预效应,验证RTCA的检测结果;进一步采用ELISA法检测下室培养液中IL-1β,TNF-α,BDNF的水平;Western blot法检测PC12细胞NF-κB的活性和ERK,p38,JNK磷酸化水平。结果显示,β-细辛醚(55.5 mg·L-1)能显著减缓Aβ1-42诱导的RA-h活化引起的PC12细胞存活率下降(P0.01),显著降低下室培养液中IL-1β,TNF-α的水平和PC12细胞ERK,p38,JNK磷酸化水平(P0.01);β-细辛醚(166.7 mg·L-1)能促进下室培养液中BDNF的释放(P0.05)。以上结果表明,Aβ1-42诱导RA-h活化并释放IL-1β,TNF-α等炎症因子加剧PC12细胞的损伤;β-细辛醚能降低IL-1β,TNF-α和促进BDNF的释放,抑制PC12细胞NF-κB的活性和ERK,p38,JNK磷酸化水平。     

刺参多糖对谷氨酸致PC12细胞损伤的保护作用

目的:研究刺参多糖(HS)对谷氨酸(Glu)所致大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤的保护作用.方法:用谷氨酸造成PC12细胞损伤模型,通过细胞形态观察、M,IT、LDH、MDA、SOD测定,观察刺参多糖的保护作用.结果:15 mmoL/L谷氨酸作用PC12细胞24h,出现明显损伤,培养上清液中LDH含量增加,细胞SOD含量降低,MDA含量升高;50、150、450 μg/mL刺参多糖可有效改善谷氨酸损伤引起的PC12细胞形态改变,提高细胞存活率,减少乳酸脱氢酶渗漏,提高SOD含量,降低MDA值;结论:刺参多糖对谷氨酸所致的PC12细胞损伤有保护作用.     

天花粉化学成分及其对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用

目的 研究天花粉Trichosanthes kirilowii Maxim的化学成分及其对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用.方法 天花粉甲醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、MCI、反相半制备HPLC等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.采用MTT法检测其细胞活力,LDH法检测乳酸脱氢酶的漏出率.结果...     

地黄饮子对β淀粉样蛋白所致PC12细胞损伤的保护作用

目的：观察地黄饮子对β淀粉样蛋白（Aβ25-35）诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法：通过HE染色、尼氏染色、电镜观察地黄饮子对细胞形态的影响。结果：地黄饮子可显著改善Aβ25-35损伤引起的PC12细胞形态的改变,减轻细胞膜的损伤,减少损伤所致的细胞死亡。结论：地黄饮子对Aβ25-35所致PC12细胞损伤具有较好的保护作用。     

芍药苷对谷氨酸引起的PC12细胞损伤的保护作用

 目的探讨芍药苷对谷氨酸引起PC12细胞损伤的保护作用。方法MTT和测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,采用Fura3/AM为荧光指示剂,用1420 Vector2多标记免疫分析仪研究芍药苷对谷氨酸所致损伤PC12细胞内Ca²⁺的作用,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位。结果芍药苷可明显提高谷氨酸诱导的PC12细胞还原MTT的能力,抑制该细胞LDH的释放;芍药苷还可抑制兴奋性氨基酸所引起的细胞内Ca²⁺含量的升高;剂量相关性地降低PC12细胞的凋亡百分率。结论芍药苷可抑制谷氨酸诱导PC12细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制细胞内钙超载,稳定细胞线粒体跨膜电位有关。     

麝香酮对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护及作用机制研究

目的:考察麝香酮对谷氨酸引起PC12细胞损伤的保护作用及作用机制.方法:将大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(pheochromocytoma,cells,PC12)分为正常组、模型组、麝香酮10.0,1.0,0.1 μmol·L~(-1)高、中、低剂量组和1μmol·L~(-1)尼莫地平组,用500μmol·L~(-1)谷氨酸造成PC12细胞损伤,采用药物预处理给药方法,MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,采用Fura3/AM为荧光指示剂,用Vector~2 1420多标记免疫分析仪研究麝香酮对谷氨酸所致损伤PC12细胞内Ca~(2+)的作用,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位,考察不同浓度麝香酮对PC12细胞的保护作用.结果:麝香酮可明显提高谷氨酸诱导的PC12细胞还原能力,抑制该细胞LDH的释放,提高细胞存活率;抑制兴奋性氨基酸所引起的细胞内Ca~(2+)含量的升高;降低PC12细胞的凋亡百分率,并呈剂量相关性.结论:麝香酮可抑制谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,其作用机制可能与抑制细胞内钙超载,稳定细胞线粒体跨膜电位有关.     

通窍活血汤含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤的保护作用

目的研究通窍活血汤含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤的保护作用。方法大鼠灌胃给予通窍活血汤提取液制备含药脑脊液后,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,台盼蓝染色、LDH法观察细胞膜通透性,试剂盒法检测细胞内NO、MDA水平及SOD、ATP酶活性,DCFH-DA荧光探针染色检测细胞内活性氧(ROS)水平,Fura-2/AM染色检测细胞内游离Ca~(2+)水平,流式细胞联合Annexin V-FITC/PI法分析细胞凋亡。结果与模型组比较,含药脑脊液组细胞形态显著改善,细胞活性、存活率显著升高(P0.05,P0.01),LDH活性,NO、ROS、MDA、游离Ca~(2+)水平及细胞凋亡率显著降低(P0.05,P0.01),SOD、ATP酶活性显著升高(P0.05,P0.01)。结论通窍活血汤含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤具有保护作用。     

β-细辛醚平喘作用的药效学研究

目的探讨β-细辛醚的平喘作用。方法豚鼠随机分成β-细辛醚高、中、低剂量组、阳性药物组(离体实验为氨茶碱,整体实验为地塞米松)和模型空白对照组,以豚鼠离体气管片实验和卵蛋白喷雾致喘整体实验,研究β-细辛醚的平喘作用。结果β-细辛醚可直接舒张豚鼠离体气管平滑肌;对整体哮喘模型,β-细辛醚能延长哮喘发作的潜伏时间,减轻症状发作的严重程度。结论β-细辛醚有平喘作用。     

β-细辛醚对缺血／再灌注损伤心肌细胞的保护作用

目的观察β-细辛醚对缺血／再灌注损伤（MI／RI）心肌细胞的保护作用。方法体外培养原代乳鼠心肌细胞，采用连二亚硫酸钠（Na2S2O4）诱导心肌细胞MI／RI，测定细胞存活率（MTT法）和细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的含量。结果在MI／RI模型中，β-细辛醚能显著提高细胞存活率，明显降低培养液中LDH、CK的含量。结论β-细辛醚对MI／RI心肌细胞具有显著的保护作用。     

奇壬醇对谷氨酸损伤的PC12细胞保护作用研究

目的探究奇壬醇对谷氨酸损伤的PC12细胞的保护作用及其机制。方法采用谷氨酸损伤PC12细胞建立模型,用MTS法考察奇壬醇对谷氨酸损伤的PC12细胞存活率的影响,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的变化。结果谷氨酸造模浓度为12.5 mmol/L,奇壬醇组细胞的存活率高于模型组(P 0.01)。模型组细胞凋亡率明显高于对照组(P0.01),奇壬醇组细胞的凋亡率显著低于模型组(P 0.01)。与对照组相比较,模型组caspase-3和Bax蛋白的表达显著升高,Bcl-2蛋白的表达显著降低,而与模型组相比较,奇壬醇组caspase-3和Bax蛋白的表达量显著降低,Bcl-2蛋白的表达显著升高,差异均有统计学意义(P 0.01)。结论谷氨酸能诱导PC12细胞凋亡,而奇壬醇通过抑制谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,发挥其对PC12的保护作用。     

大豆异黄酮对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的:探讨大豆异黄酮提取物对β淀粉样蛋白片段(Aβ1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法:从大豆中提取并纯化出总异黄酮,通过PC12细胞株体外培养的方法,给予不同剂量的大豆异黄酮预处理,并用10μmol/L Aβ1-42诱导的细胞损伤,检测经处理后细胞MTT及PC12细胞形态的变化。结果:大豆异黄酮可显著降低Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤,显著提高细胞的MTT值(P<0.05),并改善细胞的形态,与雌二醇组比较没有显著差异(P>0.05)。结论:大豆异黄酮对Aβ1-42诱导的PC12细胞具有保护作用。     

通窍活血汤含药血清对谷氨酸损伤的PC12细胞的保护作用

目的:从细胞水平研究通窍活血汤含药血清(TQHXD)对谷氨酸(Glu)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。方法:SD大鼠灌胃给予通窍活血汤提取液,每日2次,每次4 g.kg-1,连续5 d,制备通窍活血汤含药血清。采用PC12细胞和终浓度为12.5 mmol.L-1的谷氨酸共培养,造成神经细胞损伤模型。光镜观察5%,10%,20%的TQHXD对损伤PC12细胞形态改变的影响;台盼兰染色法、AO/EB染色法及LDH法观察TQHXD对损伤的细胞膜通透性的变化影响;MTT法检测TQHXD对PC12细胞增殖及活性的影响及对培养上清液中NO浓度的影响。结果:倒置显微镜下可见,正常组细胞胞体较损伤组略大,呈强折光性,细胞数量多,突起长。模型组细胞数量显著减少,折光性明显减弱,细胞突起减少、缩短。TQHXD和PC12细胞共培养24 h后,活细胞数明显增加,细胞折光性增加,损伤细胞形态接近于正常细胞;台盼兰染色后,TQHXD组活细胞比率明显上升,AO/EB染色后被EB染色的数量较少。MTT法检测结果显示,与模型组比较,各浓度TQHXD组的吸光度A均升高且有显著性差异。各浓度的TQHXD组细胞培养上清中LDH,NO含量相对模型组明显减少,两者有显著性差异。结论:TQHXD对Glu损伤的PC12细胞有明显的保护作用。     

川芎嗪对1,3-丁二烯致PC12细胞损伤的保护作用

目的：研究川芎嗪对由1,3-丁二烯损伤的PC12细胞生物学特性的影响。方法：用MTT法测定川芎嗪对损伤后PC12细胞活力的影响;流式细胞仪检测川芎嗪对损伤后PC12细胞凋亡和增殖的影响。结果：20、30、50μg/ml川芎嗪均能够提高1,3-丁二烯损伤的细胞活力,能使凋亡细胞比例减少,S和G2/M期细胞比例增加,G0/G1期细胞比例减少,其中30μg/ml浓度的川芎嗪作用最强（F=88.14,P〈0.01）;90μg/ml川芎嗪无明显作用。结论：川芎嗪能抑制由1,3-丁二烯引起的PC12细胞损伤,促进PC12增殖。