1-磷酸鞘氨醇受体2介导PI3K/AKT/eNOS通路抑制甲型流感病毒诱导的病毒性肺炎

目的:探讨1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)对甲型流感病毒诱导的病毒性肺炎的作用及机制。方法:采用甲型流感病毒鼠肺适应株FM1滴鼻感染野生C57BL/6小鼠和S1pr2~(-/-)小鼠,建立甲型流感病毒性肺炎动物模型。病毒感染4和6 d时观察比较对照组(模型组的野生小鼠)、JTE-013(S1PR2高效拮抗剂)处理的小鼠及S1pr2~(-/-)小鼠肺组织的病理改变,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白浓度、细胞总数及细胞因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)]的表达,Western blot法检测小鼠肺组织的AKT和e NOS的磷酸化水平。结果:与模型对照组的野生鼠比较,JTE处理组和S1pr2~(-/-)组甲型流感病毒性肺炎更加严重;BALF中的蛋白浓度,总细胞数及炎性细胞因子表达显著增加;且PI3K下游靶点AKT和e NOS磷酸化显著增高(P0.01)。结论:S1PR2通过介导PI3K/AKT/e NOS信号转导通路,调节NO生成,抑制血管通透性和炎性细胞因子释放,从而减轻甲型流感病毒诱导的病毒性肺炎。     

血红素加氧酶1(HO-1)基因敲除影响小鼠肺脏免疫细胞组成平衡并加重脂多糖诱导的急性肺损伤

目的 评价血红素加氧酶1(HO-1)基因缺失对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠肺脏免疫细胞组成及炎症性损伤的影响。方法 选取C57BL/6野生型(WT)小鼠和同背景HO-1条件敲除(HO-1^-/-)小鼠,按照随机数字法分为WT对照组、 LPS处理的WT组、 HO-1^-/-对照组和LPS处理的HO-1^-/-组。LPS处理的WT组和LPS处理的HO-1^-/-组分别经尾静脉注射LPS(15 mg/kg)建立ALI模型,WT对照组和HO-1^-/-对照组经尾静脉注射同等体积生理盐水。造模12 h后,处死小鼠并收集各组肺组织。HE染色观察肺组织病理变化。PCR检测肺组织肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β)和IL-6 mRNA表达。流式细胞术检测肺组织中性粒细胞(CD45⁺CD11b⁺Ly6G⁺Ly6C^-)、总单核细胞(CD45⁺CD11b     

骨髓来源间充质干细胞培养上清液减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

 目的:观察经尾静脉输注骨髓间充质干细胞培养上清液（MSCs CdM）对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的治疗作用及其机制。方法:采用全骨髓培养法分离纯化骨髓间充质干细胞,传至第3代时观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志,并且收集上清液用超滤离心管进行离心。30只BALB/c小鼠随机分为对照组、 LPS模型组和MSCs CdM治疗组。对照组腹腔内注射生理盐水（0.01 mL/g）,LPS组和MSCs CdM治疗组腹腔内注射LPS（5 mg/kg,0.01 mL/g）制备急性肺损伤模型。造模1 h后经尾静脉输注MSCs CdM（MSCs  CdM治疗组）或生理盐水 （LPS组或对照组）300 μL。6 h后处死小鼠,留取标本检测肺组织病理形态学、肺组织湿干重比（W/D）、支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量、血清及BALF中细胞因子水平和肺组织中髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果:与对照组比较,LPS处理后肺组织病理损伤严重,BALF中蛋白、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量、肺组织中MPO活性及肺组织湿干重比均显著升高。与LPS组比较,MSCs CdM治疗组肺组织病理损伤程度减轻,BALF中蛋白、血清TNF-α和IL-6含量、肺组织中MPO活性及肺组织湿干重比均显著降低,而BALF中白细胞介素10（IL-10）和角质细胞生长因子（KGF）水平显著高于LPS组和对照组。结论:骨髓间充质干细胞培养上清液可有效减轻LPS诱导的急性肺损伤,其作用机制可能与其调节肺部TNF-α、IL-6、IL-10和KGF的水平有关。     

丹酚酸B减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的研究丹酚酸B(SAB)能否减轻脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤。方法将48只小鼠随机分为对照组、模型组(气管滴注LPS)、SAB低/中/高剂量干预组、莱菔硫烷阳性对照组,检测肺湿/干重比(W/D)值;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度;HE染色法评价肺组织病理损伤;ELISA检测BALF中TNF-α、 IL-1β和IL-6的含量,检测肺组织MPO、SOD的活性和MDA含量;Western blot检测肺组织中Nrf2、NQO1、HO1、Keap1、NF-κB及p-NF-κB的蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组小鼠肺组织产生病理性变化,W/D值、BALF中蛋白质浓度、炎性细胞因子含量明显升高(P0.05),急性肺损伤模型建立成功。与模型组比较,SAB干预组的各指标值发生显著变化(P0.05);减轻LPS诱导的急性肺损伤小鼠氧化应激,且呈浓度依赖性增强,同时降低Keap1的表达(P0.01);升高Nrf2、NQO1和HO1的表达(P0.01);抑制LPS诱导的NF-κB的表达和NF-κB的磷酸化。结论 SAB可以减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤。     

TNFR-Fc减轻LPS所致小鼠ALI炎症反应损伤

目的: 评价肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白(TNFR-Fc)能否有效下调炎症反应而减轻急性肺损伤(ALI)小鼠的肺组织破坏。方法: 小鼠随机分为脂多糖(LPS)组、TNFR-Fc+LPS组和对照组。气管内滴入LPS复制ALI小鼠模型,TNFR-Fc组在滴入LPS前24 h腹膜腔注射TNFR-Fc (0.4 mg/kg),在滴入LPS后2 h收集标本,检测肺湿/干重、肺泡蛋白含量与肺组织病理评分;ELISA法检测血清TNF-α浓度及检测肺泡灌洗液与血清IL-1β、IL-6、IL-10与IFN-γ浓度。结果: TNFR-Fc显著降低血清TNF-α浓度(P＜0.05),轻度降低肺湿/干重比例,显著降低BALF蛋白浓度(P＜0.05),显著降低ALI评分数值(P＜0.05)。TNFR-Fc显著降低致炎症细胞因子IL-6在BALF(P＜0.05)与血清(P＜0.05)中的浓度,轻度提高BALF中IL-10浓度(P＞0.05),但其差异不显著,亦能显著提高血清IL-10浓度(P＜0.05)。IL-1β与IFN-γ水平处理前后变化不显著。结论: TNFR-Fc中和ALI中过度表达的TNF-α,下调以IL-6为代表的炎症反应,减轻ALI的肺组织破坏。     

白藜芦醇减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的观察白藜芦醇在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠中的作用,以及白藜芦醇对小鼠肺组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)表达的影响。方法将小鼠分为对照组,ALI模型组(经气管滴注5 mg/kg的LPS建立小鼠ALI模型),白藜芦醇干预组(经腹腔注射30 mg/kg白藜芦醇,2 h后,经气管滴注5 mg/kg的LPS)。检测小鼠呼吸功能;HE染色及病理评分观察小鼠肺组织形态的变化;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、总细胞数及中性粒细胞数目,并观察中性粒细胞的活化; ELISA检测BALF中IL-1β和IL-18的蛋白水平;real-time PCR检测小鼠肺组织IL-1β、IL-18、nlrp3、asc及pro-caspase-1 mRNA的表达;Western blot检测肺组织IκB的蛋白表达。结果白藜芦醇可改善ALI小鼠的呼吸功能;减轻LPS诱导的肺部病理损伤;降低ALI小鼠BALF中IL-1β和IL-18的蛋白水平(P0.05);减少ALI小鼠肺组织NLRP3、ASC、pro-caspase-1的表达,增加IκB的蛋白表达(P0.05)。结论白藜芦醇可能抑制NLPR3炎性反应小体活化后产物的表达,最终可减轻LPS诱导的小鼠ALI。     

褪黑素对Ctnnd2敲除小鼠的自闭症样行为及突触相关蛋白的影响

目的:观察褪黑素（MT）对Ctnnd2基因敲除(Ctnnd2^-/-)小鼠自闭症样行为、丝裂原活化蛋白激酶（MEK）/细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）通路蛋白和突触相关蛋白的影响。方法:将小鼠分为四组：野生型组（WT）、Ctnnd2基因敲除组(Ctnnd2^-/-)、Ctnnd2基因敲除+10 mg/kg褪黑素组(Ctnnd2^-/-+10 mg/kg MT)及Ctnnd2基因敲除+50 mg/kg褪黑素组(Ctnnd2^-/-+50 mg/kg MT)。不同剂量MT给出生21 d Ctnnd2^-/-小鼠连续灌胃28 d,行为学实验评价小鼠的自闭症样行为，Western Blot检测MEK1/2、ERK1/2和突触素蛋白（Syn）的磷酸化水平以及突触后致密蛋白95（PSD95）的表达。接下来为了验证MT是否通过与MT-R结合进而上调体感皮层MEK/ERK通路和引起突触相关蛋白的变化，在Ctnnd2^-/-小鼠体感皮层局部微量注射褪黑素受体（MT-R）阻断剂，30 m...     

重楼皂苷Ⅰ对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用研究北大核心CSCD

目的:探究重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法:将小鼠随机分为对照(Control)组、LPS组、PPⅠ5 mg/kg组、PPⅠ10 mg/kg组、PPⅠ20 mg/kg组和地塞米松(DEX)组,每组8只。PPⅠ各组小鼠灌胃相应剂量PPⅠ,DEX组灌胃2 mg/kg DEX,对照组灌胃生理盐水预处理7 d,鼻腔滴入LPS(5 mg/kg)建立小鼠ALI模型。24 h后处死小鼠,收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),检测肺湿/干重(W/D)值;HE染色观察肺组织损伤情况并评分;检测BALF中总蛋白含量、白细胞和巨噬细胞数;试剂盒检测一氧化氮(NO)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平;Western blot检测小鼠肺组织中p38和AMPK的磷酸化及NLRP3、caspase-1、Nrf2和KEAP1的蛋白表达。结果:与对照组相比,LPS组小鼠肺组织发生病理性变化,肺损伤评分、W/D值、BALF中总蛋白含量、炎症细胞、氧化应激水平和炎症细胞因子含量明显升高(P<0.05,P<0.01),p38磷酸化水平、NLRP3、caspase-1和KEAP1蛋白表达显著上调(P<0.01),AMPK磷酸化水平和Nrf2蛋白表达显著下调(P<0.01)。与LPS组比较,PPⅠ(10 mg/kg和20 mg/kg)和DEX减轻了LPS诱导的ALI,肺损伤评分、W/D值、BALF中总蛋白含量、炎症细胞、氧化应激水平和炎症细胞因子含量明显降低(P<0.05,P<0.01),p38磷酸化水平、NLRP3、caspase-1和KEAP1蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),AMPK磷酸化水平和Nrf2蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论:PPⅠ能够减轻LPS诱导的小鼠ALI,可能与p38-NLRP3/caspase-1和AMPK-Nrf2/KEAP1信号途径有关。     

NF-E2相关因子2对糖尿病模型小鼠视网膜内细胞及血管的保护作用

目的 探讨NF-E2相关因子2（Nrf2）对糖尿病视网膜细胞及血管的保护作用。方法 8周龄雄性Nrf2^+/+（野生型）和Nrf2^-/- C57BL/6小鼠60只随机分为模型组和对照组,共4组,每组各15只。模型组小鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ,45mg/kg）,连续注射5 d;对照组小鼠注射同体积的枸橼酸缓冲液。模型组和对照组小鼠初次注射后每周测空腹血糖及体重,至第10周取视网膜。采用免疫印迹法检测视网膜内Nrf2激活的下游蛋白血红素加氧酶-1（HO-1）的表达情况;免疫荧光染色检测具有多种剪接形式的RNA结合蛋白（RBPMS）阳性的视网膜节细胞（RGCs）及胆碱乙酰转移酶（ChAT）阳性的无长突细胞（ACs）并计数;采用过碘酸-希夫和苏木素染色,观察视网膜内无细胞毛细血管并进行定量分析。 结果 STZ诱导1周后,野生型和Nrf2^-/-模型组小鼠血糖急剧升高,体重开始显著下降,随着周龄的增长体重无明显增加;对照组小鼠血糖值无明显升高,体重呈正常缓慢增长趋势。STZ诱导糖尿病10周后,RBPMS和ChAT染色发现,Nrf2^-/-糖尿病小鼠视网膜内RGCs和ACs数量显著降低（P<0.05）;过碘酸 希夫和苏木素染色显示,Nrf2^-/-糖尿病小鼠视网膜内出现无细胞毛细血管;免疫印迹法显示,野生型小鼠模型组中Nrf2激活的下游蛋白HO-1表达升高。 结论 Nrf2对糖尿病视网膜细胞及血管具有保护作用,其可能是通过诱导HO-1上调发挥作用。     

右美托咪啶减轻急性肺损伤的机制研究

目的探讨右美托咪啶(Dex)对小鼠急性肺损伤(ALI)的影响及潜在作用机制。方法将32只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白对照组(Sham组)、右美托咪啶组(Dex组)、脂多糖组(LPS组)和药物干预组(LPS+Dex组)。LPS组和LPS+Dex组小鼠通过腹腔注射LPS(10 mg/kg)构建小鼠ALI模型,Dex组及LPS+Dex组小鼠腹腔注射Dex(40μg/kg),Sham组和LPS组注射等剂量生理盐水。LPS注射12 h后,采用HE染色比较各组小鼠肺损伤状况;qRT-PCR检测各组小鼠肺组织中促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1 mRNA的表达;Western blot检测各组小鼠肺组织中GPX4、COX2和转录因子红系2相关因子2(Nrf2)蛋白的表达。结果与Sham组相比,LPS组小鼠肺损伤评分明显升高(P0.05),促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1mRNA表达水平均明显升高(P0.05),肺组织铁死亡标志物GPX4蛋白表达水平明显降低(P0.05),COX2蛋白表达水平则明显升高(P0.05),肺组织中Nrf2蛋白表达水平明显降低(P0.05)。与LPS组相比,LPS+Dex组小鼠肺损伤评分明显降低(P0.05),IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1 mRNA表达水平明显降低(P0.05),GPX4的蛋白表达水平明显升高(P0.05),COX2蛋白表达水平则明显降低(P0.05),Nrf2的蛋白表达水平也明显升高(P0.05)。结论 Dex可能通过激活Nrf2抑制小鼠肺组织铁死亡,进而发挥肺保护作用。     

黑木耳多糖对内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺组织的保护作用

目的:探讨黑木耳多糖对LPS诱导急性肺损伤大鼠肺组织的保护作用及其机制。方法:将健康SD大鼠随机分为对照组、LPS组、地塞米松组以及黑木耳多糖低、中、高浓度组,根据分组,分别给予生理盐水或不同浓度黑木耳多糖预防性灌胃7 d,第8天腹腔注射生理盐水或LPS(8 mg/kg),地塞米松组在给予LPS后腹腔注射地塞米松(3 mg/kg)。造模12 h后于腹主动脉取血,并制肺组织匀浆和肺泡灌洗液。检测支气管肺泡灌洗液中蛋白含量、肺湿/干重比、髓过氧化物酶(MPO)、总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)等指标,做组织切片HE染色并进行肺损伤评分。结果:应用黑木耳多糖干预后,急性肺损伤大鼠支气管肺泡灌洗液中蛋白含量明显下降,肺湿/干重比值降低;大鼠肺组织中MPO、NOS活性及MDA含量较LPS组降低,T-AOC含量和T-SOD活性较之升高;肺组织病理改变减轻,肺损伤指数下降。结论:黑木耳多糖具有保护LPS损伤大鼠肺组织的作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

金纳多对内毒素诱导小鼠急性肺损伤保护作用机制的初步研究

目的：初步探讨银杏叶提取物金纳多（Ginaton）对内毒素（lipopolysaccharide, LPS）诱导小鼠的急性肺损伤(acute lung injury, ALI)保护作用的可能机制。方法：于小鼠腹腔注射LPS（10 mg/kg）复制ALI动物模型。将小鼠随机分为对照组、LPS组、Ginaton组和Ginaton＋LPS组。观察各组肺组织病理学改变,测量肺湿/干重比,支气管肺泡灌洗液蛋白含量及乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）活性,测量丙二醛（malondialdehyde, MDA）、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, iNOS）和髓过氧化物（myeloperoxidase,MPO),免疫组织化学方法检测血红素加氧酶（heme oxygenase HO-1）及iNOS蛋白表达。结果： 金纳多可有效减轻LPS所致肺组织病理学变化,并降低肺湿/干重比和肺泡灌洗液中蛋白含量,降低肺泡灌洗液中LDH活性、肺组织MPO和iNOS活性,同时MDA和NO含量下降。免疫组织化学结果显示,LPS组iNOS表达上升（P＜0.01）,而血红素加氧酶（HO-1）蛋白表达未见明显变化;而预先给予Ginaton可显著提高HO-1的表达,降低iNOS的表达（P＜0.01）。结论：Ginaton可减轻LPS所致急性肺组织损伤,其机制可能与诱导HO-1的表达,下调iNOS的表达和活性有关。     

NPS 2143, a selective calcium-sensing receptor antagonist inhibits lipopolysaccharide-induced pulmonary inflammation

NPS 2143, a novel and selective antagonist of calcium-sensing receptor (CaSR) has been reported to possess anti-inflammatory activity. In the present study, we examined the protective effect of NPS 2143 on lipopolysaccharide (LPS)-induced acute lung injury (ALI). NPS 2143 pretreatment significantly inhibited the influx of inflammatory cells and the expression of monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in the lung of mice with LPS-induced ALI. NPS 2143 decreased the levels of neutrophil elastase (NE) and protein concentration in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF). NPS 2143 also reduced the production of inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) in the BALF and serum. In addition, NPS 2143 attenuated the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2), and increased the activation of AMP-activated protein kinase (AMPK) in the lung. NPS 2143 also downregulated the activation of nuclear factor-kappa B (NF-κB) in the lung. In LPS-stimulated H292 airway epithelial cells, NPS 2143 attenuated the releases of IL-6 and MCP-1. Furthermore, NPS 2143 upregulated the activation of AMPK and downregulated the activation of NF-κB. These results suggest that NPS 2143 could be potential agent for the treatment of inflammatory diseases including ALI.     

重组人血清白蛋白-硫氧还蛋白融合蛋白对流感病毒所致急性肺损伤小鼠的保护作用

目的:探讨重组人血清白蛋白(HSA)-硫氧还蛋白(Trx)融合蛋白(HSA-Trx)对流感病毒感染所致急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用。方法:利用毕赤酵母表达系统产生基因重组HAS-Trx融合蛋白,PR8(H1N1)流感病毒诱导ALI小鼠模型,设健康对照组、ALI组、ALI+Trx组和ALI+HSA-Trx组,每组10只。收集各组支气管肺泡灌洗液(BALF),计算细胞总数,测定肺泡中性粒细胞数量,考马斯亮蓝溶液法测定蛋白浓度,ELISA法测定BALF中干扰素γ(IFN-γ)含量。收集肺组织进行苏木精-伊红染色,免疫荧光法检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和3-硝基酪氨酸(NO2-Tyr)的表达。收集血浆,使用CR2000RC分析仪测量血浆中过氧化物浓度。结果:HSA-Trx治疗显著降低ALI小鼠BALF中总细胞、中性粒细胞数量和总蛋白的含量(P<0.05),降低肺组织中8-OHdG和NO2-Tyr水平和血浆中过氧化物浓度(P<0.05),但对肺组织iNOS和IFN-γ的表达无显著抑制效果(P>0.05)。结论:HSA-Trx能够抑制肺组织炎症反应和肺内一氧化氮的过量产生,这对流感病毒诱导的ALI小鼠具有一定的保护作用。     

亚精胺减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的　观察亚精胺（spermidine）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）的影响。 方法　采用5 mg/kg的LPS经气管滴注,建立ALI小鼠模型。用小动物呼吸机检测亚精胺对ALI小鼠呼吸功能的影响;观察亚精胺对ALI小鼠肺组织形态变化的影响;检测ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白、总细胞数及中性粒细胞数目,并检测髓过氧化物酶（MPO）的水平;qPCR检测ALI小鼠肺组织中TREM-1 mRNA的表达;ELISA检测ALI小鼠BALF中sTREM-1的蛋白水平。 结果　亚精胺可改善ALI小鼠的呼吸功能;减轻LPS诱导的肺部病理损伤;减少蛋白渗出和中性粒细胞浸润;降低ALI小鼠肺内炎症放大受体TREM-1的表达。 结论　亚精胺能减少炎症细胞浸润,抑制炎症因子表达,从而减轻LPS诱导的ALI,其机制可能与亚精胺可抑制ALI小鼠肺组织TREM-1表达有关。     

CD40 plays a crucial role in lipopolysaccharide-induced acute lung injury

Activated alveolar macrophages (AMphi) are known to constitute a critical modulator of the lung inflammatory response through the production of various mediators. However, the role of activated AMphi in acute lung injury (ALI) and acute respiratory distress syndrome is less well known. To address this issue, we examined a lipopolysaccharide (LPS)-induced lung injury model for the role of activated AMphi in vivo, focusing on activation through CD40, which is one of the most important pathways for the activation of antigen-presenting cells. Without CD40, LPS-induced ALI was significantly reduced in its histological degree of injury and recruitment of neutrophils into the lung. In addition, the release in the lung of inflammatory mediators such as tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1beta, macrophage inflammatory protein 2, or matrix metalloproteinase was significantly reduced in mice deficient in CD40 (CD40KO). To elucidate the mechanism of this attenuation of ALI in CD40KO mice, we studied the function of AMphi ex vivo. AMphi purified from CD40KO mice could not induce expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) by LPS, although iNOS in wild-type AMphi was induced by LPS independently of CD40-CD154 interaction. The loss of surface expression of CD40 was enough to interrupt the expression of iNOS in AMphi in response to LPS. Also based on the tissue nitrotyrosine staining, the reactive oxygen and nitrogen intermediates seemed to be reduced in tissue in CD40KO mice. These results indicated that activation of AMphi through CD40 might be involved not only in amplification by the interaction with CD154 but also in the development of ALI by CD40 itself, and that the functional blockade of CD40 would yield one of the targets for the treatment of LPS-induced ALI and acute respiratory distress syndrome.     

外源性一氧化氮抗内毒素致肺微血管高通透性的作用机制初探

目的和方法:应用气管内滴注脂多糖(LPS)致SD大鼠急性肺损伤(ALI)模型和体外培养人血中性粒细胞(PMN),观察一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对LPS所致肺内PMN聚集、微血管通透性增高及PMN凋亡的影响。结果:①整体实验中LPS组(气管滴注LPS100μg/只)的支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、PMN数量、肺组织中伊文思蓝(EB)含量和染料单星蓝(MB)颗粒标记的肺微血管数目均明显高于假手术组,而LPS+SNP组(气管同时滴注LPS和SNP5μg/只)上述指标均明显低于LPS组;②体外培养人血PMN,SNP(5×10^-3mol/L)组的PMN凋亡百分率明显高于对照组,SNP+LPS组明显高于LPS(10μg/L)组。结论:气管内滴注SNP能够减少PMN在肺内的聚集,在一定程度上起到抗LPS所致的以肺微血管高通透性为特征的ALI的作用。促进PMN凋亡可能是SNP减轻PMN在肺内聚集的机制之一。     

Azilsartan attenuates lipopolysaccharide-induced acute lung injury via the Nrf2/HO-1 signaling pathway

Acute lung injury (ALI) is a severe complication of sepsis and hemorrhagic shock with high morbidity. In the present study, the protective effect of Azilsartan on lipopolysaccharide (LPS)-induced ALI in mice was investigated to explore the potential therapeutic property of Azilsartan for the treatment of ALI. LPS was used to induce an ALI model in mice. Hematoxylin–eosin (HE) staining sections were then evaluated for the pathological state of lung tissues. Bronchoalveolar lavage fluid (BALF) protein concentration, wet/dry weight ratios of lung tissues, and pulmonary myeloperoxidase (MPO) activity were detected to determine the degree of pulmonary injury. The number of total cells, macrophages, and neutrophils in BALF were counted using a hemocytometer to illustrate the inflammatory cell infiltration. The lung function was monitored using a spirometer. The concentrations of interleukin-1β (IL-1β), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), and interleukin-8 (IL-8) were determined using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Oxidative stress was evaluated by the superoxide dismutase (SOD) activity, glutathione (GSH), and malondialdehyde (MDA) concentrations in the lung tissue. The expressions of nuclear erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) and heme oxygenase-1 (HO-1) were determined using Western blot analysis. Azilsartan therapy alleviated LPS-induced lung tissue damage, increased BALF protein concentration, lung wet to dry weight ratio, MPO activity, and macrophage and neutrophils infiltration. Also, Azilsartan ameliorated the production of inflammatory factors (IL-1β, MCP-1, and IL-8). Azilsartan ameliorated LPS-impaired lung SOD activity, the GSH concentration, and the MDA concentration. Mechanistically, Azilsartan activated the LPS-impaired Nrf2/HO-1 signaling pathway. Azilsartan therapy attenuates LPS-induced ALI via the Nrf2/HO-1 signaling pathway.

     

亚精胺减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的　观察亚精胺（spermidine）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）的影响。 方法　采用5 mg/kg的LPS经气管滴注,建立ALI小鼠模型。用小动物呼吸机检测亚精胺对ALI小鼠呼吸功能的影响;观察亚精胺对ALI小鼠肺组织形态变化的影响;检测ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白、总细胞数及中性粒细胞数目,并检测髓过氧化物酶（MPO）的水平;qPCR检测ALI小鼠肺组织中TREM-1 mRNA的表达;ELISA检测ALI小鼠BALF中sTREM-1的蛋白水平。 结果　亚精胺可改善ALI小鼠的呼吸功能;减轻LPS诱导的肺部病理损伤;减少蛋白渗出和中性粒细胞浸润;降低ALI小鼠肺内炎症放大受体TREM-1的表达。 结论　亚精胺能减少炎症细胞浸润,抑制炎症因子表达,从而减轻LPS诱导的ALI,其机制可能与亚精胺可抑制ALI小鼠肺组织TREM-1表达有关。