丹参酮ⅡA磺酸钠对家兔缺血预处理心肌保护作用的影响

目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠对家兔缺血预处理心肌保护作用及血浆和心肌组织NO代谢产物含量的影响。方法家兔24只 ,随机分为心肌缺血再灌注组 (IR ,n=8)、缺血预处理组 (IPC,n=8)和丹参酮ⅡA磺酸钠联合缺血预处理组 (DS-201 IPC,n=8) ;TTC染色测定梗塞面积 ;HE染色病理组织学观察。采用硝酸还原酶法检测缺血前、缺血后30min和再灌注30min三个时点血浆及心肌组织NO代谢物含量。结果 (1)TTC染色称重结果显示 ,IPC组心肌梗死面积 (梗死区重量/缺血区重量为9.54±5.79)明显小于IR组 (梗死区重量/缺血区重量为35.48±3.84Δ ,P<0.05) ,DS201 IPC组心肌梗死面积 (梗死区重量/缺血区重量为5.66±1.6)明显小于IPC组心肌梗死面积 (P<0.05)。病理学检测显示 ,与IR组相比 ,IPC组组织损伤程度明显减轻。与IPC组相比 ,DS201 IPC组组织损伤程度明显减轻。 (2)缺血30min和再灌注30minIR组血浆NO代谢产物[缺血30min(11.2±3.9)μmol/L,再灌注30min(11.6±5.6)μmol/L]和心肌组织NO代谢产物[再灌注30min末(23.0±5.3)μmol/mg]显著低于缺血前[血浆NO代谢产物为(28.5±6.8)μmol/L,心肌组织NO代谢产物为(49±18.3)μmol/mg](P<0.05) ;缺血30min和再灌注30minIPC组血浆NO代谢产物[缺血30min(19.5±2.5)μmol/L,再灌注30min(1     

丹参酮Ⅱ—A对豚鼠单个心室肌细胞跨膜电位及L—型钙电流的影响

本实验采用膜片钳全细胞记录方法，观察了丹参酮Ⅱ－Ａ（ＤＳＴ）对豚鼠单个心室肌细胞跨膜电位及Ｌ－型钙电流以的影响，用蛋白酶（０．２ｍｇ／ｍｌ０循环消化的方法获得了７０～８０％耐钙心肌细胞，实验表明，ＤＳＴ能显著缩短豚鼠心肌单细胞的动作电位时程（ＡＰＤ），呈剂量依赖关系（ｒ＝－０．９９）至静息电位（ＲＰ）无何影响，ＤＳＴ１０μｍｏｌ．Ｌ＾－１对超射（ＯＳ）和动作电位幅度（ＡＰＡ）无显著影响，ＤＳＴ２０     

5-羟色胺对大鼠心肌单相动作电位及室性心律失常的影响

为探讨5-HT与缺血性室性心律失常的关系,观察了外源性5-HT对大鼠在体缺血心肌单相动作电位(MAP)及心电图的影响。结果证实(1)5-HT使心肌缺血动物DVA的VE数目增加,VT、VF持续时间延长,而不造成非心肌缺血动物的室性心律失常。(2)5-HT对缺血心脏DVA的影响不是通过MAPD的延长,而是与缺血心肌Vmax及MAPA有关。     

丹参酮ⅡA对急性肾功能衰竭大鼠肾脏的保护作用

目的探讨丹参酮ⅡA对急性肾功能衰竭(AFR)大鼠肾小管上皮细胞及肾功能的作用。方法将64只大鼠分为4组:对照组、模型组、丹参酮低剂量组和丹参酮高剂量组,每组又分为48 h组和72 h组两个亚组。应用肌肉内注射甘油制备大鼠AFR模型。然后腹腔内注射不同浓度的丹参酮ⅡA进行干预。然后在48 h和72 h检测血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)和24 h尿蛋白定量;同时制作组织切片,观察肾组织结构改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织Ki-67的表达。结果丹参酮高剂量72 h组的各项病理损害指标均低于其他各组(P<0.05);丹参酮高剂量48 h及72 h组的Ki-67阳性细胞计数明显高于其他各组(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA对急性损伤的肾小管上皮细胞具有减轻病变和促进再生的作用,可明显改善ARF大鼠的肾功能。     

丹参酮ⅡA保护脑缺血再灌注损伤的蛋白组学机制研究

目的 建立大脑缺血再灌注（I/R）损伤小鼠模型,探讨丹参酮ⅡA(Tanshinone IIA)对其神经保护作用及可能的蛋白组学机制。方法 将70只C57BL/6N雄性小鼠随机分为假手术组、缺血再灌注损伤模型对照组、丹参酮ⅡA治疗组。模型组采用大脑中动脉栓塞法（tMCAO）制作脑I/R损伤模型,丹参酮ⅡA治疗组采用10 mg/kg丹参酮ⅡA腹腔注射长时程干预28 d,进行神经功能评分及脑梗塞体积测定,取损伤半侧脑组织进行蛋白组学检测。结果 丹参酮ⅡA治疗可以降低脑I/R损伤后的神经功能评分,减少脑梗塞面积;蛋白组学分析显示丹参酮ⅡA治疗组与模型组比较,有109个差异蛋白表达,模型组与假手术组比较,有168个差异蛋白表达,3组比较差异表达蛋白45个,丹参酮ⅡA治疗后蛋白表达谱差异主要与脂质代谢调节、铁代谢等蛋白水平相关。结论 丹参酮ⅡA能保护脑缺血再灌注损伤,其长时程保护作用机制可能与调控脂质代谢及铁代谢等多个通路的共同作用有关。蛋白组学特征为研究丹参酮ⅡA保护脑缺血再灌注损伤的分子基础提供了一定的科学依据。     

丹参酮ⅡA对高糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用

目的:观察丹参酮ⅡA对高糖刺激人脐静脉内皮细胞凋亡的影响,并探讨相关的作用机制。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法定量检测内皮细胞凋亡情况;免疫印迹法检测抗凋亡分子Bcl-2、促凋亡分子Bax以及细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)的蛋白表达水平。结果:丹参酮ⅡA可抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞存活率的减少以及凋亡率的增加。此外,丹参酮ⅡA处理后,Bcl-2蛋白表达显著增加,Bax蛋白表达显著减少,并且线粒体Cyt C释放受到明显抑制。结论:丹参酮ⅡA可以通过调节线粒体凋亡信号通路相关蛋白表达而对抗高糖诱导内皮细胞的凋亡。     

垂体后叶素对心肌单相动作电位的影响及机理

用保持家兔处于闭胸状态记录心外膜心肌单相动作电位(MAP)的技术,研究垂体后叶素(Pt)对MAP的影响及机理。结果表明,Pt可致动物心率减慢、MAP振幅和V_(max)降低、MA时限延长和MAP间期不等以及室性早搏等。用阿托品(1mg/kg iv)或心得安、立其丁(各1mg/kg iv)或同时给予三种受体阻断剂后,再用Pt(2u/kg iv),出现与上述基本一致的电生理改变。结果提示:心肌MAP改变的机理是由于Pt直接作用于全身血管平滑肌使之收缩,外周阻力增加,心室的后负荷增大,心输出量减少和冠状动脉收缩血流阻力增加所致的全心性缺血。     

丹参酮ⅡA对急性心肌梗死大鼠的心肌凋亡及Bax与Caspase-3表达的影响

目的探讨丹参酮ⅡA对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞凋亡与Bax、Caspase-3蛋白表达的影响。方法选取36只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham)、急性心肌梗死组(AMI)和丹参酮ⅡA治疗组(TanⅡA),通过冠状动脉左前降支结扎大鼠建立AMI模型。制模2周后行超声心动图检查观察各组动物心脏功能情况,而后处死动物取出心脏,原位末端凋亡法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况,Western blot方法检测Bax及Caspase-3的蛋白表达。结果与假手术组比较,AMI组左室射血分数(LVEF)及左室长轴缩短分数(FS)升高,左室舒张末期内径(LVDd)及左室收缩末期内径(LVDs)降低,心肌细胞凋亡数明显升高,Bax与Caspase-3蛋白表达量显著上调(P0.01);与AMI组比较,丹参酮ⅡA能扭转上述变化(P0.01)。结论丹参酮ⅡA对急性心肌梗死大鼠的作用与抑制心肌细胞凋亡和凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3表达相关。     

丹参酮ⅡA对豚鼠肥厚心肌延迟整流钾通道的影响

目的: 通过研究丹参酮ⅡA(TSN)对豚鼠肥厚心肌细胞快激活延迟整流钾电流(I_Kr)和慢激活延迟整流钾电流(I_Ks)的影响,在离子通道水平探讨丹参酮ⅡA抗肥厚心肌心律失常的机制。方法: 采用腹主动脉结扎技术制造心肌肥厚模型,将豚鼠随机分为假手术组(A组)、肥厚模型组(B组)、低剂量丹参组(C组,10 mg·kg^-1·d^-1)、高剂量丹参组(D组,20 mg·kg^-1·d^-1)和缬沙坦治疗组(E组,10 mg·kg^-1·d^-1),每组12只。通过应用标准的全细胞膜片钳技术记录各实验组心肌细胞膜上动作电位时程(APD)、I_Ks和I_Kr密度的变化。结果: (1)与A组相比,B组、C组、D组和E组手术后4周血压均明显升高,差异有显著差异(P＜0.01),B、C、D和E组间血压无显著差异(P＞0.05)。(2)与A组相比,B组心肌细胞的膜电容明显升高,APD显著延长(P＜0.01)。 (3)与B组相比,C、D和E组显著缩短肥大心肌细胞APD的延长,降低膜电容和阻断心肌细胞上I_Kr、I_Ks的密度(P＜0.01);C和D组间无显著差异(P＞0.05)。结论: 丹参酮Ⅱ-A能降低肥厚心肌细胞上I_Kr 和I_Ks的密度,可能是其干预肥厚心肌电生理异常的重要机制之一。     

丹参酮ⅡA对高原缺氧大鼠认知功能障碍的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对高原缺氧(HH)大鼠认知功能障碍的预防作用及其可能机制。方法:将54只成年雄性SD大鼠分为对照组(control)、高原缺氧组(HH)和TanⅡA治疗组(TanⅡA)。通过低压氧舱模拟高原环境,低氧28 d造模。利用Morris水迷宫试验评估大鼠认知功能;利用膜片钳技术记录海马长时程增强(LTP),评估各组大鼠认知功能;取海马组织低温匀浆,利用试剂盒检测其SOD、GSH-Px、GSH、MDA等氧化应激相关指标,评价各组大鼠海马氧化应激状态。结果:HH组大鼠在水迷宫试验中逃避潜伏期较control组延长(P 0. 05),缺氧大鼠在目标象限游动时间百分比下降;与HH组相比,TanⅡA治疗组逃避潜伏期缩短(P 0. 05),在目标象限游动时间百分比升高(P 0. 05),HH组LTP幅度较对照组显著降低(P 0. 05),TanⅡA干预后,海马LTP较模型组明显增强(P 0. 05);相对control组,HH组大鼠海马SOD、GSH-Px、GSH水平显著降低(P 0. 05)、MDA水平明显升高(P 0. 05),TanⅡA治疗组可显著逆转上述结果(P 0. 05)。结论:TanⅡA可通过降低高原缺氧大鼠海马氧化应激水平、提高其清除氧自由基能力保护海马神经元,进而减轻大鼠认知功能障碍。     

The therapeutic effect of tanshinone IIA in mouse astrocytes after treatment with Angiostrongylus cantonensis fifth-stage larval excretory-secretory products

BackgroundAngiostrongylus cantonensis is an important food-borne zoonotic parasite that causes eosinophilic meningitis and meningoencephalitis in humans. Excretory-secretory products (ESPs) are valuable targets for studying host-parasite relationships. ESPs are composed of a variety of molecules that are used to penetrate defensive barriers and avoid immune attack of the host. Tanshinone IIA (TSIIA) is a vasoactive cardioprotective drug that is widely used in studies evaluating potential therapeutic mechanisms. In this study, we will evaluate the therapeutic effects of TSIIA in mouse astrocytes after A. cantonensis fifth-stage larvae (L5) ESPs treatment.MethodsHere, we examined the therapeutic effect of TSIIA by real-time qPCR, western blotting, activity assay, and cell viability assays.ResultsFirst, the results showed that TSIIA can elevate cell viability in astrocytes after stimulation with ESPs. On the other hand, TSIIA downregulated the expression of apoptosis-related molecules. However, the expression of molecules related to antioxidant, autophagy, and endoplasmic reticulum stress was significantly increased. The results of antioxidant activation assays showed that the activities of superoxide dismutase (SOD), glutathione S-transferase (GST), and catalase were significantly increased. Finally, we found that cell apoptosis and oxidative stress were reduced in TSIIA-treated astrocytes by immunofluorescence staining.ConclusionThe findings from this study suggest that TSIIA can reduce cellular damage caused by A. cantonensis L5 ESPs in astrocytes and clarify the related molecular mechanisms.     

心肌缺血时心室肌细胞的动作电位交替与镁的抗电交替作用

在模拟缺血条件下，采用程序电刺激的方法，观察离体豚鼠心室肌细胞动作电位交替的发生，演变和消失过程及镁对ＡＡＰ的影响。结果表明：缺血初期首先出现２：１的动作电位时程交替，然后出现２：１的动作电位振幅交替，随着缺血时间延长，低窄的动作电位逐渐减小，最后消失，ＡＡＰ一般历时约３０ｍｉｎ。随着刺激频率的增快，ＡＡＰ出现率明显增多，交替程度增大。镁对“缺血”性ＡＡＰ有明显拮抗作用。     

丹参酮IIA对低氧条件下人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及与HIF-1α、VEGF和野生型P53蛋白表达的关系

 目的:探讨低氧条件下丹参酮IIA（Tan IIA）对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法:用氯化钴（CoCl2）创建低氧模型,实验分为常氧对照组、低氧对照组和低氧+Tan IIA处理组。不同浓度的Tan IIA 分别作用于低氧下人肝癌HepG2细胞24 h、48 h和72 h,采用MTT法测定Tan IIA 对低氧下HepG2细胞增殖的抑制作用。不同浓度的Tan IIA 分别作用于低氧条件下HepG2细胞24 h和48 h后,Hoechst 33258染色法检测细胞核的形态学变化并计算凋亡率。不同浓度的Tan IIA 作用于低氧条件下人肝癌HepG2细胞48 h后,Western blotting检测低氧诱导因子1α (HIF-1α)、血管内皮生长因子（VEGF）和野生型P53的蛋白表达情况。结果:低氧条件下Tan IIA以时间和剂量依赖方式抑制HepG2细胞的生长和增殖。Tan IIA 作用于低氧下的HepG2细胞后,可见典型的凋亡细胞形态学特征,细胞凋亡率呈时间、剂量依赖性的增加。Western blotting免疫印迹法显示常氧对照组的HIF-1α和VEGF表达较低,而低氧对照组的HIF-1α、VEGF蛋白表达较常氧组升高,低氧下随着Tan IIA 浓度的升高,HIF-1α和VEGF蛋白的表达明显降低,野生型P53蛋白的表达随着Tan IIA 浓度的升高而升高。结论: 低氧条件下,Tan IIA能抑制肝癌HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制HIF-1α和VEGF蛋白表达,上调P53蛋白表达有关。     

Development and evaluation of a fully automated monophasic action potential analysis program

A fully automated program has been developed for analysing digitised cardiac monophasic action potentials (MAPs) of several animal species. Under diverse conditions, the program’s performance is evaluated by comparison with high-resolution manual analysis of action potential duration, MAP detection, baseline and plateau determination. For each variable, the differences between both forms of analysis are categorised according to species (rabbit, dog or baboon), intervention (control, sematilide or LY-190147), rhythm source (sinus or paced), and rates. They are then examined using ANOVA (null hypothesis: no difference between methods for any category). Intra-group differences are significant for baseline selection (p<0.05), and treatment effects are significant (p<0.05) for one species (baboon). However, the differences found are negligible when compared with expected measurement errors. Thus the program reliably detects and accurately analyses MAPs, independent of species, drug or pacing. The program’s strength is its use of simple heuristic algorithms to identify and profile MAP signals while rejecting spurious transients. These algorithms focus on the procedural aspects of automatic MAP detection and validation, with minimum use of complex mathematics. The program’s estimated throughput exceeds 8200 MAPs min⁻¹ on a 50 MHz i486 DX machine. With available data format conversion packages, signals from almost any data-acquisition source can be analysed.     

丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注大鼠心功能和免疫反应的调节作用

目的　本文研究丹参酮IIA磺酸钠注射液（Sodium tanshinone IIA sulfonate,TIIA）对心肌缺血再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）大鼠心功能和免疫反应的调节作用及其机制。 方法　采用冠状动脉结扎法建立心肌缺血再灌注大鼠模型;随机分成5组：Ctrl组、I/R组、I/R+TIIA（0.5 mL）组、I/R+TIIA（1 mL）组和I/R+TIIA（2 mL）组;测定平均动脉压（mean ventricular systolic pressure,MAP）、左室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）和心率（heart rate,HR）;采集血清Elisa检测心损标记物表达水平和氧化应激指标含量;HE染色和TUNEL染色观察心肌损伤情况;流式分选外周血CD4+iNOS+,CD4+IL-10+凋亡变化;蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白和P65、IL-8及TNF-α表达情况。 结果　丹参酮ⅡA磺酸钠注射液能上调MAP、HR和LVSP水平以改善I/R模型大鼠心功能(P＜0.01);降低血清中CK-MB、cTnΙ和Mb的表达上调;减少MDA、LDH表达,增加SOD水平;改善心肌组织的病理改变,抑制心肌细胞凋亡,上调Bcl-2、下调Bax蛋白表达(P＜0.01);减少iNOS+和增加IL-10+细胞凋亡而改善Th1/Th2平衡(P＜0.01);抑制P-P65、IL-8和TNF-α的表达下调(P＜0.01)。 结论 丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与改善心功能,调节免疫反应有关。     

丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注大鼠心功能和免疫反应的调节作用

目的　本文研究丹参酮IIA磺酸钠注射液（Sodium tanshinone IIA sulfonate,TIIA）对心肌缺血再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）大鼠心功能和免疫反应的调节作用及其机制。 方法　采用冠状动脉结扎法建立心肌缺血再灌注大鼠模型;随机分成5组：Ctrl组、I/R组、I/R+TIIA（0.5 mL）组、I/R+TIIA（1 mL）组和I/R+TIIA（2 mL）组;测定平均动脉压（mean ventricular systolic pressure,MAP）、左室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）和心率（heart rate,HR）;采集血清Elisa检测心损标记物表达水平和氧化应激指标含量;HE染色和TUNEL染色观察心肌损伤情况;流式分选外周血CD4+iNOS+,CD4+IL-10+凋亡变化;蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白和P65、IL-8及TNF-α表达情况。 结果　丹参酮ⅡA磺酸钠注射液能上调MAP、HR和LVSP水平以改善I/R模型大鼠心功能(P＜0.01);降低血清中CK-MB、cTnΙ和Mb的表达上调;减少MDA、LDH表达,增加SOD水平;改善心肌组织的病理改变,抑制心肌细胞凋亡,上调Bcl-2、下调Bax蛋白表达(P＜0.01);减少iNOS+和增加IL-10+细胞凋亡而改善Th1/Th2平衡(P＜0.01);抑制P-P65、IL-8和TNF-α的表达下调(P＜0.01)。 结论 丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与改善心功能,调节免疫反应有关。     

不同月龄大鼠单侧大脑中动脉闭塞对心肌的影响

３个月及１８个月大鼠各４０只闭塞单侧大脑中动脉后３小时其心肌组织病理学，超微结构，Ｎ－乙酰－β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶活性，超氧化物歧化酶活性和过氧化脂质代谢产物丙二醛含量，外周血血小板聚集度等变化的比较发现，老年大鼠的心肌改变程度比成年大鼠明显，表现为心肌组织点状坏死灶，线粒体肿胀，部分峭排列不规则，ＮＡＧａｓｅ活性增高，ＳＯＤ水平下降，ＭＤＡ含量升高，血小板解聚度降低等。提示老年大鼠脑腐卒中发生后可     

bFGF对局灶性脑缺血大鼠脑组织GRP78表达的影响

目的研究大鼠脑缺血再灌注后对葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP78)表达的影响,探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元GRP78的调节作用及机制。方法应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞2h再灌注损伤12h,采用TUNEL法、免疫组化检测海马及皮质内神经元凋亡和GRP78的表达。结果 sham组,海马及皮质偶见凋亡细胞,皮质及海马神经元内少见GRP78免疫反应阳性细胞;I/R组,海马及皮质神经元凋亡增加,缺血再灌注损伤后皮质及海马神经元内GRP78阳性表达明显高于假手术组。bFGF组,海马及皮质神经元凋亡减少,皮质及海马神经元内GRP78表达较I/R组明显增加。结论 bFGF显著减少缺血神经元凋亡,上调脑缺血诱导的GRP78表达,对脑缺血再灌注海马及皮质神经元的具有保护作用。     

bFGF对局灶性脑缺血大鼠脑组织ERK表达的影响

目的研究大鼠脑缺血再灌注后对胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)表达的影响,探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元ERK的调节作用及机制。方法应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞2 h再灌注损伤24 h,采用TUNEL法、免疫组化检测海马及皮质内神经元凋亡和ERK的表达。结果 sham组鼠海马及大脑皮质偶见凋亡细胞,大脑皮质及海马神经元内少见ERK免疫反应阳性细胞;I/R组鼠海马及皮质神经元凋亡增加,缺血再灌注损伤后大脑皮质及海马神经元内ERK阳性表达明显高于假手组;bFGF组鼠海马及皮质神经元凋亡减少,皮质及海马神经元内ERK表达较I/R组明显增加。结论 bFGF显著减少缺血神经元凋亡,上调脑缺血诱导的ERK表达,对脑缺血再灌注海马及皮质神经元的具有保护作用。