菟丝子黄酮干预雷公藤多苷所致雄性幼鼠生殖损伤

目的:研究不同剂量菟丝子黄酮干预雷公藤多苷(GTW)所致雄性幼鼠生殖损伤的影响。方法:雄性SD幼鼠80只,分2批喂养,每批40只。每批随机分为5组,空白组[ig羧甲基纤维素钠(CMC-Na)],多苷组(ig GTW,9 mg·kg~(-1)·d~(-1)),黄酮高、中、低剂量组(ig菟丝子+GTW,0.2 g·kg~(-1)+9 mg·kg~(-1),0.1 g·kg~(-1)+9 mg·kg~(-1),0.05 g·kg~(-1)+9 mg·kg~(-1)),持续给药4,12周,分别在停药时麻醉处死留取睾丸组织,称重检测脏器指数,苏木素伊红(HE)染色观察睾丸组织病理变化,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)及免疫印迹法(Western blot)检测雄激素受体(AR)mRNA及蛋白表达。结果:给药4,12周时多苷组大鼠体重、睾丸质量较空白组显著降低(P0.01);黄酮组大鼠体重、睾丸质量较多苷组显著提高(P0.01);黄酮中剂量组大鼠体重、睾丸质量较黄酮高、低剂组明显增高(P0.05)。给药4周时,多苷组大鼠睾丸曲细精管间距变宽、曲细精管扭曲、水肿,严重者曲细精管破裂,间质细胞散乱,精原细胞、精母细胞明显减少,12周时损伤程度更重;黄酮组中剂量上述病理损伤较轻。给药4,12周后,多苷组大鼠睾丸组织AR mRNA及蛋白表达明显下调(P0.05,P0.01),黄酮中剂量可以明显提高大鼠睾丸组织AR mRNA及蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:GTW可以明显降低大鼠体重、睾丸质量;下调睾丸组织AR mRNA及蛋白水平表达;GTW对雄性大鼠睾丸组织有明显的损伤作用,且随剂量的增加和时间延长损伤程度越重;菟丝子黄酮中剂量组保护这种损伤作用更加显著。     

补肾中药对雷公藤多苷所致雄性幼鼠生殖损伤的保护作用及最终生育能力的影响

目的: 探讨雷公藤多苷(glycosides of Tripterygium wilfordii,GTW)对雄性幼鼠生殖损伤和损伤后最终生育能力的影响及补肾中药(菟丝子黄酮、六味地黄丸)的保护作用。方法: ①生殖损伤研究:3~4周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组(CMC-Na)、雷公藤多苷组(9 mg·kg^-1·d^-1)单独ig,六味组(六味地黄丸1 g·kg^-1·d^-1＋GTW 9 mg·kg^-1·d^-1),黄酮组(菟丝子黄酮0.1 g·kg^-1·d^-1+GTW 9 mg·kg^-1·d^-1)混合ig,持续12周后,处死取一侧睾丸、附睾立即称质量,计算脏器指数,称重后放入固定液中保存,待观察睾丸组织形态学改变;②生育能力研究:成年大鼠100只,每组25只,分组喂养方法同上,持续12周后,将所有大鼠分笼喂养,每笼1只,按照1:1比例放入成年雌性大鼠1只,分3次合笼,每次合笼时间为15 d,合笼后观察雌鼠受孕率、仔鼠离乳存活率、仔鼠生长发育情况。结果: 雷公藤多苷对睾丸病理组织生精细胞肿胀变性,精原细胞、精母细胞、精子细胞明显减少,菟丝子黄酮、六味地黄丸能明显减轻这种损伤;用药12周后雄性幼鼠体重、睾丸质量、睾丸指数、附睾质量、附睾指数与空白组相比无显著性差异(P＞0.05);每次合笼后受孕率、离乳存活率、幼鼠的生长发育与空白组相比无显著性差异。结论: 雷公藤多苷对雄性幼鼠生殖系统的损伤是可逆的,对睾丸的病理组织损伤是可以恢复的,补肾中药具有保护这种病理组织损伤作用;雷公藤多苷对最终的生育能力没有影响,对幼仔生长发育没有影响。     

雷公藤多苷对小儿生殖安全性评价研究的思考

文章详细论述了雷公藤多苷用药的现状以及生殖安全性研究存在着诸多不足等问题,明确提出应加强对雷公藤多苷的生殖毒理研究,这不仅有助于提高雷公藤多苷治疗水平及应用范围,同时对“优生优育”具有现实与深远意义。     

雷公藤多苷致雌性小鼠肾虚生殖功能低下动物模型的研究

目的探讨雷公藤多苷(GTW)致育龄期雌性小鼠生殖功能低下的药理作用机理,建立GTW致雌性小鼠生殖功能低下的动物模型。方法采用7～8周龄雌性性成熟昆明种小鼠,随机分为GTWA(60mg·kg-1·d-1)、B(40mg·kg-1·d-1)、C(30mg·kg-1·d-1)、D(20mg·kg-1·d-1)、E(15mg·kg-1·d-1)5组及正常对照组。观察给药后小鼠动情周期,分别在部分小鼠周期延长,周期均延长、不规则,周期完全紊乱、甚至消失等3个时段分批处死小鼠,考察GTW在不同时段对小鼠生殖功能的影响。采用放免法检测血清E2、P水平,计算卵巢、子宫指数,卵巢、子宫作组织形态学观察,计数各级卵泡、黄体数,测量子宫内膜、肌层厚度。结果给药10周时,A、B、C组子宫指数明显降低,子宫内膜、肌层变薄,卵巢成熟卵泡数及黄体数减少;A、B组E2水平降低,各组P水平及卵巢指数无明显变化。结论GTW连续给药10周,可损伤雌性小鼠生殖功能,造成肾虚生殖功能低下状态。建议GTW40mg·kg-1·d-1给药10周建立雌性小鼠肾虚生殖功能低下模型。     

雷公藤多苷治疗肾脏疾病的研究进展

雷公藤具有显著的抗肿瘤、抗炎以及免疫抑制等药理作用,其主要活性成分为雷公藤多苷。近年来,雷公藤多苷被广泛应用于糖尿病肾病、慢性肾小球肾炎等肾脏疾病的治疗,并取得了较好的疗效。综合、分析并归纳雷公藤多苷近年来治疗肾脏疾病的临床应用新进展,为进一步研究提供参考。     

雷公藤多甙致大鼠生殖功能低下模型初探

目的:通过测定大鼠动情周期、卵巢和子宫指数、性激素水平及透射电镜下观察卵巢超微结构的改变,探索生殖功能低下大鼠模型的制备方法,进而为临床治疗此类疾病提供可靠的实验依据。方法:采用12周龄SD雌性大鼠20只,随机分为正常组和模型组,模型组借鉴前期研究中小鼠的造模剂量和时间,采用雷公藤多甙40mg/(kg·d)灌胃,连续10周,正常组不给药。分别观察2组大鼠动情周期、性激素、子宫和卵巢指数,并观察卵巢超微结构的改变。结果:与正常组相比,模型组大鼠动情周期紊乱,表现为动情周期缺失、不完整或延长,血清E2/P水平明显下降,子宫及卵巢质量下降且卵巢组织结构受损。结论:胃饲雷公藤多甙40mg/(kg·d)10周能损伤大鼠生殖功能,造成雌性大鼠生殖功能低下。     

复方雷公藤多苷的毒性研究

通过检测复方雷公藤多苷的急性和慢性毒性指标,来判定复方雷公藤多苷和雷公藤多苷二者的毒性大小。同时测定单纯复方中药的最大耐受量,并以此判定复方雷公藤多苷的毒性来源。     

雷公藤多苷三萜类成分的研究

 目的：对雷公藤多苷的三萜化合物进行分离鉴定和完善雷公藤多苷产品的质量控制标准。方法：硅胶柱层析分离,理化常数和光谱数据确定三萜化合物的结构。结果：分离纯化获得10个三萜化合物,分别鉴定为雷公藤内酯甲(1),雷公藤内酯乙(2),regelin(3),demethylregelin(4),salaspermic acid(5),雷公藤酮(6),cangoronine(7),3-hydroxy-2-oxo-3-fridelen-20α-car-boxylic acid(8),3-epikatonic acid(9),雷公藤三萜酸A(10)。结论：化合物(3),(4),为首次从该植物中分离得到。     

雷公藤多苷肝脏毒性研究进展

<正>雷公藤多苷是采用卫矛科雷公藤属植物雷公藤的根部提取物制成的非甾体类免疫抑制剂,对肾病、风湿性疾病、皮肤病、子宫内膜异位症、哮喘与甲状腺炎等多种疾病均具有良好的治疗效果~([1])。因其具有疗效好、起效快的特点而被广泛应用于临床治疗,但自雷公藤多苷投入临床使用以来,其毒性反应事件报道频繁,其中报道较多的是雷公藤多苷对肝、肾、生殖系统及消化系统的损害,其次是对皮肤黏膜和造血系统的损伤。本文整理和分析雷公藤多苷肝脏毒性研究的相关文献并综述如下。     

雷公藤多苷的药理毒理作用研究进展

近年来,雷公藤多苷(TWP)在临床使用越来越广泛,多被用于治疗类风湿关节炎,还作为基本免疫抑制药物治疗各种肾脏疾病,如肾病综合征等,但其临床有多种不良反应事件发生,用药方案存在争议,尤其是使用剂量和使用时间。为了雷公藤多苷的临床合理使用和深入研究,综述其药理毒理研究进展。通过梳理近年来国内外有关雷公藤多苷的药理毒理研究文献,发现雷公藤多苷的药理作用研究多集中在抗炎、抗肿瘤、肾脏保护和免疫抑制方面,主要是通过调节核转录因子-κB(NF-κB)信号通路,雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路和细胞凋亡相关信号通路的细胞因子表达水平发挥药理作用;其毒理作用研究多集中在肝毒性、肾毒性和生殖系统毒性方面,毒性作用多与氧化应激反应和炎症因子表达相关。雷公藤多苷的主要活性成分研究集中在雷公藤内酯醇和雷公藤红素。雷公藤多苷药理毒理研究较深入,表明其效、毒存在剂量依赖性和时间依赖性,具有量-效、时-效、量-毒、时-毒关系,未见雷公藤多苷在功效背景下随使用剂量和时间变化的毒性研究,其关联机制仍需进一步深入研究与探讨。     

GTW致大鼠DOS模型的中医证候属性研究

目的:探讨雷公藤致卵巢储备功能下降大鼠模型的中医证候属性。方法:用雷公藤多苷片造成雌性卵巢功能低下大鼠模型,通过以方测证观察新加归肾丸、圣愈汤、逍遥散、丹溪治湿痰方对大鼠血清FSH、LH、E2、P水平及卵巢、子宫指数的影响。结果:各用药组中新加归肾丸组FSH、LH、E2、P水平及卵巢、子宫指数与正常组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾中药复方治疗的有效性在一定程度上证实了该大鼠模型符合中医肾虚证候属性。     

菟丝子黄酮对雷公藤多苷损伤雄性幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白Bcl-2和蛋白Bax表达的影响

目的：研究菟丝子黄酮对雷公藤多苷（GTW）损伤雄性SD幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白蛋白Bcl-2和蛋白Bax的表达的影响。方法：健康3周龄SD雄性幼鼠36只,随机分为三组：空白组、雷公藤多苷组、菟丝子黄酮＋雷公藤多苷组。免疫组化法测定Bcl-2/Bax表达。结果：各实验组Bcl-2蛋白表达：雷公藤多苷组表达最少,与其他各组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。空白组表达最高,菟丝子组次之,空白组与菟丝子组之间比较（P〉0.05）差异没有统计学意义。各实验组Bax蛋白表达：雷公藤多苷组表达最高,与其他各组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。空白组表达最少,空白组与菟丝子组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。结论：菟丝子黄酮能增强雄性幼鼠生育能力,其机制可能是对抗雷公藤多苷所致雄性幼鼠睾丸组织Bcl-2蛋白表达减少和Bax蛋白表达增强。     

补肾中药对雷公藤多苷所致生殖损伤雄性幼鼠血清睾酮及睾丸组织P450scc的影响

目的:研究雷公藤多苷(glycosides of Tripterygium wilfordii,GTW)对幼年雄性大鼠血清睾酮及睾丸组织中睾酮生成酶细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(cyto-chrome P450 side chain cleavage,P450scc)的影响以及补肾中药(菟丝子黄酮、六味地黄丸)对其损伤的干预作用.方法:3～4周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组(CMC-Na)、多苷组(9 mg·kg-1·d-1)单独ig,六味组(六味地黄丸1g·kg-1·d-1 +GTW9 mg· kg-1·d-1),黄酮组(菟丝子黄酮0.1 g·kg-1·d-1+GTW 9mg · kg-1·d-1)混合ig,持续给药12周后,处死大鼠留取血清和睾丸组织,采用放免法检测血清睾酮浓度;采用RT-PCR和Western blot检测睾丸组织中p450scc在基因和蛋白水平的表达.结果:GTW组与空白组相比可以明显降低血清睾酮(P＜0.01);六味组与多苷组相比可以明显提高血清睾酮(P＜0.05);在蛋白水平GTW与空白组相比可以明显降低睾丸组织P450scc(P ＜0.05);在基因水平GTW组与其他组比较无显著性差异.结论:GTW对幼年大鼠生殖系统有一定损伤作用;六味地黄丸可以通过提高雄鼠血清睾酮水平而达到保护生殖损伤的作用.     

补肾法治疗男性不育症相关动物实验

男性不育症的实验研究是研究男性不育症发病机制和评价药物治疗的关键。该文回顾了近年来关于男性不育症的动物实验研究。有关男性不育症实验模型主要包括少弱精子症、畸形精子症、无精子症及精索静脉曲张动物模型等。少弱精子症动物模型的构建最常见的包括雷公藤多苷模型、腺嘌呤模型、氢化可的松模型、辐射模型4种类型,多以化学手段为主。无精子症动物模型的构建多采用腹腔注射双磺酸基烷化剂白消安和将小鼠阴囊浸泡在43℃的水中的方法。关于畸形精子症动物模型的研究相对较少,灌胃雷公藤多苷（GTW）和甲基磺酸甲酯（MMS）的方法较为常见。精索静脉曲张不育症动物模型多采用手术的方式进行,结扎下腔静脉外侧和精索静脉内侧间的左肾静脉中分对睾丸形态学及附睾精子质量有明显影响。相关动物实验研究表明,以五子衍宗丸为代表的补肾生精经典名方和现代研究的临床验方对男性不育症都起到了显著的治疗作用。补肾法治疗男性不育症的机制多集中于抑制生精细胞凋亡的研究方向。补肾法调控生精细胞凋亡,为中医药在男性生殖领域开辟了新的治疗思路、提供了可靠的科学依据。     

中医药治疗男性不育症思路和方法的研究进展

中医药在治疗男性不育症辨治理论、辨治方法、辨治方药等方面均取得了较大进展,表明中医药治疗男性不育症具有较好的疗效,探索中医药治疗男性不育症新的思路与方法具有重要意义。     

卵巢早衰致不孕症中西医治疗研究进展

卵巢早衰系一种多病因所致的卵巢功能衰竭,是指女性在40岁之前出现持续闭经和性器官萎缩,并伴有FSH和LH升高,而雌激素降低的综合征。中医学认为本病属"血枯""血隔""闭经""不孕症"等范畴。卵巢早衰患者长期处于低雌激素状态,严重影响身心健康。此外,其导致的不孕是许多年轻女性的灾难。该文从中西医结和角度综述了卵巢早衰的治疗、促排卵方案等方面的研究进展。     

A New Perspective on the Quercetin Paradox in Male Reproductive Dysfunction

Dietary bioflavonoids represent a large class of polyphenolic compounds found in most plants. A significant number of flavonoids are reported to have beneficial health effects. Quercetin is one such flavonoid which has been reported to possess strong antioxidant properties. However, as far as male reproduction and fertility are concerned, controversial reports exist in the literature highlighting the antioxidant as well as a prooxidant character of quercetin, leaving much to the researcher's speculation. The present review therefore, aimed at addressing this paradoxical behavior of quercetin by taking into account the in vitro and in vivo studies conducted till date regarding its role in the maintenance of male reproductive potential. From the detailed survey of the published data, it appears that the conflicting biological effects of quercetin might relate to its dose and the redox state of the cell. Thus, the cellular toxicity of quercetin metabolites might overshadow the beneficial effects of its supplementation in subjects having reproductive dysfunction coupled with elevated oxidative stress leading to the paradoxical behavior of the flavonoid. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

肾虚不孕症的中医临床研究进展

肾为先天之本 ,元气之根 ,主藏精气 ,具有促进人体生长发育和生殖的功能。临床上所见的病理性不孕 ,肾虚而致者并不少见。如《圣济总录》指出 :“妇人所以无子 ,由冲任不足 ,肾气虚故寒也。”又如《女科经纶》引薛立斋说“妇人不孕……有肾虚精弱 ,不能融育成胎……有嗜欲无度 ,阴精衰惫。”肾虚不孕症患者多见卵巢功能低下或子宫发育不良 ,所以使用补肾法治疗肾虚不孕症是当前妇科常用的方法。本文就近几年肾虚不孕症的中医临床进展概述如下。1　辨证分型治疗李氏[1] 把肾虚型女性不孕症分肾阳虚型、肾阴虚型 ,其中肾阳虚证治以温肾种子 ,…     

“壮水之主”法减轻雷公藤多苷所致女性生殖损伤的思路探讨

雷公藤多苷是目前最常用的雷公藤制剂之一,具有抗炎、调节免疫等作用,其对临床上某些自身免疫性疾病及肾脏病的独特疗效几乎是其他类似药物所无法替代的,但其可能引起的生殖损伤是阻碍其在临床应用的瓶颈所在。女性患者在临床使用中常出现月经周期紊乱、经量减少甚至闭经、不孕等症状,其主要的毒性机制在于损伤卵巢的生殖及内分泌功能和抑制卵泡的生长发育等,故在临床用药时,了解雷公藤多苷对女性生殖的损伤作用、掌握其解毒方法十分必要。然而针对以上问题,目前并没有明确的解决方法。中医理论认为“肾主生殖”,且肾阴肾精与女性经卵的关系密切,故考虑雷公藤多苷所致生殖系统损伤隶属于肾虚阴伤精亏范畴,进而提出“壮水之主”法,指出临床使用中可通过补肾滋阴填精而有效减轻雷公藤多苷对女性的生殖毒性损伤,并总结目前中药、经方、验方、针刺等方面的已有相关研究来佐证“壮水之主”法的必要性,以期为雷公藤临床的安全合理用药提供理论指导依据。