胃窦癌肝十二指肠韧带淋巴结微转移与清扫

目的 检测进展期胃窦癌肝十二指肠韧带淋巴结微转移状况,探讨进展期胃窦癌根治术肝十二指肠韧带淋巴结清扫的必要性.方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,以细胞角蛋白20(CK20)mRNA为标志基因,对45例进展期胃窦癌患者的86枚肝十二指肠韧带淋巴结标本进行检测.结果 45例进展期胃窦癌患者有23例出现肝十二指肠韧带淋巴结CK20阳性(51.11%),与常规病理检查相比,存在显著性差异(P＜0.01);常规病理检查阴性的86枚淋巴结有46枚CK20阳性(53.49%),亦存在显著性差异(P＜0.01).肝十二指肠韧带淋巴结微转移与临床分期、浸润深度以及肿瘤分化程度显著相关.结论 RT-PCR技术检测CK20 mRNA是诊断胃窦癌淋巴结微转移敏感而特异的方法,进展期胃窦癌根治术应包括肝十二指肠韧带淋巴结的清扫.     

细胞角蛋白18基因诊断胃癌淋巴结微转移

目的:建立RT-PCR检测细胞角蛋白-18（CK18）mRNA表达的方法,判断胃癌淋巴结内微转移状况,探讨18 mRNA表达在胃癌患者淋巴结微转移中的临床意义。方法:以细胞角蛋白18 mRNA为标志基因,用RT-PCR法检测35例胃癌的298枚淋巴结及良性胃病变的淋巴结20枚。结果:对照的良性胃病变淋巴结无CK18 mRNA表达,胃癌组的298枚淋巴结病理检查阳性99枚（33.2%）,而RT-PCR法检测细胞角蛋白阳性133枚（44.6%）,差异有显著性（P<0.05）。病理检查为阴性的199枚中,经CK18 mRNA RT-PCR法检测有34枚阳性（17.1%）。 结论:用RT-PCR法检测胃癌淋巴结CK18 mRNA是诊断胃癌淋巴结微转移敏感而特异的方法,对判断预后、指导术后治疗有重要意义。     

RT-PCR检测CK19 mRNA青年结直肠癌患者淋巴结微转移

目的利用RT-PCR检测CK19 mRNA技术,从分子水平探讨在青年结直肠癌患者区域淋巴结微转移的价值及临床意义。方法采用RT-PCR扩增,对角蛋白CK19检测。对30例结直肠癌患者的癌组织标本和108个淋巴结进行检测,检测良性结直肠疾病(结直肠息肉、憩室等)手术的20例患者的正常肠周淋巴结20枚作为对照组,同时行常规病理检查。结果 30例结直肠癌患者均有CK19 mRNA表达,108个淋巴结中有47个存在CK19 mRNA阳性表达,阳性率为43.5%;常规病理检查有25枚有癌转移,阳性率为23.2%;20例良性病变患者30枚淋巴结CK19mRNA表达为阴性。结论 RT-PCR扩增CK19 mRNA检测结直肠癌区域淋巴结微转移,是一种敏感而特异性的检测方法,对青年结直肠癌患者指导治疗,有较大的临床意义。     

大肠癌淋巴结中CEA、CK20和MMP-7mRNA表达诊断肿瘤微转移的意义

目的探讨大肠癌淋巴结中癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白(CK20)和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)mRNA的表达及其与肿瘤微转移的关系。方法分别用RT-PCR技术检测CEA、CK20、MMP-7基因的mRNA在106例大肠癌患者628个淋巴结及18例良性肠道疾病患者45个淋巴结中的表达情况,并与常规病理学检查进行比较。结果大肠癌患者淋巴结中CEA、CK20、MMP-7mRNA表达阳性率分别为41.6%(261/628)、42.7%(268/628)和56.1%(352/628),病理学检查转移阳性率为22.3%(140/628);CEA、CK20、MMP-7mRNA的阳性检出率均明显高于病理学阳性检出率(均P<0.01)。而18例良性肠道疾病患者45个淋巴结三者表达均阴性。结论RT-PCR技术检测淋巴结CEA、CK20、MMP-7mRNA的表达可用于诊断大肠癌的微转移,其结果较常规病理学检查敏感,对临床分期、预后评估具有重要意义。     

腹腔镜结直肠癌根治术对血循环微转移影响的研究

目的 检测腹腔镜结直肠癌根治术患者外周静脉血肿瘤标志物细胞角蛋白20(CK20) mRNA的表达,探讨腹腔镜结直肠癌根治术对术后肿瘤细胞血循环微转移的影响及临床意义.方法 应用FQ-PCR方法检测24例行腹腔镜辅助下结直肠癌根治术和31例传统开腹结直肠癌根治术患者外周静脉血的CK20 mRNA,并用免疫组化(IHC)SP法测定术后组织标本的CK20和CD44 v6的表达水平.结果 TNM分期Ⅲ期结直肠癌患者外周静脉血的CK20 mRNA阳性表达率显著高于Ⅰ期+Ⅱ期患者(P<0.05).腹腔镜辅助下结直肠癌根治术患者CK20手术开始时阳性率为29.16%(7/24),手术结束时阳性率为37.50%(9/24),两组之间差异无统计学意义(P>0.05),手术前后和开腹组比较,差异无统计学意义(P>0.05).CK20 mRNA阳性表达患者结直肠癌组织中CK20(57.14%)和CD44 v6(71.43%)阳性表达率明显高于CK20 mRNA阴性表达患者的CK20(35.29%)和CD44 v6(47.06 %)阳性表达率(P<0.05).结论 结直肠癌患者外周静脉血CK20 mRNA的水平和组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关,腹腔镜结直肠癌根治术和传统开腹手术一样,并不增加外周静脉血CK20 mRNA的阳性率,不增加术后肿瘤血行微转移的危险性.     

RT- PCR检测乳腺癌前哨淋巴结CK19 mRNA 的表达

目的探讨乳腺癌前哨淋巴结定位和检测CK19 mRNA的临床意义。方法对42例乳腺癌患者术中注射美蓝定位前哨淋巴结,用RT-PCR检测前哨淋巴结CK19 mRNA表达以确定转移病灶。结果42例乳腺癌患者中成功确定了前哨淋巴结35例,共63枚,每例1~4枚,平均每例1.8枚,检出成功率为83.33%。35例患者前哨淋巴结中,病理学证实有7例为肿瘤细胞所浸润,阳性检出率为20.00%;RT-PCR检测有20例CK19呈阳性表达,阳性检出率为57.14%,两种检测方法的阳性检出率有显著差异(P<0.05)。结论利用RT-PCR技术检测CK19 mRNA表达可明显提高乳腺癌前哨淋巴结转移病灶的检出率。     

Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结微转移规律的研究

目的 探讨几个问题(1)Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结微转移比率;(2)淋巴结微转移与肿瘤大小、病理类型、细胞分化程度、部位、分型、分期进行Logstic回归分析,确定影响微转移的主要因素;(3)探讨微转移的方式、顺序.方法 对91例非小细胞肺癌清扫的肺门和隆突下淋巴结进行MCK(AEl/AE3)免疫组化标志检测微转移的存在.另外收集45例肺部良性病变手术时切除的肺门淋巴结45枚和Ⅱ期、Ⅲ期肺癌常规病理检查阳性的肺门淋巴结45枚进行MCK(AEI/AE3)免疫组化(SP法)标志,分别作为阴性和阳性对照.结果 45例肺部良性病变手术时切除的肺门淋巴结45枚进行MCK(AEI/AE3)免疫组化标志均为阴性;Ⅱ期和Ⅲ期常规病理检查阳性的肺门淋巴结45枚进行MCK(AEl/AE3)免疫组化标志均为阳性.91例Ⅰ期非小细胞肺癌总的微转移率为49%(45/91).结论 Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结中存在微转移;Ⅰb期非小细胞肺癌微转移率明显高于Ⅰa期;有必要对Ⅰb期非小细胞肺癌进行术后化疗;肿瘤分期和分化程度是影响淋巴结微转移的主要因素;淋巴结微转移遵循肺门到纵隔的途径;腺癌存在跳跃式微转移.     

肺癌转移监测—影像学与细胞角蛋白19—mRNA对照应用研究

目的：建立一种利用影像学和细胞角蛋白19－mRNA(CK19-mRNA)全面评估肺癌患者癌细胞转移状况的方法。并探讨其临床意义。方法：利用影像学手段检测肺癌患者临床肿瘤转移灶,同时采用逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）方法检测肺癌区域性淋巴结和肺癌患者外周血CK19－mRNA表达,来评估肺癌患者亚临床转移（微转移）情况。结果（1）在临床癌转移灶检测方面,影像学具有较高的灵敏度,能够发现1cm以上的转移灶,（2）在亚临床转移检测方面：（1）将CK19 RT－PCR和传统的病理学检测方法进行对比9枚病理学检测阳性淋巴结CK19RT－PCR均为阳性,31枚病理学检测为阴性的淋巴结中有10枚CK19 RT－PCR阳性。（2）将CK19 RT－PCR和影像学进行对比,有5枚淋巴结经CT或MRI确诊为转移（标准为短径大于1cm),CK19 RT-PCR均为阳性;而经CT或MRI诊断为可疑或无临床意义的35枚淋巴结中,CK19 RT－PCR有14枚阳性。（3）30例肺癌患者外周血标本中有12例CK19 RT－PXR阳性（40％）,15例肺良性病变及5例正常人外周血中只有1例阳性。结论：（1）影像学检查是诊断肺癌临床转移可靠和主要的手段,具有很高的灵敏性。（2）在微转移检测方面,CK19 RT－PCR可作为一个标志物来检测肺癌微转移,并且有很高的灵敏度和特异度。（3）CK19RT－PCR结合影像学检查,有助于全面评估肺癌患者的转移状况;定期检测外周血CK19－mRNA,尚可作为疗效的观察指标。     

改良巢式逆转录聚合酶链反应检测大肠癌血中微转移

目的探讨改良巢式RT-PCR法检测大肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达情况,并分析其与微转移的关系,建立一种简便、快速的检测血中癌细胞微转移的方法。方法采用改良的巢式RT-PCR技术检测大肠癌患者及正常对照组外周血CK20mRNA的表达。结果CK20mRNA在正常对照组中均无表达,在大肠癌患者中阳性表达率为55.4%（62/112）。不同细胞分化程度大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率无显著性差异（P〉0.05）;而不同Dukes分期大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率有显著性差异（P〈0.05）。结论改良的巢式RT-PCR技术检测血中微转移大肠癌细胞的CK20mRNA具有简便、快速、灵敏的优点,有助于癌细胞微转移的早期诊断,有助于指导辅助化疗和监测疗效。     

Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结微转移规律的研究

目的探讨几个问题：（1）Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结微转移比率；（2）淋巴结微转移与肿瘤大小、病理类型、细胞分化程度、部位、分型、分期进行Logstic回归分析，确定影响微转移的主要因素；（3）探讨微转移的方式、顺序。方法对91例非小细胞肺癌清扫的肺门和隆突下淋巴结进行MCK（AEI／AE3）免疫组化标志检测微转移的存在。另外收集45例肺部良性病变手术时切除的肺门淋巴结45枚和Ⅱ期、Ⅲ期肺癌常规病理检查阳性的肺门淋巴结45枚进行MCK（AEI／AE3）免疫组化（SP法）标志，分别作为阴性和阳性对照。结果45例肺部良性病变手术时切除的肺门淋巴结45枚进行MCK（AEI／AE3）免疫组化标志均为阴性；Ⅱ期和Ⅲ期常规病理检查阳性的肺门淋巴结45枚进行MCK（AEI／AE3）免疫组化标志均为阳性。91例Ⅰ期非小细胞肺癌总的微转移率为49％（45／91）。结论Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结中存在微转移；Ⅰb期非小细胞肺癌微转移率明显高于Ⅰa期；有必要对Ⅰb期非小细胞肺癌进行术后化疗；肿瘤分期和分化程度是影响淋巴结微转移的主要因素；淋巴结微转移遵循肺门到纵隔的途径；腺癌存在跳跃式微转移。     

CK19及nm23-H1基因联合检测在胃癌淋巴结微转移中的研究

目的 研究胃癌淋巴结微转移情况以判断肿瘤预后，指导肿瘤的综合治疗。方法 采用RT-PCR方法对胃癌上皮及淋巴结进行CK19mRNA的检测及胃癌上皮细胞nm23-H1mRNA的检测。结果 6例正常淋巴结无CK19mRNA表达，20例胃癌组织均有CK19mRNA表达，其中有12例淋巴结存在CK19mRNA表达，占60%，而病理组织学检查只有4例存在淋巴结转移，占20%，另外该12例有淋巴结转移的胃癌组织中有9例nm23-H1mRNA低表达，结论 应用RT-PCR方法对胃淋巴结CK19mRNA及胃癌组织nm-H1mRNA进行联合检测，可提高胃癌淋巴结微转移的早期诊断率。     

巢式RT-PCR技术检测肺癌76例微量癌细胞转移分析

目的 :建立检测肺癌患者外周血及淋巴结微转移癌细胞的敏感的分子检测方法 ,并探讨其临床应用的意义。方法 :采用巢式逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)技术特异引物扩增 CK19- m RNA,以检测肺癌患者外周血及淋巴结中 CK19- m RNA的表达情况。分析CK19- m RNA扩增结果与患者临床指标的关系。结果 :76例肺癌患者外周血标本中 39例CK19- m RNA阳性 ,阳性率为 5 1 .3% ,2 7例肺良性病变中仅 1例阳性 ,阳性率为 3.7% ,1 5例健康对照者均为阴性。全部患者 1 5 7枚淋巴结中 CK19- m RNA检测出阳性率为 38.9%( 61 / 1 5 7) ,常规病理方法检出阳性率为 1 4.6% ( 2 3/ 1 5 7) ,两种方法比较 ,有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ,且 HE染色阴性的 1 34枚淋巴结中 ,经 RT- PCR法证实存在癌转移的阳性率为 2 8.3% ( 38/ 1 34) ,两组比较有显著性差异 ( P<0 .0 5 )。结论 :巢式 RT- PCR是一种特异性和敏感性均较高的癌细胞微量转移检测方法 ;可能有助于肺癌细胞微转移的早期诊断。     

RT-PCR扩增K19检测胃癌区域淋巴结微转移

目的：探讨RT-PCR检测胃癌区域淋巴结微转移的价值及其应用前景。方法：以病理组织学和RT-PCR扩增K19对30例胃癌患者的癌组织标本及126个淋巴结进行检测。结果：30例胃癌患者癌组织均有K19 mRNA表达;126个淋巴结中,组织学阳性26个(20.6%),而RT-PCR阳性42个(33.3%),RT-PCR扩增K19及内参基因β-actin后,所有瘤组织、转移淋巴结显示460和540 bp的扩增片段,非肿瘤患者的淋巴结中仅显示540 bp。 结论：RT-PCR扩增K19 mRNA检测胃癌区域淋巴结微转移是一种敏感、特异的检测方法,优于常规病理组织学。     

CEA mRNA检测诊断胃周围淋巴结癌细胞微转移

目的:评估癌胚抗原(CEA)mRNA在诊断胃癌细胞淋巴结微转移方面的应用价值。方法:以胃周围淋巴结为检测标本,用反转录套式聚合酶链反应技术(RT-NP-PCR)检测CEA mRNA,用常规病理学方法检查癌细胞。结果:胃癌组胃周围淋巴结38.8?A mRNA阳性,病理学检测17.9%癌细胞阳性;良性胃病组胃周围淋巴结均阴性。RT-NP-PCR检测CEA mRNA与病理学检查癌细胞的结果比较,有非常显著性差异(P<0.01)。结论:CEA mRNA指标诊断胃癌细胞淋巴结微转移的敏感性较高,具有较高的应用价值,可以在病理学诊断胃癌淋巴结转移时开展应用。     

胃癌患者外周血细胞角蛋白20mRNA的检测及临床意义

目的　采用逆转录聚合酶链反应检测进展期胃癌患者外周血中细胞角蛋白 2 0 (cytokeratin 2 0 ,CK2 0 )mRNA的表达 ,以检测胃癌外周血循环中微转移的情况 ,并比较CK2 0mRNA的阳性检出率与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤部位和胃癌组织的分化程度的关系。方法　 6 0例胃癌患者和 2 0例慢性胃炎患者分别作为试验组和对照组。采用密度梯度离心法分离获取全部病例外周静脉血中的单个核细胞 ,随后应用逆转录聚合酶链反应的方法检测其中的CK2 0mRNA表达情况。结果　试验组中有 32例患者外周血循环中有阳性表达 ,阳性率为 5 3.3% ;而在对照组患者外周血中无 1例标本检出细胞角蛋白 2 0mRNA ;两组间的阳性率差异具有显著性 (P <0 .0 0 5 ) ;癌细胞的检出率与胃癌组织的分化程度呈正相关 (P <0 .0 5 ) ,而与胃癌患者的性别、年龄和肿瘤部位等因素无明显相关 (P >0 .0 5 )。结论　CK2 0mRNA可作为标志物用于检测胃癌的血行转移 ;CK2 0mRNA的阳性检出率与胃癌组织的分化程度具有相关性。     

pN0胃癌淋巴结微转移的研究

目的：证实常规病理检查（HE染色）结果全部阴性的胃癌淋巴结（pN0）存在微转移（MM）,探讨pN0胃癌淋巴结微转移与胃癌临床病理学的关系。方法：选取行胃癌根治术,常规病理检查（HE染色）证实淋巴结转移全部阴性的胃癌（腺癌）病例40例,收集其淋巴结蜡块146个,淋巴结共298枚。分别用鼠单抗CK7和鼠单抗CK19行免疫组织化学染色,确定其有无微转移。结果：两组有10例（25%）共计26枚淋巴结（8.72%）发现微转移。其中CK7组6例,阳性率15%,CK19组4例,阳性率10%。胃癌微转移淋巴结的检出数量分别为：CK7组16枚（5.37%）,CK19组10枚（3.35%）。胃癌淋巴结微转移的存在与肿瘤的侵及深度有关（P〈0.05）,与患者的性别、年龄,肿瘤部位、大小等无关（P〉0.05）。结论：常规病理学检查全部阴性的胃癌淋巴结存在微转移,CK7和CK19均是免疫组化检测胃癌淋巴结微转移的理想指标,对指导胃癌的手术治疗具有积极意义。     

巢式PCR检测胃癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的：对外周血CK19 mRNA基因表达的检测,探讨对胃癌患者微转移的诊断价值。方法：采用巢式RT-PCR方法检测63例胃癌患者,20例健康志愿者外周血CK19 mRNA的表达情况。结果：胃癌患者外周血中CK19 mRNA的阳性检出率为36.5%,并与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度有关（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移无关（P〉0.05）,而健康志愿者外周血中CK19 mR-NA无1例阳性表达。结论：CK19 mRNA可以作为判断胃癌患者外周血微转移的肿瘤标志物。     

免疫组化检测胃癌淋巴结微转移的临床意义

目的 探讨胃癌淋巴结微转移与临床病理参数关系及临床意义。方法 采用免疫组织化学方法,选用细胞角蛋白CK19、细胞角蛋白CK20及CD44v6检测43例常规病理检查未发现的胃癌周围转移淋巴结453枚。结果 43例胃癌患者中16例有淋巴结微转移(37.2％)。微转移与浸润深度有关(P<0.05),且PT3、PT4患者微转移阳性率明显高于PT1、PT2患者。低分化程度癌微转移阳性率明显高于高分化程度癌(P<0.05)。微转移检测使28.1％的胃癌重新分期。结论 对常规检查淋巴结为阴性胃癌的微转移检测有助于临床准确分期、指导临床治疗及对预后的估计。