垂体肿瘤转化基因和Survivin在肝组织、肝硬化和肝癌中的表达及其临床意义

目的 分析垂体肿瘤转化基因(PTTG)和生存素(Survivin)基因在原发性肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及探讨它们的关系.方法 应用原位杂交法和免疫组化S-P法检测HCC 50例、肝硬化组织30例、正常肝组织10例中PTTG和Survivin的表达.结果 PTTG和Survivin在HCC、肝硬化和正常肝组织中的表达差异有统计学意义.结论 PTTG和Survivin异常表达与肝癌肝硬化的发展密切相关,为肝癌的早期诊断和治疗提供了较为客观的参考指标.     

原发性肝癌中Survivin mRNA 的定量表达及其临床意义

目的 对原发性肝癌组织、癌旁组织以及正常肝脏组织Survivin mRNA进行定量,分析其表达与临床特征的关系,探讨其临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR检测59例原发性肝癌组织、相对应癌旁组织以及17例正常肝脏组织Survivin mRNA 的表达量,分析其表达量与性别、年龄、血清HbsAg、AFP、分化程度、肿瘤大小、临床分期以及转移状态等临床特征的关系。结果 Survivin mRNA在原发性肝癌组织中的表达高于正常肝脏组织的8倍,差异具有统计学意义（P < 0.05）。Survivin mRNA在低分化患者肝癌组织中的表达明显高于高分化患者组（P < 0.05）;在肿瘤直径≥5cm的肝癌组织中的表达明显高于< 5cm患者组（P < 0.01）;在III~IV期患者肝癌组织中的表达明显高于I~II期患者（P < 0.01）;有淋巴结转移的患者肝癌组织中的表达明显高于未转移组（P < 0.01）。Survivin mRNA表达与患者性别、年龄、血清HbsAg以及AFP水平无相关性（P > 0.05）。结论 Survivin mRNA在原发性肝癌组织中呈高表达,且与肿瘤分化程度、肿瘤大小、临床分期和转移状态等密切相关。     

凋亡抑制蛋白及β-连环素蛋白在原发性肝癌组织中的表达及临床意义

目的研究原发性肝癌组织中凋亡抑制蛋白(Survivin蛋白)及β-连环素蛋白(β-catenin蛋白)的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色法对47例原发性肝癌组织、10例肝硬化组织、4例正常肝组织中Survivin及β-连环素蛋白的表达情况进行检测,并结合原发性肝癌临床生物学特性进行分析。结果在正常肝组织中Survivin蛋白无表达,β-catenin蛋白无表达;在肝硬化组织中Survivin蛋白无表达,2例(20%)β-catenin蛋白表达;在47例肝癌组织中30例(63.8%)Survivin蛋白表达阳性,31例(65.9%)β-catenin蛋白出现表达(组间比较P<0.01)。Survivin、β-catenin蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小无关。Survivin蛋白在原发性肝癌复发组的表达率为92.9%(26/28),无复发组的表达率为21.1%(4/19);β-catenin蛋白在原发性肝癌复发组中的异常表达率为89.2%(25/28),在无复发组的表达率为31.6%(6/19)(组间比较P<0.05)。在Survivin蛋白表达阳性的30例原发性肝癌组织中有28例(93.3%)β...     

原发性肝癌中肝细胞生长因子mRNA的定量表达及其临床意义

目的对原发性肝癌组织、癌旁组织以及正常肝脏组织肝细胞生长因子(HGF)mRNA进行定量测定,分析其表达与临床特征的关系,探讨其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测59例原发性肝癌组织、相对应癌旁组织以及17例正常肝脏组织HGF mRNA的表达量,分析其表达量与性别、年龄、血清HBsAg、AFP、分化程度、肿瘤大小、临床分期、转移状态以及是否合并肝硬化等临床特征的关系。结果HGF mRNA在原发性肝癌组织、癌旁组织中的表达与正常肝脏组织差异无显著性(P>0.05)。HGF mRNA在肝癌合并肝硬化组中的表达明显高于未合并肝硬化组(P<0.05),但与其它临床特征无关。结论HGF mRNA在肝癌合并肝硬化组织中呈高表达,提示可能与肝癌发生发展有关。     

凋亡相关蛋白Survivin及hTERT mRNA在肾细胞癌中的表达及意义

目的研究凋亡抑制蛋白Survivin和hTERT mRNA在肾细胞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化和原位杂交法检测46例肾细胞癌组织和15例对照组织(癌旁正常肾组织)中Survivin蛋白和hTERT mRNA的表达。结果46例肾细胞癌组织中Survivin的阳性表达39例,阳性表达率为84.78%,而15例正常组织中Survivin蛋白仅1例阳性表达,阳性率为6.67%,肾细胞癌组织Survivin蛋白的阳性表达率与正常比较差异有显著性(P<0.01);46例肾细胞癌组织中hTERT mRNA阳性表达41例,阳性率为89.13%,15例正常组织中hTERT mRNA阳性表达仅有1例,阳性率为6.67%,两组hTERT mRNA阳性表达率差异有显著性(P<0.01)。结论肾细胞癌组织中存在Survivin蛋白和hTERT mRNA过表达,这可能与肾细胞癌的发生发展有关。     

Survivin mRNA在肾透明细胞癌组织和外周血中表达的研究

目的探讨Survivin mRNA在肾透明细胞癌（renal clear cell carcinoma,RCCC）患者组织和外周血中的表达及其意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测46例RCCC患者肿瘤组织和15例健康志愿者外周血细胞中Survivin mRNA表达情况。结果46例RCCC患者中有21例外周血细胞Survivin mRNA阳性表达,表达率为45．7％。对照组15例中有2例Survivin mRNA阳性表达,阳性率为13．3％,RCCC组Survivin mRNA阳性率明显高于对照组（P〈0．05）。46例RCCC患者同时收集到肿瘤组织和外周血,Survivin mRNA阳性表达分别为63．0％和45．7％,两者具有相关性（P〈0．01）。结论Survivin mRNA在RCCC肿瘤组织中有显著的阳性表达,应用RT-PCR法检测外周血细胞Survivin mRNA的表达,诊断RCCC敏感性、特异性高,且创伤性小,因此Survivin mRNA有可能成为RCCC诊断的一个新的敏感指标,是目前进行肿瘤早诊的理想检测方法之一。     

UbcH10在肝细胞癌中的表达及临床病理意义

目的研究UbcH10在肝细胞癌中的表达及其与临床病理特征的联系,初步探讨UbcH10在人肝细胞癌中的生物学意义。方法利用RT-PCR法检测正常肝脏细胞系及肝癌细胞系,和肝癌组织及对应的癌旁组织中UbcH10 mRNA的表达水平。分析UbcH10 mRNA的表达水平与肝癌临床病理特征之间的关系。利用免疫组化方法检测UbcH10蛋白在肝癌组织及其癌旁组织和正常肝脏组织中的表达。结果正常肝脏细胞系L02中UbcH10 mRNA表达水平显著低于肝癌细胞细胞系BEL-7402、Hep3B、HepG2、SMMC-7721中UbcH10 mRNA的表达水平(P<0.05)。肝癌组织中UbcH10 mRNA的表达水平显著高于其癌旁组织(P<0.05)。UbcH10 mRNA表达水平与肿瘤直径、组织病理分化程度、TNM分期、门静脉侵犯特临床病理特征显著相关(P<0.05)。肝癌组织中广泛表达UbcH10蛋白,总体阳性率为68.6%(48/70),癌旁组织和正常肝组织中较少见UbcH10蛋白阳性表达,其染色阳性率分别28.6%(20/70)和26.7%(8/30)。结论 UbcH10在肝癌细胞系及肝癌组织中高表达。UbcH10的高表达与肝癌的恶性临床病理特征相关,UbcH10可能成为潜在的分子标志物或治疗靶点。     

Survivin蛋白及其mRNA在直肠癌中的表达及意义

目的：研究凋亡抑制因子Survivin蛋白及其mRNA在直肠癌组织中的表达及其与临床病理关系。方法：采用免疫组织化学方法检测40例直肠癌组织和20例正常组织中Survivin蛋白的表达量,采用实时荧光定量PCR方法检测25例直肠癌组织和19例正常组织中Survivin mRNA的表达量。结果：Survivin蛋白在直肠癌组织中的阳性表达率为75%（30/40）,在正常直肠组织中的阳性表达率为0%（0/20）,survivin mRNA在直肠癌组织中的阳性表达率为68%（17/25）,在正常组织中的阳性表达率为5%（1/20）。在癌组织中,Survivin蛋白及其mR-NA的表达量与患者的性别分期和年龄无关,与组织的分化程度、Dukes＇和有无淋巴结转移密切相关。结论：Survivin可能在直肠癌的发生中发挥重要作用,可以作为一种肿瘤标记物用于直肠癌的预后。     

FEZ1/LZTS1基因与原发性肝癌相关性研究

目的:研究FEZ1/LZTS1基因和原发性肝癌的相关性。方法:新鲜肝癌组织及正常肝脏组织各96例,分别提取癌组织(其中肝细胞癌86例,胆管上皮癌6例,混合性癌4例)和正常组织总RNA,采用RT-PCR方法检测肝癌组织和正常肝脏组织FEZ1/LZTSl基因mRNA的表达。运用免疫组织化学法(SP法)分别检测96例肝癌和正常肝脏组织标本FEZI/LZTSl基因蛋白表达。结果:FEZ1/LZTS1基因的mRNA表达在96例肝癌组织中的情况如下:27例(28.1%)缺失,28例(29.2%)表达下降,41例(42.7%)表达正常;而FEZ1/LZTS1基因mRNA在相应的96例正常肝脏组织中全部表达。肝癌组织FEZ1/LZTS1基因的mRNA表达与正常肝脏组织相比显著下调(P<0.01)。FEZ1/LZTS1基因蛋白在全部正常肝脏组织中表达,在肝癌组织中30例(31.3%)强阳性(+),20例(20.8%)中度阳性(+/-),26例(27.1%)弱阳性(-/+),20例(20.8%)阴性(-)。结论:与正常组织比,FEZ1/LZTS1基因和蛋白表达在原发性肝癌组织中明显缺失或减少,这可能导致肝癌的发生。     

血浆中CAP2基因表达在肝癌诊断中的价值

目的:检测腺苷酸环化酶相关蛋白2(CAP2)mRNA在血浆中表达情况,探讨其在肝癌诊断中的价值。方法:采用ELISA方法和实时荧光定量PCR分别检测61例肝癌患者、29例肝硬化患者及30例正常人血浆AFP和CAP2 mRNA的表达情况。结果:肝癌患者、肝硬化患者、正常人CAP2 mRNA阳性率分别为73.7%、41.4%、20.0%,差异有统计学意义(P<0.05);CAP2 mRNA在AFP阴性肝癌诊断敏感度为81.5%。AFP诊断敏感度为55.7%。联合检测CAP2 mRNA和AFP敏感度为91.8%。结论:检测血浆CAP2 mRNA有助于诊断肝癌,尤其是AFP阴性肝癌患者的诊断,联合CAP2 mRNA和AFP可提高肝癌的诊断率。     

人肝癌中p57kip2 mRNA及其蛋白表达研究

【目的】研究p57kip2基因在人体肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)不同阶段的mRNA和蛋白表达情况,以探讨HCC发生的分子生物学机制。【方法】运用原位分子杂交和免疫组化技术分别检测30例正常肝组织、30例癌周肝硬化和30例肝癌组织中p57kip2mRNA及P57kip2蛋白的表达情况。【结果】p57kip2mRNA表达:正常肝组织组未见表达,癌周肝硬化组与肝癌组阳性表达率分别为33.33%和16.67%。肝癌组分化好和分化差阳性表达率之间差异有统计学意义,相关分析呈正相关。P57kip2蛋白表达:正常肝组织组未见表达;癌周肝硬化组与肝癌组阳性表达率分别为56.67%和63.33%。肝癌组分化好者与分化差者阳性表达率之间差异有统计学意义,相关分析呈正相关。【结论】p57kip2基因mRNA和蛋白表达缺失或下降与HCC分化程度低呈正相关,提示p57kip2基因的失活可能是进展期HCC的晚期分子事件,并可能是一个新的预后指标。     

肝细胞肝癌中Galectin-9 mRNA表达及其临床意义

目的：探讨Galeetin-9 mRNA在肝细胞肝癌（简称肝癌）中的表达及其临床意义。方法：用TRIZOL法从89例肝癌患者手术切除的肝癌组织及癌旁组织中提取总RNA并反转录成cDNA,荧光定量PCR检测其Galetin-9 mRNA的表达量。结果：癌组织中的Galectin-9 mRNA表达较癌旁组织表达下降,仅为癌旁组织的0．504倍,两者比较差异有统计学意义（P〈0．001）;癌组织中的Galecin-9 mRNA表达的程度与肿瘤的大小、术前转移、病理分化、TNM分级、术后复发存在相关性（P〈0．05）;而与性别、年龄、HBsAg、AFP、肝硬化、包膜完整性无相关性（P〉0．05）。结论：Galectin-9 mRNA的表达水平与肝癌的病理分化、转移、复发有关,可能成为诊断肝癌及判断预后的新生物学指标或治疗肝癌的潜在靶点。     

膜联蛋白A4在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的观察膜联蛋白A4（Annexin A4）在不同肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达情况,探讨其临床病理意义。方法先应用RT-PCR验证ANX A4在不同类型肝组织中mRNA的表达,再应用免疫组织化学方法检测在15例正常肝组织、15例乙肝后肝硬化组织和63例不同表型肝癌组织标本中的表达,探讨其差异表达与临床病理资料之间的联系及其意义。结果（1）ANX A4mRNA表达水平在肝硬化及肝癌组织中均比正常肝组织上调（P〈0．05）,但肝硬化组与肝癌组差异无统计学意义（P〉0．05）;（2）ANXA4蛋白阳性表达率正常肝组织为20％,乙肝后肝硬化组织为26．67％;在63例HCC中阳性率为49．21％,癌旁组织为61．90％,其中小肝癌阳性率为50．00％,大肝癌为64．29％,多发癌为28．57％,相应癌旁组织阳性率分别为50．00％、64．29％、66．67％。随着肝细胞的恶性转化并进展,ANXA4蛋白呈逐渐上调趋势,但当肿瘤出现侵袭转移时反而下调。与临床病理指标的相关性研究表明Annexin A4与HCC进展及侵袭相关。结论（1）从正常肝一肝硬化一肝癌组织,Annexin A4的mRNA表达水平逐渐上调;（2）ANxA4蛋白在HCC组织中的表达明显失调,其变化可能与HCC进展及侵袭相关。     

实时逆转录荧光定量聚合酶链反应检测外周血GPC3mRNA在原发性肝癌患者中的表达及意义

目的探讨实时逆转录荧光定量聚合酶链反应（RealtimeQRT-PCR）检检测外周血磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 mRNA（GPC3 mRNA）在原发性肝癌（HCC）患者中的表达意义。方法采用Realtime QRT-PCR技术分别检测37例HCC、21例转移性肝癌、22例肝硬化患者和35例体检健康志愿者外周血中GPC3 mRNA的水平。结果 HCC患者外周血GPC3mRNA的阳性率为91.8%（34/37）,表达水平为（1.5±0.9）×106copies/ml;转移性肝癌外周血GPC3 mRNA的阳性率为4.7%（1/21）,表达水平为5.2×103copies/ml;肝硬化患者GPC3 mRNA的阳性率为4.5%（1/22）,表达水平为2.6×103 copies/ml;体检健康志愿者外周血GPC3 mRNA无阳性表达。HCC患者手术前后血液中GPC3 mRNA的阳性率差异无统计学意义（P〈0.05）,但两者表达水平差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Realtime QRT-PCR检测外周血GPC3 mRNA是诊断早期HCC血微转移可行的实验方法。     

人肝癌p57^kip2基因表达缺失与杂合性缺失的关系研究

目的通过对p57^kip2 mRNA表达水平下降的人体肝癌进行杂合性缺失研究,探讨肝癌发生有关基因调控的分子机制．方法对人肝细胞肝癌及癌周肝组织各30例,正常肝组织对照20例,共80例标本,采用原位杂交检测p57^kip2 mRNA的表达,并运用PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染法和基因分型对30例肝癌组织及其癌周肝硬化组织p57^kip2基因所在染色体区域的10个微卫星位点（D11S1397,D11S1318,D11S4046,D11S922,TH01,D11S2359,D11S1760,D11S1338,D11S569和D11S1397）进行杂合性缺失检测,同时分析了p57^kip2 mRNA表达与杂合性缺失之间的关系．结果原位分子杂交检测正常肝组织未见p57^kip2 mRNA表达,癌周肝硬化组与肝癌组阳性表达率均为26．7％（8/30）．杂合性缺失检测结果显示在10个微卫星位点中,仅有TH01（7／30,23．3％）、D11S2359（5／30,16．6％）和D11S569（1／30,3．3％）3个位点有杂合性缺失;p57^kip2 mRNA和蛋白表达缺失主要与TH01位点相关．结论p57^kip2 mRNA和蛋白表达异常提示其可能在原发性肝癌的发生发展中起重要作用．与p57^kip2基因同一区域的10个微卫星位点不是p57^kip2基因LOH和MSI的频发位点,但p57^kip2 mRNA表达缺失与TH01位点的杂合性缺失相关．     

Mcl-1在肝硬化和肝癌组织中的表达及临床意义

目的：分析髓样细胞白血病-1（Mcl-1）在原发性肝癌（HCC）和肝硬化（LC）组织中的表达及其临床意义.方法：免疫组化法分别检测50例HCC、50例LC和50例对照组肝组织中Mcl-1的表达,并分析其与肝癌临床病理学特征的相关性.结果：与对照组比较,Mcl-1在LC和HCC组中的表达增强（P＜0.05）;肝癌组织中Mcl-1的表达与肿瘤直径、Edmonson grade分级、肝内外转移、复发、静脉浸润相关（P＜0.05）;Mcl-1高表达患者与低表达患者生存时间差异有统计学意义（P＜0.05）;多因素分析显示,Mcl-1表达、肿瘤大小和血清AFP值分别是影响肝癌预后的独立因素.结论：Mcl-1的过表达可能与HCC的发生、发展有关.Mcl-1表达影响肝癌患者预后.     

P-gp在人肝硬化及肝细胞肝癌中的表达及意义

目的探讨P糖蛋白(P-gp)在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学SABC法分别检测41例HCC、10例肝硬化及10例正常肝组织中P-gp蛋白的表达。结果P-gp在HCC组织中阳性表达率为70.73%(29/41),肝硬化中P-gp阳性表达率为40%(4/10),正常肝组织P-gp阳性表达率为30%(3/10)。3种组织P-gp表达不同(P<0.05);P-gp在正常肝组织与HCC组织中的表达比较差异有统计学意义(P<0.017);在肝硬化与HCC组织中的表达比较差异具有统计学意义(P<0.017);而在肝硬化组织和正常肝组织之间差异无统计学意义(P>0.017)。P-gp的阳性表达与HCC的Edmenson分级明显相关,分化程度越低,P-gp表达越高。结论P-gp蛋白在HCC中高表达,可能参与了HCC的发生、发展及恶性增殖。     

GCF2选择性剪接区在肝癌组织及细胞株中的表达及意义

目的：研究肿瘤相关抗原GCF2选择性剪接区在人肝癌细胞株、肝癌组织、癌旁组织及正常成人肝细胞及组织中的表达及意义.方法：采用RT PCR检测GCF2 5个选择性剪接区（D1～D5）在人肝癌细胞株、43例肝癌组织、相对应的癌旁组织,以及正常成人肝细胞株及9例肝组织中的表达.结果：GCF2 4个选择性剪接区（D1～D4）在所检测的细胞株、肝癌组织、癌旁组织和正常成人肝组织中均未检测到表达;GCF2选择性剪接区D5仅在人肝癌细胞株检测到阳性表达;在43例肝癌组织及相应的癌旁组织中,有41例肝癌组织GCF2选择性剪接区D5呈阳性表达,阳性表达率为95.35％ （41/43）,而9例正常肝组织均未检测到GCF2选择性剪接区D5表达.结论：GCF2 D5选择性剪接区在肝癌组织中有较高阳性表达,GCF2选择性剪接区D5可能与肝癌的发生发展有关.