长链非编码RNA HOTAIR在宫颈癌患者组织及HeLa细胞中的表达和影响

目的探讨长链非编码RNA HOTAIR在宫颈癌患者组织中的表达及对宫颈癌细胞系He La细胞增殖和凋亡的影响。方法 66例宫颈癌手术切除标本(包括癌组织和癌旁组织),实时荧光定量PCR检测HOTAIR的表达,分析其与临床病理特征的关系;用慢病毒介导shRNA干扰人宫颈癌细胞He La HOTAIR表达后,分别用CCK-8法、流式细胞术检测细胞增殖、周期和凋亡。结果 HOTAIR在宫颈癌组织中的相对表达量为8.25±0.46,高于癌旁组织的3.60±0.26(P0.001);HOTAIR的表达水平与临床病理分期(P0.05)、肿瘤大小(P0.05)、淋巴结转移(P0.05)密切相关;HOTAIR的表达被干扰后,He La细胞增殖明显减慢,48、72和96 h的抑制率分别为20%、24.6%和33.1%;细胞周期被阻滞于G0/G1期;HOTAIR干扰组细胞凋亡比例为12.37%±2.74%,高于对照组的5.94%±1.27%(P0.01)。结论 HOTAIR在宫颈癌组织中显著高表达,可以作为宫颈癌预测、判断预后的分子标志物和潜在的治疗靶点。     

长链非编码RNA调控肿瘤细胞凋亡的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度>200个核苷酸、通常不编码蛋白质的RNA。近年研究表明,lncRNA在肿瘤的的发展过程中发挥抑癌或促癌作用,参与细胞增殖、凋亡等过程。本综述简要介绍lncRNA的生物学功能及其调控细胞凋亡的研究进展。     

长链非编码RNA CRNDE调控胶质瘤细胞凋亡

目的 探讨长链非编码RNA CRNDE在胶质瘤细胞凋亡中发挥的功能和可能的作用机制.方法 将CRNDE基因干扰siRNA转染人胶质瘤U87细胞系,利用PE Annexin-V/7-AAD双染,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并利用Western方法检测细胞凋亡关键蛋白的表达变化.结果 siRNA干扰CRNDE表达的胶质瘤细胞中,细胞凋亡程度增加,凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase7、Caspase9、PARP表达量明显升高.结论 CRNDE可能通过降低凋亡相关蛋白活性及表达水平,抑制胶质瘤细胞凋亡能力.     

长链非编码RNA调控细胞凋亡及自噬的研究进展

<正>细胞死亡根据其表观形态学特征分为:凋亡、自噬、坏死等,随着研究的进展,逐步发现了其它多种死亡类型。细胞死亡是胚胎发育、组织稳态和免疫调节的基础。机体通过多种不同的细胞死亡方式维持各种组织、器官的正常运行以及机体内环境的稳态。细胞死亡机制的失调可引起肿瘤等多种疾病。近年来研究显示,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在细胞中表达水平上的差异与多种     

长链非编码RNA亚细胞定位和功能的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)的亚细胞定位和其功能息息相关,定位于细胞核时,lncRNA可以维持染色质结构,调控基因转录,参与mRNA的可变剪接;定位于细胞质时参与信号传导、转录后调控、翻译和翻译后修饰;定位于细胞器时协助完成细胞器的功能。lncRNA的亚细胞定位机制与其自身序列、结合蛋白等密切相关。此外通过构建核滞溜载体Snovector、添加胞质定位元件等强制改变lncRNA的亚细胞定位,以及利用APEX2等技术研究lncRNA亚细胞定位和其功能之间的关系,有利于lncRNA疗法的开发。     

长链非编码RNA与结直肠癌

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200 nt的非蛋白编码RNA分子,能同时与DNA、RNA和蛋白质分子相互作用,通过转录和转录后调控等多种作用机制在结直肠癌中发挥促癌或抑癌的双重作用。lncRNA表达异常或突变在结直肠癌的发生、发展、侵袭和转移过程中扮演着重要角色,且与患者预后密切相关。lncRNA有望为成为结直肠癌新的诊断和治疗靶点。     

长链非编码RNA与病毒和微小非编码RNA关系的研究进展

非编码RNA,包括以miRNA、siRNA和piRNA等为代表的短小RNA和长链非编码RNA.长链非编码RNA,有别于其他小分子非编码RNA,是目前非编码RNA研究的热点.随着研究的不断推进,人们发现lncRNA与物种进化、胚胎发育、物质代谢以及肿瘤发生等都有着密切的联系.microRNA是一类长度为19～ 23个核苷酸的内源性非编码RNA,可以在转录水平或转录后水平调节基因的表达.     

长链非编码RNA-AP000344.3对人膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及机制

目的探讨特异性长链非编码RNA-AP000344. 3对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法采用qRT-PCR检测膀胱癌细胞和正常膀胱上皮细胞中AP000344. 3的表达,选取表达量最低的癌细胞株进行后续实验。采用Lipofectamine2000转染试剂将AP000344. 3质粒或阴性对照质粒转入膀胱癌细胞中,qRT-PCR检测AP000344. 3的转染效率。MTT法检测细胞的增殖活性,Transwell实验检测细胞的侵袭能力。生物信息学预测AP000344. 3的下游miRNA和下游基因。qRT-PCR和Western blot法检测下游基因的表达。结果膀胱癌细胞中AP000344. 3的表达显著低于正常膀胱上皮细胞(P 0. 01),BIU87细胞中表达最低(P 0. 01)。AP000344. 3转染48 h后BIU87细胞AP000344. 3表达上调(P 0. 01)。BIU87细胞增殖活性降低(P 0. 05),细胞侵袭能力降低(P 0. 05)。AP000344. 3可靶向结合miR-135a-5p,miR-135a-5p可靶向结合CMTM3。AP000344. 3表达上调后,miR-135a-5p表达下调(P 0. 01),CMTM3 mRNA和蛋白表达上调(P 0. 01)。结论AP000344. 3在膀胱癌细胞中明显低表达,AP000344. 3上调可抑制膀胱癌细胞增殖和侵袭,其作用机制可能是抑制miR-135a-5p的表达进而上调CMTM3蛋白的表达,为寻找膀胱癌新的治疗靶点提供理论依据。     

长链非编码RNA在卵巢癌中的研究进展

长链非编码RNA (lncRNA)是指长度超过200个核苷酸、具有调控基因表达作用的非编码RNA,近年来,因其具有复杂的生物学功能而引起了研究者的广泛关注.目前研究证实,lncRNA与多种肿瘤的发生发展有着密切的关系,可能参与促进或抑制肿瘤的生长和与肿瘤的转移有关.在卵巢癌中,某些lncRNA也被证实可能参与其致病过程.     

长链非编码RNA与口腔癌研究进展

口腔癌(oral cancer)是口腔外科常见的恶性肿瘤,易发生转移且预后不容乐观,长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)是一类内源性的长度大于200个核苷酸、缺少特异完整的开放阅读框,不具有蛋白质编码功能的转录本,最初认为并没有生物学功能,但随着生物学技术的发展,发现其能够在表观遗传水平、转录水平和转录后水平等多个层面上调控基因的表达,从而影响机体生长、发育、衰老和死亡等重要的生命活动以及疾病的发生和发展。近年来的研究显示口腔癌的发生、发展、侵袭、转移和预后与lncRNA的表达水平密切相关。因此本文对lncRNA在口腔癌中的研究进展进行论述,并探讨lncRNA与口腔癌发生、发展之间的关系,旨在进一步阐述lncRNA与OSCC的关系并为寻找口腔癌肿瘤标志物提供新的方向,为口腔癌患者提供新的治疗策略。     

长链非编码 RNA Gm15577参与小鼠小脑神经元增殖与分化

目的鉴定新的参与奈美亨综合征（ NBS ）小鼠模型中与小脑发育缺陷相关的长链非编码RNA（ lncRNA）,并探讨其与小脑增殖分化相关的功能。方法利用芯片技术分析野生型（野生组,Nbs1CNS-ctr）小鼠及Nbs1神经元特异性敲除（突变组,Nbs1CNS-del）小鼠小脑中RNA的表达差异;利用即时荧光定量PCR技术对芯片结果加以验证;针对目的RNA,检测其全身表达及小脑中表达模式、细胞内定位以及对母基因的表达调控模式。结果 lncRNA Gm15577是由神经生长调节因子-1（ Negr1）基因内部的内含子区反向转录而成,特异性表达于小脑,且在其发育过程中呈动态变化趋势,而Nbs1缺失之后整体表达水平显著降低;同时,与未分化期比较,分化后的小鼠小脑原代神经前体细胞中Gm15577及其母基因Negr1均有显著升高;Gm15577敲低之后导致Negr1以及小脑增殖分化相关因子Shh与β-catenin 在RNA水平的表达显著下调;人髓母细胞瘤临床样本数据分析表明Negr1基因在正常人群与肿瘤患者之间有显著的表达差异。结论从神经特异性敲除Nbs1小鼠模型出发报道了一个新的与小鼠小脑发育相关的lncRNA Gm15577,初步结果表明Gm15577通过调控Negr1进而影响小脑神经元增殖与分化进程中的Shh与β-catenin信号通路,其基因行为异常有可能与髓母细胞瘤发病有一定的相关性。     

长链非编码RNA与糖尿病关系的研究进展*

Long non-coding RNAs (lncRNAs) are a group of RNAs, which are longer than 200 nucleotides without containing functional open reading frame and cannot encode protein. The study of lncRNA will help to understand the multi-level expression regulatory network of the body, and is expected to provide the basis of prediction, diagnosis and treatment of complex diseases. Although the functions and mechanism of lncRNA remain unclear, some studies indicate that lncRNA is involved in the development of diabetes mellitus, and those lncRNAs may be new diagnostic markers and therapeutic targets.     

左旋门冬酰胺酶与盐霉素联合作用对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖凋亡的影响

 目的：研究左旋门冬酰胺酶（L-asparaginase,L-ASP）与盐霉素（salinomycin,Sal）联合作用对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖和凋亡的影响及其机制。方法：CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况;Western blotting方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase-3、caspase-8、caspase-9及细胞色素C表达的变化;流式细胞术分析各实验组细胞凋亡率之间的差别。结果：不同浓度的L-ASP和Sal单独处理Jurkat细胞株后均显示出明显的增殖抑制作用,L-ASP的IC50为812 IU/L,Sal 的IC50为0.75 μmol/L。而两药联合使用的增殖抑制作用更显著（P<0.05）;合用指数计算公式结果显示两药为协同作用。Western blotting 显示联合用药组与L-Asp、Sal单独处理组相比,Bcl-2蛋白表达明显减少,caspase-3、caspase-8、caspase-9和胞浆细胞色素C水平明显增高;干预48 h后行流式细胞术检测结果显示L-ASP（25 IU/L）单独处理组和Sal（0.5μmol/L）单独处理组细胞凋亡率分别为（7.11±0.23）%和（25.43±047）%,与对照组（6.67±0.13）%比较差别有统计学意义（P＜0.05),联合用药组细胞凋亡率（39.12±1.97）%分别与L-ASP、Sal单独处理组比较,差别有统计学意义（P＜0.05)。结论：左旋门冬氨酸酶与盐霉素联合作用于Jurkat细胞具有协同抑制增殖和诱导凋亡的作用。     

长链非编码RNA KLHL7-DT对人退变髓核细胞增殖和凋亡的影响及其相关机制

目的 探讨长链非编码RNA KLHL7-DT对人退变髓核细胞增殖和凋亡的影响及其相关机制。方法 选取2018年1月—2019年10月南京江北医院骨科脊柱骨折患者手术切除的正常椎间盘标本18例,其中男11例、女7例,年龄为22~46 （38.3±4.3）岁,PfirrmannⅠ级6例、Ⅱ级12例。取椎间盘标本常规分离、培养髓核细胞,使用10 ng/mL IL-1β处理髓核细胞获得退变髓核细胞。将退变髓核细胞分为沉默对照组、KLHL7-DT沉默组、过表达对照组、KLHL7-DT过表达组。4组细胞分别对应转染沉默对照序列、siRNA-KLHL7-DT沉默序列、过表达对照序列、KLHL7-DT过表达序列。取转染后4组退变髓核细胞采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测聚集蛋白聚糖（Aggrecan）、Ⅱ型胶原（Col Ⅱ）蛋白的表达情况。结果 （1）KLHL7-DT过表达组EdU染色阳性细胞/DAPI染色阳性比值（0.147±0.002）低于过表达对照组（0.203±0.007）,而KLHL7-DT沉默组比值（0.428±0.050）高于沉默对照组（0.240±0.032）,差异均有统计学意义（t=14.25、-5.44,P值均<0.05）。（2）KLHL7-DT过表达组细胞凋亡率（19.01%±0.41%）高于过表达对照组（14.38%±0.31%）,KLHL7-DT沉默组细胞凋亡率（16.08%±0.59%）低于沉默对照组（17.42%±0.36%）,差异均有统计学意义（t=15.69、3.36,P值均<0.05）。（3）Western blot结果显示,KLHL7-DT过表达组细胞Aggrecan和Col Ⅱ蛋白的相对表达量（分别为0.34±0.29、0.57±0.11）均低于过表达对照组（1.00±0.22、1.05±0.10）,KLHL7-DT沉默组Aggrecan和Col Ⅱ蛋白的相对表达量（分别为1.77±0.14、1.63±0.12）均高于沉默对照组（1.10±0.18、0.98±0.08）,差异均有统计学意义（t=3.10、5.54、-5.05、-7.66,P值均<0.05）。结论 上调KLHL7-DT的表达可抑制退变髓核细胞的增殖,促进退变髓核细胞的凋亡,其机制可能是通过调节细胞外基质Aggrecan、Col Ⅱ蛋白的合成,进而参与椎间盘退变的发展。     

长链非编码RNA TTTY15在骨肉瘤组织中的表达及其对骨肉瘤细胞活力和侵袭的影响

目的:观察长链非编码RNA TTTY15在骨肉瘤组织及细胞株中的表达,并探讨其对骨肉瘤细胞活力和侵袭的影响。方法:应用qPCR法检测11例骨肉瘤组织及其瘤旁组织中TTTY15的水平,同时检测TTTY15在骨肉瘤细胞株(143B、Saos2、MG-63、U2OS和HOS)和人成骨细胞株hFOB1.19中的表达。在表达量最高的细胞株(MG-63)中通过转染小干扰RNA敲减TTTY15的表达,CCK-8法检测TTTY15低表达对细胞活力的影响,流式细胞术检测其对细胞周期的影响,Transwell检测其对细胞侵袭能力的影响,qPCR检测miR-216b-5p和FOXM1 mRNA的表达,Western blot法检测相关蛋白的变化。结果 :与瘤旁正常组织相比,TTTY15在骨肉瘤组织中表达升高(P0.01);与人成骨细胞相比,TTTY15在骨肉瘤细胞株中表达升高(P0.05),其中在MG-63细胞中表达水平最高(P0.01)。敲减TTTY15在MG-63细胞的表达后,细胞活力降低(P0.05),细胞周期被抑制在G_0/G_1期(P0.01),细胞的侵袭能力降低(P0.01),miR-216b-5p mRNA表达水平升高(P0.01),FOXM1的mRNA表达降低(P0.01),同时FOXM1、CDK4、cyclin D1、MMP-2和N-cadherin的蛋白表达降低,而E-cadherin的蛋白表达升高(P0.05)。结论:TTTY15在骨肉瘤组织和细胞株中表达增高,敲减TTTY15的表达可抑制骨肉瘤细胞的活力和侵袭能力,其机制可能与TTTY15低表达导致miR-216b-5p的表达升高,引起FOXM1基因表达下调有关。