采用聚合酶链反应检测肺结核病患者中的结核杆菌

目的：建立一种快速，敏感及特异的早期诊断肺结核病方法。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测了６４例肺结核患者的外周血与痰标本结核杆菌－ＤＮＡ。结果：外周血结核杆菌－ＤＮＡ的阳性率为６７．２％（４３／６４），痰标本的阳性率为２９．６％（１９／６４）（Ｐ〈０．０５），结论：用ＰＣＲ技术诊断肺结核病，可提高临床检测的特异性和敏感性。     

肺结核病病人夹层杯集菌离心涂片法的临床应用价值

诊断肺结核病有多种方法，但痰涂片抗酸染色镜检抗酸菌，仍然是肺结核病诊断的最基本方法。检查结果阳性是世界卫生组织推荐的诊断肺结核的金标准。怎样才能提高痰涂片检查抗酸菌的阳性率是全世界都在探讨的课题。我们将夹层杯集菌离心涂片法（简称夹层杯法）^[1]与常规涂片法对照观察，结果提示，用夹层杯法检查结核菌更为理想。     

检测结核杆菌六种实验方法的比较分析

应用聚合酶链反应（PCR）、涂片抗酸染色、BACTEC快速培养、L－J法培养、ELISA测PPD－IgG和结核杆菌抗原六种方法对57例临床部病人和36例中枢神经系统（CNS）感染病人检测结核杆菌。结果表明，对肺部病人还是CNS感染病，PCR检测结核杆菌的阳性率最高，PCR对肺结核病人的敏感性和特异性分别为96．7％和100％，对结核性脑膜炎病人的敏感性和特异性均为100％，六种方法中敏感性最低的是涂片法，肺结核为33％，结核性脑膜炎为20％，BACTEC快速培养法敏感性（痰76．7％，CSF50％）L－J法（痰60％，CSF25％）；免疫学方法敏感性较高，但存在一定假阳性。实验结果表明，PCR技术是早期、快速和准确地诊同的有效方法。     

痰涂阴性肺结核三项检测方法的对比分析

目的：对三种实验检测方法进行对比分析,探讨各实施方法对痰涂阴性肺结核的诊断价值及实验方法联合检测的诊断意义。方法：对128例痰涂阴性肺结核病人及24例健康人用（1IU）PPD皮试,并采用快速酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中的抗PPD－IgG及采用杂交PCR法检测外周血白细胞和痰标本中TB－DNA。同时进行了实验方法的联合检测。结果：PPD皮试、血清抗PPD－IgG和外周血白细胞TB－DNA检测的阳性率分别为71．1％,82．0％和88．6％,特异性分别为100％、91．7％和87．5％。结论：PPD皮试和血清抗PPD－IgG检测虽然特异性较高,但敏感性较低,若两者联合检测可提高检测率,杂交PCR法在涂肺结核中具有较高的敏感性和特异性。如与ELISA或PPD皮试结合可进一步提高检测的敏感性。     

斑点金免疫渗滤法检测结核分枝杆菌抗体在肺结核诊断中的应用

目的：探讨利用斑点金免疫渗滤试验（DIFGA）检测结核分枝杆菌抗体对肺结核临床诊断的应用价值。方法：应用斑点金免疫渗滤法检测了正常人和各类肺部疾病患者共313例血清中结核分枝杆菌抗体，并与痰液涂片法、结核菌培养法和PCR法进行方法学比较。结果：结核分枝杆菌抗体检测肺结核患者阳性率为80．77％．非结核性肺病患者阳性率为7．64％，正常人阳性率为3．08％。结论：斑点金免疫渗滤法检测结核分枝杆菌抗体对肺结核的诊断敏感性高，特异性好，对肺结核诊断有较高的应用价值，并且操作简便、快速，与涂片法、培养法和PCR相比，有明显优势。     

酶联免疫吸附试验检测血清抗体结核分枝杆菌抗体

目的探讨酶联免疫吸附试验在结核病临床诊断中的应用及临床意义。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）技术检测105例肺结核患者血清抗结核抗体与痰直接涂片检测患者痰中的结核杆菌进行了对比。分析比较两者的检测结果。结果ELISA法检测患者血清抗结核抗体阳性率为83．8％，直接涂片阳性率为26．3％，ELISA法的阳性率明显高于痰直接涂片（P〈0．001）。结论ELISA法检测患者血清抗结核抗体简便、快速、特异性好，是目前最理想的诊断方法。     

痰涂片、TB-Ab、TB-DNA在肺结核诊断中的应用比较

目的探讨痰涂片、结核分枝杆菌抗体（TB-Ab）、结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）在肺结核患者临床诊断中的意义。方法选取102例肺结核患者和120例非肺结核患者（对照组）,分别比较两组痰涂片、TB-Ab、TB-DNA的敏感性和特异性。结果肺结核组的痰涂片、TB-Ab、TB-DNA的敏感性分别为24.5%,64.7%,80.4%,三种方法敏感性两两比较均存在显著差异。非肺结核组的痰涂片、TB-Ab、TBDNA的特异性分别为100%,81.7%,98.3%,痰涂片与TB-Ab、TB-Ab与TB-DNA的特异性均存在显著差异。结论 TB-DNA在肺结核的诊断中敏感性和特异性均较高,对于肺结核的早期诊断具有较高的临床应用价值。     

金标法检测血清抗结核抗体对肺结核的诊断价值

目的：探讨金标法检测血清抗结核抗体对肺结核的诊断价值。方法：观察在活动性肺结核、稳定期肺结核及非结核性疾病三组患者中金标法检测血清抗结核抗体的结果及对肺结核诊断的敏感性和特异性。以及与ELISA法检测及痰涂片结果的一致性,以及与结核病程的关系。结果：金标法检测血清抗结核抗体在活动性肺结、稳定期肺结核及非结核性疾病三组患者中的阳性率分别为77．4％、77．8％、20．0％,肺结核诊断的敏感性为77．4％,特异性为80．0％,与ELISA检测及痰涂片的阳性符合率分别为81．6％和76．9％,血清抗结核抗体的消长与疾病病程有一定的相关性。结论：（1）金标法检测血清抗结核抗体结果与ELISA法相近,但更为简便快捷;（2）单凭血清抗结核抗体结果难以判断肺结核病变是否活动,需结合其它资料综合分析评估。     

聚合酶链反应DNA扩增对活动性肺结核的诊断价值

目的：为了探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）ＤＮＡ扩增对诊断活动性肺结核的临床价值。方法：采用ＰＣＲ扩增技术对６９例活动性肺结核病人的痰（３５例）和胸水（３４例）进行检测。结果：痰灵敏度６５７１％（２３／３５），特异度７３９１％（１７／２３），准确度６８９６％（４０／５８），胸水灵敏度６１７６％（２１／３４），特异度８５７１％（６／７），准确度６５８５％（２７／４１）。并同涂片和培养法比较，时间上有益于结核病的早期诊断，但前者比后两者敏感性高，特异性差。结论：用ＰＣＲＴＢ－ＤＮＡ扩增作为临床诊断活动性肺结核的常规手段，尚需进一步探讨     

结核蛋白芯片联合PPD检测对痰茵阴性肺结核的诊断价值

目的：观察结核蛋白芯片和结核菌素纯蛋白衍生物(purified proteiderivative，PPD)实验对痰结核分枝杆菌阴性肺结核(菌阴肺结核)的诊断价值。方珐：采用结核蛋白芯片和PPD实验，检测53例痰菌阴性活动性肺结核和40例非结核性肺部疾病患者，观察两种方法检测的灵敏性、特异性、检测的一致性和联合检测阳性率。结果：结核蛋白芯片诊断痰菌阴性肺结核的敏感性和特异性分别为62．3％、87．5％，敏感性明显高于PPD试验(41．5％)，特异性无明显差异；两种方法检测一致率为69．8％；两种检测方法联用阳性检出率为88．7％，高于单独应用任一方法。结论：结核蛋白芯片检测对痰菌阴性活动性肺结核病人具有较好的诊断价值，联用PPD检测可提高痰菌阴性肺结核患者检出率。     

结核感染T细胞斑点试验在肺结核合并糖尿病患者中的诊断价值

目的 探讨结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）在肺结核（PTB）合并糖尿病（DM）患者中的诊断价值。方法 选取2017年2月—2018年12月河北省胸科医院结核内科收治的106例DM并发可疑PTB患者,其中确诊为PTB合并DM患者62例,设为观察组;单纯DM患者44例,设为对照组。对所有受试者进行T-SPOT.TB、结核菌素（PPD）试验及痰抗酸杆菌（AFB）涂片检测,同时对比不同血糖控制情况下T-SPOT.TB检测诊断PTB合并DM的结果。结果 痰涂片AFB诊断PTB合并DM的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及诊断准确度分别为27.42%（17/62）、95.45%（42/44）、89.47%（17/19）、48.28%（42/87）、55.66%（59/106）,而PPD试验的诊断结果依次为56.45%（35/62）、84.09%（37/44）、83.33%（35/42）、57.81%（37/64）、67.92%（72/106）,T-SPOT.TB诊断结果则分别为95.16%（59/62）、93.18%（41/44）、95.16%（59/62）、93.18%（41/44）、94.34%（100/106）。其中T-SPOT.TB诊断的灵敏度、阴性预测值及准确度均显著高于痰涂片AFB和PPD试验（P<0.05）。血糖控制良好与控制不良者T-SPOT.TB检测诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度相比差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 T-SPOT.TB检测在PTB合并DM的临床诊断上具有更高的灵敏度和临床应用价值。     

结核分支杆菌荧光PCR试剂盒的研制及临床试验

目的用荧光PCR(fluorescence PCR,F-PCR)方法研制结核分支杆菌(TB)DNA检测试剂盒,通过临床试验评价其性能,并与其他方法进行比较。方法F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法。由于采用完全闭管荧光检测,避免了PCR后处理导致的假阳性污染;又采用了荧光检测技术,可以提高检测的灵敏性。应用F-PCR检测了297份肺结核病人和249份非结核对照者的痰液标本,以改良罗氏培养法、金胺荧光染液涂片法、Abbott公司的LCx试剂盒检测作为对照。结果设计合成了TB F-PCR诊断试剂盒。检测阳性率49.1%,灵敏性89.2%,特异性98.8%,符合率93.6%。结论F-PCR在灵敏性上显著优于培养法和涂片法,与LCx试剂盒检测无显著差异。F-PCR试剂盒可以检测TB的真实感染情况,对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义。     

结核分枝杆菌荧光PCR试剂盒的研制及临床试验

目的：用荧光PCR(fluorescence PCR,F-PCR)方法研制结核分枝杆菌（TB）DNA检测试剂盒，通过临床试验评价其性能，并与其他方法进行比较。方法：F－PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法。由于采用完全闭管荧光检测，避免了PCR后处理导致的假阳性污染；又采用了荧光检测技术，可以提高检测的灵敏性。应用F－PCR检测了297份肺结核病人和249份非结核对照者的痰液标本，以改良罗氏培养法、金胺荧光染液涂片法、Abbott公司LCx试剂盒检测作为对照。结果：设计合成了TB F－PCR诊断试剂盒。检测阳性率49．1％，灵敏性89．2％，特异性98．8％，符合率93．6％。结论：F－PCR在灵敏上显著优于培养法和涂片法，与LCx试剂盒检测无显著差异。F－PCR试剂盒可以检测TB的真实感染情况，对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义。     

GeneXpert MTB/RIF在检测系统性自身免疫病合并肺结核患者中的应用

目的 评价GeneXpert MTB/RIF系统在诊断系统性自身免疫病（SAD）合并肺结核（MTB）患者中的应用价值。方法 对临床诊断和影像学检查确诊的350例系统性自身免疫病合并肺结核患者和50例系统性自身免疫病非结核对照组患者的痰标本进行GeneXpert MTB/RIF检测,评价GeneXpert MTB/RIF诊断性能,并与结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法等比较,判断优劣以及半定量检测结核菌的效能。以结核菌液体药敏法为标准,分析GeneXpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度。结果 GeneXpert MTB/RIF、结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法4种方法检测的灵敏度分别为95.14%、84.00%、89.71%和56.86%,特异度分别为100.00%,92.00%,84.00%,100.00%。GeneXpert MTB/RIF系统灵敏度与T-SPOT比较差异无统计学意义（χ² =4.21,P>0.05）,高于抗酸涂片染色法（χ² =36.60,P<0.05）。GeneXpert MTB/RIF检测利福平(RIF)耐药性的灵敏度为86.00%,特异度为90.56%。结论 GeneXpert MTB/RIF与传统的MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸涂片染色法等联合,可显著提高合并肺结核系统性自身免疫病结核病的检出率。     

Improved diagnosis of Ziehl-Neelsen smear negative tuberculosis using sodium hypochlorite sedimentation method

BACKGROUND: Bacteriological diagnosis of tuberculosis (TB) is largely dependent on Ziehl-Neelsen (ZN) microscopy. This method has a low sensitivity. Although concentration of sputum with sodium hypochlorite (NaOC1) followed by sedimentation increases the sensitivity of direct smear microscopy, no study has focused on the effect of NaOC1 on smear negative sputum specimens. OBJECTIVE: To establish whether 3.5% NaOC1 sedimentation method specifically improves the diagnosis of Ziehl-Neelsen smear negative tuberculosis. DESIGN: A prospective study. SETTING: Mbagathi District Hospital and Center for Respiratory Diseases Research, Kenya Medical Research Institute. SUBJECTS: Two hundred and thirty confirmed direct ZN smear negative sputum specimens from new TB suspects were analysed. RESULTS: Seventy (30.4%) specimens were culture positive. Of these, 19 were ZN smear positive. The ZN sensitivity, specificity, positive and negative predictive values were 27.1%, 99%, 95% and 76%, respectively, after sedimentation with 3.5% NaOC1. CONCLUSION: Overnight sedimentation using 3.5% NaOC1 significantly improves diagnosis of ZN smear negative TB. This technique has potential to improve diagnosis in TB diagnostic services especially in settings with high burden of dual TB/HIV infection.     

2种检测方法对不同年龄组涂阴肺结核病诊断价值的对比分析

[摘要] 目的 探讨 γ 干扰素释放试验( T-SPOT.TB )及结核蛋白芯片检测对不同年龄组抗酸染色涂片阴性 肺结核病的诊断价值。方法 分别选取已确诊的涂阴肺结核病例 191 例、肺炎病例 91 例,分为 3 组:青少年组( 7~ 40 岁),中年组( >40~65 岁),老年组( >65 岁),均进行 T-SPOT.TB 及结核蛋白芯片检测。结果 青少年组和中 年组 2 种检测方法敏感度差异有统计学意义( P <0.05 )、特异性差异无统计学意义( P >0. 05 ),而老年组敏感度、特 异度差异均无统计学意义( P >0.05 )。结论 T-SPOT.TB 方法对青少年及中年涂阴肺结核的诊断有一定的价值, 对老年涂阴肺结核的诊断则应视具体情况选择。     

几种方法检测结核分支杆菌的比较

目的：评价聚合酶链反应（PCR）,细菌培养,抗酸染色,荧光染色对结核病的诊断价值。方法：PCR检测43例临床标本中结核分支杆菌（MTB）DNA,并与常规细菌学检测作对比。结果：PCR检测法敏感性为48.8%,荧光染色法为44.2%。细菌培养为32.6%,抗酸染色法为25.6%。结果表明,PCR法检测结核分支杆菌较抗酸染色法更敏感。结论：PCR法具有简便快速的特点。对结核病有较高的诊断价值。     

Diagnosis of pulmonary tuberculosis among asymptomatic HIV+ patients in Guangxi, China

Background Pulmonary tuberculosis （PTB） among asymptomatic Chinese patients with HIV infection has not been investigated despite high tuberculosis burden in China. This study was aimed to evaluate the prevalence, risk factors and clinical outcomes of PTB among asymptomatic patients with HIV/AIDS in Guangxi to facilitate the development of diagnostic and treatment strategies.Methods All asymptomatic adult HIV-infected patients with CD4 ＜350 cells/μl who attended four HIV clinics in Guangxi between August 2006 and March 2008 were evaluated for active PTB with physical examination, chest X-ray （CXR）,sputum smear and/or sputum liquid culture. Data were described using median （interquartile range, IQR） and frequencies.Univariate and multivariate Logistic regression analyses were performed to identify risk factors associated with PTB.Results Among 340 asymptomatic subjects, 15 （4%） were diagnosed with PTB, with 4 （27%） sputum smear positive and 8 （53%） sputum culture positive. CXR has higher diagnostic sensitivity （87%） than sputum smear （25%） and sputum culture （67%）, but lower specificity （56%） compared with sputum smear （99%） and culture （100%）. In univariate analysis,injection drug user, body mass index （BMI） ＜18 kg/m2, CD4 ＜50 cells/μl and presence of peripheral lymphadenopathy were associated with an increased risk of asymptomatic PTB, while in multivariate analysis only peripheral lymphadenopathy maintained statistical significance （OR=7.6, 95% CI 1.4-40）. Patients with negative smear and minor or no abnormalities on CXR had longer interval between screening and TB treatment.Conclusions PTB was relatively common in this group of HIV＋ asymptomatic Chinese patients. Diagnosis is challenging especially where sputum culture is unavailable. These findings suggest that an enhanced evaluation for PTB needs to be integrated with HIV care in China and transmission prevention in China to control at both households and health care facilities, especially for patients with factors associated with a higher risk of PTB.     

结核分枝杆菌/利福平耐药基因联合结核感染T细胞斑点检测在耐药结核性胸膜炎中的应用价值

目的 探讨结核分枝杆菌/利福平耐药基因检测(Xpert MTB/RIF)联合结核感染T细胞斑点检测(T-SPOT.TB)对耐药性结核性胸膜炎诊断及治疗的价值.方法 选取2014年1月至2019年12月河北省胸科医院收治的62例结核性胸膜炎患者为结核性胸膜炎组,选择同期来河北省胸科医院院救治的非结核性胸膜炎患者60例为对...     

Diagnostic Value of Cerebrospinal Fluid T-SPOT.TB for Tuberculousis Meningitis in China

The aim of this study was to evaluate the diagnostic value of the cerebrospinal fluid(CSF) T‐SPOT.TB test for the diagnosis of TB meningitis(TBM). A retrospective analysis of 96 patients with manifested meningitis was conducted; T‐SPOT.TB test was performed for diagnosing TBM to determine the diagnostic sensitivity, specificity, positive predictive value(PPV), and negative predictive value(NPV). A receiver operating characteristic(ROC) curve was also drawn to assess the diagnostic accuracy. The sensitivity, specificity, PPV, and NPV of CSF T‐SPOT.TB test were 97.8%, 78.0%, 80.3%, and 97.5%, respectively, for 52 patients(54.2%) of the 96 enrolled patients. The area under the curve(AUC) was 0.910, and the sensitivities of CSF T‐SPOT.TB for patients with stages I, II, and III of TBM were 96.7%, 97.2%, and 98.9%, respectively. CSF T‐SPOT.TB test is a rapid and accurate diagnostic method with higher sensitivity and specificity for diagnosing TBM.