淋巴细胞过度活化及细胞因子与鼻息肉的免疫发病机制研究

目的：探讨淋巴细胞CD4、CD69和细胞因子RANTES、IL-5、IL-8在鼻息肉组织中的表达及其在鼻息肉发生、发展中的作用。方法：苏木精-伊红染色、免疫组织化学和图像分析法检测34例鼻息肉组织（鼻息肉组）和30例鼻甲黏膜组织（对照组）中CD4、CD69、CD34、RANTEs、IL-5、IL-8的表达。结果：鼻息肉组中淋巴细胞、嗜酸粒细胞弥漫浸润,腺体增生、杯状细胞增生、纤维增生、间质水肿的阳性率明显高于对照组（均P〈0．01）。鼻息肉组中CD4、CD69、IL-5、IL-8、RANTES阳性淋巴细胞数密度（n／mm^2）明显高于对照组（均P〈0．05）;CD4、CD69和RANTES、IL-5、IL-8的表达呈显著正相关（P〈0．01、P〈0．05和P〈0．05）。IL5、RANTES的高表达分别与嗜酸粒细胞浸润呈显著正相关（P〈0．05、P〈0．01）。IL8的表达和鼻息肉组织中微血管形成呈显著正相关（P〈0．01）。结论：CD4、CD69过度活化的T淋巴细胞及其产生的相关细胞因子IL5、IL-8、RANTES可能促进和形成鼻息肉的免疫发病过程;IL5、RANTES可促进嗜酸粒细胞的浸润、聚集、活化;IL-8可促进微血管形成。     

鼻息肉组织中IL-9和IL-17及Foxp3的表达及意义

目的：观察鼻息肉组织中IL-9、IL-17及Foxp3的表达,初步探讨Th9、Thl7／Treg细胞失衡在鼻息肉发病机制中的作用。方法：标本取自40例鼻息肉患者鼻息肉组织（鼻息肉组）和20例鼻中隔手术患者的正常中鼻甲黏膜（对照组）。采用免疫组织化学法检测鼻息肉标本和正常中鼻甲黏膜中IL-9、IL-17及Foxp3的表达水平。结果：鼻息肉组织中IL-9、IL-17阳性率分别为75．0％、80．0％,其表达明显高于对照组（阳性率分别为35．0％和50．0％）,而Foxp3表达（37．5％）明显低于对照组（80．0％）,均P％0．05。结论：IL-9和IL-17因子明显与鼻息肉的发病有关,推测鼻息肉组织中有明显Th9浸润,并存在Thl7／Treg失衡,二者可能在鼻息肉的发病机制中起重要作用。     

IL-17在鼻息肉中的表达及其意义

目的：研究伴变应性体质和不伴变应性体质的鼻息肉患者息肉中IL-17的表达及与病理特征的关系。方法：30例鼻息肉患者根据皮肤点刺实验分为伴变应性体质组和不伴变应性体质组,通过苏木精一伊红染色法嗜酸粒细胞浸润程度评价组织学特征,运用ELISA及RT—PCR方法检测IL-17在鼻息肉中的表达。结果：伴变应性体质组嗜酸粒细胞浸润明显高于不伴变应性体质组（P〈O．01）;两组息肉组织中IL-17蛋白及mRNA水平均显著高于对照组（P〈O．01或P〈0．05）,且变应性体质组IL-17水平明显高于不伴变应性体质组,鼻息肉患者IL-17水平与嗜酸粒细胞浸润呈正相关。结论：IL-17在鼻息肉组织中表达明显上调,且在伴变应性体质组中水平更高,提示IL-17可能在鼻息肉的发病机制中发挥重要作用,变应性因素在鼻息肉形成中可能是通过促进IL-17曲立牛而,卉＇枷曲     

白细胞介素-6和8在鼻息肉组织中的表达

目的探讨白细胞介素（interleukin,IL）-6、8与鼻息肉（nasalpolyps,NP）发病机理的关系，进一步探讨炎症及变态反应对鼻息肉发生及发展的影响。方法采用放射免疫分析法研究细胞因子(cytokines)成员中IL-6，IL-8在鼻息肉组织匀浆、鼻息肉患者血清、正常成人血清及脐血中的表达及其意义。结果鼻息肉组织匀浆中IL-6平均质量浓度为（2.7658±0.3797）ng/L，IL-8平均质量浓度为（4.1877±0.1758）ng/L，与鼻息肉患者血清、正常血清及脐血相比，鼻息肉组织中IL-6、IL-8过度表达，差异有显著性（P<0.01），但患者血清、正常血清及脐血之间IL-6、IL-8表达无明显差异。IL-6、IL-8表达与鼻息肉患者的性别无关，变应原试验阳性组及阴性组之间亦无明显差异。结论IL-6及IL-8在鼻息肉组织中过度表达，其通过局部微环境调控，在鼻息肉的发生发展过程中起重要作用，而变态反应并非鼻息肉发生的必备条件和启动因素。     

Eotaxin和Eotaxin-2在鼻息肉病和鼻息肉组织中的表达及意义

目的：了解嗜酸粒细胞（EOs）趋化因子Eotaxin、Eotaxin-2在人鼻息肉病和鼻息肉组织中的表达情况,探讨鼻息肉与鼻息肉病发病机制上的异同。方法：采用免疫组织化学方法（SP法）检测15例鼻息肉病患者（鼻息肉病组）、13例鼻息肉患者（鼻息肉组）的息肉组织和8例行鼻中隔偏曲矫正术患者的中鼻甲组织（对照组）中Eotaxin和Eotaxin-2的表达。结果：Eotaxin-2在对照组、鼻息肉组和鼻息肉病组3组间呈递增表达,且每2组间比较均差异有统计学意义（均P〈0．05）;Eotaxin在鼻息肉病和鼻息肉组中的表达均显著高于对照组（均P〈0．05）,而在鼻息肉病组与鼻息肉组间表达差异无统计学意义。结论：Eotaxin和Eotaxin-2可能均参与了鼻息肉病与鼻息肉的炎症反应过程,Eotaxin-2在鼻息肉病和鼻息肉组织之间的不同表达提示它可能是鼻息肉病与鼻息肉发病机制不同的重要原因之一。     

鼻息肉组织中TSLP的表达及与Th2炎症反应的关系

目的：探讨鼻息肉组织中TSLP的表达及与Th2炎症反应的关系。方法：收集60例确诊为鼻息肉的患者,采用免疫组织化学SP染色法检测其鼻息肉组织中TSLP的表达,ELISA法检测组织中IL-4、IL-5、IFN-γ及IL-13的表达,并分析其与TSLP表达的相关性。结果：TSLP在鼻息肉组织中较正常下鼻甲黏膜表达高,而IL-4、IL-5、IFM-γ和IL-13在鼻息肉组织表达显著增高（P〈0．05）。TSLP与IL-4、IL-5、IL-13呈显著正相关（r分别为0．475、0．594和0．582,P〈0．01）,TSLP与IFN-γ呈显著负相关（r=-0．614,P〈0．01）。结论：TSLP高表达可能会促进T细胞向Th2方向分化,参与鼻息肉的发生、发展,并加重鼻部Th2炎症反应。     

淋巴细胞在慢性鼻-鼻窦炎组织中的表达及意义

目的：探讨B淋巴细胞（CD20）和T淋巴细胞亚群（CD4、CD8）在慢性鼻-鼻窦炎（CRs）中的表达及在炎症反应中的作用。方法：采用免疫组织化学技术检测B淋巴细胞（CD20）和辅助性T细胞（CD4）、细胞毒性T细胞（CD8）在实验组[分为15例CRS不伴鼻息肉（CRSsNP）组、12例CRS伴鼻息肉（CRSwNP）组、7例复发性CRSwNP组]和对照组（13例下鼻甲黏膜对照）中的表达。采用Mann-WhitneyU检验分析实验组和对照组B淋巴细胞、T淋巴细胞亚群的表达情况,实验组组间淋巴细胞浸润比较用单因素方差分析One—WayANOVA。结果：与对照组相比,实验组有明届的13淋巴细胞（CD20）和T淋巴细胞亚群（CD4、CD8）浸润（P〈0．05）：T淋巴细胞、亚群（CD4、CD8）在CRSwNP组和复发性CRSwNP组病变中的表达明显高于CRSsNP组（P〈0．05）;CD4在复发性CRSwNP组中的表达明显高于CRSwNP和CRSsNP组（P〈0．01）。结论：实验组鼻腔黏膜中B淋巴细胞、辅助性T细胞和细胞毒性T细胞高表达,均参与炎症的形成,其炎症匣应与T淋巴细胞浸润密切相关。     

肺表面活性蛋白A在变应性鼻炎鼻黏膜及鼻息肉组织中的表达及意义

目的：肺表面活性蛋白A（SP—A）在呼吸道中发挥重要的宿主防御作用。本研究的目的是了解SP-A在变应性鼻炎鼻黏膜和鼻息肉组织中的表达情况,探讨SP—A在上呼吸道炎症反应性疾病中发挥的作用。方法：采用免疫组织化学方法和间接免疫荧光法分别检测11例变应性鼻炎患者鼻黏膜组织（变应性鼻炎组）、15例鼻息肉患者的息肉组织（鼻息肉组）和7例行鼻中隔偏曲矫正术患者的中鼻甲组织（对照组）中SP-A的表达。结果：免疫组织化学方法结果显示变应性鼻炎组及鼻息肉组中SP—A的表达明显高于对照组（P〈0．05）,变应性鼻炎组及鼻息肉组黏膜下嗜酸粒细胞的数量明显高于对照组（P〈0．05）,变应性鼻炎组及鼻息肉组中SP-A的表达与黏膜下嗜酸粒细胞的数量均呈正相关（r分别为0．81,0．55）;免疫荧光法结果显示SP—A在变应性鼻炎组及鼻息肉组黏膜上皮细胞内的绿色荧光强度高于对照组（P〈0．05）。结论：SP-A可能参与了变应性鼻炎与鼻息肉的炎症反应过程。SP—A在上呼吸道炎症性疾病中的表达,为今后寻找新的治疗方法提供理论思路。     

白介素-2信号通路在鼻息肉发病中的作用

目的：研究白介素2（IL-2）信号通路相关因子及调节性T细胞在鼻息肉患者组织中的表达情况,探讨二者之间的关联及其在息肉发病中的可能作用机制。方法：集取鼻息肉及正常对照组共30例患者的息肉组织及鼻甲黏膜,采用ELISA法检测局部组织内IL-2及IL-2R,免疫印迹检测组织中的磷酸化STAT5,实时荧光定量PCR法检测Foxp3mRNA在局部组织的表达情况;采用流式细胞术检测局部组织内Treg细胞的比率;同时分析IL-2通路相关因子及Treg细胞的相关性。结果：鼻息肉患者局部组织中IL-2、IL-2R及pSTAT5的含量较正常对照组显著降低,差异有统计学意义（均P〈O．05）;同时,与正常对照组相比,鼻息肉患者的Foxp3mRNA及Treg细胞的比率显著下调,差异有统计学意义（均P〈O．05）;且鼻息肉局部组织内IL-2信号通路相关因子的表达与Treg细胞比率及Foxp3mRNA水平呈正相关（均P〈O．01）。结论：IL-2信号通路的活化状态在鼻息肉患者局部组织中发生了变化,且与Treg细胞的表达呈正相关,提示IL-2信号通路在鼻息肉的发病中起重要作用,鼻息肉中Treg细胞的下调可能是由IL-2信号通路的活化下调所引起的。     

流式细胞术检测IFN-γ、IL-4在鼻息肉及变应性鼻炎患者外周血表达的差异

目的检测鼻息肉及变应性鼻炎患者外周血单个核细胞（PBMC）内IL-4，IFN-γ的表达，探讨细胞因子与鼻息肉和变应性鼻炎发病的关系，以及二者发病机制的不同。方法用流式细胞仪测定30例鼻息肉患者、30例变应性鼻炎患者和30例健康人的PBMC，经PMA诱导培养后IFN-γ／和IL-4的水平，与健康对照组比较，进行统计学分析。结果鼻息肉组PBMC中CD3^＋／CD8^-／IFN-γ^＋和CD3^＋／CD8^-／IL-4^＋含量均较健康对照组明显升高，比较有统计学意义（P〈0．05）。变应性鼻炎组PBMC中CD3^＋／CD8^-／IFN—γ^＋含量较健康对照组明显降低，而CD3^＋／CD8^-／IL-4^＋含量则明显升高，比较均有统计学意义（P〈0．05）。结论鼻息肉患者体内分泌IFN-γ、IL-4均增高，分泌多种细胞因子，在鼻息肉的发生发展中起到网络调节作用。而变应性鼻炎患者分泌IL-4增高，分泌IFN-γ却受到抑制，这种细胞因子失平衡可能在变应性鼻炎发病机制中起到重要作用。     

The concentration and expression of IL-5 in human nasal polyp tissue]

OBJECTIVE: To study the concentration and expression of IL-5 in nasal polyp tissues and explore its significance in the micro-environment differentiation of eosinophils accumulation and clarify the conception of nasal polyposis. METHODS: The concentration and expression of IL-5 in nasal polyp tissues of 40 patients were determined by ELISA and immunohistochemistry, and inferior turbinate mucosa from patients with nasal polyps and healthy volunteers was used as control. RESULTS: 1. IL-5 concentration in the polyp tissues was significantly higher than that in inferion turbinate mucosa(P < 0.05). There was no significant difference in inferion turbinate mucosa between the patients with nasal polyps and healthy volunteers (P > 0.05). IL-5 concentration in polyp tissues was markedly higher in patients with extensive polypoid change of nasal mucosa, history of previous polypectomy and allergic rhinitis compared with those without these features (P < 0.05). IL-5 concentration had no correlation with age and sex (P > 0.05). 2. 80.1% of the eosinophils were positive for IL-5 and 90.9% of IL-5 positive cells were eosinophils. Only 3.7% of the lymphocytes and neutrophils were IL-5 positive, and IL-5 was not detectable in epithelial cells. IL-5 expression in eosinophils of polyp tissues was remarkably stronger than that of the turbinate mucosa (P < 0.05). There was no significant difference in inferion turbinate mucosa between the patients with nasal polyps and healthy volunteers (P > 0.05). IL-5 expression of eosinophils in polyp tissues was significantly stronger in patients with extensive polypoid change of nasal mucosa, history of previous polypectomy and allergic rhinitis compared with those without these features (P < 0.05). There was no significant difference in IL-5 expression in lymphocytes and neutrophils between polyp tissues and inferior turbinate nasal mucosa (both P > 0.05). CONCLUSION: IL-5 is a key protein in eosinophilic pathologic mechanisms in nasal polyp tissues.     

IL-12和IL-4在鼻息肉表达的意义

目的探讨鼻息肉组织中T辅助细胞1（Th1）和Th2细胞及细胞因子IL 12和IL 4的含量及意义。方法标本取自30例鼻息肉患者的息肉组织和20例行鼻中隔手术患者的正常中鼻甲黏膜（对照组）。新鲜鼻息肉手术标本和正常中鼻甲黏膜制备单细胞悬液,流式细胞术测定Th1和Th2细胞的百分率。用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测IL 12和IL 4在冰冻鼻息肉标本和正常中鼻甲黏膜的含量。结果鼻息肉组织以Th1细胞亚群为主,且其中Th1和Th2细胞亚群显著高于对照组（P<0.05）;鼻息肉组织IL 12、IL 4的水平高于对照组（P<0.05）;Th1细胞百分率与IL 12的水平正相关（P<0.05）,Th2细胞百分率与IL 4的水平正相关（P<0.05）,IL 12的水平与IL 4负相关（P<0.05）。结论鼻息肉中Th细胞在IL 12和IL 4作用下分化为Th1和Th2,二者共同参与鼻息肉的发生发展和免疫应答。     

白细胞介素-5与嗜酸性粒细胞阳离子蛋白在鼻息肉发病中的意义及相互关系

目的：探讨白细胞介素—5(IL—5)及嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)在鼻息肉发病中的作用及相互关系。方法：采用pharmacia CAP荧光免疫系统和ELISA双抗体夹心法对30例鼻息肉患者(鼻息肉组)和8例鼻中隔偏曲或阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者(对照组)分别进行血清中ECP及组织匀浆中ECP、IL—5的检测。结果：鼻息肉组匀浆中IL—5的水平明显高于对照组，其差异有显著性意义(P＜0．05)；鼻息肉组血清与匀浆中的ECP含量明显高于对照组，其差异亦有显著性意义(P＜0．05)。鼻息肉组匀浆中IL—5与血清中ECP水平呈明显正相关(r＝0．598，P＜0．05)；与匀浆中的ECP水平也呈正相关(r＝0．451，P＜0．05)。结论：ECP是嗜酸性粒细胞活化的标志，也是导致鼻腔炎症发生的重要因子；IL—5在鼻息肉组织中高表达，并与血清和组织中ECP水平密切相关，共同促进鼻腔炎症过程的不断加重。     

Distribution of rantes and interleukin-5 in allergic nasal mucosa and nasal polyps.

Eosinophil-chemoattracting cytokines are thought to be important in the pathogenesis of allergic inflammation. However, little is known about the presence and significance of RANTES in nasal allergy and nasal polyps, two well-known rhinologic disorders characterized by eosinophil infiltration in the tissue. In order to evaluate the role of RANTES in eosinophil infiltration in vivo, the tissue distributions of RANTES and interleukin-5 (IL-5) and their correlation with eosinophil infiltration were investigated. Nasal mucosa specimens were obtained from 9 allergic and 12 control subjects, and nasal polyps from 6 allergic and 9 nonallergic subjects. All the subjects were divided into 4 groups: normal mucosa, allergic mucosa, nonallergic polyps, and allergic polyps. To identify the cellular localizations of RANTES and IL-5, we used specific immunohistochemical staining. We also investigated the differences in cytokine expression among the 4 groups, and the correlation between cytokine expression and eosinophil infiltration in the tissue. RANTES was expressed in the epithelium, endothelium, and some submucosal cells, while IL-5 was confined to the cells in the submucosa. Expression of both RANTES and IL-5 significantly increased in allergic mucosa and nasal polyps compared to normal mucosa; however, there was no significant difference in their expression between allergic and nonallergic polyps. Both cytokines had a significant correlation between their expression and either total or activated eosinophil numbers. The results of this study suggest that RANTES, as well as IL-5, plays a role in eosinophil recruitment in allergic nasal mucosa and nasal polyps in vivo.     

Increased expression of IL-4, IL-5, IFN-gamma, IL-6, IL-8, and TGF-beta mRNAs in maxillary mucosa of patients with chronic sinusitis

This study aimed to investigate expression of various cytokine mRNAs, including IL-6, IL-8, TGF-beta, IL-4, IL-5, and IFN-gamma in maxillary sinus mucosa of patients with chronic sinusitis. Maxillary sinus mucosae of six patients with chronic sinusitis and turbinate mucosae of six healthy subjects were obtained. We performed RT-PCR and Southern blot to examine gene expression of the cytokines IL-6, IL-8, TGF-beta, IL-4, IL-5, and IFN-gamma in maxillary sinus mucosa and compared the results with cytokine gene expressions in normal turbinate mucosa. IL-6, IL-8, TGF-beta, IL-4, IL-5, and IFN-gamma mRNAs were expressed more frequently in maxillary sinus mucosa from patients with chronic sinusitis than in normal turbinate mucosa. All the maxillary sinus mucosa specimens revealed relatively higher mean density ratio for each cytokine investigated than did normal turbinate mucosa. IL-6, IL-8, TGF-beta, IL-4, IL-5, and IFN-gamma mRNAs were expressed simultaneously in maxillary sinus mucosa of chronic sinusitis. These cytokines may be responsible for recruitment of inflammatory cells and for mucosal thickening in chronic sinusitis, and thus chronicity of the disease.     

LL-37和IL-8在慢性鼻窦炎鼻息肉组织中的表达及意义

目的:研究人源抗菌肽LL-37和IL-8在慢性鼻窦炎鼻息肉组织中的表达。方法:采用半定量RT-PCR和免疫组织化学方法检测31例慢性鼻窦炎息肉组织中LL-37和IL-8的表达,并以11例慢性鼻炎下鼻甲组织作对照。结果:LL-37和IL-8 mRNA在所有息肉组织和下鼻甲组织中均呈阳性表达,二者在息肉组织中的表达均明显高于下鼻甲组织(均P<0.01),且在息肉组织中的表达呈正相关(P<0.01);LL-37与IL-8蛋白在鼻息肉组织中的阳性表达率均明显高于下鼻甲组织(均P<0.01),二者在息肉组织中的阳性表达率呈正相关(P<0.01)。结论:LL-37和IL-8可能在慢性鼻窦炎的发病中发挥一定作用;除天然免疫作用外,LL-37还可能通过增强获得性免疫提高机体的抗感染功能。     

转化生长因子β1白细胞介素-6及11和17在变应性鼻炎患者鼻黏膜中的表达

目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1），白细胞介素（IL）-6、11和17在变应性鼻炎患者鼻黏膜中的表达及意义。方法：采用酶联免疫吸附试验定量检测19例变应性鼻炎患者（变应性鼻炎组）下鼻甲黏膜和21例行鼻中隔偏曲矫正术的非变应性鼻炎患者（对照组）下鼻甲黏膜组织中TGF-β1，IL-6、11和17的蛋白表达量。结果：①变应性鼻炎组的TGF-β1蛋白表达量显著高于对照组（P〈0．01）；②IL-6、11和17的蛋白表达量在两组间差异无统计学意义（均P〉0．05）；③TGF-β1，IL-6、11和17的蛋白表达量在并发哮喘和不并发哮喘的变应性鼻炎患者间的表达差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论：TGF-β1可能在变应性鼻炎的组织结构重塑中起作用，而IL-6、11和17可能在此过程中无明显作用，这可能是变应性鼻炎和哮喘组织结构重塑差异的分子基础之一。