血管紧张素Ⅱ受体1在人胃癌细胞中的表达及其拮抗剂对胃癌荷瘤裸鼠生长的抑制作用

目的：检测血管紧张素Ⅱ受体1（AT1R）在人胃癌细胞株中的表达及其拮抗剂对人胃癌荷瘤裸鼠生长的抑制作用。方法：采用实时定量PCR和蛋白印迹分析法检测AT1R在胃癌细胞株中的表达。建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,分别以2mg/kg和5mg/kgTCV-116（AT1R拮抗剂）每日给荷瘤裸鼠灌胃,观察肿瘤体积的变化并绘制肿瘤生长曲线;以免疫组织化学染色观察胃癌裸鼠移植瘤的微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）表达。结果：AT1R在人胃癌细胞株中有较高水平的表达。经TCV-116处理的胃癌荷瘤裸鼠移植瘤体积较对照组显著减小,且TCV-116处理组的MVD和VEGF表达水平也较对照组显著降低。结论：选择性AT1R拮抗剂对人胃癌裸鼠移植瘤的生长具抑制作用,其可能是通过抑制肿瘤血管生成的途径产生抑制作用;故阻断血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）可能是治疗胃癌的一种新方法。     

DADS对人宫颈癌细胞生长及VEGF蛋白表达的影响

【目的】探讨二烯丙基二硫（DADS）对人宫颈癌Hela细胞生长及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的影响。【方法】体外培养人宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法测定DADS对Hela细胞增殖活性的影响;裸鼠皮下注入人宫颈癌Hela细胞建立人宫颈癌裸鼠并种移植模型,观察腹腔注射DADS对宫颈癌移植瘤在Balb／c-nu裸鼠体内生长情况的影响,HE染色后进一步观察DADS对移植瘤组织形态的改变,SP免疫组织化学法观察移植瘤细胞VEGF蛋白酌表迭情况。【结果】DADS对人宫颈癌Hela细胞增殖有一定抑制作用,并呈浓度依赖性,以DADS60mg／L高剂量药物组抑制活性最强;腹腔注射DADS剂量为50mg／kg、100mg／kg和200mg／kg时,细胞增殖抑制率分别为28．1％、38．6%、55．3％,瘤重抑制率分别是35．9％,49．9％,55．4％;HE染色结果示DADS具有杀伤人宫颈癌裸鼠移植瘤细胞作用;SP免疫组织化学法示DADS下调移植瘤细胞VEGF表达。[结论]DADS具有抑制人宫颈癌细胞的生长作用,此作用可能与下调移植瘤细胞VEGF表达有关。     

BAY11-7082抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤生长及其机制

目的 初步探讨IκBα磷酸化抑制剂BAY11-7082对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法 建立人卵巢癌细胞系COC1裸鼠皮下移植瘤模型,腹腔注射BAY11-7082,测量移植瘤的质量,并用TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡情况。同时应用免疫组化染色,检测瘤组织内的NF-κB p65、血管内皮生长因子（VEGF）和FⅧ蛋白表达,并计数微血管密度（MVD）。结果 BAY11-7082组移植瘤质量显著低于阴性对照组（P〈0.05）,抑制率为47.60%;BAY11-7082组AI值高于对照组（P〈0.05）;PI值小于对照组（P〈0.05）,BAY11-7082组NF-κB p65、VEGF与MVD均显著低于对照组（P〈0.05）。结论 BAY11-7082可能通过降低VEGF表达,抑制卵巢癌COC1裸鼠移植瘤生长。     

蛇毒解聚素在裸鼠胶质瘤间质化疗中的实验研究

目的:通过建立裸小鼠皮下人脑胶质瘤模型,研究蛇毒解聚素(contortrostatin)抑制U87胶质瘤裸鼠移植瘤生长的作用机制.方法:BALB/C裸鼠30只,接种U87胶质瘤细胞成功后随机分成两组,接种后肿瘤长至直径约1 cm大小时开始间质内注射给药.蛇毒解聚素按40μg/d给药,持续3周.观察两组肿瘤抑瘤率,用免疫组织化学检测移植瘤组织中的微血管计数(MVD),以及VEGF.结果:与溶媒对照组相比,蛇毒解聚素组均能抑制肿瘤生长(P＜0.01),其体积抑瘤率为50%;蛇毒解聚素能明显降低肿瘤MVD并下调移植瘤组织中VEGF的蛋白表达.结论:蛇毒解聚素通过抑制肿瘤血管形成抑制U87裸鼠移植瘤生长.     

豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响的实验研究

目的观察豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响及可能的机制。方法建立24只裸小鼠胃癌原位移植瘤模型,随机分成4组（每组6只）：对照组、5-FU组、豆蔻提取物组、联合组,各组按设计剂量给药,实验期间,每3d测量移植瘤瘤径及体积,4周后,颈椎脱臼法处死,计算抑瘤率,用免疫组化法检测各组移植瘤瘤体中ODX-2和VEGF的表达情况。结果成功建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,各组实验裸鼠体重下降明显低于对照组,各组抑瘤率分别为：5-FU组55．99％,豆蔻提取物组42．81％,联合用药组67．36％,联合用药组瘤体中COX-2和VEGF的表达明显下调。结论豆蔻提取物可抑制胃癌原位移植瘤的生长,豆蔻提取物联合5-FU可显著抑制胃癌原位移植瘤的生长,2组具有协同作用,其抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用机制可能与下调COX-2和VEGF的表达有关。     

survivin基因RNA干涉对宫颈癌裸鼠移植瘤生长及凋亡和顺铂化疗敏感性的影响

目的观察survivin基因RNAi对宫颈癌裸鼠移植瘤生长、凋亡和化疗敏感性的影响。方法随机选择雌性BALB/C-nu/nu裸小鼠24只,细胞接种法建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,每天观察裸鼠一般状况及肿瘤生长情况,通过绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤生长抑制率,观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响;通过免疫组化SP法检测各组移植瘤组织中survivin蛋白表达情况,TUNEL染色观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤凋亡的影响;当肿瘤体积达0.2cm3时给予顺铂化疗以观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤化疗敏感性的影响。结果成功建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积在每个检测点均明显小于接种HeLa组;观察结束时,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.369±0.043）g和（1.150±0.136）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤生长抑制率为67.9%。免疫组化结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠survivin蛋白表达显著下降;TUNEL染色结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠细胞凋亡明显增多,凋亡指数（AI）值达（22.73±1.37）%。顺铂化疗后不同检测点接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积明显小于接种HeLa组,肿瘤生长明显受抑;观察结束后,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.323±0.058）g和（1.347±0.173）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤细胞凋亡明显增多,与接种HeLa组AI比较,接种HeLa-S2组AI明显升高,分别为：（37.38±1.01）%和（5.19±0.61）%（P〈0.05）。结论 survivin基因RNAi可通过下调移植瘤组织survivin蛋白表达抑制移植瘤生长并促进其凋亡,并通过增加顺铂化疗诱导的细胞凋亡,增强顺铂化疗对移植瘤的生长抑制,进而提高移植瘤对顺铂化疗的敏感性。     

三氧化二砷对小鼠肺癌移植瘤治疗作用的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用及可能机制。方法建立C57BL/6皮下肺癌移植瘤模型,随机分为三组:对照组、As2O3治疗组、顺铂(DDP)治疗组,观察肿瘤生长情况计算抑瘤率,免疫组织化学法检测肿瘤组织内增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞因子(VEGF)的表达。结果实验表明As2O3组肿瘤生长明显抑制,VEGF和PCNA的表达显著下降。结论 As2O3对小鼠肺癌移植瘤有显著的抑制作用;抑制VEGF、PCNA的表达可能是三氧化二砷的抗肿瘤机制之一。     

三氧化二砷对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的：观察三氧化二砷（As2O3）对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其机制。方法：20只体质量相似的BALB/c裸鼠,皮下接种胆囊癌移植瘤随机分为0.9%氯化钠液（NS）组（n=10）和As2O3组（n=10）。尾静脉注射NS0.2mL（NS组）或As2O310mg.kg-1（As2O3组）,每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的质量和体积,同时分别用免疫组织化学法和Western blot法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的表达。结果：NS组瘤质量0.992±0.401g、体积1.50±0.57mm3,As2O3组瘤质量0.526±0.269g、体积0.83±0.39mm3,两组间均有显著差异（P〈0.01）;免疫组织化学和West-ern blot检测结果显示As2O3组肿瘤组织Cyclin D1的表达明显下降。结论：As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长,可能通过下调Cyclin D1的表达来实现抑瘤生长。     

NSAIDs对胃癌移植瘤的抑制作用及对COX-2、VEGF、NF-KB表达的影响

目的通过裸鼠移植瘤试验，观察NSAIDs药物对胃癌移植瘤的抑制作用；通过NSAIDs对COX-2、VEGF及NF-κB表达影响的研究，证实抑制胃癌新生血管形成在NSAIDs抗胃癌发生发展中的重要作用；探讨COX-2与核转录因子NF-κB的关系及核转录因子NF-κB在NSAIDs抗胃癌中的作用。方法应用裸鼠移植瘤实验，观察NSAIDs对胃癌移植瘤的抑制率；应用免疫组织化学方法及图象分析仪检测NSAIDs作用前后胃癌移植瘤COX-2、VEGF及NF-κB表达；结果尼美舒利的抑瘤率为85％、舒林酸的抑瘤率为88．96％、吲哚美辛抑瘤率为75％，与对照组比较有显著性差异（P〈0．01）；免疫组织化学及图象分析仪检测结果显示尼美舒利、舒林酸、吲哚美辛均可使COX-2、VEGF及NF-κB的表达下调。结论不同NSAIDs均表现有抑制胃癌裸鼠移植瘤生长的作用。NSMDs可能通过下调VEGF表达而抑制肿瘤新生血管的生成。NF-κB表达与COX-2蛋白表达呈正相关，NSAIDs可能是通过NF-κB途径抑制COX-2表达，从而抑制胃癌细胞增殖，促进细胞凋亡；NF-κB表达与VEGF正相关，因而对VEGF可能有正面调节作用。NSMDs可能通过影响NF-κB的活性，进而影响胃癌血管的形成，而起到抑制胃癌的作用。     

17 DMAG对人结直肠癌裸鼠移植瘤微血管形成的抑制作用

目的探讨17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-DMAG）对结直肠癌微血管生成的抑制作用。方法24只BALB／C-nu／nu裸鼠用于建立裸鼠结直肠癌移植瘤模型,并将其随机分为17-DMAG、5-氟尿嘧啶（5-Fu）及对照组各8只,分别腹腔注射17-DMAG、5-Fu、生理盐水,4周后测量裸鼠移植瘤体质量、体积,采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）,采用蛋白免疫印迹法检测VEGF。比较3组结果。结果17-DMAG组、5-FU组移植瘤体质量、体积与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）;17-DMAG组MVD、VEGF水平均低于5-Fu组与对照组（P均〈0．05）,而5-FU组与对照组的MVD、VEGF水平比较差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论17-DMAG可通过下调VEGF的表达减少结直肠癌组织中新生血管的生成进而抑制肿瘤的生长。     

反义miR-21对荷人宫颈鳞癌裸鼠移植瘤生长和凋亡的影响

目的 构建荷人宫颈鳞癌裸鼠移植瘤模型,探讨干扰miR-21 表达对移植瘤生长、凋亡的影 响.方法 将人工合成的反义寡核苷酸ASODN(AS-miR-21)转染SiHa 细胞(抑制组),同时设阴性对照组和 空白对照组,对数生长期的SiHa 细胞分别接种于裸鼠皮下,绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤生长率.当肿瘤 体积达0.2 cm3 时采用AS-miR-21 多点瘤周注射,观察其对移植瘤的影响.应用免疫组化技术、荧光TUNEL 检测移植瘤细胞增殖活性和凋亡情况.结果 (1)成功构建人宫颈鳞癌裸鼠皮下移植瘤模型,抑制组、阴性 对照组及空白对照组成瘤率分别为37.5%、75.0%、100.0%,瘤体平均体积为(732.80 ±56.32 ) mm3 、(1228.46 ±78.53)mm3 、(1301.26 ±80.63)mm3,平均生长率为18.32%、30.71%和32.53%,瘤重为(0.73 ± 0.05)g、(1.26 ±0.12)g 和(1.35 ±0.25)g,抑制组与阴性、空白对照组比较差异均有统计学意义(P <0.05); (2)免疫组化显示抑制组裸鼠瘤体Ki67 表达显著下降;荧光TUNEL 凋亡检测显示抑制组裸鼠肿瘤细胞凋亡 率明显增多;(3)注射治疗剂量AS-miR-21 两周后观察肿瘤组织局部坏死严重,胞核裂解、消失,凋亡明显增 加.结论 AS-miR-21 可下调裸鼠人宫颈鳞癌移植瘤中miR-21 的表达,抑制移植瘤生长和促进其凋亡.     

抑制Smac基因表达对胰腺癌裸鼠移植瘤生长影响的研究

[目的]探讨Smac基因对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.[方法]于裸鼠腋下接种200 μL 107/mL的PANC-1细胞悬液,建立人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,将其分为三组：注射PBS液（A组）、转染空载体（B组）、转染Smac基因（C组）,比较三组移植瘤的大小、移植瘤细胞的凋亡率,移植瘤中Smac蛋白表达和微血管密度（MVD）.[结果]与A、B组比较,C组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小;移植瘤细胞的凋亡指数和Smac蛋白的表达率均明显增高,其差异均有统计学意义（P〈0.05）.[结论]脂质体转染Smac基因能抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导胰腺癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关.     

豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响的实验研究

目的观察豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响及可能的机制。方法建立24只裸小鼠胃癌原位移植瘤模型,随机分成4组(每组6只):对照组、5-FU组、豆蔻提取物组、联合组,各组按设计剂量给药,实验期间,每3 d测量移植瘤瘤径及体积,4周后,颈椎脱臼法处死,计算抑瘤率,用免疫组化法检测各组移植瘤瘤体中COX-2和VEGF的表达情况。结果成功建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,各组实验裸鼠体重下降明显低于对照组,各组抑瘤率分别为:5-FU组55.99%,豆蔻提取物组42.81%,联合用药组67.36%,联合用药组瘤体中COX-2和VEGF的表达明显下调。结论豆蔻提取物可抑制胃癌原位移植瘤的生长,豆蔻提取物联合5-FU可显著抑制胃癌原位移植瘤的生长,2组具有协同作用,其抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用机制可能与下调COX-2和VEGF的表达有关。     

5-氨基乙酰丙酸光动力治疗胰腺癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的：探讨以5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）作为光敏剂对胰腺癌裸鼠移植瘤进行光动力治疗的疗效。方法：将18只裸鼠随机分为3组，每组6只。A组为荷瘤对照组，不给任何治疗；B组行单纯激光照射，不予任何光敏剂；C组在瘤内注射5-ALA，剂量为30mg／kg，2h后进行肿瘤局部光动力治疗。结果：光动力治疗组（C组）肿瘤体积与对照组（A、B组）相比明显缩小。差异有显著性（P〈0．05）。结论：5-ALA作为光敏剂对胰腺癌裸鼠移植瘤进行光动力治疗，能使肿瘤组织坏死，生长速度明显减慢。     

The inhibitory effects of carnosic acid on cervical cancer cells growth by promoting apoptosis via ROS-regulated signaling pathway

Cervical cancer has been the fourth most common cancer killing many women across the world. Carnosic acid (CA), as a phenolic diterpene, has been suggested to against cancer, exerting protective effects associated with inflammatory cytokines. It is aimed to demonstrate the therapeutic role of carnosic acid against cervical cancer and indicate its underlying molecular mechanisms. 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide (MTT) was performed to assess the possible anti-proliferative effects of carnosic acid. And also, colony formation was used to further estimate carnosic acid’s ability in suppressing cervical cancer cells proliferation. Flow cytometry assays were performed here to indicate the alterations of cervical cancer cells cycle and the development of apoptosis. Western blot assays and RT-PCR were also applied to clarify the apoptosis-associated signaling pathways affected by reactive oxygen species (ROS) generation. And immunofluorescence was used to detect ROS-positive cells. In vivo experiments, CaSki xenograft model samples of nude mice were involved to further elucidate the effects of carnosic acid. In our results, we found that carnosic acid exerted anti-tumor ability in vitro supported by up-regulation of apoptosis and ROS production in cervical cancer cells. Also, acceleration of ROS led to the phospharylation of (c-Jun N-terminal kinase (JNK) and its-related signals, as well as activation of Endoplasmic Reticulum (ER) stress, promoting the progression of apoptosis via stimulating Caspase3 expression. The development and growth of xenograft tumors in nude mice were found to be inhibited by the administration of carnosic acid for five weeks. And the suppressed role of carnosic acid in proliferation of cervical cancer cells and apoptosis of nude mice with tumor tissues were observed in our study. Taken together, our data indicated that carnosic acid resulted in apoptosis both in vitro and vivo experiments via promoting ROS and activating JNK signaling pathways in human cervical cancer cells, which supplied a potential therapy for the application of carnosic acid in clinical treatment.     

Shank-interacting protein–like 1 promotes tumorigenesis via PTEN inhibition in human tumor cells

Inactivation of phosphatase and tensin homolog (PTEN) is a critical step during tumorigenesis, and PTEN inactivation by genetic and epigenetic means has been well studied. There is also evidence suggesting that PTEN negative regulators (PTEN-NRs) have a role in PTEN inactivation during tumorigenesis, but their identity has remained elusive. Here we have identified shank-interacting protein–like 1 (SIPL1) as a PTEN-NR in human tumor cell lines and human primary cervical cancer cells. Ectopic SIPL1 expression protected human U87 glioma cells from PTEN-mediated growth inhibition and promoted the formation of HeLa cell–derived xenograft tumors in immunocompromised mice. Conversely, siRNA-mediated knockdown of SIPL1 expression inhibited the growth of both HeLa cells and DU145 human prostate carcinoma cells in vitro and in vivo in a xenograft tumor model. These inhibitions were reversed by concomitant knockdown of PTEN, demonstrating that SIPL1 affects tumorigenesis via inhibition of PTEN function. Mechanistically, SIPL1 was found to interact with PTEN through its ubiquitin-like domain (UBL), inhibiting the phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate (PIP₃) phosphatase activity of PTEN. Furthermore, SIPL1 expression correlated with loss of PTEN function in PTEN-positive human primary cervical cancer tissue. Taken together, these observations indicate that SIPL1 is a PTEN-NR and that it facilitates tumorigenesis, at least in part, through its PTEN inhibitory function.     

VEGF—C反义多肽对乳腺癌裸鼠移植瘤影响的实验研究

目的观察血管内皮生长因子C（VEGF—C）反义多肽对乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的影响，探讨以VEGF—C反义多肽用于乳腺癌基因治疗的应用前景。方法制备靶向VEGF—C的反义多肽，构建乳腺癌细胞MCF-7裸鼠皮下移植瘤模型，瘤体内注射VEGF—C反义多肽，观察其对乳腺癌细胞的抑制作用；免疫印迹（Western Blot）检测VEGF—C在瘤组织的表达情况。结果VEGF—C反义多肽具有较强的生物学活性，瘤组织内给予VEGF-C反义多肽后，Western blot分析VEGF—C在瘤组织中的表达降低，肿瘤生长受制，抑瘤率为52％（P〈0．05）。结论 制备出的VEGF—C具有良好的生物学活性，有抗乳腺癌作用。     

聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球瘤内注射抑制荷人三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤细胞的增殖

背景:通过超声引导,将抗肿瘤药物缓释剂注射到肿瘤局部进行间质化疗,可提高抗肿瘤效果,并且减轻全身毒副作用。目的:观察超声引导下瘤内注射多西他赛聚乳酸-羟基乙酸微球对荷人三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤增殖的抑制作用。方法:采用乳化溶剂挥发法制备多西他赛聚乳酸-羟基乙酸微球,扫描电镜观察微球的表面形态及粒径,高效液相色谱法测定包封率、载药率及体外释放情况。建立荷人三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为5组:模型组无处理;微球组在肿瘤内注射空白聚乳酸-羟基乙酸微球1次;多西他赛瘤内注射组在肿瘤内注射多西他赛注射液(多西他赛剂量为10mg/kg),每10d给药1次,连续4次;多西他赛聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球低剂量组在肿瘤内注射载药微球(多西他赛剂量为20mg/kg)1次;多西他赛聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球高剂量组在肿瘤内注射载药微球(多西他赛剂量为40mg/kg)1次。结果与结论:多西他赛聚乳酸-羟基乙酸微球平均粒径23.1μm,包封率为96.3%,载药率为4.82%,40d累积释放药物85.7%。超声引导下多西他赛聚乳酸-羟基乙酸微球瘤体内注射具有明显的抗肿瘤作用,高剂量组抑瘤率达65.7%,彩色多普勒超声见肿瘤血流信号明显减少,病理学检查见肿瘤组织大片坏死,提示超声引导下瘤内注射多西他赛聚乳酸-羟基乙酸微球可明显抑制荷人三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤增殖。