枳实中脱氧肾上腺素的测定方法及其含量与直径的关系

样品溶液的制备及分析方法称取粉碎后样品500mg加50％甲醇40ml在水浴上回流提取1h,趁热过滤,滤液和洗液合并至50ml,取20ml通过填充了CM-(?)CH的柱(12mm×30mm),该柱用50％甲醇20ml清洗后,用0.1mol/LHCL洗脱并定容至20ml为样品溶液。内标溶液为L-肾上腺素的0.1mol/L HCI溶液(0.05mg/ml)。分析时取样品和标准溶液各1.0ml,加入内标溶液1.0ml,进样20μl。分析条件为:柱3011-C(弱酸性阳离子交换树脂4×250mm),流动相:0.1mol/L KH_2PO_4-0.3mol/L NH_4Cl-MeOH(35:35:30),流量1.0ml/min,检测220nm。在上述条件下,肾上     

用荧光钙指示剂喹2测定人血小板胞浆游离钙浓度的方法

我们采用荧光钙指示剂喹2,建立了测定人血小板胞浆游离钙浓度的方法,简报如下。 导入喹2的血小板悬液(QPS)的制备:将富含血小板血浆与10 μmol/L 喹2/AM混匀,置22℃水浴20 min,加入1μmol/L PGE_1,室温下430×g 离心 15 min,弃上层液。用1ml含1 μmol/L PGE_1和10μmol/L EGTA的HEPES无钙台氏缓冲液(HTB)使血小板悬浮并移至10ml体积已用HTB(含10 μmol/L EGTA)50ml平衡过的2％琼脂糖胶柱上,用相同缓冲液洗脱。过柱后将血小板悬液调至1×10~8血小板/ml和Ca~(2+)浓度至1 mmol/L,置22℃备用。对照血小板悬液(CPS)的制备:用等体积     

人红细胞中LDH-1的分离、纯化和抗体制备

我们对LDH同功酶的分离、纯化以及免疫动物等技术进行了研究。成功地应用QAE-Sephadex A-50作交换剂,从人红细胞中分离纯化出LDH-1抗原,并获得了兔抗人LDH-1抗体。较文献介绍的其他方法为简便,现介绍如下: 一、材料和试剂配制1.人红细胞。2.QAE-Sephadex A-50(Pharmacia进口分装)。3.洗脱A液:20mM/L Tris缓冲液,pH6.3±0.1。Tris 4.8456g,溶于1600ml蒸溜水中,用6N HCl调至pH6.3,加蒸溜水至2000ml。     

奥曲肽治疗肝硬化上消化道出血的疗效观察

目的:探讨对肝硬化合并食管胃底静脉破裂出血,用奥曲肽配合输液泵止血的效果.方法:观察组用奥曲肽0.1mg加生理盐水20ml缓慢静脉注射,继以25～50μg/h速度持续静脉滴注48～72h,用输液泵控制滴速.对照组用垂体后叶素加入5%葡萄糖液中以0.2～0.4U/min持续静脉滴注48～72h,用输液泵控制滴速.结果:奥曲肽治疗组见效快、治愈率高,起效时间为10～16h,出血停止时间14～72h,全组病例无任何不良.结论:奥曲肽治治肝硬化消化出有显著疗效.     

迷迭香酸对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

目的:研究迷迭香酸对黄嘌呤氧化酶的抑制作用.方法:将20、40、60 μg/ml迷迭香酸或1 μg/ml阳性对照别嘌呤醇,分别加入黄嘌呤溶液(测尿酸生成量:1 mmol/L;测超氧离子:50 μmol/L)和0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶中,用生化仪测定5 min尿酸生成量和超氧离子生成(NBT显色法).在1 ml 2×105/ml HL-60细胞悬液中加入100 μl 6 mol/L黄嘌呤、100 μl 0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶、500 μg/ml迷迭香酸,分别以AnnexinⅤ-PI双标试剂盒法(以1 μg/ml别嘌呤醇为阳性对照)或细胞周期法(以100 U/ml SOD为阳性对照)测定细胞凋亡率.结果:迷迭香酸显著抑制尿酸生成和超氧离子引起的NBT显色,两种方法测得其IC50分别为56 μg/ml和21 μg/ml;对细胞凋亡的抑制率均在40%以上.结论:迷迭香酸是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂.     

第二届妇科泌尿学与盆底重建外科手术与热点问题研讨会

1小儿葡萄糖液的输液速度1.1输液时葡萄糖的耐量无论成人或小儿均为0.4～0.5g/(kg.h),这样给葡萄糖的速度不会引起高血糖及糖尿。此葡萄糖值相当于400～500mg/(kg.h)=6～8mg/(kg.min)。1.2维持液中葡萄糖的浓度无脱水小儿输液宜用维持液,维持液由4份10%葡萄糖和1份生理盐水(NS),再加氯化钾配成0.15%浓度组成,即每100ml中含10%葡萄糖80ml、NS20ml和15%KCl1ml,其中含葡萄糖8g(8000mg),或每0.1ml含葡萄糖8mg。1.3维持液的输液速度用一次性输液器,规格1ml=20滴,即0.1ml=2滴。葡萄糖以4～8mg/(kg.min)输液,相当0.05～0.1ml/(kg.min)=1～2滴/(k…     

PSK-01型注射泵工作原理及故障检修

PSK-01型注射泵是日本NIKKISO公司的产品,具有交直流两用供电、注射器20ml、30mi、50ml随意选择、自动调节功能,注射速度0.1～300.0ml/h连续可调(最小单位0.1ml/h),注射量显示范围为0.1～999.9(最小单位为0.1ml),精确度在±1%之内,充足的电池在5ml/h注射速度下可工作大约2小时.该注射泵还具有阻塞、电池低电压、注射器错误等多种报警功能,不失为降低护理工作强度,提高治疗精度的理想设备.     

熊胆对离体大鼠胸主动脉的舒张作用

用大鼠胸主动脉制备成保存内皮细胞和去除内皮细胞两种血管条标本,以 Tyrode 液灌流。两种血管条在10~(-7)mol/L NE 或50 mmol/L 高钾作用下显著收缩,5～10 min 后依次加入0.01、0.1、0.25、0.5 mg/ml 的熊胆,每次给药间隔10min。观察到两种标本均显示相似幅度的舒张,这种作用随熊胆浓度的增加而增加。0.5 mg/ml 的熊胆可以完全对抗10~(-7)mol/LNE 所致的收缩,而使高钾所致的收缩张力下降50%左右。熊胆对两种血管条的舒张作用无显著差异(P>0.1)。并证明熊胆对血管的舒张作用不依赖于血管内皮细胞。     

奥曲肽治疗急性上消化道出血的临床分析

目的 观察应用奥曲肽(生长抑素八肽)治疗各种原因引起的急性上消化道出血的疗效.方法 用奥曲肽注射液0.1mg加生理盐水10ml缓慢静脉推注,继以0.1mg加入0.9%生理盐水50ml中,用静脉微注泵以25μg-50μg/h持续静脉泵入,至出血停止后24小时逐步减量停药.结果 24h出血停止者45例,48h出血停止者25例,总显效率91.95%(80/87),治疗中均未见明显的不良反应.结论奥曲肽治疗上消化道出血疗效好,无明显副作用,在各种原因引起上消化道出血均可尽早应用.     

颌面部赝复用硅橡胶老化后体外细胞毒性研究

目的 研究颌面部赝复用硅橡胶老化后的体外细胞毒性.方法 以A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶作为受试材料,根据GB/T3512-2001分别制备24、48、72 h老化试件.以小鼠成纤维细胞(L-929)培养液为浸提介质,参照GB/T16886.5-2003制备相应浓度的浸提液培养L-929细胞.根据试件的老化时间和浸提液的浓度进行实验分组,同时设立阴性和阳性对照.于加入浸提液后的2、4、7 d分别收集细胞,MTT法检测细胞增殖,以测得的吸光度值(D490nm)计算细胞相对增殖率并以此评价受试件的毒性程度.结果 加入浸提液后2、4 d,SEI老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性为2级.加入浸提液后7 d,A.2186老化48 h 100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级;SEI老化48 h 50%和100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级.除A-2186老化24 h 50%浓度组外(细胞毒性为0级),其余各组细胞毒性评价均为1级.结论 老化48 h后,液态双组份SEI硅橡胶表现出轻微的细胞毒性;老化72 h后,A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶均有一定的细胞毒性.建议临床使用赝复体的患者定期更换赝复体.     

油酸在人肝癌HepG2细胞内转化生成9,10-二羟基硬脂酸

目的以人肝癌细胞株HepG2验证油酸转化生成9,10-二羟基硬脂酸（DHSA）途径。方法将HepG2细胞消化传代接种于24孔培养板,24h贴壁后分别加入含50μmol/L和100μmol/L油酸的无血清MEM培养液,培养24h和48h后测定细胞裂解液及上清液中DHSA和油酸（OA）的含量。结果添加50μmol/L和100μmol/L油酸培养24h后,HepG2细胞裂解液中DHSA浓度分别为（3.29±0.38）ng/ml和（6.33±1.99）ng/ml,无油酸对照组为（2.08±0.61）ng/ml;OA含量分别为（645.07±142.81）ng/ml和（1341.6±349.69）ng/ml,对照组为（359.68±12.06）ng/ml;上清液中DHSA和OA含量亦显著高于对照组。培养48h后,油酸组细胞裂解液中OA含量仍高于对照组,DHSA含量仅100μmol/L油酸组高于其他组;细胞上清液中OA含量仅100μmol/L油酸组高于对照组,DHSA含量各组间无显著差异。结论油酸可在HepG2细胞内代谢生成DHSA。     

危重型毒蛇咬伤43例临床分析

目的:总结重、危重型毒蛇咬伤的疗效.方法:采用以抗蛇毒血清为主要治疗方法,积极防治并发症等实用技术.结果:本组病人全部治愈.结论:抗蛇毒血清是一种目前没有任何药物可以替代的治疗毒蛇咬伤的特效首选药,抗蛇毒血清使用的技巧取决于医生的临床经验.     

高效液相色谱法测定盐酸异苯环戊胺胶囊的含量及溶出度

目的 建立测定盐酸异苯环戊胺胶囊含量及溶出度的方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(加0.1%三乙胺,用磷酸调节pH值至3.0)-甲醇-乙腈(30:35:35,V/V/V);流速为1.0 ml/min;检测波长为224 nm;柱温为40℃.溶出度测定采用转篮法,分别以0.1 mol/L盐酸溶液、pH 4.5醋酸盐缓冲液、水、pH 6.8磷酸盐缓冲液500 ml为溶出介质,以50、75和100 r/min为转速,筛选溶出条件.结果 该法专属性良好,含量测定的线性范围为20.74~155.58μg/ml(r=1.0000),平均回收率为100.1%;溶出量测定的线性范围为2.08~24.90μg/ml(r=0.9998),平均回收率为98.9%.确定了以0.1 mol/L盐酸溶液为溶出介质和50 r/min为转速的溶出度测定方法.3批胶囊的含量和溶出度均符合规定.结论 该法简便、准确、重现性好,可用于盐酸异苯环戊胺胶囊的含量及溶出度测定.     

地塞米松抑制聚肌胞苷酸诱导人气道上皮细胞趋化因子表达及机制的初步研究

目的 初步探讨地塞米松对聚肌胞苷酸刺激气道上皮细胞后趋化因子表达的影响及其机制.方法 将人气道上皮细胞16hBE给予不同浓度的聚肌胞苷酸(0.001、0.01、0.1、1 μg/ml)及地塞米松(0.1、1、10 μmol/L)处理,用RT-PCR检测刺激6h后IL-8、IP-10 mRNA的表达水平,用ELISA法检测刺激24 h后培养上清液中IL-8和IP-10蛋白含量,用免疫组化方法检测细胞NF-κB p65亚单位的表达强度.结果 0.001、0.01、0.1 μg/ml聚肌胞苷酸处理16hBE细胞后IL-8和IP-10mRNA表达水平和蛋白分泌量呈浓度依赖性升高,在0.01 μg/ml及0.1 μg/ml浓度时,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);但在聚肌胞苷酸浓度为1μg/ml时,IL-8和IP-10 mRNA表达水平和蛋白分泌量都出现了下降.地塞米松(1、10 μmol/L)预处理0.5h明显抑制聚肌胞苷酸诱导的IL-8和IP-10 mRNA表达及蛋白分泌(P＜0.05,P＜0.01).1 μmol/L地塞米松预处理明显抑制了聚肌胞苷酸诱导的NF-κB p65表达强度(P＜0.01).结论 糖皮质激素可抑制聚肌胞苷酸诱导的气道上皮细胞趋化因子的表达,其机制可能与NF-κB的活化有关.     

4种水果抗羟自由基活性比较

目的:比较苹果、猕猴桃、桔子、梨对羟自由基(·OH)的清除作用.方法:以抗坏血酸(Vc)、甘露醇作阳性对照,采用分光光度法测定甲基紫-Fe2 -H2O2体系吸光度的变化,比较4种水果对·OH的清除作用.结果:苹果、猕猴桃、梨和桔子原汁清除·OH的IC50分别为0.007 ml、0.007 ml、0.6 ml、0.5 ml;阳性对照抗坏血酸(0.01mol/L)与甘露醇(0.001 mol/L)的IC50分别为1.2 ml和0.38 ml.梨和桔子原汁清除·OH的能力相当,苹果与猕猴桃原汁的清除能力相当而且强于前2种.结论:4种水果对·OH均有很好的清除作用.     

丙泊酚对离体兔气管黏膜上皮纤毛运动的影响

目的观察不同浓度的丙泊酚对体外培养的兔气管黏膜上皮细胞纤毛运动的影响,探讨一氧化氮（NO）在丙泊酚影响纤毛运动中的作用。方法无菌条件下从健康新西兰兔获取离体气管标本,分离上皮组织培养7～8d后观察。以Hank平衡盐溶液（HBSS）将丙泊酚的终浓度分别稀释为1、10、20、50、100、200μg/ml。将组织块随机分为8组,前7组分别加入HBSS（P0）和上述6种浓度的丙泊酚（P1、P2、P3、P4、P5、P6）,第8组（P7）在加入0.1mmol/L的一氧化氮合酶（NOS）总抑制剂——L-NMMA后再以200μg/ml丙泊酚处理。在加药前（T0）,加药后1min（T1）、5min（T2）、10min（T3）、20min（T4）、30min（T5）,采用高速数码摄像系统采集纤毛摆动图像,通过IPLabV3.65软件分析,计算纤毛摆动频率（ciliarybeatfrequency,CBF）,分别进行组内和组间对比。结果①P0组、P1组和P2组的CBF值在各时点与各自的基础值比较均无明显变化;P1组和P2组的CBF值与P0组相应时间点相比无明显变化;②P3组CBF在T1时点比基础值和P0组T1时点值明显升高（P〈0.05）;在随后的各个观察时点与基础值及P0组相应时间点比较无明显变化;③P4、P5、P6组加药后各个观察时点的CBF均明显高于基础值和P0组各时点值（P〈0.05）;④P7组加药后各时点的CBF值与基础值相比均无明显变化。结论50μg/ml以上浓度的丙泊酚可促进纤毛摆动,50、100、200μg/ml浓度的丙泊酚可能通过促进NO合成和释放而加速离体纤毛运动。     

烟酸缓释片的制备及溶出度的测定

制备烟酸缓释片剂,并评价其体外释放特性。根据中国药典１９９５年版所载的溶出度测定方法测定其释放度,并建立紫外分光光度法测定含量。烟酸缓释片体外释放符合Ｈｉｇｕｃｈｉ模型。样品在１０００ｍｌ０．１ｍｏｌ／Ｌ盐酸中用转蓝法（５０ｒ／ｍｉｎ）测得２、４、６ｈ的释药量分别达到４４．１２％、６９．９７％和８４．９５％。Ｔｄ为３．９７ｈ。该片剂处方较为合理,适合于工业化生产,可为高脂血症的临床防治提供一个新剂型     

连翘对LPS作用的巨噬细胞TLR4蛋白表达的影响

目的观察连翘对LPS诱导巨噬细胞（RAW264．7）16h后TLR4蛋白表达的影响,探讨连翘对抗内毒素作用及其可能机制。方法体外实验共分6组,分别为control组,LPS组,连翘高、中、低剂量组及多黏菌素B组;连翘高、中、低剂量组及多黏菌素B组分别加入连翘水煎液50mg／ml、25mg／ml、12．5mg／ml及多黏菌素B10ug／ml培养0．5h后,再加入10ng／ml LPS,培养16h;Western blot法测各组细胞TLR4蛋白表达变化。结果control组RAW264．7细胞只表达少量TLR4,给予LPS刺激16h,TLR4表达明显升高（P〈0．01）,连翘高、中、低剂量组预处理均可明显降低TLR4的表达（P〈0．01）,并呈剂量依赖关系;连翘高剂量组与多黏菌素B组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论连翘预处理能抑制LPS诱导的巨噬细胞TLR4的表达可能是其抗内毒素作用的重要机制。     

外周动静脉同步换血治疗新生儿重症溶血症

目的 :观察外周动静脉同步换血治疗新生儿重症溶血症的疗效。方法 :对确诊为溶血症的 3 1例患儿采用留置针穿刺 ,外周静脉输血 ,桡动脉抽血 ,同步进出速度 90～ 15 0ml/h ,配血量 160～ 180ml/kg(其中 10～ 15ml/kg为换血后输血用 ) ,换血前后监测胆红素、电解质、血常规。结果 :换血前总胆红素 44 8 86± 5 7.5 8μmol/L、间接胆红素 412 46± 15 6.3 8μmol,换血后分别为 2 0 7 5 4± 2 1 87μmol/L、183 72± 65 2 4μmol/L ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,血红蛋白换血后较换血前显著升高 (P <0 .0 1) ,电解质钾、钠、氯、钙无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :外周动静脉同步换血治疗新生儿重度溶血症 ,简单、易行、疗效可靠 ,无明显并发症 ,值得推广     

他莫昔芬对人肝癌细胞增殖及ER、Smad4表达的影响

目的：研究他莫昔芬对人肝癌HepG2细胞增殖、雌激素受体（ER）、Smad4表达的影响。方法：根据他莫昔芬的不同浓度分为3组,即7.5、15、30μmol/L组,对照组不加他莫昔芬,每组设6个平行对照孔,每孔加入细胞浓度为1×105个/ml的细胞悬液0.1ml,培养24、48、72h。采用MTT法测定OD值,然后计算抑制率;免疫组化染色观察他莫昔芬对人肝癌HepG2细胞ER、Smad4表达的影响。结果：他莫昔芬抑制人肝癌细胞增殖,随浓度的增加及处理时间的延长,抑制率增加;他莫昔芬抑制肝癌细胞ER表达,促进Smad4的表达,具有时间－浓度依赖。结论：他莫昔芬可通过影响肝癌细胞ER、Smad4的表达来抑制肝癌细胞增殖。