包虫和猪囊虫抗原免疫化学性质及酶联免疫印斑技术临床应用研究

用 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶联免疫印斑技术分别对人源细粒棘球蚴囊液、棘球蚴砂、猪囊尾蚴囊液抗原组分进行分析研究,并对两种病血清学交叉反应进行了试验。结果显示包虫囊液抗原有29条蛋白区带,有两条糖蛋白带。猪囊虫囊液抗原显示36条蛋白带谱,两条糖蛋白带。棘球蚴砂显示23条蛋白带谱。包虫病人血清与印有包虫囊液抗原的硝酸纤维膜反应显示23条反应带,其中特异带为6条。包虫病人、猪囊虫病人血清与此膜反应显示4条共同反应带。包虫病人血清与棘球蚴砂抗原膜反应显示4条主要特异反应带,包虫病人血清、猪囊虫病人血清与此膜反应显示1条共同反应带。猪囊虫病人血清与猪囊虫囊液抗原膜反应显示22条反应带,其中有5条特异反应带;包虫病人和囊虫病人血清与此膜反应显示3条共同反应带。     

酶免疫转移印迹试验分析斯氏狸殖吸虫成虫抗原

本文应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离斯氏狸殖吸虫成虫抗原,并通过转移电泳亚硝酸纤维薄膜(NC)上,然后用酶联免疫试验观察成虫抗原蛋白与感染斯氏狸殖吸虫的病人、犬及大鼠血清的反应,检测和识别特异性虫体抗原蛋白。实验结果显示:虫体抗原经SDS-PAGE分离,染色后可显示20余条蛋白区带,分子量分别为22、24、26KD的抗原蛋白对人体和动物的斯氏狸殖吸虫感染具有诊断价值。     

猪囊尾蚴蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦分析

猪囊尾蚴粗抗原在进行人体囊虫病的免疫诊断中有比较好的效果。但猪囊尾蚴抗原成分复杂,为了进一步提高阳性率,减少交叉反应,需要纯化抗原,分离出特异的抗原组分。我们用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和薄层水平等电聚焦(IEF)对猪囊尾蚴的囊液、头节囊壁和全囊抗原蛋白质组分进行了比较分析。     

猪囊尾蚴抗原的免疫化学研究

本文应用琼脂双向扩散(DID)、免疫电泳(IEP)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对猪囊尾蚴的各部分抗原,即完整幼虫、囊液、头节和囊壁抗原进行分析。实验结果表明,四种抗原间存在相同的抗原成分。囊液中含有糖蛋白和脂蛋白。囊液、头节和囊壁蛋白质的主要分子量均在100KD以下。囊液与头节有     

猪囊尾蚴表面蛋白及其抗原性的初步测定分析

本文初步分析了猪囊尾蚴囊壁表面蛋白的特性。根据囊尾蚴漂洗液PAGE和SDS-PAGE考马斯亮蓝染色带分别显示了9条及14条蛋白区带,其中大部分与宿主骨骼肌组织的可溶性蛋白有一致的迁移率,但其中第5、7、10条蛋白带为其独有。漂洗液与囊液兔高免血清IE可出现1条沉淀弧;用漂洗液蛋白抗原对35例囊虫病人血清做ELISA,阳性率为60％。此外,对囊虫表面宿主蛋白的可能作用,做了初步探讨。     

获得性及先天性弓形虫病人血清对弓形虫排泄分泌抗原的识别:急、慢性感染标志的鉴定

本文主要探讨不同感染期包括先天性弓形虫病对弓形虫排泄分泌抗原(ESA)的血清免疫应答。分别采集急性、亚急性、慢性病人血清和感染新生儿及其母亲的血样,用~(35)S甲硫氨酸标记ESA和放射碘标记虫膜抗原(MA)进行放射免疫沉淀试验,而后用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行比较分析。制备抗原的虫体取自RH株感染小鼠腹腔液,制备ESA~((?)5)S甲硫氨酸标记物,取     

旋毛虫成虫三种抗原SDS-PAGE及Western-blot比较研究

目的研究大理猪源旋毛虫(Trichinella spiralis)成虫虫体可溶性抗原、表面抗原和排泄分泌抗原3种抗原的蛋白组分及其之间的差异,比较分析其免疫反应性。方法以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹对成虫3种抗原进行蛋白组分及其免疫反应性分析。结果十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果:虫体可溶性抗原显示29条蛋白带,分子量范围在112kDa~10kDa之间,其中主带13条;表面抗原显示4条主要蛋白带,分子量分别为50、48、40、34kDa;排泄分泌抗原显示17条蛋白带,分子量范围在120~14kDa之间,其中主带6条,分子量分别为120、64、43、40、35、33kDa。蛋白印迹结果:虫体可溶性抗原出现13条反应条带,其中分子量为81、40、37、33、30kDa的条带着色明显;表面抗原出现4条反应条带,其分子量分别为50、48、40、34kDa;排泄分泌抗原显示7条反应带,其中43、40、27、18kDa着色明显。结论旋毛虫成虫虫体可溶性抗原与排泄分泌抗原较表面抗原蛋白组分复杂,3者主带部分属低分子量区;免疫反应性的强度表面抗原和排泄分泌抗原高于虫体可溶性抗原,说明前两种抗原是旋毛虫成虫刺激机体产生免疫应答的主要靶抗原。     

中国大陆日本血吸虫品系的研究 X.成虫蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

对中国大陆的安徽、湖北、广西、四川和云南5地日本血吸虫成虫蛋白质组分进行了SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和比较,结果表明各地虫体蛋白质电泳图谱基本相似,但作银染分析时,广西地区两性虫体的蛋白条带则呈现某些差别。     

不同发育阶段广州管圆线虫的抗原分析

目的 分析不同发育阶段广州管圆线虫抗原差异 ,筛选优势诊断抗原分子。　方法　对不同发育阶段的广州管圆线虫的虫体蛋白进行十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和免疫印迹分析。结果　不同发育阶段的虫体蛋白质谱大致相同 ,SDS PAGE中出现的少数差异带在免疫印迹试验(Westernblotting)中无明显差异。各期虫体抗原相对分子质量为Mr 40 000、50 000、 66 000和 80 000的 ,与感染大鼠和正常大鼠血清均出现反应条带。 2～3周幼虫Mr 104 000与 2周感染血清出现明显反应条带。雌虫Mr 33 000及所有虫体的Mr 32 000抗原与感染后 2周血清出现反应条带 ,与感染 3周～5月的大鼠血清均出现明显反应 ,与正常大鼠血清均无明显反应。　结论　Mr 40 000、50 000、66 000和80 000抗原可能在以虫体粗抗原作探针的免疫诊断中引起非特异性反应。幼虫Mr 104 000、雌虫Mr 33 000和所有虫体的Mr 32 000可作为广州管圆线虫病早期诊断和流行病学调查的候选抗原分子。     

感染弓形虫小鼠腹水内可溶性抗原的初步分析

收集感染弓形虫小鼠的腹水,高速离心,上清液为可溶性抗原S;沉淀物为虫体和宿主细胞的混合物,制成悬液,超声处理,加等量1.7％NaCl至等渗,高速离心,上清液为虫体裂解抗原DB。将S用硫酸铵分级沉淀,分别获得S_1、S_2和S_3组分,再经葡聚糖G-100凝胶过滤纯化。用双向琼脂扩散、单向定量免疫电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳可见DB比S有较强的敏感性,但不含有虫体特异的可溶性组分,而S制备较简便,其抗原组分S_1除含有特异的可溶性抗原组分外,尚含与DB一致的组分,值得进一步纯化。     

绵羊牦牛棘球蚴囊液及囊壁抗原的SDS—PAGE分析

本文应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对绵羊、耗牛棘球蚴囊液及绵羊棘球蚴囊壁可溶性粗抗原的蛋白组分进行了分析。使用10％凝胶,采用垂直板型电泳、考马斯亮兰R—250染色进行SDS-PAGE的结果表明,绵羊及耗牛棘球蚴囊液分别含有16及11种蛋白组分,分子量范围分别为270～16.5KD及280～17KD;主带均为8条。绵羊棘球蚴囊壁可溶性粗抗原共显示17条蛋白带,分子量范围245～17KD,主带8条。本项研究为进一步分析分离特异性抗原奠定了基础。     

弓形虫与日本血吸虫成虫、虫卵蛋白组分的初步分析

<正> 以往有实验表明:弓形虫抗原与急性血吸虫病人血清可产生较严重交叉反应,为了探求交叉反应的发生是否与其蛋白组分有共同部分有关,我们采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对血吸虫成虫、虫卵和弓形虫的蛋白组分进行了初步分析。 经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后,血吸虫成虫、虫卵和弓形虫的蛋白区带数和特征性主带数分别为:成虫28条和12条;虫卵为27和13条;弓形虫为22和7条。血吸虫成虫和虫卵中不管是谱带总数、特征性主带数及其分布均较为相似,而它们和弓形虫,无论是     

日本血吸虫表皮膜蛋白的研究:Ⅱ、生化及免疫活性分析

为了寻找理想的抗原物质,对血吸虫表皮膜进行了研究,目的是找出特异的可供临床诊断用的表皮膜抗原;同时探讨是否具有预防作用。采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PACE)及酶联免疫印斑技术(ELIB)结合使用,不仅能分辨出不同分子量蛋白质,而且能鉴别具有免疫活性的蛋白组分,本文对日本血吸虫表皮膜蛋白进行提取和分离,并对其     

丝虫抗原的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

在基本消灭丝虫病的广大地区,多种免疫学诊断技术已广泛地应用于流行病学监测。随之对抗原的制备及纯化提出更高的要求。为了解丝虫抗原主要蛋白成分的分子量,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对马来丝虫成虫、微丝蚴抗原、成虫分泌代谢(E-S)抗原及牛腹腔丝虫虫体抗原进行了分析。 材料与方法 1 马来丝虫成虫及微丝蚴抗原     

雷丸蛋白酶对猪囊尾蚴体外作用的初步研究

应用雷丸蛋白酶培养后的猪囊尾蚴，经光学显微镜观察发现：固体发酵雷丸蛋白酶（雷3、雷7）与天然雷丸干品蛋白酶（雷透）均能引起猪囊尾蚴组织结构的改变；进一步电镜观察表明其对囊虫的微毛、表皮、线粒体、肌尾等超微结构均有明显的破坏作用。在此基础上．我们把用该药物培养后的猪囊尾蚴制成全囊蛋白液，采用聚丙烯酰胺凝况电泳（PAGE）方法，经分析表明：雷丸蛋白酶作用后的囊虫蛋白带谱较正常囊虫多2～3条，此带谱的变化可能与雷丸蛋白酶杀虫作用和破坏虫体蛋白质有关。     

四个旋毛虫地理株肌幼虫虫体抗原和排泄—分泌抗原的免疫学分析

目的分析4个旋毛虫地理株肌幼虫的虫体抗原、排泄-分泌抗原的蛋白组成和免疫学特性。方法昆明小鼠16只,每只感染旋毛虫肌幼虫300条,45 d后人工消化法收集旋毛虫肌幼虫制备虫体抗原,幼虫体外培养获得排泄-分泌抗原。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,SDSPAGE)分析虫体抗原和排泄-分泌抗原的组分,并用感染小鼠血清和旋毛虫病、血吸虫病、华支睾吸虫病、棘球蚴虫病、裂头蚴病、鞭虫病、卫氏并殖吸虫病、囊尾蚴病、钩虫病患者血清与抗原进行免疫印迹反应,观察阳性反应抗原条带。结果经SDS-PAGE分析,4个旋毛虫地理株虫体可溶性抗原和排泄-分泌抗原均有8条主带,相对分子质量(M_r)分别为100000、66000、49000、45000、43000、30000、18000、12000和M_r 66000、53000、49000、43000、36000、34000、30000、16000。免疫印迹结果显示,旋毛虫肌幼虫虫体可溶性抗原与旋毛虫病患者和感染小鼠血清的反应条带以M_r 95000、72000、53 000、49 000、43 000为主,排泄-分泌抗原反应条带以M_r 53 000、49 000、43 000、40 000为主。结论各地理株不同抗原的组分和免疫学反应存在一定的差异,其中虫体可溶性抗原的M_r 95 000、72 000成分和排泄-分泌抗原的M_r 40 000成分是进一步研究的重点。     

赖型钩端螺旋体红细胞致敏物（ESS）和脂多糖（L—LPS）的抗原分析

本文采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和抗原印渍(Western blotting)技术对钩端螺旋体赖型70091株的两种抗原成份,即红细胞致敏物(ESS)和脂多糖(L-LPS),作了抗原分析。提示ESS保护性抗原决定簇位于相当标准分子量蛋白的23kd处;结合化学组成分析,认为这一片段以多糖为主。L-LPS在同一位置似乎也有共同抗原。     

阿苯达唑对猪囊尾蚴糖原作用的观察

1980年我国首先应用阿苯达唑临床治疗囊虫病,大量病例临床疗效观察证实,该药对皮肌型和脑型囊虫病均有显著疗效。本文报道阿苯达唑对虫体糖原的作用,借以探讨该药对囊尾蚴的作用机理。 材料与方法:猪囊尾蚴取自武汉市肉类联合加工厂当天宰杀的新鲜“米猪肉”,选择大小正常,充满透明囊液的虫体,在生理盐水中漂洗2次,置40％生理     

结核分支杆菌Ag85A蛋白的克隆、表达及其血清学诊断价值的研究

10多年来国内、外学者一直从结核分支杆菌培养滤液中提纯蛋白质抗原进行多方面的研究 ,由于该方法制备蛋白抗原较烦琐、费时 ,因此 ,近年来许多研究者应用大肠杆菌来表达结核分支杆菌基因 ,简便地获得了大量结核分支杆菌单一的蛋白抗原。Ａｇ85复合物是结核分支杆菌主要的分泌性蛋白 ,在结核分支杆菌Ｈ37Ｒｖ株中占分泌蛋白总量的 3 0 % ,可从早期培养物中分离 ,是一种热不稳定的蛋白 ,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (ＳＤＳ ＰＡＧＥ)和等电聚焦分析可分为Ａｇ85Ａ、Ａｇ85Ｂ和Ａｇ85Ｃ三个组分[1] 。因此本研究通过基因工程技术构建…     

卫氏并殖吸虫可溶性虫卵抗原的抗原性

为了评价未成熟虫卵作为诊断抗原的效果,从104条卫氏并殖吸虫中取得约百万虫卵制成盐水浸液,即成卫氏并殖吸虫可溶性虫卵抗原(Pw SEA),以其及卫氏并殖吸虫十二周龄的成虫全虫浸液(PwWWE),对实验感染并殖吸虫病的病犬进行微量ELISA检测,观察了IgG及IgM抗体的水平,并用盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析了Pw SEA的蛋白组成。结果发现,抗Pw SEA的特异IgG抗体于实验感染后8周开始上升,直至观察的13周仍处于高水平,