郑州市无偿献血者核酸检测的应用及分析

目的通过对郑州地区献血者进行酶免筛查后再实施核酸检测(NAT),探讨增加NAT在临床输血中的必要性及可行性。方法采用罗氏全自动核酸筛查系统和上海科华全自动核酸筛查系统检测HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA,样本混合分别采用6人份×166.7μL及8人份×180μL汇集(称为1个pool),如果混检阴性,则直接出具结果;如混检阳性,再进行二次拆分检测,以拆分结果报告最终结果。结果罗氏系统共检测ELISA阴性标本115 227份,其中混检阳性pool 130个,经拆分80个pool为反应性,反应性标本86例,拆分率为61.5%,标本阳性率0.75‰;科华系统共检90 359份ELISA阴性标本,混检阳性pool 93个,经拆分31个pool为反应性,反应性标本31例,pool拆分率33.3%,标本阳性率为0.34‰。二者总计共检标本205586份,反应性标本117例,标本阳性率0.57‰,其中1例为HIV"窗口期"感染。结论核酸检测可以有效降低酶免漏检造成的输血风险,进一步保障输血安全。     

血浆金标法快速筛查HBsAg在流动采血中的应用

HBsAg检测是保证输血安全的重要检测项目之一。在流动采血中，本站采用血浆金标免疫层析法检测试条，现场筛查无偿献血者HBsAg，经与EIA法比较，发现其特异性和灵敏度与EIA法相近，现报道如下。     

胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附法结合使用在乙型肝炎检测中的应用

胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附法(ELISA)单独用于乙型肝炎的检测,已广泛应用于临床。由于二者标记物、灵敏度、特异性等方面的不同,在检测方面体现出不同的优缺点,二者结合使用,在乙型肝炎检测中,尤其在乙型肝炎特殊模式出现时,给临床检验带来了很大的方便。1　材料与方法1 1　标本来源选择2 0 0 1 2～2 0 0 3 2两年内临床上经ELISA法检测的两对半(乙肝5项)不同模式血清35 6份,其中不同模式血清份数如表1。1 2试剂、方法HBsAg检测免疫金标试纸条:MaysunClinicalRe agentCenter　Lot:0 30 12 8　Exp :0 7 2 0 0 4HBsAg检测ELISA…     

2种检测胃蛋白酶原方法的比较

目的探讨胶体金免疫层析法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测胃蛋白酶原(PG)结果的一致性,为胶体金免疫层析法检测PG的可靠性提供实验依据。方法选取该院消化内镜中心经胃镜确诊的胃部炎性患者40例和体检中心体检健康者60例,分别采用胶体金免疫层析法和ELISA法检测2组研究对象的PG,胶体金免疫层析法为待评价方法,ELISA法为参考方法,对2组结果进行方法比对和偏倚分析。结果 2种方法检测结果的相关系数均大于0.95,说明相关性良好且不存在整体偏倚;2种方法的敏感性和特异性分别为0.775、0.85和0.782、0.823。结论 2种方法均可作为胃病患者的辅助诊断方法。     

全血金标法快速筛查非固定采血点HBsAg的初探

笔者用HBsAg全血金标免疫层析法(金标法)检测试条,现场筛查非固定采血点献血者HBsAg,其灵敏度与酶免法相近,且简便快速.     

实时荧光PCR和ELISA在乙型肝炎病毒检测中的应用

目的 比较实时荧光聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在乙型肝炎病毒(HBV)检测中的结果差异.方法 对182份血清同时进行HBV DNA定量检测和ELISA法测定.结果 182份血清标本经两种方法测定,HBV DNA阳性率与ELISA检测HBV-M在HBV-M在HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组("大三阳" 组)和HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组("小三阳" 组)之间差异有统计学意义(P＜0.05);HBV DNA阳性拷贝数与ELISA检测"大三阳"组和"小三阳"组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HBV DNA定量检测方法灵敏度更高,对临床治疗具有较强的指导意义.     

ELISA、GICA与MEIA法检测新生儿TORCH-IgM抗体的比较

目的比较ELISA、GICA与MEIA法对新生儿TORCH-IgM抗体的检测效果。方法选择120例疑似TORCH感染的新生儿作为研究对象,分别采用ELISA、GICA与MEIA三种方法检测血清TORCH-IgM抗体,比较三种方法对新生儿TORCH-IgM抗体检测的阳性率、符合率、灵敏度以及特异性。结果以MEIA法为金标准,ELISA法和GICA法检测TORCH-IgM抗体的灵敏度和特异性比较,ELISA法检测中的RV-IgM、HSV-IgM以及CMV-IgM检测的灵敏度均高于GICA法(P<0.01),两组的TOX-IgM检测比较无显著性差异(P>0.05);ELISA法检测中的CMV-IgM检测的特异性高于GICA法(P<0.01);ELISA法和GICA法检测TORCH-IgM抗体阳性预测值和阴性预测值比较,ELISA法中CMV-IgM检测的阳性预测值和阴性预测值均高于GICA法(P<0.05),尤其是阴性预测值(P<0.01);与MEIA法检测总符合率均在90%以上。结论 ELISA法检测新生儿TORCH-IgM抗体,具有特异性强、敏感性高、可信度高、简单易行等优点,是一种比较可靠的新生儿TORCH感染筛查的检测方法。     

胶体金免疫层析法与ELISA检测HBsAg的比较

胶体金免疫层析法测定 ( GICA)乙型肝炎表面抗原 ( HBs Ag) ,具有简便、快速 ,不需要仪器设备等优点。我们介绍应用此法与酶联免疫吸附试验( ELISA)比较检测HBs Ag的结果。一、材料与方法1 .标本来源　本院患者和体检者血清 986份。2 .试剂　 GICA试剂由郑州博赛生物试剂实验研究所提供 ,ELISA试剂为上海科华生物技术有限公司产品。3.方法　 986份血清以 GICA、ELISA2种方法平行检测 ,操作均按说明书。二、结果和讨论1 .GICA的灵敏度　用 GICA试纸条检测 2ng/ml,1 mg/ml的质控品 ,其灵敏度可达 1 ng/ml,与文献报道相同。2 …     

免疫层析法在HIV(1/2)抗体检测中的应用

卫生部要求 HIV初筛实验室必须备有两种不同实验原理的试剂 ,对可疑结果进行复检。国内已经推广使用 ELISA双抗原夹心法检测 HIV(1 / 2 )抗体 ,笔者发现初筛复检用免疫层析法检测 HIV(1 / 2 )抗体 ,具有较高的准确性。为了进一步验证其结果 ,与 ELISA双抗原夹心法进行比较 ,实验结果如下。1　材料和方法1 .1　血清标本　 HIV(1 / 2 )抗体阳性血清 45份 ,分别由丽珠、华美试剂公司提供 ,本院住院患者血清标本 2 0 0 0份。1 .2　试剂　免疫层析法 :批号 2 0 0 30 81 8,美国雅培制药有限公司产品 ,HIV(1 / 2 )快速检测试剂 ;ELISA…     

胶体金免疫层析法急诊检测HBsAg漏检风险评价

目的评价胶体金免疫层析法(简称胶体金法)急诊检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的漏检风险。方法新疆生产建设兵团医院2014年急诊手术前或急诊侵入性检查前胶体金法检测HBsAg患者3 887例,检测结果经酶联免疫吸附试验(ELISA)验证。采用胶体金法和ELISA检测4个浓度水平HBsAg质控品,评价检测方法灵敏度。以ELISA检测结果为参照,评价胶体金法的漏检风险。结果胶体金法检测HBsAg的灵敏度为2~4IU/mL,ELISA检测灵敏度小于或等于0.5IU/mL。患者标本胶体金法和ELISA检测结果比较差异有统计学意义(P0.05)。ELISA结果阳性而胶体金法检测结果为阴性的相对风险为0.003 91(95%CI:0.002 318~0.006 597)。ELISA检测的标本光密度与临界值的比值(S/CO)为15.314~21.210时,可初步估计胶体金法检测结果。结论在急诊手术前或急诊侵入性检查前采用胶体金法检测HBsAg存在漏检风险,应引起实验室和临床的关注。     

登革热不同病程中核酸、NS1抗原及IgM/IgG抗体测定的价值

目的探讨核酸、NS1抗原和Ig M/Ig G抗体在登革热(DF)不同病程中的检测价值,为合理选择DF检测项目提供科学依据。方法以开始发热为病程第1天,收集138例DF住院患者不同病程的血清标本共254例,以实时荧光PCR法检测登革病毒核酸,免疫层析法分别检测登革病毒特异性NS1抗原和Ig M/Ig G抗体,分析这4个指标在DF不同病程中的诊断价值。结果核酸总阳性率为78.7%,其中第1~5天核酸阳性率均为100%,第6天开始下降;NS1总阳性率为85.4%,第1~8天均大于80%,第9天开始降低;Ig M抗体总阳性率为68.9%,从第3天开始检出,第5天以后大于80%;Ig G抗体总阳性率为28.7%,第1~7天阳性率均低于20%,第8天开始迅速升高。第1~8天核酸联合NS1检测阳性率均为100%,第7天开始NS1联合Ig M/Ig G检测阳性率为100%。结论核酸、NS1和Ig M/Ig G抗体分别适用于病程早期、中期和后期的检测,而病程早中期核酸联合NS1、后期NS1联合Ig M/Ig G可以实现100%的检出率。     

Clinical applicability of single-tube multiplex reverse-transcriptase PCR in dengue virus diagnosis and serotyping

This study has evaluated the clinical applicability of a single-tube multiplex RT-PCR as compared with a two-step nested RT-PCR for the diagnosis as well as serotyping of dengue virus in patient's samples. Seventy-six acute phase blood samples collected from clinically suspected dengue patients during the 2008 outbreak were subjected to two-step nested RT-PCR and single-tube multiplex RT-PCR for dengue diagnosis and serotyping. Of the 76 samples, 17 (22.4%) were positive for dengue viral RNA. Single dengue virus infection was found in 16 cases and 1 had concurrent infection with two serotypes (3&1). Dengue serotype 3 was the predominant serotype (70.5%), followed by serotype 1 (23.5%). Single-tube multiplex PCR had concordant result with that of two-step nested RT-PCR including the one with concomitant infection. This study reveals the predominance of dengue serotype 3 in North India in addition to the co-circulation of multiple serotypes and concomitant infection. The rapid and accurate diagnostic capability of single-tube multiplex RT-PCR used in the study appears to be promising enough to be commonly used for dengue viral detection as well as serotyping.     

不同方法检测肠道病毒71型IgM抗体在手足口病诊断中的意义

目的：研究免疫层析法（ICA）和酶联免疫吸附法（ELISA）检测肠道病毒71型（EV71）IgM 抗体在手足口病诊断中的意义。方法采集135例手足口病确诊患儿和44例排除手足口病诊断的患儿血清标本,采用ICA及ELISA检测EV71 IgM 抗体。结果135例手足口病患儿,ICA、ELISA 检测 EV71 IgM 抗体阳性率分别为21．48％（29/135）和20．74％（27/135）;44例非手足口病患儿,ICA、ELISA检测EV71 IgM抗体阳性率均为0．00％（0/44）。结论ICA或ELISA检测EV71 IgM抗体阳性者均可确诊为手足口病,但检测结果为阴性者,不能排除手足口病的可能性,应结合临床表现进行诊断。     

金标法检测乙肝表面抗原漏检原因分析

目的：分析金标法检测乙肝表面抗原（HBsAg ）的漏检原因。方法采用金标法和酶联免疫吸附法（ELISA）对10335例献血者血液标本进行HBsAg检测,计算阳性率、漏检率。采用金标法和ELISA检测 HBsAg质控品,分析检测灵敏度。结果金标法检测阳性率为0．33％,ELISA为1．14％,金标法检测阳性率低于 ELISA （χ2＝46．76,P＜0．05）。金标法漏检率为71．19％。金标法反应时间为5、10、15 min时,漏检率为94．92％、88．98％、71．19％,比较差异有统计学意义（χ2＝38．27,P＜0．05）。金标法不能检出浓度为0．5 ng/mL的 HBsAg质控品。结论金标法检测灵敏度较ELISA低,并且受人为因素影响较大,适用于献血前初筛。     

乙型脑炎和登革热病毒的环介导等温扩增基因定量检测技术研究

目的建立一种适合口岸现场快速检测乙型脑炎和登革热病毒的环介导等温扩增(LAMP)定量技术。方法根据LAMP方法的原理,设计LAMP检测引物和反应体系,建立LAMP检测方法,同时综合评估初始拷贝数值与方法中的灵敏度、特异度、重复性及荧光信号值反应时间(1×104)之间的线性关联。结果检测选用1套LAMP引物,完成时间为0.5h,传统PCR检测与LAMP对比,差异明显,LAMP检测可有效提高灵敏度,是PCR检测技术的10倍。循环阈值和模版浓度具有良好的线性联系,实验室变异系数为小于5%。结论该方法是特异度与灵敏度较高,操作简单、结果判断容易、设备要求低的快速检测方法,适合基层医疗卫生机构和现场查验机构的广泛应用。     

广东省深圳市某建筑工地登革热疫情暴发调查

2010年10月12日,深圳市某医院收治了1例疑似登革热病例,经深圳市疾病预防控制中心(CDC)检测,广东省CDC复核,登革病毒IgM和核酸阳性,确诊为登革热实验室确诊病例,该病例为一建筑工地升降机操作员。共采集9份疑似病例血液标本,登革病毒核酸检测均阳性,病毒分型为DEN-1。由于该工地工人流动性较大,人员进出频繁,没有完整的出入记录和联系方式,工人患病后通常辞工返乡,因此未能找到本次疫情的传染源病例。     

血液标本集中检测提高输血安全性研究

目的：探讨柳州市、来宾市、河池市采供血机构实施血液标本集中检测在提高血液制品质量,保障输血安全性方面的意义。方法评价集中检测实验室的检测工作质量,回顾性分析集中检测前后献血者血液标本各项血液传染性疾病指标检测结果。结果集中检测实验室在各级室间质评活动中取得优异成绩;集中检测后采用互补片段试剂组合模式进行血液传染性疾病指标检测,检测阳性率高于集中检测前得随机试剂组合模式（ P＜0．05）;集中检测后采用酶联免疫吸附法联合核酸检测法进行血液传染性疾病指标检测,阳性率较集中检测前仅采用酶联免疫吸附法明显增高（P＜0．05）。结论柳州市、来宾市、河池市采供血机构实施血液标本集中检测,能够明显提高血液制品质量,保障临床输血安全性。     

3种酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒前S1及S2抗原的比较

目的比较酶联免疫吸附试验(ELISA)的3种不同检测方式,选择最佳检测方式,用于临床诊疗。方法用Addcare ELISA800全自动酶免仪、TECAN freedom evolyzer全自动酶免分析系统、手工ELISA法等3种方式对质控品标本和患者血清标本进行乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre-S1Ag)和前S2抗原(Pre-S2Ag)检测,并采用统计学方法对其结果进行分析。结果 3种方式检测Pre-S1Ag的批内精密度分别为4.73%、5.38%、11.87%,检测Pre-S2Ag的批内精密度分别为4.91%、5.04%、11.75%;检测Pre-S1Ag的批间精密度分别为6.63%、7.90%、13.26%,检测Pre-S2Ag的批间精密度分别为6.74%、7.81%、12.59%。灵敏度均为100.00%。结论 3种方法有非常好的一致性,均能较好地检测Pre-S1Ag和Pre-S2Ag,Addcare ELISA800全自动酶免仪精密度最好,可进一步提升临床检验质量。     

nm23-H1蛋白在急性髓细胞白血病患者中的表达及其疗效

目的探讨nm23-H1蛋白在急性髓细胞白血病(AML)患者中的表达及其疗效。方法 86例急性髓性白血病患者设为观察组,79例健康人群作为对照组。结果 86例AML患者免疫分型阳性表达率由高到低依次为CD33(94.17%)、MPO(86.05%)、CD13(77.91%);CD13+组患者血清nm23-H1蛋白表达情况显著高于CD13-组(t=3.641,P0.001)。CD33+组患者血清nm23-H1蛋白表达情况显著高于CD33-组(t=2.699,P=0.008)。MPO+组患者血清nm23-H1蛋白表达情况显著高于MPO-组(t=3.402,P=0.001)。初治组患者、CR组、复发组血清nm23-H1蛋白表达显著高于对照组(P0.05)。结论 AML免疫抗原CD13、CD33、MPO表达阳性患者血中nm23-H1蛋白呈现表达上调。