南方汉族HLA-DQA1基因与糖尿病视网膜病变相关性的研究

目的研究南方汉族HLA—DQA1基因与糖尿病视网膜病变的相关性。方法实验组收集60名临床诊断为糖尿病视网膜病变（DRP）患者的血样．对照组为52名健康的志愿捐血者血样．采用rSSO HLA流式磁珠分型并辅以PCR-SSP方法进行HLA—DQA1基因定型．统计实验组和对照组HLA-DQA1的基因频率．采用Woolf法计算相对危险度值。结果在糖尿病视网膜病变的实验组和对照组中，均检出了10种DQA1等位基因．检出的等位基因频率最高的为DQA1＊0102：实验组DQA1＊0501的基因频率显著高于正常对照组．计算RR值为2．73。结论南方汉族中DQA1＊0501的基因可能为DRP的易感性标志．     

CD40基因多态性与Graves病的相关性研究

目的：观察CD40基因启动子区多态性在中国汉族人群中的分布频率及其与Graves病易感性的关系。方法：应用聚合酶链反应一直接测序法对367例Graves病患者和373例正常对照者CD40基因启动子区多态性进行检测，分析该基因多态性与Graves病的相关性。结果：中国汉族人群CD40基因启动子区存在两处变异：一295C／T和-1C／T，两位点紧密连锁，D’=0．98。两位点基因型、等位基因型和单倍型分布频率在病例一对照比较中均无统计学差异。但在女性人群中，-295T和-1C与Graves病有明显关联，P值分别为0．025和0．011；单倍型CT在女性病例组和对照组的频率分别为36％和44％。P=0．007。结论：CD40基因启动子区多态性可能与女性Graves病发病有关，但与男性Graves病发病无关。     

广西沿海地区Graves病与HLA-DQA1、DQBIDRB1*09等位基因的相关性研究

目的研究广西沿海地区Graves病（gravesdisease,GD）患者中HLADQA1、DQB1及DRB1＊09等位基因的分布情况及其关系。方法采用序列特异性引物PCR（PCR—SSP）方法检测162例广西沿海地区GD患者及90例健康者的HLA—DQA1、DQB1及DRB1＊09的基因型,计算和比较各组间等位基因频率。结果与健康对照组比较,HLADQA1＊0501、DQB1＊0303和HLA—DRB1＊0901在GD患者组的分布频率明显增高（P〈0．05）;GD女性患者组中的HLADQA1＊0301频率比健康对照组女性明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HLADQA1＊0501、HLA-DQB1＊0303及HLADRB1＊0901是广西沿海地区GD遗传易感基因;DQA1＊0301是广西沿海地区女性GD患者中的遗传易感基因。     

急性冠脉综合征患者MMP-3基因启动子5A/6A的多态性分析

目的　建立MMP 3基因启动子 5A/6A多态性的快速基因型分析方法 ,并且探讨此多态性对湖北武汉地区汉族人群急性冠脉综合征危险性的可能影响。方法　通过设计错配引物以及多聚酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)分析方法 ,同时结合单链构象长度多态性 (SSCP)分析 ,检测了湖北地区10 3例汉族急性冠脉综合征患者及 10 0例健康成人的MMP 3基因 16 12 (5A/6A)的基因型。结果　急性冠脉综合征组与健康对照组MMP 3基因的 5A/6A +5A/5A基因型频率分别为 4 1 7%、 2 4 % ,5A等位基因频率分别为 2 1 8%、 13% ,两两比较均有显著性差异 (P <0 0 5 )。 5A/6A +5A/5A基因型的OR值为 2 2 6 9(95 %CI :1 2 4 1～ 4 14 9,P =0 0 0 7)。结论　MMP 3基因 5A/6A多态性与急性冠脉综合征危险性有关 ,并可能在冠心病的发生发展中起重要作用     

血管紧张素转换酶基因多态性与肝肾综合征相关研究

目的　探讨血管紧张素转换酶 (ACE)基因插入 /缺失 (I/ D)多态性与失代偿性肝硬化并发肝肾综合征 (HRS)之间的关系。方法　应用聚合酶链反应方法扩增 5 6例失代偿性肝硬化并发 HRS患者及 6 0例正常对照组 ACE基因上 DNA片断 ,根据 I/ D判断其多态性 ;同时各例均采血测丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、血清肌酐 (SCr)及尿素氮 (BU N)等指标 ,并测定肾小球滤过率 (GFR) ,比较不同基因型间上述指标的差异显著性。结果　 HRS患者各基因型及等位基因频率与对照组间差异均无显著性 (P均 >0 .0 5 ) ;I等位基因频率均显著高于 D等位基因频率 (P均 <0 .0 1)。正常对照组中 3种基因型频率间差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;HRS组中 II基因型频率显著高于 ID型及 DD型 (P均 <0 .0 5 )。 II基因型的 BU N与 SCr均显著高于 ID型及 DD型(P均 <0 .0 5 ) ,GFR显著低于 ID型及 DD型 (P均 <0 .0 5 )。结论　 ACE基因多态性与失代偿性肝硬化并发HRS的发生率有关 ,II基因型可能为失代偿性肝硬化易并发 HRS的遗传学方面因素 ;失代偿性肝硬化并发HRS患者中 ,II基因型个体的肾功能衰竭程度重于 ID型及 DD型。     

鼻咽癌患者谷胱甘肽S转移酶M_1基因多态性研究

目的探讨鼻咽癌 (NPC)患者的GSTM1基因多态性。方法采用内参照PCR对NPC患者的基因组DNA进行GSTM1基因型检测。结果NPC患者GSTM1空白基因型频率为 6 0 .0 % ,对照组为 4 5 .0 % ,两者差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,其OR =1.833,95 %CI =1.0 4 6～ 3.14 7;鳞癌的空白基因型频率为 6 0 .5 % ,明显高于腺癌的5 0 .0 % (χ2 =5 .4 0 6 ,P <0 .0 1) ;吸烟者空白基因型个体患鼻咽癌的危险性显著增加 (OR =2 .813,95 %CI=1.35 3～ 6 .0 12 ,P <0 .0 1) ,而不吸烟者的危险性增加不明显 (P >0 .0 5 )。结论GSTM1基因多态性与NPC患者的遗传易感有关 ,与NPC的病理类型也有关 ,吸烟者的GSTM1空白基因型个体更易患NPC     

Ⅱb型高脂蛋白血症低密度脂蛋白受体相关蛋白四核苷酸重复序列(TTTC)n基因多态性研究

目的　探索中国人Ⅱb型高脂蛋白血症患者低密度脂蛋白受体相关蛋白 (LRP)四核苷酸重复序列 (TTTC)n基因多态性与血清脂质、脂蛋白和载脂蛋白水平的关系。方法　采用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术 ,分别对 72例Ⅱb型高脂蛋白血症患者及 10 1例正常健康人的LRP(TTTC)n基因多态性进行基因型检测 ,同时对TG、TC、LDL C、HDL C、ApoA、ApoB浓度进行测定。结果　Ⅱb型高脂蛋白血症患者的TG、TC、LDL C、ApoB较正常对照组显著性升高 (P <0 .0 1) ;而且Ⅱb型高脂蛋白血症组TC、LDL C、ApoB由 5 / 5、5 / 6、向 6 / 6基因型变化中存在渐降趋势 ,且有统计学意义 (P <0 .0 1) ,而正常对照组也有类似的变化趋势 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　Ⅱb型高脂蛋白血症患者LRP四核苷酸重复序列 (TTTC)n不同基因型与血脂水平有关     

IL-5基因启动子多态性与Graves病相关性探讨

目的：检测皖南地区正常人群和Graves病患者中IL-5基因的启动子区的多态性,并分析该基因遗传多态性与Graves病易感性之间的关系。方法：采用直接测序法在华东地区汉族人群中检测369例Graves病患者和374例正常对照人群IL-5基因启动子区的多态性位点,并分析其与Graves病的相关性。结果：皖南地区汉族人群IL-5基因启动子区仅检测到1个单核苷酸多态性（SNP）：-746T〉C。在病例组等位基因频率为0.69和0.31,在对照组频率为0.70和0.30,差异无统计学意义。结论：皖南地区汉族人群的IL-5基因的启动子区多态位点可能与Graves病的易感性无关。     

青海地区藏族HLA-DQA1基因多态性与慢性阻塞性肺疾病相关性研究

目的探索青海地区藏族HLA-DQA1基因多态性与慢性阻塞性肺疾病的相关性。方法回顾性选取2016年7月至2017年8月于接受治疗的30例藏族慢性阻塞性肺疾病患者为观察组,另收集30例身体健康的藏族人外周血为对照组。收集两组患者的一般资料进行比较,统计并记录两组患者的等位基因频率分布情况,进行独立危险因素分析。结果观察组患者DQA1*0301的等位基因频率36. 36%显著高于对照组9. 09%,DQA1*0102的等位基因频率6. 82%显著低于对照组40. 91%,差异具有统计学意义(P 0. 05)。DQA1*0301是造成HLA-DQA1等位基因人群患慢性阻塞性肺疾病的独立危险因素(P 0. 05)。结论青海地区藏族HLA-DQA1基因多态性与慢性阻塞性肺疾病具有显著相关性,DQA1*0301等位基因与慢性阻塞性肺疾病的发生具有直接联系。     

编码前蛋白转化酶枯草溶菌素9基因E670G多态性与中国汉族人群大动脉粥样硬化性卒中的相关性

目的探讨编码前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因E670G单核苷酸多态性与动脉粥样硬化型缺血性脑卒中患病风险以及血液中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的相关性。方法选取TOAST分型为动脉粥样硬化型缺血性卒中患者216例为病例组,根据其发病机制分为a(动脉-动脉栓塞亚型)、b(穿支动脉口闭塞亚型)、c(低灌注栓子清除功能下降亚型)、d(混合型亚型)共4个亚型组。选取无脑卒中症状的健康体检者192例为对照组。选取PCSK9基因的E670G位点,利用PCR酶切法进行基因分型。分析基因多态性与脑卒中患病风险的相关性,以及各亚型组与患病风险的相关性。结果与对照组比较,病例组PCSK9基因E670G等位基因G的频率显著增高(52. 8%vs. 41. 1%,P 0. 05),病例组AG和GG基因型的频率显著增高(57. 4%vs. 44. 8%,24. 1%vs. 18. 8%,P 0. 05)。各亚组基因型分布无显著差异(P 0. 05)。与对照组比较,a组、b组等位基因G的基因型频率显著增高(P 0. 05),GG基因型的频率也显著增高(P 0. 05)。c组、d组的等位基因G、GG基因型频率与对照组比较无显著差异(P 0. 05)。结论 PCSK9 E670G等位基因是动脉粥样硬化型缺血性脑卒中的易感基因。PCSK9 E670G等位基因与动脉粥样硬化型缺血性脑卒中的患病风险增高相关。     

载脂蛋白E外显子4基因多态性与Alzheimer′s病

探讨了载脂蛋白E (apoE)外显子 4基因多态性与Alzheimer′s病的关系。应用聚合酶链式反应扩增apoE外显子 4基因片段 ,对扩增片段用HhaⅠ酶切消化后进行基因分型 ,并用DNA测序技术对分型结果予以证实。Alzheimer′s病组与年龄匹配对照组在apoE外显子 4ε3/4基因型频率和ε4等位基因频率分布上的差异有显著性 (χ2 =8 91,P <0 0 5 ;χ2 =9 49,P<0 0 1) ,Alzheimer′s病组血清apoAⅠ水平显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ,而TC、Trig、Lp (a) ,HDL C、LDL C、apoB两组间没有显著性差异 ,有apoEε 4等位基因个体患Alzheimer′s病风险为无ε 4个体的 3倍 ,比值比 (OR)为 2 932。总之 ,apoEε 4等位基因与Alzheimer′s病显著性相关 ,apoEε 4可能是Alzheimer′s病发病的危险因素。     

5-羟色胺2A受体基因多态性与品行障碍的相关性

目的:探讨5-羟色胺2A(5-HT2A)受体基因A1438G、T102C多态性与品行障碍(CD)的相关性.方法:对88例病例组和60例对照组提取基因组DNA,采用RFLP技术分析相应的基因型,并比较两组不同基因型的行为特点有无差异.结果:5-HT2AA1438G基因型和等位基因频率在病例组和对照组之间差异无显著性(P＞0.05),5-HT2AT102C多态性分析虽未发现其与品行障碍存在显著关联,但伴ADHD组的T1/T1基因型频率明显低于对照组,T1/T2基因型频率明显高于对照组,差异有显著性(P＜0.05).结论:5-HT2A受体基因的A1438G、T102C多态性与品行障碍的关系尚需进一步探讨.     

血小板特异性抗原基因与职业性慢性苯中毒的相关性分析

目的探讨血小板特异性抗原HPA-1-6,15基因多态性与职业性慢性苯中毒的相关性。方法采用FLOW-SSO法和PCR-SSP法对32名职业性慢性苯中毒患者(病例组)做HPA-1-6,15基因分型,并将之与中国汉族人群(对照组,n=245 8)的数据比较。结果 HPA-3b等位基因频率、HPA-3基因型分布,病例组与对照组分别为0.593 7 vs 0.441 4(P0.05)及0.750 0 vs 0.506 9(P0.01);HPA-3b等位基因相关ab/bb基因型,实验组与对照组分别为96.88%(31/32)vs 69.49%(1 708/2 458)(P0.01)。HPA-1,2,4,5,6,15等位基因频率和基因型分布,2组比较均无明显差异(P0.05)。结论职业性慢性苯中毒可能与HPA-3基因多态性有关。     

椎基底动脉供血不足患者与血管紧张素转换酶基因和AT1R基因多态性的相关性研究

目的　探讨椎基底动脉供血不足 (VBI)与血管紧张素转换酶 (ACE)基因插入 /缺失(insertion/deletion ,I/D)和血管紧张素Ⅱ的 1型受体 (AT1R)基因A116 6 C多态性的关系。方法　采用聚合酶链反应 限制性内切酶片段长度多态性技术 (PCR RFLP)分别检测 12 0例VBI患者和 14 6名正常人对照的ACEI/D基因及AT1RA116 6 C突变位点基因型。结果　VBI患者中ACEI/D基因的基因型频率、等位基因频率与正常对照组比较 ,差异具有显著意义 (P <0 0 5) ;VBI患者中AT1R基因型频率、等位基因频率与正常对照组比较 ,差异具有显著意义 (P <0 0 5)。两组ACE和AT1R联合基因分析 :Ⅱ AA基因型频率VBI组与正常对照组比较 ,差异具有非常显著意义 (P <0 0 1) ,DD AA基因型频率VBI组与正常对照组比较 ,差异具有显著意义 (P <0 0 5) ,其余联合基因型分析均P >0 0 5,尚不能认为差异具有统计学意义。结论　ACE基因中D等位基因及AT1R基因A116 6 点突变基因型C可能对VBI的发生有重要意义 ;在VBI的发生中 ,ACE基因及AT1R基因多态性Ⅱ AA联合基因型对VBI的发生可能存在负协同作用 ,而DD AA则可能对VBI的发生存在正协同作用     

优化聚合酶链反应产物银染测序法鉴定白细胞抗原-DQA1*0102等位基因纯合子

聚合酶链式反应-序列特异引物(PCR-SSP)技术在人类白细胞抗原(HLA)基因分型中被广泛使用。然而，分型过程中常出现“空白基因”而影响整个结果的可靠性。对此，目前多采用DNA测序以确定各等位基因纯合子或存在新突变或结合PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法进行确认。我们用PCR-SSP对109名广西巴马县壮族长寿老人和71名对照组进行HLA-DQA1座位基因分型，发现了33个HLA．DQA1*0102／一个体，经本室优化DNA直接银染测序法测定，确定均为HLA-DQA1*0102／*0102等位基因纯合子，现报告如下。     

168名广东β-重症地中海贫血患者的HLA高分辨基因多态性分析

目的探讨广东地区β-重症地中海贫血患者HLA高分辨多态性及其遗传易感性。方法采用PCR-SSP技术对168名广东籍β-重症地中海贫血患者(病例组)及138名正常无血缘关系广东供者(对照组)作HLA-A、-B和-DRB1基因高分辨分型,并对这2组人群的HLA-A、-B、-DRB1等位基因频率、A-B、B-DRB1和A-B-DRB1单体型频率作统计学分析。结果病例组HLA-A*02∶03、A*11∶02/11∶53、DRB1*16∶02等位基因频率分别为9.27%、4.21%、8.23%,高于对照组的3.70%、1.11%、4.44%(P0.05)。病例组单体型B*38∶02-DRB1*16∶02频率与对照组相比具有统计学差异(P0.05)。结论广东地区β-重症地中海贫血患者HLA高分辨基因多态性广泛,单体型分布分散,其与正常人之间HLA基因多态性和单体型的差异有可能是疾病易感因素。     

6965名汉族骨髓供者HLA多态性分析

目的　分析中国汉族骨髓供者的人类白细胞抗原 (HLA)多态性 ,并寻找和鉴定新的HLA等位基因。方法　采用序列特异性引物聚合酶链反应、DNA测序技术以及分子克隆等以DNA为基础的HLA基因分型技术。结果　共鉴定 6 96 5人份无关汉族骨髓供者的HLA A、B、DRB1座位上的等位基因 ,其中 4 70 7人份为南方汉族个体 ,2 2 5 8人份为北方汉族个体。在受检群体中共检出 72种HLA特异性 ,包括过去很少在汉族人群中被检测到的HLA A2 5、A34、A74、B4 1、B4 2、B5 3、B73、B81等。HLA A、B、DRB1座位上尚未被检测出的空白基因频率分别小于 0 .2 0 % ,0 .2 5 %和 0 .70 %。发现 3个新等位基因 ,已被WHO命名为HLA A 0 2 5 3N ,HLA A 1114和HLA B 5 6 10。结论　在骨髓供者HLA分型中使用以DNA为基础的基因分型技术 ,可以得到精确可靠的基因频率以及发现新的等位基因。一些HLA基因在南北汉族人群中的分布有明显的差异 ,为了能最大限度地募集到带有不同HLA分型的骨髓供者 ,有必要在我国南北多个地区筛选骨髓供者     

谷胱甘S肽转移酶P1多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性的研究

目的 :探讨谷胱甘S肽转移酶P1(GSTP1)基因外显子 10 5位多态性与慢性阻塞性肺疾病 (COPD)易感性的关系。方法 :应用PCR RFLP技术结合聚丙烯酰胺凝胶电泳及硝酸银染色 ,对 10 4例COPD患者和 44例非COPD人群GSTP1基因外显子 10 5位多态位点进行检测 ,并根据性别、年龄及吸烟史对其易感性进行分析。结果 :( 1)COPD组与对照组GSTP1基因A/A基因型频率分别为 0 62 5、0 5 2 2 ,二者未发现差异有显著性 (P >0 0 5 ) ,两组A/G基因型频率、G/G基因型频率也未发现差异有显著性 (P >0 0 5 )。COPD组与对照组GSTP1基因 10 5位A型等位基因频率分别为 0 78、0 73 ,未发现差异有显著性 (P >0 0 5 )。 ( 2 )根据性别、不同年龄组、不同吸烟史分析 ,COPD组与对照组之间GSTP1等位基因频率的差异均无显著性 (P值均 >0 0 5 )。结论 :GSTP1基因外显子 10 5位多态性可能与COPD的易感性无相关性     

广东地区CML患者中HLA-A,B,DRB1的表达与分析

为了调查慢性髓系白血病（CML）患者中HLA—A、B、DRB1基因多态性的表达，探讨HLA与CML之间的可能关联，采用DNA扩增基础上的反向序列特异性寡核苷酸杂交（PCR—RSSO）技术，对广东地区293例CML患者和随机同期采集的406名汉族健康献血者的HLA—A、B、DRB1位点进行基因多态性分型，并对2组间基因频率进行了比对分析。结果显示：CML组HLA—A＊24基因频率为15．53％，显著低于对照组22.09％（RR=0．63，P=0．005），HLA—B＊13基因频率为10．41％，与对照组6．74％相比则显著增高（RR=1.68，P=0.016），HLA—DRB1＊14基因频率为7．51％，与对照组11．89％相比显著降低（RR=0．58，P=0．008）。结论：HLA—A＊24、HLA—DRB1＊14在广东地区CML患者中表达较正常人明显减低，HLA—B＊13在广东地区CML患者中表达较正常人明显升高。HLA—A＊24、HLA—DRB1＊14是否为广东地区CML患者的保护性基因标记及HLA—B＊13是否为其易感性基因标记尚需进一步研究明确．     

血脂异常与AT1R基因A1166C多态性的关系

目的　研究血脂异常与高血压以及血脂异常合并高血压患者的血管紧张素Ⅱ Ⅰ型受体基因多态性的分布情况。方法　盐析法提取原发性高血压组 (n =130 )和正常对照组 (n =5 10 )的白细胞脱氧核糖核酸 (DNA) ,采用多聚酶链反应 (PCR)结合限制性内切酶方法检测AT1R基因A116 6C多态性 ,并用全自动生化检测仪测定所有研究对象的各项血生化指标。结果　混合性高脂血症患者的AC基因型显著高于正常对照组 (P <0 .0 0 1) ,有统计学意义。合并有高脂血症的高血压患者C等位基因频率显著高于正常对照组 ,统计学分析有意义。结论　AT1R基因A116 6C多态性与血脂异常有关 ,尤其高血压合并血脂异常者关系更加密切。