乙型肝炎病毒e抗原的纯化及其在人血清抗体检测中？…

目的 方法利用Ｚｈｏｕｊｉａｎ教授提供的重组质粒ＤＮＡ ｐＢＶ２２０／ｅＡｇ，转染ＤＨ５＾α细胞经３０℃培养３小时，４２℃培养６小时温度诱导后，提取乙型肝炎病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）。经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ层折 纯化后免疫打点分析，收集阳性蛋白。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，考马斯亮蓝Ｇ２５０染色，显为单一的蛋白带，用免疫印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ）和免疫打点（ｌｍｍｕｎ     

胶体金联免疫吸附试验在乙型肝炎病毒表面抗原检测中…

采有来源于鼠抗乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）单克隆抗体杂交瘤细胞株腹水，经纯化后包被硝基纤维素膜，和标记四氯金酸，建立双抗体夹心测定乙型肝炎病毒表面抗原的间接胶体金联免疫吸附试验（ＧＣＩＳＡ）。其特异性和国内外酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）试剂盒水平相同，而灵敏度明显高于ＥＬＩＳＡ检测水平，完全达到了ＨＢｓＡｇ诊断试剂国家质控标准的要求，特点是操作简便，快速，观察结果直观可靠，适于血站，医院大     

Epstein—Barr病毒基因工程亚单位疫苗膜抗原gp340／ …

利用病毒学研究所免疫研究室重组的表达Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒膜抗原（ＭＡ）ｇｐ３４０／２２０重组痘苗病毒感染１４３细胞，２４小时后裂解细胞，获得的上清液经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ及Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ２００层析纯化，经免疫打点分析后收集阳性蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，考马斯亮蓝Ｒ－２５０染色，显示为单一的蛋白带，从而获得纯化的亚单位疫苗ＭＡ ｇｐ３４０／２２０。将纯化的ＭＡ与Ａ１（     

乙型肝炎病毒单克隆表面抗体的抗独特型抗体的制备与免疫效果

用乙型肝炎病毒单克隆表面抗体免疫新西兰兔制备抗独特型抗体，经小鼠γ球蛋白－ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ免疫亲和柱纯化后，用ＥＬＩＳＡ鉴定，结果表明特异性良好。以此抗独特型抗体免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，引起抗－ＨＢ＿ｓ应答，提示制备抗独特型疫苗的可能性。     

应用重组质粒pAM－HBsAg在果蝇细胞中表达乙型肝炎病毒表面抗原及基因免疫的初步研究

应用果蝇（ＤＳ２）表达系统，构建了含有乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、摄金蛋白启动子（ＭＴｎ－ｐｒｏｍｏｔｅｒ）的共表达质粒ｐＡＭ－ＨＢｓＡｇ，转染细胞，经克隆，存活细胞株的培养上清液经硫酸铵沉淀、氯化铯（ＣＳＣｌ）密度梯度离心沉淀，获得的抗原用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）法检测抗体，免疫吸印法（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）和电泳凝胶银染显色证实分子量为２３０００和２７０００，免疫电镜观察显示表达产物为２２ｕｍ球型颗粒，通过重金属离子（ＣｕＳＯ４、ＺｎＳＯ４）的诱导可增加抗原的表达量。用共表达质粒ｐＡＭ－ＨＢｓＡｇ的ＤＮＡ，注射Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠的股四头肌。经ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ检测抗体产生情况，结果免疫后的小鼠经硫酸锌喂养抗体高于普通喂养的小鼠。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实鼠肌肉细胞存在ＨＢｓＡｇ基因。小鼠免疫接种实验表明，ＤＳ２细胞表达的抗原与直接用ＤＮＡ含有ＨＢｓＡｇ的重组质粒）免疫小鼠均获抗ＨＢｓＡｇ的抗体。     

人源性抗HBsAg单克隆抗体Fab片段的表达与纯化

对已筛选到的人源性抗ＨＢｓＡｇ特异性噬菌体抗体基因文库进行表达研究，将特异性噬粒转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，反复冻溶法制备可溶性Ｆａｂ片段。免疫印迹实验表明大肠杆菌质周腔内有可溶性Ｆａｂ片段的表达。制备羊抗人ＩｇＧ Ｆａｂ抗血清，建立抗人ＩｇＧ Ｆａｂ抗体－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和层析柱，纯化Ｆａｂ片段。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示纯化的Ｆａｂ达免疫纯，点印迹法表达纯化后的Ｆａｂ片段具有中和ＨＢｓＡ     

抗人IgGFc和Fab单克隆抗体的鉴定及应用

本文将采用木瓜蛋白酶水解和ＳＰＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱亲和层析等手段获得的人ＩｇＧＦｃ和Ｆａｂ，以抗人ＩｇＧＦｃ和抗人ＩｇＧＦａｂ单抗为参比品（Ｓｉｇｍａ）．鉴定了细胞库中抗人ＩｇＧ系列的部分细胞林，得到分泌特异性抗人ＩｇＧＦｅ和抗人ＩｇＧＦａｂ单抗的细胞各一株。在此基础上。应用抗人ＩｇＧＦｃ及抗人ＩｇＧＦａｂ单抗分别制备了Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱，纯化了酶解的人ＩｇＧＦｃ和Ｆａｂ。经ＥＬＩＳＡ法鉴定，相互间无交叉反应。同时用此方法还制备了人抗ＨＢｅＦａｂ，并将此Ｆａｂ标记过氧化物酶。配制ＨＢｅＥＬＩＳＡ诊断盒，证明其生物学活性未受影响，而且消除了类风湿因子引起的ＨＢｅＡｇ假阳性现象。     

乙型肝炎病毒感染者癌基因蛋白的表达及与HBeAg的关系

目的为了阐明癌基因蛋白异常表达与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制的关系。方法用链霉菌素－生物素（ＳＬＡＢ）免疫组织化学染色和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，检测了６４例慢性ＨＢＶ感染者肝细胞中Ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ１８５、ｒａｓＰ２１和Ｐ５３等癌基因蛋白和血清乙型肝炎病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）。结果Ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ１８５和ｒａｓＰ２１阳性组中，血清ＨＢｅＡｇ的阳性检出率分别为８９４％和８４６％，而阴性组ＨＢｅＡｇ的检出率分别为２０％和４８％，两组差异显著。结论表明癌基因蛋白Ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ１８５和ｒａｓＰ２１的异常表达与ＨＢＶ复制密切相关。     

抗肾综合征出血热病毒人单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

以亲和层析技术纯化的肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）结构蛋白（５５０００，６７０００）为特异性抗原，体外免疫正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ），然后将体外免疫的淋巴细胞与人－鼠种间杂交瘤细胞（Ｋ６Ｈ６／Ｂ５）融合，经ＥＬＩＳＡ间接法筛选出２株（２Ｄ５，１Ｂ７）分泌抗－ＨＦＲＳＶ人单克隆抗体（Ｈ－ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株，４次克隆化后，１００％阳性。对２Ｄ５株初步鉴定表明，其抗体类型为ＩｇＧ１；培养上清中抗体浓度为２０～３０μｇ／ｍｌ；特异性免疫荧光反应证明２Ｄ５株Ｈ－ＭｃＡｂ是ＨＦＲＳＶ特异性；中和效价为１∶１６０；体外连续传代６个月仍稳定分泌抗体。     

血清乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其与病毒复制的关系

用抗Ｓ和抗前Ｓ１单抗的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测１５０例慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）携带者和健康人血清中的ＨＢＶ前Ｓ１抗原，其结果和ＨＢＶＤＮＡ聚合酶链反应（ＰＣＲ）、乙型肝炎血清标志的检测结果进行比较。结果表明：前Ｓ１抗原在乙型肝炎病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性组中的检出率和相对滴度显著高于ＨＢｅＡｇ阴性组（Ｐ＜０．０１）；在ＨＢｅＡｇ阴性组中，抗－ＨＢｅ阴性人群前Ｓ１抗原的检出率和相对滴度也显著高于抗－ＨＢｅ阳性人群（Ｐ＜０．０１）。前Ｓ１抗原和ＨＢＶＤＮＡ检测结果的符合率达８０％，两者检出率的相关系数ｒ＝０．９８２６（Ｐ＜０．０１）。结论：血清前Ｓ１抗原和乙型肝炎病毒的存在关系密切。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.