槲皮素治疗高尿酸血症的机制研究

目的探讨槲皮素降尿酸的作用及机制。方法利用CRISPR/Cas9技术敲除尿酸酶基因建造高尿酸血症小鼠模型,观察槲皮素对慢性高尿酸血症小鼠血清尿酸、尿素氮、肌酐及肝脏黄嘌呤氧化酶活性的影响。试剂盒测定肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活力;实时荧光定量聚合酶链式反应qRT-PCR测定肾脏和肠道中尿酸转运体相关基因的mRNA表达。Western Bolt测定肾脏尿酸盐转运体GLUT9、URAT1与ABCG2蛋白的表达情况。结果高剂量槲皮素可显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,降低血清尿素氮和肌酐水平。显著抑制肝脏和肠道中GLUT9的表达,增加ABCG2蛋白的表达,对其他转运蛋白影响不大。结论槲皮素具有良好降尿酸作用,其机制可能与调节肾脏和肠道中的GLUT9和ABCG2表达有关。     

美花石斛醇提物对高尿酸血症小鼠的影响

目的 研究美花石斛醇提物对高尿酸血症小鼠的影响.方法 采用次黄嘌呤诱导小鼠急性高尿酸血症模型,测定小鼠血清尿酸(SUA)及血清、肝脏的黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶(ADA)水平;采用氧嗪酸钾复制慢性小鼠高尿酸血症模型,测定小鼠SUA及血清肌酐(SCr)水平.结果 与正常组比较,模型组小鼠SUA水平显著增加(P＜0...     

桂枝汤对高尿酸血症小鼠肾保护作用的研究

目的：研究桂枝汤对高尿酸血症小鼠肾保护作用及其机制。方法：用氧嗪酸钾诱导小鼠产生高尿酸血症模型,并随机分为6组：空白对照组、模型对照组、别嘌呤醇组（5 mg·kg^-1）、桂枝汤组（900、1 799和3 598 mg·kg^-1）。苏木精-伊红染色观察小鼠肾脏组织病理学变化;商品化试剂盒测定小鼠血清和尿液中尿酸、肌酐和尿素氮水平以及肝脏黄嘌呤氧化（XOD）活性。采用Western blot方法检测动物肾脏尿酸盐转运子（URAT1）、葡萄糖转运子9（GLUT9）、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）、有机阳离子转运子1（OCT1）、OCT2、有机阳离子/肉毒碱转运子1（OCTN1）和OCTN2。结果：与模型对照组比较,桂枝汤可明显降低高尿酸血症小鼠血清尿酸、肌酐和尿素氮水平,增加尿液尿酸和肌酐浓度,提高尿酸排泄分数。另外,桂枝汤可有效抑制高尿酸血症小鼠肝脏XOD活性,下调模型动物肾脏URAT1和GLUT9蛋白水平,上调肾脏ABCG2、OCT1、OCT2、OCTN1和OCTN2蛋白水平。结论：桂枝汤可能通过抑制高尿酸血症小鼠肝脏XOD活性以减少尿酸生成、调节肾脏有机离子转运子蛋白水平以促进尿酸及其他有机离子排泄,从而发挥其降尿酸和肾保护作用。     

广西特色壮药金边蚂蟥抗痛风活性成分研究

目的：研究金边蚂蟥中具有抗痛风作用的活性成分。方法：采用次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型,二甲苯诱导小鼠耳郭肿胀模型,热板法、扭体法筛选金边蚂蟥的活性部位,筛选金边蚂蟥活性成分,观察金边蚂蟥抗抗痛风作用的物质基础。结果：金边蚂蟥水溶性部位是其抗痛风的活性部位,可降低次黄嘌呤诱导的高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平,可抑制二甲苯诱导的小鼠耳郭肿胀,可减少醋酸诱导的小鼠扭体反应和增加小鼠热板痛阈;水溶性部位中水蛭素是主要活性成分。金边蚂蟥活性成分（水蛭素）0.8 g/kg和0.4 g/kg及金边 蚂蟥续滤粉2.0 g/kg 可显著降低血清尿酸水平,血清尿酸水平由模型组的232.73±50.93 umol/L 分别下降到140.70±25.97 umol/L、149.07±39.28 umol/L、176.45±44.33 umol/L（P ＜ 0.01）;金边蚂蟥活性成分（水蛭素）0.8 g/kg、0.4 g/kg和0.2 g/kg及金边蚂蟥续滤粉2.0 g/kg可明显抑制二甲苯引起小鼠耳郭肿胀,肿胀度由22.80±2.86 mg分别抑制到20.10±2.18 mg、19.80±2.57 mg、20.10±1.66 mg、20.85±1.60 mg（P ＜ 0.05）;金边蚂蟥活性成分（水蛭素）0.8 g/kg,可明显降低醋酸引起的小鼠扭体次数,次数由22.80±2.86次降到20.10±2.18次（P ＜ 0.05）。结论：金边蚂蟥抗痛风的活性部位是水溶性部分,其中水蛭素是其主要活性成分。     

水蛭素对高尿酸血症大鼠尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9表达的影响

目的 探究水蛭素对高尿酸血症大鼠的作用及机制。方法 雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、别嘌醇（30 mg/kg）组和水蛭素低、中、高剂量（0.2、0.4、0.8 g/kg）组。大鼠ig氧嗪酸钾（0.75 g/kg）,1次/d,连续5周,建立高尿酸血症模型;同时各给药组分别ig相应剂量的药物,1次/d,连续5周。采用生化法检测大鼠血清和尿液中的尿酸水平;免疫组化法测定肾组织中有机阴离子转运蛋白1（organic anion transporter 1,OAT1）水平;Western blotting法测定肾组织中葡萄糖转运体9（glucose transporter 9,GLUT9）、OAT1、尿酸盐转运体1（urate transporter 1,URAT1）蛋白表达;qRT-PCR检测肾组织中GLUT9、OAT1、URAT1 mRNA表达。结果 模型组大鼠血清和尿液中尿酸水平显著升高（P<0.01）,GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,OAT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）;与模型组比较,水蛭素可显著降低大鼠血清和尿液中尿酸水平（P<0.01）,显著下调GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）,显著上调OAT1 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）。结论 水蛭素可通过调控高尿酸血症大鼠肾脏尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9的表达,从而发挥降尿酸作用。     

痛风饮颗粒对高尿酸血症肾损害小鼠血尿酸及尿β_2微球蛋白的影响

目的:探讨痛风饮颗粒治疗高尿酸血症肾损害的可能作用机制。方法:将50只昆明种雄性小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、苯溴马隆组、别嘌醇组、痛风饮颗粒组,每组10只。除正常对照组外,其余4组采用腺嘌呤联合尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾灌胃的方法建立小鼠高尿酸血症肾损害的模型,造模周期21 d。造模开始后第7天,按组别给予不同的干预药物,实验第22天,检测小鼠尿尿酸、尿β_2微球蛋白水平和血尿酸、尿素氮水平,并取小鼠肾脏行HE染色,光镜观察病理变化。结果:痛风饮颗粒组小鼠血尿酸、尿素氮及尿β_2微球蛋白水平均显著降低,与模型组比较有统计学意义(P 0. 05);同时尿尿酸水平显著升高,与模型组比较有统计学差异(P 0. 05)。病理学观察显示痛风饮颗粒可减轻肾小管的损伤及肾间质炎性细胞的浸润程度。结论:痛风饮颗粒能够改善尿酸代谢、促进尿酸排泄、减轻高尿酸血症肾脏病理损害。     

痛风冲剂抗痛风作用的实验研究

目的 通过对痛风冲剂抗痛风与抗炎的作用研究。探讨该药的药效学作用。为临床应用提供依据。方法 运用尿酸钠致大鼠踝关节肿胀法，次黄嘌呤致小鼠高尿酸血症法观察其抗痛风作用；二甲苯致小鼠耳廓肿胀法，角义菜胶致大鼠足跖肿胀法和羧甲基纤维素囊袋法观察其抗炎作用。结果 痛风冲剂有明显的降低高尿酸血症小鼠血尿酸水平和抗炎作用。并具有增加高尿酸血症小鼠尿尿酸排出的趋势。结论 痛风冲剂具有抗痛风急性发作的作用。     

二丁颗粒抗痛风药效学研究

目的:研究二丁颗粒的抗痛风作用。方法:采用氧嗪酸钾单次造模和连续造模建立两种小鼠高尿酸血症模型,观察二丁颗粒的降尿酸作用;采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进实验,观察二丁颗粒抗炎作用;采用醋酸扭体实验,观察二丁颗粒镇痛作用;建立尿酸钠晶体诱导的大鼠急性痛风性关节炎模型,观察二丁颗粒抗痛风性关节炎作用。结果:40g/kg二丁颗粒能显著性降低高尿酸血症(单次造模和连续造模)小鼠血清尿酸水平,能够显著抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加;10g/kg二丁颗粒能够显著减少冰醋酸刺激引起的扭体次数;12g生药/kg和6g生药/kg在造模后4h、6h、8h能显著性的抑制痛风性关节炎大鼠关节肿胀,降低关节浸出液中IL-1β水平。结论:二丁颗粒具有较强的抗痛风作用。     

不同药性成分对OAT4、URAT1抑制作用及对急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响

目的研究不同药性中药成分对尿酸重吸收转运体尿酸转运蛋白1(URAT1)和有机阴离子转运蛋白4(OAT4)的抑制作用及对急性高尿酸血症小鼠尿酸水平的影响。方法应用OAT4、URAT1过表达单克隆细胞株(MDCK-hOAT4、HEK293-hURAT1),检测各药性中药单体对OAT4、URAT1的抑制作用及半数抑制浓度(IC50);运用黄嘌呤联合氧嗪酸钾制备急性高尿酸血症小鼠模型,研究原儿茶酸、甘草素、异甘草素对急性高尿酸血症小鼠血清尿酸的影响。结果苦味药中的川陈皮素,甘味药中的甘草素、异甘草素、甘草查耳酮A对OAT4抑制作用较强,IC50分别是0.556、18.40、6.831、6.825μmol/L。酸味药中的原儿茶酸、甘味药中的甘草素对URAT1具有较强的抑制作用,IC50分别是7.709、14.540μmol/L。甘草素能显著降低急性高尿酸血症小鼠的血尿酸水平,增加尿酸排泄量,降低血清肌酐、尿素氮的含量。结论川陈皮素、甘草素、异甘草素、甘草查耳酮A对OAT4具有较强的抑制作用,原儿茶酸、甘草素对URAT1具有较强抑制作用。甘草素能显著降低急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平,其作用机制可能是抑制OAT4、URAT1对尿酸的重吸收,并具有一定的肾脏保护作用。     

氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症动物模型的研究及评价

目的:通过对小鼠梯度给药,探讨氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症急性模型的用药剂量,并对不同的高尿酸血症动物模型进行比较,为高尿酸血症研究中动物模型的选择提供参考。方法:小鼠腹腔注射不同剂量氧嗪酸钾,诱导体内尿酸蓄积,在一定时间段内对小鼠进行尾静脉采血,测定血清尿酸值,得到小鼠急性高尿酸血症模型氧嗪酸钾合适剂量;再利用实时荧光定量技术检测小鼠给药后肝脏黄嘌呤氧化/脱氢酶基因表达水平的变化。依据文献显示的大鼠和树鼩高尿酸血症动物模型氧嗪酸钾用量和肝脏黄嘌呤氧化/脱氢酶mRNA表达水平的变化对三种动物模型进行分析比较。结果:小鼠腹腔注射600 mg/kg的氧嗪酸钾在给药后1～2 h时能形成较为稳定的急性高尿酸血症;腹腔注射氧嗪酸钾1.5h后,小鼠黄嘌呤氧化酶/脱氢酶mRNA的表达水平较对照组上升2.14倍。综合本实验结果和文献分析显示氧嗪酸钾致三种动物高尿酸血症的用药剂量不同,其中树鼩所需最小。结论:尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾均能诱导出大鼠、小鼠和树鼩急性高尿酸模型,但药物的敏感性差异较大,提示树鼩可作为一种潜在的高尿酸动物模型。     

车前子提取物部位群抗痛风的作用

目的: 探讨车前子部位群的抗痛风活性与机制,为后续研究提供参考依据。方法: 以系统溶剂法提取分离车前子。90只昆明种小鼠,随机分为9组,每组10只,分别为正常组,高尿酸血症组(模型组),别嘌呤醇组(0.01 g·kg^-1),总提物组(25 g·kg^-1),石油醚组(25 g·kg^-1),二氯乙烷组(25 g·kg^-1),乙酸乙酯组(25 g·kg^-1),正丁醇组(25 g·kg^-1),水部位组(25 g·kg^-1)。除正常组外,其余各组采用氧嗪酸钾盐诱导小鼠急性高尿酸血症模型,ig给予相应药物,正常组和模型组给予等体积生理盐水,连续给药7 d。观察车前子总提物及5个部位对小鼠血清尿酸水平及肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活性的影响。结果: 系统溶剂法提取分离车前子得到5个部位,分别为石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水部位。与正常组比较,模型组小鼠血清尿酸的水平与XOD活性明显升高(P<0.01);与模型组比较,别嘌呤醇、车前子总提物及各不同部位均可降低小鼠血清尿酸的水平与XOD活性(P<0.05,P<0.01)。结论: 车前子及不同提取部位具有一定的抗痛风作用。     

车前子醇提物降低急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平及机制研究

目的:探讨车前子醇提物对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响及降尿酸作用机制.方法:车前子低、中、高剂量(1.17,2.34,4.68 g·kg-1)和别嘌呤醇(10 mg·kg-1)ig连续7d,建立小鼠高尿酸血症模型,观测对氧嗪酸钾盐诱导的急性高尿酸血症小鼠血清尿酸与肌酐含量、肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)与腺苷脱氨酶(ADA)的活性、肾脏尿酸转运体(mURAT1)mRNA表达的影响.结果:与正常组比,模型组小鼠血清尿酸与肌酐含量和肝脏XOD与ADA活性显著增高,并上调肾脏尿酸转运体mURAT1 mRNA的表达.提取物低、中、高剂量组血清尿酸分别为(178.32±10.26),(148.77±13.59),(160.28±14.65)μmol·L-1,明显低于模型组(235.65±19.38) μmol·L-1(P ＜0.01).血清肌酐分别为(56.12±4.58),(50.97±3.27),(52.45±4.66) μmol·L-1,明显低于模型组(107.59±8.32) μmol·L-1(P ＜0.01).肝脏XOD活性分别为(23.18±3.72),(16.96±2.45),(14.62±3.43) U·g-1,明显低于模型组(24.39±3.58) U·g-1 (P ＜0.05).ADA活性分别为(4.70±0.44),(3.89±0.24),(4.08±0.58) U·mg-1,明显低于模型组(5.92±0.84) U·mg-1 (P ＜0.05,P＜0.oi).肾尿酸转运体mURAT1 mRNA的表达分别为1.83±0.12,1.52±0.13,1.72±0.11,明显低于模型组2.22 ±0.1(P ＜0.05,P＜0.01).结论:车前子醇提物能够降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸,改善高尿酸血症小鼠肾脏功能.抑制XOD与ADA活性并下调肾脏尿酸转运体mURAT1 mRNA的表达,是其降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的可能机制.     

秦皮总香豆素降低小鼠急性高尿酸血症血尿酸水平及机理研究

目的:研究秦皮总香豆素对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响,并初步探讨其作用机理。方法:采用氧嗪酸钾腹腔注射复制小鼠急性高尿酸血症模型,给予不同剂量秦皮总香豆素(440、220、110mg/kg),观察高尿酸血症小鼠血清尿酸水平及肝脏黄嘌呤氧化酶、鸟嘌呤脱氢酶和腺嘌呤脱氢酶水平。结果:秦皮总香豆素组小鼠的血清尿酸值明显低于模型组,其中以大、中剂量组为佳;对黄嘌呤氧化酶的活性有明显的抑制作用;而对小鼠鸟嘌呤脱氢酶和腺嘌呤脱氢酶的影响无统计学意义。结论:秦皮总香豆素能明显降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平,其机理可能和抑制黄嘌呤氧化酶的活性有关。     

盐制对黄柏抗痛风作用的影响

目的 :研究盐制对黄柏抗痛风作用的影响。方法 :以小鼠血清尿酸水平和肝脏黄嘌呤氧化酶活性为指标 ,评价黄柏生品和盐制品抗痛风作用。结果 :黄柏生品和盐制品低剂量和高剂量均可降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平 ,抑制小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶活性 ,具有抗痛风作用。二者的高剂量组对正常动物血清尿酸水平仅有一定降低的趋势 ,但无显著性差异。黄柏盐制品作用可能略弱于生品。结论 :盐制对黄柏抗痛风作用无显著性影响。     

鸡矢藤提取物对酵母膏致小鼠高尿酸血症的影响

目的:探讨鸡矢藤提取物(EPS)对酵母膏致小鼠高尿酸血症的影响及其作用机制。方法:采用酵母膏造模法造成小鼠高尿酸血症模型,检测EPS对正常小鼠和高尿酸血症小鼠血清尿酸水平和肝脏黄嘌呤氧化酶活性的影响;进一步从体外研究EPS对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。结果:EPS对正常小鼠血清尿酸水平无明显影响,但可显著降低高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平,并能显著抑制其肝脏黄嘌呤氧化酶的活性;体外实验EPS对黄嘌呤氧化酶也有明显的抑制作用,IC50为1.00g/L。结论:EPS可显著降低酵母膏致高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平,其机制可能与抑制黄嘌呤氧化酶活性有关。     

栀子降尿酸有效部位研究

目的:确定栀子降尿酸作用有效部位.方法:用系统溶剂法提取分离得到4个部位,分别为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水液部位,采用氧嗪酸钾盐诱导的小鼠急性高尿酸血症模型,研究栀子总提物和4个部位对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平和肝脏黄嘌呤氧化酶的影响.结果:栀子总提物组、乙酸乙酯组和水组具有较好的降尿酸作用,栀子总提物组、石油醚组和水组能够较好的抑制黄嘌呤氧化酶的活性.栀子总提取物和各部位提取物对正常小鼠血清尿酸水平没有显著影响.结论:栀子乙酸乙酯提取部位和水液部位为降尿酸活性部位,其降尿酸作用部分机制是通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性.     

栀子苷降尿酸作用研究

目的：探讨栀子苷对高尿酸血症小鼠的影响。方法：用氧嗪酸钾连续7 天灌胃造成小鼠高尿酸血症模型,同时每天灌胃栀子苷（50、100、200 mg?kg-1）,检测小鼠血清尿酸（SUA）、尿尿酸（UUA）、肝脏黄嘌呤氧化酶活性（XOD）。结果：栀子苷中、高剂量能显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平（P<0.01）。结论：栀子苷可通过促进尿酸排泄降低高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平。     

虎杖提取物抗动物高尿酸血症的实验研究

目的：观察虎杖提取物对高尿酸血症动物尿酸及痛风性关节炎的作用。方法：采用尿酸酶抑制剂法,造成小鼠高尿酸血症,观察虎杖提取物对该模型血尿酸的抑制作用;采用腺嘌呤＋乙胺丁醇法造成正常大鼠高尿酸血症模型,取血测其血尿酸和黄嘌呤氧化酶浓度,观察虎杖提取物对高尿酸血症大鼠动物模型的影响;同时取动物关节组织,观察滑膜组织的病理改变。结果：虎杖提取物可显著降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸水平,可明显降低大鼠高尿酸症的血尿酸水平和抑制黄嘌呤氧化酶的活性,可改善痛风性关节炎的病理改变。结论：虎杖提取物能改善高尿酸血症和痛风性关节炎的病理改变。     

益母草提取物对大鼠高尿酸血症的调控作用

该研究采用灌胃给予SD大鼠氧嗪酸钾(300 mg·kg·d)制备高尿酸血症模型, 并将其分为正常组、模型组、别嘌醇组、益母草提取物高、中、低剂量组(200, 100, 50 mg·kg·d), 给予氧嗪酸钾1 h后给药, 连续给药7 d。分别测定血清尿酸(serum uric acid, SUA), 肌酐(serum creatinine, SCre), 尿中尿酸(uric acid, UA)及肾脏中相关转运体的表达水平, 研究益母草提取物对高尿酸血症大鼠血尿酸、肾功能的影响及肾脏相关转运体的mRNA的调节作用。结果显示与模型组相比, 益母草提取物可以显著性降低高尿酸血症大鼠血清尿酸, 肌酐的水平, 升高尿尿酸水平;同时, 益母草提取物可以显著性下调肾脏尿酸盐转运体(urate transporter 1, URAT1), 葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9, GLUT9) mRNA 的表达, 上调有机阳离子转运体(organic cation transportanter, OCT), 肉毒碱转运体(carnitine transporter, OCTN)mRNA的表达, 具有促进肾脏尿酸排泄的作用。