1例ABw19亚型的血型分子机制分析

目的对1例ABw19亚型的血型分子机制进行研究。方法对1例ABO血型正反定型不符患者的血型通过基因测序等方法研究其分子机制。结果该患者血型鉴定为比较少见的ABw19亚型,该亚型是由于ABO血型基因第7外显子存在646T/A杂合,导致F216I氨基酸改变所致。结论 ABO血型基因646TA突变可能是导致ABw19亚型的分子遗传基础之一。     

1例B3亚型的分子机制及家系调查

目的分析B3亚型家系成员的血型血清学特点及分子机制。方法应用常规血型血清方法进行血型鉴定;采用PCR-SSP法进行ABO初步基因分型检测,并对ABO基因第6和第7外显子的核苷酸序列进行扩增、测序和分析。结果本家系中2人为A₁B₃亚型,血清中含有抗-B抗体;3人为B3亚型,血清中不含抗-B抗体。基因分析第7外显子上存在1054C>T突变,导致多肽链第352位精氨酸被色氨酸替换。结论基因点突变1054C>T是导致B₃亚型的分子遗传基础,且在家系中能够稳定遗传,采用分子生物学技术和人源抗血清可正确鉴定B₃亚型。     

cisAB03血型鉴定及家系分析

目的对罕见的ABO亚型标本进行ABO血型鉴定及家系调查分析。方法采用血型血清学方法对家系标本进行ABO血型鉴定,正反定型不符的标本采用ABO血型基因检测及cisAB与B(A)血型基因分型等分子生物学方法,并分析血型遗传规律。结果该家系调查发现2例血清学结果正反定型结果不符,1例血清学正定型为AB型,反定型为O型,ABO基因型为cisAB03/O2型。另1例标本正定型为AB型,反定型为B型,ABO基因型为cisAB03/B型。结论对ABO血型血清学正反定型不符的标本,可以用家系调查和分子生物学方法进行辅助验证,并能阐述ABO血型弱表达现象的分子基础。     

ABO亚型B(A)04鉴定及家系调查

目的对罕见的ABO亚型标本进行ABO血型鉴定及家系调查分析。方法采用血型血清学方法对家系标本进行ABO血型鉴定,同时采用PCR-SSP方法检测红细胞ABO血型基因及ABO cisAB与B(A)血型基因分型,并分析血型遗传规律。结果该家系调查发现2例血清学结果正反定型结果不符,均为血清学结果为正定型AB型,反定型B型,ABO基因型为B(A)04/O2型。结论对ABO血型血清学正反定型不符的标本,可以用家系调查和分子生物学方法进行辅助验证,并能阐述ABO血型弱表达现象的分子基础。     

Bel亚型与α1,3半乳糖基转移酶基因G952A多态性关系的研究

目的 研究红细胞ABO血型系统中B放散型的ABO基因分子遗传基础.方法 通过标准血型血清学试验鉴定了3例Bel亚型及15例对照B型样本,采用ABO基因分型PCR序列特异性引物、ABO基因第6及第7外显子PCR产物直接测序及克隆测序等方法进行ABO基因及亚型的定型.结果 在1例血型血清学检测为Bel亚型标本中,发现一个新的B等位基因.该等位基因与B101标准等位基因相比,差异仅在于ABO基因的第7外显子上nt952位G>A突变,导致多肽链Val318Met,定为B放散型(Bel)新基因,GenBank注册号为EF117687.而其余2例Bel型样本及15例对照B型样本含正常标准B基因.结论 首次在ABO基因编码区核苷酸930位后的错义突变中发现并报道了新B等位基因,表明1,3半乳糖基转移酶基因G952A多态性可能是Bel分子遗传机制之一.     

A×B亚型1例报道

目的通过对1例A×B亚型的鉴定,说明血型鉴定中正反定型及ABO亚型对输血的重要性。方法按照试剂所提供的操作方法进行血型血清学检测,进行ABO血型正反定型,抗人球蛋白检测。结果血清学试验表明,被检者的红细胞与A抗体发生凝集,与B抗体不发生凝集,与抗-AB发生凝集,被检者的血清与A1型红细胞、B型红细胞、O型红细胞不发生凝集,初步判定为A×B亚型。结论 ABO亚型是ABO抗原以外的抗原性较弱的亚型或变异,主要是由糖基转移酶基因突变或单碱基因缺失等原因导致A抗原或B抗原表达减弱,是导致正反定型不符,血型误判及配血不合的主要原因,给血型鉴定及患者输血带来困难。在临床工作中,应重视ABO血型亚型的存在,提高输血安全性。     

罕见的AEL.05亚型等位基因的鉴定及家系分析

目的 A_(el)是中国人群中1种较为常见的ABO亚型,其分子机理尚未完全阐明。本文对1例A_(el)亚型家系进行分子机制研究。方法在常规血型血清学鉴定的基础上,应用吸收放散法鉴定弱血型抗原;PCR-SSP方法进行ABO基因初步分型;PCR方法扩增ABO基因的7个外显子;对扩增产物进行直接测序和克隆后测序分析。构建3D分子模型,并就突变对α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶稳定性改变(ΔΔG)的影响进行预测。结果吸收放散试验证明患者红细胞上存在弱A抗原,血清学定型为典型的A_(el)表型;ABO基因初步分型为A1/O型,测序发现第7外显子767位碱基TC突变,导致A糖基转移酶第256位异亮氨酸被苏氨酸替换,血型基因型为ABO*AEL.05/O.01.01。分子模建与分析提示突变导致蛋白局部氢键作用力改变不显著,但突变导致ΔΔG值的升高,表明蛋白稳定性降低。结论α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶p.I256T突变可能通过降低了酶的稳定性导致A_(el)表现型。     

ABO血型系统B101-O02等位基因杂交导致的Bw亚型

目的 研究中国汉族个体红细胞ABO血型Bw亚型的分子遗传背景.方法 通过标准血型血清学方法 鉴定了1个家庭3例ABw亚型,PCR扩增样本基因组DNA的ABO基因增强子、启动子和外显子1～7及侧翼内含子序列,PCR产物经割胶纯化后直接测序,并将含有多态性位点的外显子7克隆到pcDNA3.1(-)质粒,转化DH5α后进行单倍体序列分析.结果 3例ABw亚型的直接序列分析发现其ABO基因均有A102、B101和002等3种等位基因部分序列特征,但无法直接确定其基因型.单倍体序列分析表明,其中1个等位基因为A102,另1个为B101-O02杂交等位基因,表现为B101等位基因基础上的646T>A,657T>C和681G>A变异.在110份随机样本中未发现该杂交等位基因.结论 B101和O02等位基因杂交可能是导致该Bw亚型的分子机制.     

ABO血型变异与B糖基转移酶关系研究

目的研究ABO血型B亚型系统Bw亚型与B糖基转移酶的关系。方法运用血型血清学鉴定方法鉴定1个家庭2例ABO血型的Bw亚型,运用聚合酶链式反应的方法扩增糖基转移酶1~7号外显子,送到试剂公司测序。结果直接测序发现2例ABO血型的Bw亚型,其中B糖基转移酶基因第721位C〉T的转变,导致糖基转移酶多肽链Arg241Trp的转变。结论糖基转移酶基因第721位的C〉T的突变引起糖基转移酶活性的消失或者减弱,导致Bw亚型。     

3例ABO血型鉴定正反不符患者基因序列分析——附1个新的ABO等位基因突变点位的发现

目的 探讨导致3例ABO血型正反定型不符的分子机制。方法 采用血型血清学方法对ABO正反定型不符标本进行亚型鉴定;采用PCR方法扩增ABO基因的6、7外显子;采用测序方法对ABO6、7外显子进行直接测序。结果 血型血清学试验结合基因测序证实3例标本为分别为：AwB(1例)、Ael(2例)。基因直接测序发现先证者1在A等位基因第7外显子发生了476C>T、595C>T突变,在B等位基因第7外显子526C>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C、930G>A突变;先证者2、3在A等位基因第7外显子发生了476C>T和767C>T突变,两标本突变点符合Ael₀₅。以上的基因位点改变均导致了ABO血型的血清学表型变化,表现为ABO亚型。先证者3的母亲及女儿都携带Ael₀₅等位基因。结论 本研究揭示了3例ABO亚型的分子遗传背景,并发现1个新的ABO血型等位基因,即：c.595C>T单基因位点突变。     

广东瑶族人群HBsAg阳性与ABO血型的相关性研究

目的了解广东瑶族人群HBsAg阳性与ABO血型的相关性。方法采用ELISA法及微量板法分别检测1559例瑶族人群血液HBsAg与ABO血型,并对HBsAg阳性者的ABO血型分布及性别分布进行分析。结果共检出HBsAg阳性299例,总阳性率为19．18％,其中男性为19．70％,女性为18．70％,男女阳性率差异无统计学意义（χ^2=0．25,P〉0．05）。不同性别HBsAg阳性者的血型分布特点为：男性：A〉O〉AB〉B,女性：AB〉O〉A〉B,不同性别分布差异无统计学意义（χ^2=8．51,P〉0．05）。HBsAg阳性者中A2亚型阳性率为66．67％,A2亚型全部为女性。结论广东瑶族人群HBsAg阳性率高于全国平均水平,HBsAg阳性者的ABO血型分布无性别差异。     

弱反应Am亚型1例

无偿献血者 ,女 4 1岁。ABO血型鉴定时发现正定为O型 ,反定为A型。为正确判定血型做如下血清学鉴定。1　ABO血型鉴定　结果见表 1。献血者红细胞与抗 A、抗 B不出现凝集 ,但与抗 AB反应 30min后有弱凝集 ,室温反应最好 ,考虑为A亚型或B亚型。表 1　ABO血型正反定型反应温度 正定型抗 A抗 B抗 AB抗 H反定型AcBcOc自身c4℃ 0 0± 4+0 3 +0 0室温 0 0± 4+0 3 +0 03 7℃ 0 0± 4+0 3 +0 02　吸收放散试验　反应结果见表 2。由吸收放散结果可知 ,该献血者可能有A抗原 ,但原液和吸收液均为 4 +凝集 ,进一步检测抗 A体抗效价 ,…     

非亲缘异基因骨髓移植中ABO血型不合的供髓输注和护理

目的 探讨非亲缘异基因骨髓移植中ABO血型不合的供髓输注的要点又护理，方法 对7例ABO血型主要不合的受者在移植前一天用CS-3000Plas血细胞分离机，进行血浆置换术，5例ABO血型次要不合者用血库专用离心机在温度4℃，2000转/min离心15min去除供者血浆。ABO血型主，次要均不合采用置换受者血浆，去除供者红细胞。结果 11例输髓过程顺利，无溶血反应，经处理好转，13例血型不合患者的造血功能均获重建，血除供者红细胞，结果 11例输髓过程顺利，无溶血反应，经处理好转，13例血型不合患者的造血功能均获重建。血除供者红细胞，结果 11例输髓过程顺利，无溶血反应，经处理好转，13例血型不合患者的造血功能均获重建。血型在2-3个月内转为供者血型。结论 加输髓前、中、后均采取周密的预防措施，密切观察病情，发现问题及时处理，13例ABO血型不合的髓均顺利输注到受体内，并获得造血重建。     

免疫磁珠试剂在ABO血型反定型检测中的应用

人ABO血型是由红细胞抗原和血(浆)清中抗体决定的,用抗-A和抗-B试剂检测红细胞抗原称之正定型,用A型和B型红细胞检测血清中抗体称之为反定型.正常健康人的ABO血型正反定型应相符合[1],即A型人红细胞上有A抗原,血清中有抗-B抗体;B型人红细胞上有B抗原,血清中有抗-A抗体;AB型人红细胞上有AB抗原,血清中无ABO血型抗体;O型人红细胞上无A和B抗原,血清中有抗-A,抗-B抗体.对于临床病人ABO血型正反定型结果经常出现不相符合现象,分析追踪其不相符原因,可以正确地判断血型和选择血型相容的血液进行输血.目前,ABO血型正反定型已是临床常规检测项目,卫生部要求每名就医患者都需要进行正反定型.     

ABO基因转录调控机制研究进展

ABO血型抗原不仅表达于红细胞表面,在多种组织的上皮细胞、内皮细胞中也有表达。在细胞发育、分化、成熟过程中ABO抗原表达状态发生一系列变化,在一些疾病,如血液系统疾病、恶性实体瘤的进程中,红细胞及组织中ABO抗原的表达水平也会发生改变。为弄清ABO抗原表达变化的调节机制,本文综述了ABO抗原表达相关的转录调控分子基础,包括ABO基因上游、下游和内含子中的转录调控元件及这些区域结合的转录因子的调控作用,以及与ABO基因转录相关的表观遗传调控机制,反义RNA的调控机制,为系统性的认识调控ABO基因转录的分子机制提供参考。     

Genotyping of samples lacking expected antibodies in ABO blood group

We report nine donations with ABO inconsistency in reverse typing caused by partly or entirely missing antibodies. A and B antigens and antibodies were examined by serological blood typing, and ABO deoxyribonucleic acid (DNA) analyses were performed by sequence-specific priming and sequencing. A B101 allele was demonstrable in a case with O phenotype. The molecular mechanisms in deficiency of natural ABO antibody could be partly clarified. The ABO genotyping technique is an accurate method for determining the blood samples involved in ABO grouping discrepancies and is a valuable complement to serology for correct determination of donor blood status. The mechanisms involved in the absence of potent natural antibodies directed against A and B antigen lacking on an individual's own red cell membranes remain to be further investigated.     

天然ABO抗体缺失的分子机制研究

目的 从ABO基因水平探讨正常人群血型鉴定中出现天然抗体缺失的机制.方法 部分或全部缺失抗体导致ABO血型正反定型不一致的15个正常健康个体运用检验红细胞表面血型抗原最为敏感的方法-吸收放散试验未能检测出其抗原性.PCR扩增后直接序列分析ABO基因全长编码区及5'端调控(CBF/NF-Y)增强子区域多态性.结果 在常规的血清学反向定型实验中,这15个标本的血清中部分或全部缺失抗体,吸收放散实验与A或B型红细胞反应均为阴性.12个标本的ABO基因分析定型、增强子区域多态性与血清学结果相符合,1个O表型的标本中存在B101等位基因,2个B表型标本中检测出A102等位基因.结论 天然ABO抗体缺失的分子机制可能部分被揭示:ABO基因编码少量表达抗原,按照天然抗体产生规律,导致不能产生相应的ABO抗体.ABO基因分型在正反定型不符的疑难血液标本鉴定中,是血清学方法 非常有益的补充手段,是正确鉴定血型的有效方法.     

Analysis of ABO grouping discrepancies among patients from a tertiary hospital in Korea

BackgroundAccurate ABO typing is essential for preventing ABO incompatibility reactions. However, the causes of ABO grouping discrepancy has not been sufficiently studied, and it may vary among different ethnic populations. Thus, the aim of this retrospective study was to investigate the causes of ABO discrepancy in the East Asian population.Materials and methodsA retrospective observational study on ABO typing discrepancy among patients in a tertiary hospital was carried out using the electronic medical record database of Samsung Medical Center (Seoul, Korea) between July 2016 and May 2019.ResultsABO grouping was performed on 551,959 blood samples during the study period; 1468 events of serologic ABO discrepancy were determined from 1334 (0.24 %) samples. A total of 134 samples (0.02 %) presented multiple causes of ABO discrepancy. Weak/missing serum reactivity (594, 40.5 %) was the most frequent reason for ABO discrepancy, followed by extra serum reactivity (370, 25.2 %), weak/missing red cell reactivity (267, 18.2 %), mixed-field red cell reactivity (176, 12.0 %), and extra red cell reactivity (61, 4.2 %). In the category of weak/missing red cell reactivity, ABO subgroup was the most common reason, and using ABO genotyping, 26.2 % of the cases genotyped were found to be related to the cis-AB allele.ConclusionsOur results suggest that the incidence and cause of ABO typing discrepancies vary among institutes and ethnic groups. Our data helps to better understand and facilitate the resolution of ABO typing discrepancies in patients.