人精子膜抗原的提纯及分析

目的：提纯并分析人精子膜抗原。方法：用表面活性剂Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００及脱氧胆酸钠的ＴＤＯＣ缓冲液提取人精子膜抗原，并与超声法及反复冻融法所获精子抗原通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法分析比较其成分。结果：ＴＤＯＣ缓冲液提取的人精子膜抗原种类丰富，考巴斯亮蓝染色见２３条蛋白带，明显优于超声法或反复冻融法所提的抗原。     

骨肉瘤特异性细胞毒T淋巴细胞的诱导及其抗肿瘤特性的研究

目的 诱导崩肉瘤特异性细胞毒Ｔ淋巴细胞（ｏｓｔｏｓａｒｃｏｍａ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ,ＯＳＳ－ＣＴＬ）观察其体内外的抗肿瘤特性。方法 通过生化方法从ＨＯＳ－８６０３细胞系中提取纯化骨肉瘤相关抗原（ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ａｎｔｉｇｅｎ,ＯＳＡＡ）,并与低剂量ＩＬ－２,ＣＤ３单体协同刺激骨肉瘤致敏的淋巴细胞诱导产生ＯＳＳ－ＣＴＬ。结果     

肝癌病人树突状细胞诱导高效而特异的抗肝癌免疫

目的 以肝癌病人树突状细胞（ＤＣ）体外诱导抗肝癌免疫。方法 自肝癌病人外周血中分离出单个核细胞（ＰＢＭＣ０;以人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２肿瘤细胞的肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）激活ＤＣ;以粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白介素４（ＩＬ－４）联合刺激ＰＢＭＣ中ＤＣ;ＤＣ诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖,分化为细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）;检测ＣＴＬ及其上清液对ＨｅｐＧ２,ＢＥＬ－７４０２,ＬＯＶＯｅｙ ＨＯＳ－８６     

慢性细菌性前列腺炎对精液质量和精子功能的影响

为了探讨慢性细菌性前列腺炎引起不育的机理，本文对１７例经细菌学检查诊断为慢性细菌性前列腺炎（ＣＢＰ）的不育患者和７例正常生育力者进行了研究。包括精液常规检查、ＳＶＴ和精子低渗肿胀试验，精液丙二醛（ＭＤＡ）和精浆ＳＯＤ测定，抗精子抗体与精浆Ｔ细胞ＣＤ４／ＣＤ８比例测定等。结果提示：１．ＣＢＰ可通过多方面机制影响精液质量和男性生育力；２．ＣＢＰ患者精液中白细胞及其活性产物在精子膜过氧化机制中发挥重要作用，并影响精子功能。     

经气管超声多普勒测定心排血量的临床应用及评价

心脏手术和腹腔镜胆囊切除术（ＬＣ）各２０例，术中采用ＴＴＤ连续监测ＣＯ；心脏手术病人术前行彩色超声（ＥＣＨＯ）测定主动脉直径（ＡＯＤ）并与ＴＴＤ测定的ＡＯＤ进行相关分析。结果：ＴＴＤ与ＥＣＨＯ的ＡＯＤ高度相关（ｒ＝０．９３，ｎ＝２０）；心脏手术病人ＣＯ在术毕明显增加，ＳＶＲ降低，ＣＶＰ和ＨＲ无显著变化；ＬＣ病人ＣＯ在气腹后１、５ｍｉｎ明显降低，ＳＶＲ在气腹后增加，ＭＡＰ在气腹后５、１０ｍｉｎ升高，     

阿屈可林,普鲁卡因对血清超氧化物歧化酶含量影响的初步观察

本文采用放射免疫－双抗体法观测了静滴阿屈可林（ＡＴＣ）与普鲁卡因（ＰＲＯ）对血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量的影响。将３４例患者随机分为ＡＴＣ组与ＰＲＯ组，静滴ＡＴＣ及其与ＰＲＯ时间分别为１４２±１６分、１．１２±２３分。结果表明：连续静滴ＡＴＣ不影响血清ＳＯＤ－１水平，但静滴ＰＲＯ则降低其含量。     

慢性细菌性前列腺炎对精液质量和精子功能的影响

为了探讨慢性细菌性前列腺炎引起不育的机理，本文对１７例经细菌学检查诊断为慢性细菌性前列腺炎（ＣＢＰ）的不育患者和７例正常生育力者进行了研究，包括精液常规检查、ＳＶＴ和精子低涌肿胀试验，精液丙二醛（ＭＤＡ）和精浆ＳＯＤ测定，抗精子抗体与精浆Ｔ细胞ＣＤ４／ＣＤ８比例测定等。结果提示：１．ＣＢＰ可通过多方面机制影响精液质量和男性生育力；２．ＣＢＰ患者精液中白细胞及其活性产物在精子膜过氧化机制中发挥重要     

体外诱导骨肉瘤特异性细胞毒T淋巴细胞的实验研究

研究诱导骨肉瘤特异性细胞毒Ｔ淋巴细胞,及其体内外的抗肿瘤作用。方法：通过生化方法提取纯化骨肉瘤相关抗原,并与低剂量ＩＬ２、ＣＤ３ＭｃＡｂ协同刺激骨肉瘤致敏的淋巴细胞诱导产生ＯＳＳ－ＣＴＬ。结果：ＯＳＳ－ＣＴＬ表型特征为以ＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＴＬ为主的异质细胞群;对ＯＳＡＡ相关的肉瘤细胞显示高亲和杀伤活性。     

溶脲脲原体与精子膜蛋白共同抗原分析

本文通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和应用抗Ｕｕ血清作免疫印迹技术证明，人精子膜蛋白有６条蛋白带，Ｕｕ与人精子膜蛋白间有２条带为共同抗原，分子量约为６９ｋＤａ和６４ｋＤａ。进一步应用兔抗Ｕｕ血清对正常人精子涂片作ＡＢＣ免疫酶染色，显示精子膜及尾部呈棕黄色ＡＢＣ阳性反应。实验证明，人精子膜蛋白与Ｕｕ间确有共同抗原存在。     

人骨形成蛋白1全基因cDNA的克隆与序列分析

目的　克隆人骨形成蛋白１（ Ｏ Ｐ１） 全基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ,研究其结构与功能。方法　取新鲜胎盘组织提取总 Ｒ Ｎ Ａ,分别以 Ｏｌｉｇｏ（ｄ Ｔ） 、随机引物及特异引物 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ。以 Ｓａｎｇｅｒ 双脱氧链终止法作序列测定。结果　以 Ｏｌｉｇｏ（ｄ Ｔ） 引导的 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 仅扩增出 Ｏ Ｐ１ 基因３′端５６０ｂｐ 片段,以随机引物及特异引物引导的 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 扩增出５′端７５０ｂｐ 片段,重组连接两片段得到 Ｏ Ｐ１ 全基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ;序列测定显示５ 个核苷酸变异,但编码的氨基酸相同。结论　首次从中国人胎盘组织克隆到 Ｏ Ｐ１ 全基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ。与 Ｇｅｎ Ｂａｎｋ 中的 Ｏ Ｐ１ 序列比较,中国人 Ｏ Ｐ１ 基因之中存在５ 个简并密码子。     

人精子RNA的提取及含量分析

目的建立可靠的提取人精子RNA的方法,分析其含量并用于检测基因mRNA。方法9例正常精液标本液化后,经Percoll纯化,用体细胞裂解液(含0.1%十二烷基硫酸钠和0.5%Triton X-100的水溶液)于0℃处理15 min去除精子以外的细胞。用RNeasy Kit提取精子RNA,微量核酸测定仪测定RNA量。RNA用于逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测β-Actin、精子特异性阳离子通道2(CatSper2)、鱼精蛋白2(Protamine-2)mRNA,同时,检测c-Kit、CD4、上皮细胞钙粘蛋白(E-Cad-herin)mRNA,分别排除生精细胞、白细胞和上皮细胞的污染。结果体细胞裂解液于0℃处理15 min能去除精子以外的细胞,使精子RNA提取量提高(2.2~4.9倍)。9例正常精液标本RNA量为(233.5±75.3)ng/106精子。所有标本RNA用RT-PCR,均成功扩增β-Actin、CatSper2、Protamine-2,但扩增c-Kit、CD4、E-Cadherin未见目的条带。结论人精子中含微量RNA,本提取方法能提取人精子中微量RNA,且避免其他细胞污染,可供人精子RNA研究和临床检测选用。     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.     

人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

目的 对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣,以确定可供临床使用的标准的制备流程.方法 将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取,制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化(S-100、Col I)和透射电镜、氮含量测定等检测,观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况.结果 分别萃取2次持续24 h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底,纵切片上未见任何细胞,红染的神经内膜呈波浪状纵形排列,轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙;S-100染色呈阴性;Col I染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构,而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构.透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义.氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低.结论 使用Triton X-100处理24 h再分别脱氧胆酸钠24 h持续萃取2次,可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程.