双嘧达莫对体外培养神经干细胞增殖的影响

目的研究双嘧达莫(dipyridamole)对体外培养神经干细胞的促增殖作用.方法取新生小鼠大脑进行神经干细胞原代培养,通过神经球生成的观察、特异性蛋白质免疫细胞化学染色和BrdU标记鉴定并判断其增殖能力;双嘧达莫按0.1,0.5,2.5 μmol·L-13个浓度加入神经干细胞培养基中,同时设立溶媒对照组和阳性对照组,通过观察神经球形态、神经球生成数目及MTT法定量比较,分析不同浓度双嘧达莫对神经干细胞分裂增殖的影响.结果在培养物中有大量神经球生成,神经干细胞的特异性蛋白质免疫细胞化学染色呈阳性,BrdU标记亦呈阳性反应,表明所培养的细胞为神经干细胞,具有增殖能力.双嘧达莫中、高浓度组神经球数目、MTT比色结果明显高于溶媒对照组.结论双嘧达莫具有促进神经干细胞增殖的作用.     

神经妥乐平药理作用及临床应用现状北大核心CSCD

神经妥乐平是将牛痘疫苗接种于家兔皮肤,从其免疫炎症组织中提取的去除蛋白的小分子生物活性混合物,临床上广泛应用于疼痛治疗及抗过敏治疗等方面,特别是对神经病理性疼痛具有独特的疗效。神经妥乐平的药理作用集中在调节免疫系统功能、调节疼痛信号传导、保护细胞及神经修复、抑制炎症反应等方面。其在临床上广泛用于骨科各种急慢性疼痛疾病、神经内科中脑缺血、神经痛及神经炎症疾病、皮肤科瘙痒症、过敏性疾病等。本文综述了神经妥乐平的相关研究,阐明其药理作用及目前的临床应用。     

腺苷促进体外培养神经干细胞增殖作用研究

目的研究腺苷促进体外培养神经干细胞（NSCs）增殖作用。方法取新生小鼠大脑进行神经干细胞原代培养,观察神经球生成情况,特异性蛋白质免疫细胞化学染色和BrdU标记鉴定并判断其增殖能力;将腺苷按0.4,2.0,10.0 μmol•L 13个浓度加入神经干细胞培养基,同时设立溶媒对照组和阳性对照组,通过观察神经球形态、神经球生成数目及 MTT法定量比较,分析不同浓度腺苷对神经干细胞分裂增殖的影响。结果培养物中有大量神经球生成,神经干细胞特异性蛋白质免疫细胞化学染色呈阳性,BrdU标记亦呈阳性反应,所培养的细胞为神经干细胞,具有增殖能力;腺苷中、高浓度组神经球数目、MTT比色结果明显高于溶媒对照组。结论腺苷具有促进NSCs增殖作用。     

神经鞘瘤发病相关信号通路研究进展

神经鞘瘤因良性发病却常致恶性临床结果受到广泛关注,目前研究表明Merlin、SMARCB1、LZTR1、COQ6蛋白表达异常在神经鞘瘤组织中普遍存在.通过文献检索分析发现这四种蛋白通过多种信号转导通路调控雪旺细胞生长、增殖、分化、凋亡等生理过程,在神经鞘瘤发病中起重要作用.现将与神经鞘瘤发病相关的信号转导通路进行综述以利理解其发病机制.     

骨骼肌提取液促进体外培养神经干细胞增殖作用研究

目的寻找促神经干细胞分裂增殖物质,为神经系统发育研究和神经系统疾病的治疗研究提供新的依据。方法用硫酸铵盐析及超滤离心法分离骨骼肌蛋白质,体外培养新生小鼠神经干细胞,通过神经球生成的观察、特异性蛋白质免疫细胞化学染色和MTT比色检测法鉴定神经干细胞并判断其增殖能力。结果在培养物中有大量神经球生成,且与对照组差异有显著性(P<0.01),神经干细胞的特异性蛋白质(Nestin)免疫细胞化学染色呈阳性。结论骨骼肌提取液可促进体外培养神经干细胞增殖分裂,且呈一定量效关系,其有效成分为分子量≤100 ku的蛋白质分子。     

人胚神经干细胞分离培养与鉴定方法

目的:建立神经干细胞(NSCs)实验室分离、培养方法,为NSCs移植提供细胞源.方法:取4月龄(±15 天)正常孕妇水囊引产胎儿大脑纹状体区组织分离神经干细胞,培养于含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和B27的无血清培养基;同时利用单细胞克隆技术进行连续传代培养;利用形态学观察和免疫荧光技术检测神经上皮干细胞蛋白Nestin抗原的表达来鉴定神经干细胞.结果:体外培养的干细胞在bFGF和B27培养基中可不断增殖形成细胞球,并出现少量细胞分化.单细胞培养4天即开始分裂,同时伴有个别细胞分化;出现大量神经球一般为15天;分化的细胞在30天开始分解,50天左右基本消失.细胞培养3个月(每月补液1次)仍具有分裂增殖能力.单细胞克隆可连续传代10次,仍具增殖分化能力.液氮冻存6个月的细胞复苏后仍具增殖分化能力.单细胞克隆传代增殖的细胞球经Nestin免疫荧光鉴定,呈阳性结果,证实其胚胎源性.结论:采用bFGF和B27的无血清培养基能促进神经干细胞连续稳定增殖,并有少量分化,细胞体外培养3个月、克隆连续传代10次情况下的细胞仍具有神经干细胞特性.     

神经干细胞分化调节机制及中药对其的影响

神经干细胞(NSC)是新世纪神经科学研究的热点之一,其分化调控分子研究是NSC研究的热点和难点.本文综述了NSCs增殖分化过程是细胞因子、神经递质和激素、化学物质等微环境及自身基因信号共同调节,相互作用的过程;并且对中药在NSCs分化调控的研究进展做一概述.     

神经亲免素配体(NILs)的研究进展

介绍神经亲免素配体在设计、合成、构效关系以及促神经生长和神经保护研究方面的一些进展.     

腓总神经腓骨小头处病变患者的神经电生理定位诊断

目的 探讨神经电生理检查对腓总神经腓骨小头处损害患者的定位诊断价值.方法 应用常规的神经电生理检测法:腓总神经运动传导、腓浅神经感觉神经传导、腓总神经支配肌肉的肌电图;特殊检测法:短节段性神经传导检测法,共检测了30例经临床诊断并进一步做神经电生理检查以确诊腓总神经腓骨小头处病变的患者.短节段性神经传导检测法重点检测腓总神经运动传导腓骨小头下、腓骨小头上,以寻找其具体损害部位.结果 ①腓总神经病变组中有28例出现腓总神经在腓骨小头下至腓骨小头上段运动神经传导速度减慢;②腓总神经腓骨小头下段至腓骨小头上段短节段性神经传导检测结果显示具体病变部位多数集中在腓骨小头上下2 -6 cm内;③腓总神经在腓骨小头处病变者并非均有胫骨前肌、踇长伸肌肌电图的异常.结论 短节段性神经传导检测法在确定腓总神经在腓骨小头处的具体损害部位时有较高的定位诊断价值,而常规的腓浅神经感觉传导及肌电图异常能协助诊断.     

褪黑素对SD大鼠胚胎中脑神经干细胞增殖和分化的影响

目的：脑内神经发生受多种病理生理因素调节，既往的研究表明褪黑素（Melatonin，MT）具有广泛的神经营养和神经保护作用，本研究观察MT对SD大鼠胚胎中脑神经干细胞（NSCs）增殖和分化的影响。方法：分离培养孕13-14天SD大鼠胚胎的中脑NSCs，用MTS方法测定MT对NSCs增殖的影响；通过RT-PCR、Western blot和免疫荧光方法检测MT对NSCs分化方向的调节作用；RT-PCR和Western blot方法检测NSCs上MT受体及脑源神经营养因子（BDNF）和胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）的表达。结果：MT（0．05、0．1和1nM）均可促进NSCs的增殖，与对照组相比具有显著性差异（P〈0．05或P〈O．01）；而且，MT明显促进中脑NSCs分化时多巴胺能神经元标志蛋白酪氨酸羟化酶（TH）表达（P〈O．05），抑制胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达；此外，MT可使NSCs内BDNF和GDNF的表达水平显著提高（P〈0．01）；同时我们还发现MT受体的两个亚型MTl和MT2在中脑NSCs均有表达，提示可能参与了对NSCs的调节作用。结论：本研究发现，MT不仅可以促进中脑NSCs的增殖，还显著提高NSCs向多巴胺能神经元方向的分化，而抑制其向星形胶质细胞的分化，这可能与MT上调BDNF和GDNF的表达有关。以上结果可为MT临床治疗某些老年性神经疾患并改善部分临床症状的作用机理提供线索。     

3，6＇-二芥子酰基蔗糖抗抑郁作用及对新生大鼠海马神经前体细胞增殖的影响

目的探讨远志活性成分3,6’-二芥子酰基蔗糖（DISS）的抗抑郁作用及对新生大鼠海马神经前体细胞增殖的影响。方法通过小鼠悬尾和强迫游泳试验来考察DISS抗抑郁作用;体外分离培养新生大鼠海马神经前体细胞,同时给予DISS,用四甲基噻唑蓝（MTT）法测定细胞存活率,观察DISS对神经细胞增殖的影响,并初步探讨其抗抑郁的作用机制。结果DISS不同剂量（5,10,20mg／kg）给药后,能明显缩短小鼠在悬尾和强迫游泳试验中的不动时间,并且随着剂量的增大抗抑郁作用逐渐降低;DISS不同质量浓度（0．4,10,50~g／mL）对所培养具神经前体细胞特性的细胞有促进增殖的作用。结论DISS具有较好的抗抑郁作用,该作用可能是通过调控神经干细胞的增殖、促进功能性神经再生和保护作用实现的。     

氯胺酮对胚胎大鼠培养神经干细胞增殖和细胞周期的影响

目的　探讨氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞增殖、细胞周期的影响。方法　采用MTT法检测氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞生长的抑制作用 ,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果　氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞具有生长抑制作用 ,并存在量效关系。流式细胞仪分析表明G0 /G1期细胞百分率上升 ,S期细胞百分率下降。结论　氯胺酮对大鼠培养神经干细胞的增殖有抑制作用 ,其机制与细胞周期阻滞有关。     

人胚胎神经干细胞体外培养及其增殖与分化的研究

目的 建立神经干细胞分离、培养及分化的鉴定技术，观察神经干细胞增殖、分化的特点。方法 从人胚胎海马区分离神经干细胞，采用无血清培养基，进行体外扩增培养、传代。采用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞和分化的神经细胞；利用流式细胞仪和细胞生长曲线检测神经干细胞的增殖能力。结果 从人胚胎脑海马区分离的细胞具有增殖和多向分化潜能，可进行传代培养，获得的细胞团中大部分为nestin表达阳性细胞。贴壁分化后可以出现NSE、GFAP表达阳性的细胞。结论 用上述方法分离培养的细胞能表达nestin蛋白，具有自我更新和增殖能力，并具有向神经元、星形胶质细胞分化的潜能，具备神经干细胞的特征，可用于细胞移植等相关研究。     

Maternal bisphenol A oral dosing relates to the acceleration of neurogenesis in the developing neocortex of mouse fetuses

Bisphenol A (BPA), an endocrine-disruptor, is widely used in the production of plastics and resins. Human perinatal exposure to this chemical has been proposed to be a potential risk to public health. Animal studies indicate that postnatal exposure to BPA may affect neocortex development in embryos by accelerated neurogenesis and causing neuronal migration defects. The detailed phenotypes and pathogenetic mechanisms, especially with regard to the proliferation and differentiation of neural stem/progenitor cells, however, have not been clarified. C57BL/6J pregnant mice were orally administered BPA at 200μg/kg from embryonic day (E) 8.5 to 13.5, and the fetuses were observed histologically at E14.5. To clarify the histological changes, especially in terms of neurogenesis, proliferation and cell cycle, we performed histological analysis using specific markers of neurons/neural stem cells and cell cycle-specific labeling experiments using thymidine-analog substances. Cortical plate was hyperplastic and the number of neural stem/progenitor cells was decreased after the exposure to BPA. In particular, the maternal BPA oral dosing related to the effects on intermediate progenitor cells (IPCs, neural progenitor cells) in the subventricular zone (SVZ) of dorsal telencephalon. Exposure to BPA associated the promotion of the cell cycle exit in radial glial cells (RGCs, neural stem cells) and IPCs, and decreased the proliferation resulting from the prolong cell cycle length of IPCs in the SVZ. Our data show that maternal oral exposure to BPA related to the disruption of the cell cycle in IPCs and the effects of neurogenesis in the developing neocortex.     

胍丁胺对新生大鼠海马神经前体细胞增殖的影响

目的探讨胍丁胺对大鼠海马神经前体细胞增殖的影响及可能的作用机制。方法分离新生24 h大鼠的海马组织,制成单细胞悬液后进行无血清条件培养;用CCK-8试剂盒和3H-胸腺嘧啶核苷参入法检测细胞增殖和胍丁胺的作用。结果从新生大鼠海马分离得到的细胞可以持续分裂增殖形成细胞克隆(神经球);胍丁胺1、10μmol.L-1可以显著促进神经前体细胞的增殖,并且这种促增殖作用可以被依法克生所抑制。结论胍丁胺可以促进体外培养的新生大鼠海马神经前体细胞的增殖,其促增殖作用可能与咪唑啉Ⅰ(I1)受体有关。     

Cell cycle-dependent inhibition of the proliferation of human neural tumor cell lines by iron chelators

The current studies were designed to examine the conditions under which the ferric iron chelator desferrioxamine (DFO) arrested cell cycle progression and hence the proliferation of neural cell lines in vitro. DFO arrested proliferation at different stages of the cell cycle depending on the concentration and duration of drug exposure. Twenty-four-hour treatment with 160 μM DFO arrested glioma cells in G₁, whereas 72-hr treatment with 10 μM DFO acted to slow the passage of glioma cells through the cell cycle, eventually accumulating in G₂/M. Another iron chelator, ADR 529, also inhibited the proliferation of glioma cells by lengthening the period of the cycle and causing the cells to arrest in G₂/M. The effects of 10 and 160 μM DFO were irreversible after 24 and 48 hr, respectively, and 10 μM DFO became cytotoxic after 3 days. These observations demonstrate that DFO has different effects on the proliferation of neural tumor cell lines depending on the concentration and time of exposure, which result in different sites of cell cycle arrest. These different in vitro actions of DFO may have ramifications for the successful application of iron chelator therapy in vivo.     

药物神经毒性评价体外模型的研究进展

神经毒性是药物安全性评价的重要方面。体外模型相比较体内动物实验在药物高通量筛选、分子机制研究、检测分析技术应用上具有显著优势。至今,研究和评价药物神经毒性的体外模型主要包括原代神经细胞培养、神经细胞系培养、诱导神经干细胞分化模型,三维细胞培养模型等。这些体外模型的复杂程度、对药物的敏感性及检测方法不尽相同。概述各种神经毒性体外模型的应用领域及研究进展,提出了神经毒性体外评价模型研究应用中存在的问题及今后的发展方向。     

人胰岛素样生长因子-1重组腺病毒转染C17.2神经干细胞增殖及分化的影响

目的观察人胰岛素样生长因子-1重组腺病毒(Ad-IGF-1)转染对C17.2神经干细胞体外增殖和分化的影响。方法体外培养及鉴定C17.2神经干细胞,Ad-IGF-转染C17.2神经干细胞;Western-blotting法检测IGF-1蛋白的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测IGF-1蛋白的表达曲线;MTT检测C17.2神经干细胞增殖,NSE及MBP免疫组化观察C17.2神经干细胞体外分化。结果转染AdIGF-1的C17.2神经干细胞成功表达IGF-1蛋白;IGF-1蛋白在病毒转染5～7d达高峰,13d仍高于转染前,Ad-IGF-1转染后各时间C17.2神经干细胞的增殖与对照组相比有显著差异,Ad-IGF-1转染对c17.2神经干细胞向神经元细胞及神经胶质细胞的分化与对照组相比有显著差异。结论Ad-IGF-1转染c17.2神经干细胞可稳定表达IGF-1,Ad-IGF-1转染促进C17.2神经干细胞的增殖及向神经元细胞和少突胶质细胞的分化。     

芸香苷对小鼠脑缺血损伤保护作用的实验研究

目的　研究芸香苷对脑缺血损伤的保护作用。方法　小鼠脑缺血模型采用双侧颈总动脉结扎法 ;神经细胞凋亡用TUNEL法检测 ;组织学检查用来测定神经细胞形态学变化 ;丙二醛 (MDA)和一氧化氮 (NO)含量分别用TBA法和Green法测定。结果　 5 0、10 0mg·kg-1的Ru则可显著提高脑缺血小鼠的存活率 ,改善神经元和胶质细胞的形态学变化 ;也可显著抑制缺血脑组织中NO及MDA含量的增高及减少缺血脑组织神经元的凋亡数目。结论　Ru对小鼠脑缺血损伤具有保护作用 ,作用机制可能与其抗自由基、抗凋亡及减少NO生成有关。     

Endocannabinoids: a new family of lipid mediators involved in the regulation of neural cell development

The endocannabinoids (eCBs) anandamide and 2-arachidonoylglycerol are important retrograde messengers that inhibit neurotransmitter release via presynaptic CB1 receptors. In addition, cannabinoids are known to modulate the cell death/survival decision of different neural cell types, leading to different outcomes that depend on the nature of the target cell and its proliferative/differentiation status. Thus, cannabinoids protect primary neurons, astrocytes and oligodendrocytes from apoptosis, whereas transformed glial cells are prone to apoptosis by cannabinoid challenge. Moreover, a potential role of the eCB system in neurogenesis and neural differentiation has been proposed. Recent research shows that eCBs stimulate neural progenitor proliferation and inhibit hippocampal neurogenesis in normal adult brain. Cannabinoids inhibit cortical neuron differentiation and promote glial differentiation. On the other hand, experiments with differentiated neurons have shown that cannabinoids also regulate neuritogenesis, axonal growth and synaptogenesis. These new observations support that eCBs constitute a new family of lipid signaling cues responsible for the regulation of neural progenitor proliferation and differentiation, acting as instructive proliferative signals through the CB1 receptor.