Wnt/β-catenin信号通路在多种人前列腺癌细胞系中的表达研究及意义

目的:检测多种不同上皮细胞间质转化(EMT)特性的人前列腺癌细胞Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白的表达,对细胞中Wnt/β-catenin信号通路的功能状态进行鉴定,分析其在前列腺癌EMT现象中可能的作用。方法:用Western印迹法鉴定LNCaP及其亚细胞系C4、C4-2、C4-2B和ARCaP亚细胞系IF11、IA8,以及PC-3、DU145细胞中β-连环素(β-catenin),糖原合成酶3β(t-GSK3β),磷酸化糖原合成酶3β(p-GSK3β)的表达差异情况。结果:β-catenin和p-GSK3β在LNCaP、C4、C4-2、C4-2B、IF11、IA8中表达较高,在PC-3中表达较低,在DU145中表达缺失,t-GSK3β在上述所有细胞中表达无明显差异。p-GSK3β/t-GSK3β比值在LNCaP、C4、C4-2、C4-2B、IF11、IA8中较高,在PC-3和DU145中较低。结论:8种不同EMT特性的前列腺癌细胞系中,Wnt/β-catenin信号通路的功能状态存在差异。     

多种转移潜能不同的人前列腺癌细胞“上皮细胞间质转化态”特性鉴定及其意义

目的:对多种转移潜能不同的人前列腺癌细胞“上皮细胞间质转化态”(EMT)特性进行鉴定,并从粘附因素和细胞骨架蛋白角度分析其骨转移潜能获得的分子机制。方法:用W estern印迹法鉴定LNCaP及其亚细胞系C4、C4-2和ArCaP亚细胞系IF11、IA8,以及PC-3、Du145等细胞中上皮型钙粘素(E-cadherin)、神经型钙粘素(N-cadherin)和波形纤维蛋白(V im entin)的表达差异情况,并分析其在前列腺癌转移过程中的作用。结果:E-cad-herin在PC-3、LNCaP、C4、C4-2中表达较高,但在Du145、IF11、IA8中表达极低;而V im entin的表达情况恰恰与E-cadherin相反;N-cadherin在IF11、IA8细胞中呈现显著的高表达状态。结论:转移潜能不同的人前列腺癌细胞株之间存在EMT表型的表达差异,其中PC-3、LNCaP、C4、C4-2是未发生EMT改变的细胞,Du145、IF11、IA8却是EMT化的细胞。EMT表型差异蛋白在解释前列腺癌转移机制方面占据着重要地位。     

TGF-β/Smads通路关键蛋白在5种前列腺癌细胞株中表达的鉴定及意义

目的:对多种不同人前列腺癌细胞株TGF-β/Smads信号通路的"开放"或"关闭"状态进行鉴定,初步探讨此通路在前列腺癌侵袭、转移中的作用及可能的机制。方法:用Western印迹法检测LNCaP、PC-3、DU145及AR-CaP亚细胞系IF11、IA8细胞中TGF-β/Smads通路的关键蛋白TGF-βⅡ型受体(TβRⅡ)、Smad2/3、磷酸化Smad2(p-Smad2)、Smad4的差异表达。结果:TβRⅡ在PC-3、DU145、IF11、IA8中表达较高,在LNCaP中表达极低;Smad2/3在所有细胞中表达均较高,但活性成分p-Smad2仅在PC-3、DU145中表达;Smad4在LNCaP、PC-3、DU145中表达较高,IF11、IA8中表达缺失。结论:不同转移潜能的前列腺癌细胞株TGF-β/Smads通路的"开闭"状态存在差异,仅PC-3、DU145细胞处于开放状态;前列腺癌细胞可能通过不同的方式改变TGF-β/Smads通路状态参与晚期肿瘤的侵袭、转移过程。     

环氧化酶2在不同前列腺癌细胞系中的表达

目的:研究环氧化酶2(COX-2)在不同前列腺癌细胞系中的表达,探讨COX-2在前列腺癌侵袭进展及转移潜能获得机制中的可能作用。方法:应用Western印迹及RT-PCR鉴定LNCaP及其亚细胞系C4-2和AR-CaP亚细胞系IF11、IA8,以及PC-3细胞中COX-2的表达情况,并初步分析其在不同特性前列腺癌细胞系转移侵袭过程中的作用。结果:Western印迹结果显示:COX-2蛋白在PC-3细胞中表达相对较高,在IF11、IA8、LNCaP和C4-2细胞中表达缺失,差异具有统计学意义(P<0.05)。COX-2mRNA表达结果同蛋白一致。结论:不同来源、不同转移潜能的前列腺癌细胞株中COX-2表达存在差异。高表达COX-2可能在PC-3细胞高侵袭转移潜能获得方面起着一定作用,而与其他细胞系转移作用无关。     

Smad4在人前列腺癌细胞系LNCaP和ARCaP中的差异表达及意义

目的:探讨TGF-β/Smads信号转导的核心Smad4在前列腺癌转移潜能获得中的作用及可能的机制。方法:用Millicell体外侵袭试验观察LNCaP和ARCaP系IF-11、IA-8细胞株转移潜能的差异情况,分别应用Western印迹法和逆转录PCR鉴定这3种细胞株中Smad4蛋白及mRNA的差异表达。结果:ARCaP系IF-11、IA-8细胞株的体外侵袭潜能明显高于LNCaP细胞(P<0.01);但Smad4蛋白在低转移潜能的LNCaP细胞中高表达,而在高转移潜能的IF-11、IA-8中表达缺失(P<0.01),Smad4 mRNA表达结果与蛋白一致。结论:Smad4在转移潜能不同的前列腺癌细胞系间存在差异表达,Smad4表达缺失可能是晚期前列腺癌发生侵袭转移的机制之一。     

缺氧诱导因子1α诱导人前列腺癌细胞上皮间质化改变的研究

目的:研究人前列腺癌细胞在缺氧诱导因子1α(HIF-1α)诱导下能否发生上皮细胞间质转化态(EMT)改变,进而致侵袭能力增强,并初步分析其分子机制。方法:应用RT-PCR技术检测LNCaP细胞及其亚细胞系C4、C4-2、C4-2B这4种EMT阴性的人前列腺癌细胞中波形蛋白(vimentin)mRNA表达情况,并凭此筛选出适合于进一步作转染诱导试验的细胞。用脂质体Lipofectamine2000包装重组真核表达载体pCDNA3.1(-)/HIF-1α和pCD-NA3.1(-)空质粒后,分别转染上步试验所挑选出的人前列腺癌细胞LNCaP,600μg/mLG418筛选抗性克隆。免疫荧光及Western印迹法鉴定HIF-1α表达,Western印迹法检测EMT标志蛋白——上皮型钙粘素(E-cadherin)和vimentin的表达,Transwell验证转染后LNCaP细胞侵袭能力的改变。结果:RT-PCR证实4种EMT阴性的细胞中,仅LNCaP表达有vimentin编码基因,适合作转染诱导试验。免疫荧光也观察到HIF-1α转染细胞胞质中荧光亮度较空质粒转染细胞和未转染细胞明显增强。Western印迹法证实HIF-1α转染细胞发生了EMT转化,其E-cad-herin表达缺失,而vimentin表达增加。同时,Transwell体外侵袭试验也发现,LNCaP/HIF1α细胞的体外侵袭能力显著高于LNCaP细胞和LNCaP/pCDNA3.1(-)细胞。结论:HIF-1α过表达可以通过调节两种EMT相关蛋白诱导人前列腺癌细胞LNCaP发生EMT改变并致其侵袭能力增强。     

β-连环素酪氨酸磷酸化调控E-钙黏蛋白表达参与转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化

目的 观察β-连环素(catenin)在TGF-β1诱导的上皮细胞-间充质细胞转分化(EMT)过程中对E-钙黏蛋白(cadherin)表达的调控作用。方法 应用穿透性多肽技术构建表达底物模仿多肽和对照多肽。以体外培养的人肾小管上皮细胞HK2为研究对象，模型组予10 ng/ml TGF-β1刺激肾小管上皮细胞72 h，底物模仿多肽组和对照多肽组同时分别予2 μmol/L的底物模仿多肽或对照多肽干预TGF-β1刺激肾小管上皮细胞；应用Western印迹方法检测各组E-cadherin、α-SMA蛋白的表达及各组β-catenin酪氨酸磷酸化水平。应用激光共聚焦显微镜观察各组细胞β-catenin的分布。结果 正常对照组表达E-cadherin，几乎不表达α-SMA，β-catenin酪氨酸磷酸化水平低，主要表达于细胞连接间的细胞膜上。模型组几乎不表达E-cadherin，α-SMA的表达上调，β-catenin酪氨酸磷酸化水平上调，主要表达于细胞核内。底物模仿多肽组与正常组的结果相似；对照多肽组与模型组结果相似。结论 人肾小管上皮细胞β-catenin酪氨酸磷酸化水平的上调，使β-catenin向核转移，E-cadherin/β-catenin复合体解离，E-cadherin功能丧失，表达α-SMA，参与TGF-β1诱导的EMT。     

肾小管上皮细胞转分化中CIP4与β连环素的相互作用

目的 探讨在大鼠肾脏纤维化组织中CIP4(Cdc42-interacting protein 4)的表达和分布,以及在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)-间质细胞转分化(EMT)模型中,CIP4与β连环素(β-catenin)之间的相互作用关系.方法 体内实验用SD大鼠5/6肾切除法建立肾纤维化模型,根据Masson染色结果观察肾脏组织纤维化程度;用免疫组织化学染色观察CIP4在模型组和假手术组的表达和分布.体外实验用HK-2细胞株作为研究对象,使用TGF-β1(10 μg/L)刺激72 h建立EMT模型.Western印迹法检测E钙黏蛋白(E-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达变化,同时检测CIP4和β-catenin的表达水平;免疫荧光法观察CIP4和β-catenin在两组细胞中的共定位关系;免疫共沉淀方法检测CIP4和3-catenin之间的相互作用关系;用脂质体2000将质粒pcDNA4.0-CIP4瞬时转染至HK-2细胞,Western印迹法检测高表达CIP4对上述指标的影响,以及高表达CIP4与TGF-β1刺激对β-catenin入核的影响.结果 体内实验,CIP4在假手术组和5/6肾切除组大鼠肾组织中都有表达,在纤维化的肾脏组织中表达上调,主要分布在肾小管中,且在上皮细胞侧基底膜处聚集.体外实验,与对照组相比,EMT模型组HK-2细胞CIP4和α-SMA蛋白表达明显增高,分别是对照组的1.8倍和2.5倍,同时E-cadherin表达量减少(均P＜0.05),β-catenin表达量无明显变化.免疫荧光结果显示对照组CIP4与β-catenin主要分布于细胞膜,且在细胞膜上存在部分共定位;模型组中,CIP4与β-catenin在细胞膜上分布减少,细胞核内表达增多,细胞核内存在部分共定位现象.免疫共沉淀结果表明在以上两组细胞中,CIP4和β-catenin均存在相互作用.单独转染CIP4目的基因质粒的HK-2细胞中,CIP4与α-SMA表达上调,分别为对照组的3.5倍与1.7倍,并伴有E-cadherin表达下降(均P＜0.05),与单独TGF-β1刺激相似;高表达CIP4与TGF-βl刺激均可上调β-catenin在核蛋白中的表达,分别为对照组的2.0倍和2.5倍(P＜0.05).结论 CIP4在5/6肾切除组大鼠肾脏组织中表达上调,且主要分布于肾小管上皮细胞侧基底膜处,其与β-catenin有部分共定位,且存在相互作用,提示CIP4可能通过促进β-catenin入核,参与EMT的进程.     

两种不同前列腺癌上皮细胞间质转化模型转录调控因子的比较及意义

目的:初步筛选、对比决定两种不同前列腺癌上皮细胞间质转化(EMT)模型(LNCaP/HIF1α细胞模型、ARCaP细胞模型)表型的转录因子,为利用这两个模型深入研究前列腺癌转移机制奠定基础。方法:分别体外培养LNCaP/HIF1α细胞模型中的LNCaP细胞、稳定高表达缺氧诱导因子HIF1α的LNCaP细胞和ARCaP细胞模型中的IF11细胞、IA8细胞,提取总RNA行RT-PCR,检测目前发现的决定EMT表型的5种转录因子(Snail、Slug、ZEB1、SIP1、Twist1),对比两种模型的差异。结果:LNCaP/HIF1α细胞模型中的两种细胞均不同程度地表达5种转录因子,其中Slug、Twist1有差异,表型转化后Slug表达升高,而Twist1表达降低(P<0.05);ARCaP细胞模型中的两种细胞均不同程度地表达Snail、Slug、ZEB1、SIP1,不表达Twist1,其中ZEB1、Slug有差异,表型转化后ZEB1、Slug表达升高(P<0.05)。结论:决定不同来源的前列腺癌EMT模型表型转化的转录调控机制各不相同,Slug可能是决定HIF1α诱导LNCaP细胞EMT表型转化的关键转录因子,而ZEB1、Slug则可能在ARCaP细胞EMT表型转化中起决定作用。     

TGFα和EGF对前列腺癌细胞系EGFR表达的调控作用

目的：探讨转化生长因子（TGF）α和表皮生长因子（EGF）对前列腺癌细胞系中表皮生长子受体（EGFR）表达的调控作用。方法：采用RT－PCR和Western印迹法分别对TGFα和EGF刺激前列腺癌细胞系LNCaP、PC3、ARCaP后EGFR mRNA表达及其蛋白水平进行定量分析。结果：EGF引起前列腺癌细胞系LNCaP、PC3、ARCaP的EGFR mRNA升高2－5倍,TGFα引起各细胞系EGFR mRNA升高2－10倍。TGFα使各细胞系EGFR不同程度升高;EGF处理的LNCaP EGFR蛋白水平略升高,PC3、ARCaP EGFR蛋白水平降低。结论：TGF／EGF-EGFR通路在前列腺癌发生发展中起重要作用;非依赖型前列腺癌中TGFα－EGFR自分泌环的作用可能强于EGF－EGFR自分泌环。     

结肠癌细胞CDH1基因启动子甲基化对E-上皮钙黏素和β-连接素表达的调控作用

目的 观察结肠癌细胞中上皮钙黏素基因( CDH1)启动子甲基化对上皮钙黏素(E-cadherin)和β－连接素(β-catenin)表达的影响.方法 通过甲基化特异性PCR(MSP)、逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)检测DNA甲基化抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预前后人结肠癌HT-29细胞株CDH1基因启动子甲基化状态及E-cadherin mRNA的改变,并运用免疫荧光标记及激光共聚焦观察E -cadherin和β-catenin在细胞内的表达及分布.结果 (1)HT-29细胞在用药前CDH1基因启动子甲基化扩增阳性,非甲基化扩增阴性,用5-Aza-CdR处理后CDH1基因启动子甲基化扩增阴性,非甲基化扩增阳性;(2)5-Aza-CdR处理前细胞RT-PCR不能扩增出E-cadherin mRNA特异性条带,5-Aza-CdR处理后则可检测到E-cadherin mRNA转录,且mRNA水平与药物的浓度呈正相关,平均灰度比值1 μmol/L时为0.491±0.011,2μmol/L时为0.568±0.013(P＜0.05;(3)5-Aza-CdR 处理前细胞未见E-cadherin表达,β-catenin主要表达于细胞质及细胞核中,5-Aza-CdR处理后在细胞膜可见E-cadherin及β-catenin表达.且随着5-Aza-CdR诱导E-cadherin的表达,β-catenin在细胞膜的分布增加,而在细胞质及细胞核的分布明显减少.免疫荧光双重染色显示β-catenin胞膜分布与E-cadherin一致.结论 CDH1基因启动子甲基化可能是导致结肠癌细胞E-cadherin表达缺失及β-catenin异位分布的重要因素.     

前列腺癌转移：宿主微环境在促进肿瘤细胞“上皮向间质转化”及向骨、肾上腺特异性地转移过程中的作用

研究者从转移前列腺癌患者的腹水中分离癌细胞，经筛选鉴定，建立一株具有高转移特性的细胞系-ARCaP。利用该细胞模型，对亲本ARCaP细胞系及ARCaP源性亚克隆细胞系的细胞遗传学、生长、迁移、侵袭、细胞间相互作用、药物敏感性及基因表达等方面进行比较。利用“连续心内注射肿瘤细胞SCID小鼠动物模型”分析体内ARCaP源性亚克隆细胞系的基因表达、细胞生物学特性及体内转移特点。进一步探讨宿主微环境对亲本ARCaP细胞系及ARCaP源性亚克隆细胞系在肿瘤进展、上皮细胞问质转化（EMT）及向骨、肾上腺转移过程中的作用。结果发现，ARCaP亚克隆细胞系ARCaP（E）细胞呈卵圆形，通过与宿主骨、肾上腺组织细胞的相互作用发生了EMT进而获得ARCaP（M）细胞系，其呈纺锤形，成纤维细胞状，表现出细胞间黏附力降低，具有高度骨、肾上腺转移特性。对亲本ARCaP细胞系及其亚克隆细胞系的细胞基因组分析证实了其克隆形成能力。ARCaP系列细胞系为研究前列腺癌骨、肾上腺转移以及研究EMT分子生物学基础提供了一种较理想的细胞模型。     

不同前列腺癌细胞系及其皮下肿瘤上皮间质转化特性鉴定

目的:通过比较不同人前列腺癌细胞系在SC ID鼠皮下成瘤特性,鉴定前列腺癌细胞系及其皮下肿瘤上皮、间质标志蛋白的表达情况,探讨前列腺癌细胞系成瘤过程与上皮-间质转化(EMT)之间关系。方法:将DU145、Tsu、PC3和LNCaP 4种人前列腺癌细胞系分别接种于SC ID鼠皮下,比较其成瘤特性;用W estern印迹法鉴定人前列腺癌细胞系及其相应皮下肿瘤钙粘蛋白、波形纤维蛋白的表达,并比较其成瘤前后的区别,探讨上皮间质转化与成瘤的关系。结果:EMT阳性细胞(DU145和Tsu)成瘤率、成瘤速度高于EMT阴性细胞(PC3和LNCaP),4种细胞系成瘤的上皮性的标志蛋白钙粘蛋白表达出现不同变化:DU145表达下调,PC3、LNCaP表达缺失,Tsu表达上调,共同特点是间质性的标志蛋白波形纤维蛋白表达消失。结论:EMT阳性细胞成瘤能力高于EMT阴性细胞,皮下肿瘤的形成过程中的确存在间质-上皮转化(MET)现象。     

前列腺癌细胞株LNCaP和IA8中转移相关蛋白的差异表达及意义

目的:从粘附因素及细胞骨架蛋白角度初步探讨前列腺癌细胞骨转移潜能的分子机制。方法:用Western印迹法鉴定转移潜能不同的两个前列腺癌细胞株(LNCaP和IA8)中E钙粘素和波形蛋白的表达差异情况,并初步分析其在前列腺癌转移过程中所发挥的作用。结果:E钙粘素在低转移细胞株LNCaP中高表达、在高转移细胞株IA8中缺失;而波形蛋白在这两种细胞中的表达情况恰与E钙粘素相反。结论:人前列腺癌高、低转移株之间确实存在转移表型(E钙粘素和波形蛋白)的表达差异,而这两种表达差异蛋白可能在促进或抑制前列腺癌转移的过程中发挥重要作用。     

前列腺癌转移:宿主微环境在促使上皮细胞间质转化并促进向骨和肾上腺转移中的作用

ARCaP细胞系是在转移前列腺癌患者腹水中建立的细胞系。该项研究鉴定了宿主微环境对ARCaP及ARCaP来源的细胞亚克隆在肿瘤演进,上皮细胞间质转化(EMT)及肿瘤向骨和肾上腺转移中的作用。研究者比较了ARCaP各亚克隆在细胞遗传特点、生长、迁移、侵袭、细胞间相互作用、药物敏感性及基因表达等方面的差异。利用联合免疫缺陷SCID小鼠连续心内注射动物模型来分析ARCaP亚克隆的体内基因表达、细胞行为及转移。研究表明,鹅卵形ARCaP(E)细胞与宿主骨及肾上腺细胞相互作用后发生EMT。纺锤形成纤维细胞样ARCaP(M)细胞则表现出低细胞黏…     

γ-干扰素对前列腺癌细胞粘附和侵袭能力影响的初步研究

目的：探讨γ-干扰素对前列腺癌细胞粘附和侵袭行为的影响。方法：用纤维粘连蛋白和层粘连蛋白处理细胞培养板，检测γ-干扰素对前列腺癌细胞系LNCaP和PC-3粘附作用的影响；用Transwell小室，以Matrigel和纤维粘连蛋白构建基底膜，检测γ-干扰素对前列腺癌细胞侵袭人工基底膜能力的影响；应用Western-blot法检测γ-干扰素对前列腺癌细胞膜粘连蛋白-2（annexin-2）表达的影响。结果：γ-干扰素未处理的两种人前列腺癌细胞系细胞LNCaP、PC-3粘附率分别为46％和40％，γ-干扰素处理的两种细胞系细胞LNCaP、PC-3粘附率分别为21％和23％，同种细胞系γ-干扰素处理组与未处理组间差异有显著性（P均〈0．05）。在相同细胞系γ-干扰素处理组较未处理组前列腺癌细胞24h侵袭能力明显降低（P均〈0．05）。Western印迹结果表明γ-干扰素可显著抑制annexin-2蛋白的表达（P〈0．05）。结论：γ-干扰素可能通过下调annexin-2的表达来抑制前列腺癌细胞的粘附和侵袭。     

Raptor调节前列腺癌上皮-间质转化机制研究

目的探讨Raptor调节前列腺癌上皮-间质转化(EMT)作用及机制研究。方法构建Raptor-shRNA慢病毒载体并筛选具有稳定转染Raptor-shRNA DU145细胞株,应用transwell观察沉默Raptor后DU145细胞株侵袭力的变化,Western Blot观察沉默Raptor后DU145细胞E-cadherin,β-catenin,N-cadherin和vimentin表达,以及RhoA活性表达。结果成功构建Raptor-shRNA DU145细胞株;transwell检测稳定转染Raptor-shRNA后DU145细胞侵袭力下降(P0.01);Western Blot检测显示该细胞株E-cadherin和β-catenin表达下降,N-cadherin和vimentin表达升高,RhoA活性表达下降。结论 Raptor与前列腺癌细胞EMT的发生有关,其作用可能是通过RhoA信号途径。     

上皮钙黏附素/β连环素在滑膜肉瘤中的表达及意义

目的通过研究上皮钙黏附素（Ecadherin）,β-连环素（β-catenin）以及ki-67在滑膜肉瘤中的表达变化,探讨上皮钙黏附素/β-连环素（E-cadherin/β-catenin,E-cad/cat）复合物与滑膜肉瘤的形态发生学及其进展的关系.方法采用免疫组织化学方法（ Envision 二步法）检测 Ecadherin,β-catenin 以及 ki-67 在26 例滑膜肉瘤（其中双相分化型6 例,单相分化型20 例）中的表达情况.结果 a）E-cadherin在7 例滑膜肉瘤中表达,阳性表达率为26.9%（7/26）,且主要表达在有上皮样分化区域的肿瘤细胞膜上,其表达与肿瘤的分型有关;b）β-catenin除表达于肿瘤细胞细胞膜上以外,57.7%（15/26）出现有意义的异常表达（表现为肿瘤细胞细胞浆或细胞核表达）,其异常表达与ki-67指数具有相关性（P＜0.01）.结论 a）Ecadherin/β-catenin介导了滑膜肉瘤中上皮样分化肿瘤细胞间的粘附,可能参与了该肿瘤的形态学发生;b）β-catenin的异常表达可能激活了相关信号传导通路,引起滑膜肉瘤肿瘤细胞的异常增殖,从而促进该肿瘤的发生、发展.     

多嘧啶序列结合蛋白1对前列腺癌细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响

目的检测多嘧啶序列结合蛋白1(PTBP1)在前列腺癌中的表达水平, 并探究PTBP1对前列腺癌细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法运用UALCAN数据库分析PTBP1基因在前列腺癌组织中的表达水平、PTBP1基因与前列腺癌患者总生存期(OS)的关系, 收集前列腺癌及癌旁组织, 采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)技术检测前列腺癌及癌旁组织、正常前列腺上皮细胞及前列腺癌细胞中PTBP1 mRNA和蛋白质的相对表达水平。在前列腺癌PC3细胞中转染siRNA-PTBP1, 将细胞分为转染组(si-PTBP1)和对照组(NC), 采用RT-qPCR和Western blot验证转染效率。利用细胞克隆形成实验和细胞计数盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力;利用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;利用Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)及EMT标志蛋白的表达水平;所有结果应用SPSS 26.0统计软件分析。结果 UALCAN数据库显示PTBP1基因在前列腺癌组织中表达水平升高(P<0....     

γ-干扰素对前列腺癌细胞粘附和侵袭能力影响的初步研究

目的：探讨γ-干扰素对前列腺癌细胞粘附和侵袭行为的影响。方法：用纤维粘连蛋白和层粘连蛋白处理细胞培养板，检测γ-干扰素对前列腺癌细胞系LNCaP和PC-3粘附作用的影响；用Transwell小室，以Matrigel和纤维粘连蛋白构建基底膜，检测γ-干扰素对前列腺癌细胞侵袭人工基底膜能力的影响；应用Western-blot法检测γ-干扰素对前列腺癌细胞膜粘连蛋白-2（annexin-2）表达的影响。结果：γ-干扰素未处理的两种人前列腺癌细胞系细胞LNCaP、PC-3粘附率分别为46％和40％，γ-干扰素处理的两种细胞系细胞LNCaP、PC-3粘附率分别为21％和23％，同种细胞系γ-干扰素处理组与未处理组间差异有显著性（P均〈0．05）。在相同细胞系γ-干扰素处理组较未处理组前列腺癌细胞24h侵袭能力明显降低（P均〈0．05）。Western印迹结果表明γ-干扰素可显著抑制annexin-2蛋白的表达（P〈0．05）。结论：γ-干扰素可能通过下调annexin-2的表达来抑制前列腺癌细胞的粘附和侵袭。