叔二苯哌啶拮抗MPTP对多巴胺神经元毒性作用的实验研究

在小鼠应用较大剂量MPTP后,纹状体DA及代谢产物的含量显著降低。与对照组相比,DA减少94％(P<0.001),DOPAC减少62％(P<0.05),HVA减少65％(P<0.001)。如用MPTP前先用叔二苯哌啶,虽然纹状体DA含量低于对照组,但却显著高于MPTP组,表明叔二苯哌啶能部分地拮抗MPTP对多巴胺神经元的毒性作用。     

锰卟啉络合物对MPTP诱导的帕金森病小鼠的防治作用

目的:观察锰卟啉络合物[manganese(Ⅲ)meso-tetrakis(N,N'-diethylimidazolium-2-yl) porphyrin,MnTDM]对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的早期帕金森病模型小鼠的防治效果,探讨其可能的作用机制.方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为MPTP模型组(连续3 d皮下注射25 mg/kg MPTP),MnTDM MPTP组(于MPTP注射前1 h皮下注射15 mg/kg MnTDM)以及MnTDM对照组、生理盐水对照组,每组10只.末次注射后第3日进行爬杆和游泳等行为学检测;HPLC-ECD法检测各组小鼠纹状体多巴胺(dopamine,DA)及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)水平;硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法测定各组小鼠纹状体丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平.结果:急性注射MPTP可建立早期帕金森病小鼠模型;与对照组相比,MPTP组小鼠纹状体DA、DOPAC、HVA水平明显下降(P＜0.01),MDA水平明显升高(P＜0.05);但短期对小鼠行为学指标影响不大.MnTDM能部分抑制MPTP的上述作用;与MPTP组相比,MnTDM MPTP组小鼠纹状体DA、DOPAC、HVA水平明显上升,MDA水平明显下降(P均＜0.05).各组小鼠间行为学指标无统计学差异.结论:MnTDM能抑制脂质过氧化,促进多巴胺类神经递质分泌,对MPTP诱导的帕金森病小鼠有一定防治作用.     

人参首乌提取物对慢性帕金森病小鼠的药效学研究

目的 研究人参首乌(RSSW)提取物对慢性帕金森病(Parkinson's disease,PD)模型小鼠的行为学以及纹状体内多巴胺(DA)及其代谢产物和5-羟色胺(5-HT)含量变化的影响.方法 采用丙磺舒和1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)联合腹腔注射C57BL/6小鼠5周(每周2次)制作小鼠慢性PD模型,连续30 d灌胃给予不同剂量的RSSw(90、180 mg/kg)和美多芭(100 mg/kg)治疗.最后通过转棒法检测小鼠运动能力,高效液相色谱-荧光检测法测定纹状体内DA及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA),以及5-HT的含量.结果 RSSW给药30 d能提升丙磺舒和MPTP联合造模致小鼠帕金森病的运动能力,提高纹状体内DA和5-HT的含量.结论 RSSW能减轻丙磺舒和MPTP小鼠慢性帕金森病模型的多巴胺能神经元损伤,恢复模型动物运动功能.     

神经降压素对帕金森病模型大鼠纹状体DA含量影响

目的观察神经降压素(NT)对正常和帕金森病模型大鼠纹状体多巴胺(DA)及其代谢产物含量的影响。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)单侧损毁内侧前脑束制备帕金森病大鼠模型。将5μL 1 mmol/L NT或生理盐水双侧缓慢注入正常及帕金森病模型大鼠侧脑室30 min后,利用高效液相色谱分析(HPLC)法检测纹状体DA及其代谢产物高香草酸(HVA)和3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)含量的变化。结果正常大鼠NT组纹状体DA含量与生理盐水组相比均明显升高(t=5.32,P<0.01)。帕金森病模型大鼠生理盐水组损毁侧纹状体DA含量与未损毁侧和正常大鼠生理盐水组相比明显降低(F=61.23,P<0.001);损毁侧纹状体DA更新率(DOPAC+HVA)/DA、DOPAC/DA、HVA/DA均明显高于未损毁侧和正常大鼠生理盐水组(F=27.52、21.12、28.43,P<0.001)。帕金森病模型大鼠侧脑室注射NT可明显提高两侧纹状体DA的含量(t=3.87、2.26,P<0.05)。结论 NT可增加正常及帕金森病模型大鼠纹状体DA的含量,提示NT具有抗帕金森病效应。     

重组胶质细胞源性神经营养因子腺病毒保护小鼠中脑多巴胺能神经元

目的：观察携带大鼠来源的胶质细胞源性神经营养因子(rGDNF)的重组腺病毒在小鼠帕金森模型中有无保护中脑多巴胺(DA)能神经元对抗神经毒素甲基-苯基-四氢吡啶(MPTP)损伤的作用。方法：将LacZ重组腺病毒(Ad-LacZ)通过脑立体定位仪注入小鼠单侧纹状体，分别于注射后24h、72h、10d和30d灌流取脑做X-Gal染色，观察报告基因在小鼠脑内的表达情况；将rGDNF重组腺病毒(Ad-rGDNF)通过脑立体定位仪注入小鼠单侧纹状体。两者均于72h后给予MPTP损伤中脑DA能神经元，1周后用高压液相色谱分析纹状体中DA、3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量。结果：Ad-LacZ注射后24h表达较弱，72h逐渐增强，10d仍可见到较强表达，30d则逐渐减弱。LacZ基因的表达范围比较局限，胶质细胞和神经元都能被感染，并且未见明显的腺病毒载体引起的细胞毒性作用。注射Ad-rGDNF侧纹状体DA含量较MPTP损伤组和MPTP Ad-LacZ组显著升高，而未注射侧无明显升高。此外，DA主要代谢产物DOPAC和HVA的含量也明显升高，而DOPAC／DA、HVA／DA比值则明显降低。结论：Ad-rGDNF能显著保护中脑DA能神经元对抗MPTP的损伤。     

染料木黄酮对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的 探讨染料木黄酮对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备的帕金森病(PD)模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用.方法 将C57BL6雄性小鼠随机分为正常对照组、MPTP模型组及染料木黄酮预处理组.用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)及多巴胺转运体(DAT) 基因的表达水平.应用高效液相色谱法检测纹状体(Str)内DA及其代谢物二羟基苯乙酸(DOPAC)含量.结果 MPTP模型组黑质TH和DAT基因的表达较正常对照组明显降低,染料木黄酮预处理组可逆转上述改变(F=20.31、13.19,P<0.01).MPTP模型组Str内DA及其代谢产物DOPAC的含量较对照组明显减少,应用染料木黄酮后可逆转上述改变(F=63.58、16.12,P<0.01).结论 染料木黄酮对MPTP制备的PD模型小鼠黑质纹状体DA能神经元有明显的保护作用.     

乌鸡白凤丸有效成分对帕金森病模型小鼠的神经保护作用

目的探讨乌鸡白凤丸有效成分（BFP）对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱致C57BL小鼠黑质神经元凋亡的保护作用及其可能机制。方法C57BL小鼠连续5d皮下注射MPTP（30mg／kg）制备帕金森病小鼠模型。给予BFP预处理后,用酪氨酸羟化酶（TH）免疫组织化学法观察黑质神经元的变化;同时应用免疫组织化学法检测Bax蛋白表达; 应用高效液相-电化学方法检测纹状体（Str）多巴胺（DA）及其代谢产物二羟基苯乙酸（DOPAC）和高香草酸（HVA）的含量变化。结果BFP预处理能使黑质致密带（SNc）TH免疫阳性神经元数目较MPTP组明显增多,而Bax蛋白表达较MPTP组明显减少;可使Str区DA及其代谢产物DOPAC、HVA含量明显增加。结论BFP有效成分可以拮抗神经毒性物质MPTP对C57BL小鼠黑质多巴胺能神经元的损伤,其作用机制可能与其抗凋亡作用有关,Bax表达的降低可能是BFP抗凋亡作用的途径之一。     

MPTP对小鼠行为学及脑纹状体多巴胺含量的影响

目的观察不同剂量对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）小鼠行为学及脑纹状体多巴胺（DA）去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）及其代谢产物含量的影响,探讨MPTP致帕金森病（PD）样小鼠模型的最佳条件。方法 C57BL小鼠分别给予MPTP不同单日剂量（20～40mg/ kg）,不同给药次数（1～7）天处理,测定各组小鼠爬杆时间检测动物运动协调性,测定自发活动记数评价动物神经兴奋性,测定通道式水迷宫游出时间评价各组小鼠空间学习记忆能力。应用高效液相色谱法检测动物纹状体内DA、NE、5-HT及其代谢产物含量。结果 MPTP30mg/kg腹腔注射1天、3天、7天及40mg/ kg腹腔注射1天、3天后小鼠都出现不同程度爬杆时间延长,自发活动次数减少,但小鼠水迷宫游出时间在给药前后未见明显改变。MPTP处理组与对照组相比DA及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸（DOPAC）含量都有明显降低,而NE、5-HT、及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）含量均未见明显改变。结论 MPTP处理可造成小鼠的帕金森病样症状,但不伴有明显智力障碍。在此种动物模型中,应根据科研目的选择MPTP的应用剂量和给药途径。     

PROTECTIVE ACTION OF BUDIPINE AGAINST MPTP NEUROTOXICITY

Mice treated with large dose of MPTP showed a reduction in the levels of DA, 5-HT and their metabolites in the striatum. The average levels as compared with the control were reduced by 94% for DA (P<0.001), 61% for DOPAC (P<0.05), 65% for HVA (P<0.01). 5-HT and 5-HIAA were lower than detection limits. In mice pretreated with budipine, although the striatal dopamine level was also reduced, mean DA and 5-HT levels were significantly higher than those in mice given MPTP alone. This result suggested that budipine can partially prevent the MPTP neurotoxicity.     

神乐康对大鼠脑内单胺类神经递质及其代谢产物的影响

神乐康（SLK）（7,3.5,1.75g／kg,po）能显著增加大鼠脑内边缘区的去甲肾上腺素（NA）、多巴胺（DA）及DA和5-羟色胺（5-HT）的代谢产物3,4二羧苯乙酸（DOPAC）、高香草酸（HVA）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量;SLK能增加大鼠脑内纹状体的DA及DA代谢产物HVA的含量,亦能升高DOPAC和5-HIAA的水平。     

实验性溃疡大鼠胃肠道单胺类物质含量的变化

应用高效液相色谱电化学检测法（ＨＰＬＣ－ＥＣＤ）测定正常及ＭＰＴＰ（１甲基２苯基１，２，３，６四氢吡啶）溃疡大鼠胃体、胃窦和十二指肠粘膜组织中单胺类神经递质，包括肾上腺素（Ｅ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）、３，４－双羟苯乙酸（ＤＯＰＡＣ）、多巴胺（ＤＡ）、５羟吲哚乙酸（５ＨＩＡＡ）、高香草酸（ＨＶＡ）和５羟色胺（５ＨＴ）含量的变化。正常大鼠胃体、胃窦和十二指肠粘膜含有丰富的ＤＡ和ＤＯＰＡＣ。侧脑室注射ＭＰＴＰ后大鼠胃体、十二指肠粘膜ＤＡ减少并持续较长时间，减少程度同用药时间、剂量平行。胃体ＤＡ减少的同时伴有５ＨＴ减少、十二指肠５ＨＴ升高。提示ＤＡ在溃疡病的发生机理中具有重要作用，５ＨＴ亦参与溃疡形成。     

MPTP对小鼠行为学及脑纹状体多巴胺含量的影响

目的：观察不同剂量对1－甲基－4－苯基－1,2,3,6－四氢吡啶（MPTP）小鼠行为学及脑纹状体多巴胺（DA）去甲肾上腺素（NE）,5－羟色胺（5－HT）及其代谢产物含量的影响,探讨MPTP致帕金森病（PD）样小鼠模型的最佳条件。方法：C57BL小鼠分别给予MPTP不同单日剂量（20－40mg/kg),不同给药次数（1－7）天处理,测定各组小鼠爬杆时间检测动物运动协调性,测定自发活动记数评价动物神经兴奋性,测定通道式水迷宫游出时间评价各组小鼠空间学习记忆能力。应用高效液相色谱法检测动物纹状体内DA,NE,5－HT及其代谢产物含量。结果：MPTP30mg /kg腹腔注射1天,3天,7天及40mg/kg腹腔注射1天,3天后小鼠都再现不同程度爬杆时间延长,自发活动次数减少,但不鼠水迷宫游出时间在给药前后未见明显改变。MPTP处理组与对照组相比DA及其代谢产物3,4－二羟基苯乙酸（DOPAC）含量都有明显降低,而NE,5－HT,及其代谢产物5－羟吲哚乙酸（5－HIAA）含量均未见明显改变。结论：MPTP处理可造成小鼠的帕金森病样症状,但不伴有明显智力障碍,在此种动物模型中,应根据科研目的选择MPTP的应用剂量和给药途径。     

自噬诱导剂海藻糖对帕金森症小鼠的治疗作用

目的：探讨自噬诱导剂海藻糖对帕金森症小鼠的治疗作用。方法：使用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐（MPTP）建立小鼠帕金森症模型,通过观察小鼠中脑黑质区多巴胺（DA）神经元数量、纹状体内神经递质多巴胺及代谢产物变化,判断海藻糖治疗帕金森症的作用。结果：（1）免疫组化染色发现MPTP使小鼠黑质区DA神经元数量明显减少。海藻糖干预后可增加DA神经元数量。（2）HPLC检测发现MPTP造成小鼠纹状体中多巴胺明显减少,海藻糖组可增加神经递质及代谢物。结论：海藻糖能减少MPTP造成的黑质区DA神经元丢失,增加纹状体中多巴胺的含量,海藻糖能有效治疗帕金森症。     

Effect of monoamine neurotransmitters in the hypothalamus in a cortisol-induced rat model of yang-deficiency

Eight monoamine neurotransmitters in hypothalamus of normal and cortisol-induced Yang-deficiency rats were measured with HPLC-ECD. These neurotransmitters included: (1) Noradrenaline (NA); (2) Adrenaline (A); (3) 3-methoxy-4-hydroxyphenyl glycol (MHPG); (4) 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC); (5) Dopamine (DA); (6) 5-hydroxyindole-3-acetic acid (5-HIAA); (7) Homovanillic acid (HVA); and (8) Serotonin (5-HT). With the mobile phase of 10% methanol-0.15 M chloroacetic acid-sodium hydroxide buffer, the neurotransmitters might be well separated, the sensitivity was similar to that of gas chromatography-mass spectrogram with the lower limit of 0.1 ng, this assay was simple and might be accomplished with half an hour. The Yang-strengthening Chinese herbs Radix Aconiti Praeparata, Cortex, Cinamomi, Epimedium brevicorum and Herba Cistanchis were used in the study and the following were founded: (1) In the hypothalamus of cortisol-induced Yang-deficiency rat NA decreased and a increased when compared with that of the normal controls (both P less than 0.05). (2) After 4 weeks of administration of Yang-strengthening herbs, the NA and A of the Yang-deficiency rats returned to nearly normal and it suggested these herbs have the effect of "supporting the right and recovering the source"; DA markedly increased both in control rats and Yang-deficiency rats (P less than 0.05, P less than 0.001 respectively); DOPAC obviously decreased both in control rats and Yang-deficiency rats (P less than 0.001); 5-HT and 5-HIAA increased in the control rats (both P less than 0.001) and HVA significantly decreased in Yang-deficiency rats. (3) The ratio of DA/DOPAC and 5-HT/5-HIAA markedly increased both in the control and Yang-deficiency rats after using Yang-strengthening herbs (P less than 0.01-0.001) and it suggested Yang-strengthening herbs could inhibit the activity of monoamine oxidase in hypothalamus.     

Effects of Echinacoside on Histio-central Levels of Active Mass in Middle Cerebral Artery Occlusion Rats*

Objective To investigate the effects of echinacoside on the extracellular striatal levels of norepinephrine (NE),dopamine (DA),homovanillic acid (HVA),3,4-dihydroxyphenylethanoid acid (DOPAC),5-hydroxyindoleacetic acid (HIAA),and 5-hydroxytryptamine(5-HT) in middle cerebral artery occlusion (MCAO rats.Methods The middle cerebral artery was occluded in male Sprague-Dawley rats.Three days later microdialysis probes were placed into the right striatum of MCAO rat brains and the brains were perfused with Ringer's solution at a rate of 1.5 μL/min.Cerebral microdialysates were collected every 30 minutes from awake and freely moving rats before assaying for NE,DA,HVA,DOPAC,HIAA,and 5-HT levels by reverse phase HPLC with electrochemistry.Results Three days after MCAO,the extracellular striatal levels of NE,DA,DOPAC,HIAA,HVA,and 5-HT of the MCAO rats increased significantly (at least P＜0.05 vs.control).However,simultaneous treatment with echinacoside (30.0 or 15.0 mg/kg) attenuated these increases (at least P＜0.05 vs.non-treated model rats).Conclusion These results imply that echinacoside may protect striatal dopa minergic neurons from the injury induced by MCAO and may help prevent and treat cerebral ischemic diseases.