人IL-2RαcDNA探针制备及在肾移植中的应用初探

从质粒pBSR中分离出人IL-2RacDNA片段,长0.9kb,应用地高辛配基标记此片段,制备成人IL-2RacDNA探针。该探针特异性强,敏感性可达到检测1.5pg同源DNA或RNA,且无放射性污染等。用此探针连续检测5例肾移植病人外周血淋巴细胞mRNA,结果显示:术前IL-2RamRNA均很低,术后肾功能稳定者也处于很低水平,2例出现排斥反应者IL-2RamRNA明显升高。     

IL—2和IL—2R在过敏性哮喘大鼠淋巴细胞中的表达

ＩＬ┐２和ＩＬ┐２Ｒ在过敏性哮喘大鼠淋巴细胞中的表达①陈巍李电东蔡年生（中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所，北京１０００５０）中国图书分类号Ｒ１３５．２Ｒ５６２．２①本课题受国家自然科学基金资助（编号３９４７０６０４）作者简介：陈巍，男...     

突变型人重组IL—2的研制

人白细胞介素—2(Interleukin 2,IL—2)含有3个半胱氨酸(Cys),其中第58位和第105位Cys形成二硫键,第125位Cys的巯基游离。应用PCR和定点突变技术将编码125位Cys的密码子突变成编码丙氨酸(Ala)的密码子,将此突变基因(hIL—2a)受控于P_RP_L串联启动子和人工合成SD序列,在E.coli中获得高效表达,用凝胶过滤法分离表达产物获得新型白细胞介素2[rIL—2(125-Ala)],其比活性达1×10~7IU/mg蛋白。     

IL—2和sIL—2R在哮喘发病中的意义探讨

为了探讨ＩＬ－２和ｓＩＬ－２Ｒ在哮喘发病中的意义，对３６例哮喘患者外周血单个核细胞诱生ＩＬ－２水平和血浆ｓＩＬ－２Ｒ水平进行了检测，同时以支气管炎患者与正常人作对照，结果表明，ＰＢＭＣ诱生的ＩＬ－２活性哮喘组高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）；血浆ｓＩＬ－２Ｒ水平哮喘组高于支气管炎和正常组（Ｐ＜０．０１），后两者差异无显著性。以上结果表明，哮喘发病中存在着Ｔ细胞的活化，ＩＬ－２／ＩＬ－２Ｒ在哮喘发病中     

IL—10对外周血单个核细胞体外产生IL—2及IFN—γ的调节作用

为探讨Ｔｈ１与Ｔｈ２两类细胞因子间相互调节，研究了ｒｈＩＬ－１０对ＰＨＡ体外诱导人ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ的影响。结果表明，１０ｎｇ／ｍｌＩＬ－１０明显抑制ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ（Ｐ＜０．０２及Ｐ＜０．０１）。在加入兔抗人ＩＬ－１０抗体的ＰＢＭＣ体外培养体系中，在５μｇ／ｍｌ浓度时，ＩＬ－２产生可明显增加（Ｐ＜０．０５），随着抗体浓度增加，ＩＬ－２呈剂量依赖性增加（ｒ＝０．９６２，Ｐ＜０．０１），ＩＦＮ－γ产生亦增加，但差异不明显。本研究表明ＩＬ－１０抑制活化人ＰＢＭＣ体外产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ，而抗人ＩＬ－１０抗体则表现出增强作用。ＩＬ－１０介导Ｔｈ１与Ｔｈ２两类辅助性Ｔ细胞间的相互调节，选择机体对抗原的免疫应答类型，从而对临床疾患的防治有一定指导意义。     

单克隆抗体亲和层析法提纯人重组IL—2

本文用正辛酸沉淀法提纯了四株抗IL-2单克隆抗体(8H7、982、9812、9F5),并与溴化氢活化的Sepharose4B 偶联制成亲和层折柱纯化人重组IL-2(rhIL-2)。结果表明四根单抗亲和层析柱均可有效地纯化rhIL-2,其中9B12柱和9F5柱的提取率分别达到49.2%和37.5%,提取物纯度在95%以上,并具有较高的生物活性。     

IgA肾病患者IL—2的产生及IL—2受体的表达

本文对IgA肾病(IgAN)外周血淋巴细胞白细胞介素2(IL-2)的产生、受体的表达及免疫球蛋白的产生进行了研究。结果发现:外周血淋巴细胞产生IL-2的活性明显增高,IL-2受体表达亦明显增强并伴有免疫球蛋白产生增多,提示IgAN存在着细胞免疫功能的紊乱。     

人IL—2RαcDNA探针的制备及其在mRNA检测上的应用

从质粒pJSB15中分离出人IL-2RαcDNA 673b_p片段,用放射性同位素α-~(32)p标记此片段,制备了IL-2RαcDNA探针。利用该探针与淋巴细胞RNA进行点杂交。结果证明,pHA、TPA均可诱导IL-2Rα转录增加,二者合用有明显的协同效应;且发现新鲜分离的多种白血病细胞测出的IL-2R_α(?)RNA水平高低不同,这可能有助于临床分型。     

IL—2受体介导的免疫抑制疗法在器官移植中的应用

抗ＩＬ－２Ｒ单抗和ＩＬ－２毒素融合蛋白作为免疫抑制剂，为预防器官移植排斥提供了一条新途径。它们能特异性识别活性化性Ｔ细胞表达的ＩＬ－２受体，前者表现为抑制混合淋巴细胞反应和细胞毒Ｔ细胞的产生，后者发挥“生物导弹”作用，特异地损伤靶细胞，从而抑制同种移植物排斥或移植物抗宿主反应。延长同种器官移植的存活期。     

鼻咽癌病人血浆脂质过氧化物,IL—2及IL—2受体活性的研究

本文对不同病期鼻咽癌(NPC)病人血浆中脂质过氧化物—丙二醛(MDA)、外周血淋巴细胞产生IL-2的能力、IL-2受体活性进行初步探讨。结果显示NPC病人血浆中MDA含量较正常人明显增高(P<0.01),晚期病人比早期病人增高更明显(P<0.01);患者外周血淋巴细胞分泌IL-2的能力及IL-2受体活性较正常人明显下降(P<0.01)。这提示了NPC患者血浆中MDA的增高和肿瘤的发生发展有关,NPC患者免疫功能的下降可能与MDA的升高有关。     

联合应用IL—2基因疗法和IL—3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免 …

以大剂量化疗后基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型。动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后葆瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＮＦ＿γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促     

测定白细胞介素2以监视肾移植排异的初步研究

本文测定了28例肾移植患者术前术后PBL和白细胞介素2(IL-2)的产生,并与正常人作了比较。在85人次测定中有7次排异反应。术前PBL与正常值无明显差异,IL-2产生略有降低;术后稳定期PBL和IL-2产生都明显下降;排异期急速上升,甚至高于正常水平。一些典型病例的动态观测也表明,术后无排异时IL-2产生逐渐恢复;排异时急速增加。本文引入IL-2×PBL的概念,即每毫升血液的PBL产生IL-2的能力代替IL-2,由于同时考虑了PBL的改变,所以监测排异反应的阳性率和准确率均优于IL-2指标。     

哮喘患儿外周血IL—2,IL—10与NO水平及其关系研究

采用双抗夹心ＥＬＩＳＡ技术检测了２８例哮喘患儿血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）在植物血凝素（ＰＨＡ）刺激下产生ＩＬ－１０水平，同时检测了ＮＯ和ＩＬ－２水平。结果：①急性发作期哮喘患儿血浆及ＰＢＭＣ在ＰＨＡ刺激下产生ＩＬ－１０水平均比正常儿童显著降低（Ｐ＜０．０１），在哮喘缓解期虽均有所恢复，但仍低于正常儿童（Ｐ＜０．０５）；②ＮＯ水平在急性发作期患儿明显升高（Ｐ＜０．０５），而在缓解期恢复正常（Ｐ＞０．０５）；③急性发作期哮喘患儿在ＰＨＡ刺激下ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２水平明显升高（Ｐ＜０．０１），但在缓解期恢复正常（Ｐ＞０．０５）；④急性发作期哮喘患儿在ＰＨＡ刺激下ＰＢＭＣ产生ＩＬ－１０水平与ＩＬ－２呈显著负相关（ｒ＝－０．５０４，Ｐ＜０．０１），而与血浆ＮＯ水平相关不显著（ｒ＝－０．３１９，Ｐ＞０．０５）。提示：哮喘发作时ＩＬ－１０分泌及释放减少，ＮＯ和ＩＬ－２水平升高，导致或加重气道慢性炎症反应，引起气道高反应性而诱发或加重哮喘。