Sirt1参与异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大

目的:观察Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶1(Sirt1)在异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌肥大中的表达及作用。方法:昆明小鼠随机分为正常对照组、ISO模型组和ISO+NAM(烟酰胺,Sirt1抑制剂)组。皮下注射ISO诱导小鼠心肌肥大。以心脏重量指数(心脏重量/体重)、HE染色、透射电镜以及脑钠肽(BNP)mRNA表达水平观察心肌肥大的变化。同时采用RT-PCR、Western blotting检测各组心肌Sirt1 mRNA、蛋白质的表达。结果:与对照组相比,心脏重量指数,HE染色,透射电镜以及BNP mRNA表达水平均显示皮下注射ISO可明显诱导小鼠心肌肥大;Sirt1在心肌肥大模型组表达显著增多(P0.01),其抑制剂NAM可明显减轻ISO诱导的心肌肥大(P0.05),并降低Sirt1的表达(P0.01)。结论:Sirt1的激活可能参与ISO诱导的小鼠心肌肥大。     

NF-κB参与Akt信号途径激活诱导的心肌肥大

目的：探讨NF-κB信号在Akt信号途径激活诱导的心肌肥大发生机制中所起的作用。 方法： 以缩窄SD大鼠升主动脉诱导的心肌肥大和心脏特异性表达的caAkt转基因小鼠为模型，采用EMSA检测心肌组织中NF-κB结合活性，应用Western blot方法分析心肌组织中phospho-Akt 和 phospho-IκBα的表达水平。 结果： ①缩窄大鼠升主动脉3周后，心脏重量/体重比值高于假手术组34.5%(P＜0.01) ，而且肥大心肌组织中p-Akt蛋白表达明显高于假手术组(P＜0.01)。②caAkt转基因小鼠心脏明显肥大，其心肌组织中NF-κB活性比野生型小鼠高567.86%(P＜0.01)，同时心肌组织中IκBα的磷酸化水平也明显高于野生型小鼠(P＜0.01)。 结论： NF-κB介入到Akt信号途径激活所致的心肌肥大发生发展过程中。     

低氧环境运动对营养性肥胖大鼠心肌细胞自噬相关蛋白表达的影响

目的:研究低氧环境运动对营养性肥胖大鼠心肌细胞自噬相关蛋白LC3、beclin-1、p62和AMPKα2表达的影响,为低氧环境运动改善机体形态和促进心肌组织自噬的保护功能提供实验依据。方法:7周高脂膳食诱导SD大鼠营养性肥胖模型,建模成功后随机分为常氧对照(NC)组、常氧运动(NE)组、16.3%低氧环境安静(HC1)组、16.3%低氧环境运动(HE1)组、13.3%低氧环境安静(HC2)组和13.3%低氧环境运动组(HE2),每组10只,各组均维持高脂饲料喂养。运动组大鼠进行1周适应性跑台训练,正式训练跑速为20 m/min,运动时间40 min/d,每周5 d,跑台坡度0°,持续8周。末次训练24 h后,处死大鼠并采样,采用Western blot技术检测大鼠心肌beclin-1、LC3、p62和AMPKα2的表达水平。结果:8周低氧环境耐力运动后,与NC和HC1组相比,NE、HE1和HE2组大鼠体重和Lee指数显著降低(P0.05),心脏重量指数显著升高(P0.05);HE1和HE2组体重显著低于NE组(P0.05)。Western blot结果显示,NE和HE1组大鼠心肌AMPKα2蛋白表达显著低于NC组(P0.05),而HE2组AMPKα2蛋白表达显著高于NC组(P0.05),且显著高于其他组(P0.05);HC2、HE1和HE2组beclin-1蛋白表达显著高于NC组(P0.05),HE1和HE2组beclin-1蛋白表达显著高于NE组(P0.05);其他各组LC3-II/LC3-I比值显著高于NC组(P0.05),而p62蛋白表达显著低于NC组(P0.05);HE1和HE2组LC3-II/LC3-I比值显著高于HC1组(P0.05),HE2组LC3-II/LC3-I比值显著高于NE组(P0.05)。结论:低氧环境运动可改善营养性肥胖大鼠形态,升高心脏重量指数。低氧环境或(和)运动均可上调beclin-1和LC3蛋白表达,下调p62蛋白表达,增强心肌细胞自噬水平,可能有利于提高对心肌细胞的保护功能。     

白藜芦醇减轻异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌细胞肥大

目的探讨白藜芦醇(RES)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌细胞肥大的保护作用及对心肌肥大时内质网应激相关因子GRP78和GRP94表达的影响。方法建立ISO诱导大鼠心肌细胞肥大模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、异丙肾上腺素组(加入ISO 0.3μg/m L作用48 h)、白藜芦醇干预组(RES 11.4μg/m L作用48 h)和白藜芦醇对照组。采用Leica 2Q500图像分析系统检测心肌细胞表面积和心肌肥大标志基因心房钠尿肽(ANP)表达,评价心肌细胞肥大程度;检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量;实时定量PCR,检测ANP mRNA基因表达和Western blot分析GRP78和GRP94的蛋白表达。结果异丙肾上腺素注射液组与正常对照组比较,ISO作用心肌细胞48 h诱导心肌细胞肥大后,内质网应激相关因子GRP78和GRP94蛋白表达均增高(P0.01,P0.05);白藜芦醇干预组与异丙肾上腺素组比较,RES干预可以有效抑制ISO诱导的心肌细胞肥大(P0.05);同时降低GRP78和GRP94的蛋白表达(P0.05,P0.01),减少细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的释放(P0.05)。结论 RES通过抑制心肌细胞内质网GRP78和GRP94表达,发挥对心肌肥大的保护作用。     

银杏总黄酮抑制心肌细胞过度自噬对缺血性心力衰竭大鼠心肌重塑和内质网应激的调节

目的:探究银杏总黄酮(TFG)抑制心肌细胞过度自噬对缺血性心力衰竭(IHF)大鼠心肌重塑和内质网应激(ERS)的调节作用。方法:左冠状动脉结扎法构建IHF大鼠模型,造模前给予TFG 25 mg/kg、100 mg/kg灌胃处理,连续7 d,1次/d,同时设立空白对照组(Control)和美托洛尔组[美托洛尔片12 mg/(kg·d)];HE染色观察大鼠心肌组织结构损伤,qRT-PCR和免疫组化检测心肌组织中Caspase-3含量,心脏超声心动图检查大鼠左心室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(FS)、左室壁厚度(LVWT)、左心室收缩期末容积(LVESV)、左心室舒张末容积(LVEDV),Western blot检测ERS和自噬相关蛋白表达。结果:与IHF model组相比,给予TFG处理后心肌细胞排列趋于整齐,细胞间隙明显减少,LVWT、LVWF、FS、GADD34、Bip及p62表达明显升高,LVESV、LVEDV、Caspase-3、CHOP、cleaved Caspase-12、Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平明显下降(P0.05),且高剂量组改善效果与阴性对照组相近,明显优于低剂量组(P0.05)。结论:银杏总黄酮可有效抑制IHF大鼠心肌细胞的凋亡和心肌重塑,可能与内质网应激和自噬相关蛋白有关。     

热休克蛋白A12B介导COX-2表达调控心肌缺血再灌注损伤中心肌细胞线粒体自噬的作用研究

目的 探讨热休克蛋白A12B(HSPA12B)对心肌缺血再灌注(MI/R)损伤中心肌细胞线粒体自噬的影响及可能的分子机制。方法 将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、p LVX-NC组和p LVX-HSPA12B组,每组10只。其中,假手术组大鼠仅暴露心脏,不进行MI/R处理;模型组大鼠给予心肌内注射0.9%氯化钠注射液20μL,7 d后构建MI/R模型; p LVX-NC组大鼠给予心肌内注射20μL p LVX-NC慢病毒液,7 d后构建MI/R模型; p LVX-HSPA12B组大鼠给予心肌内注射20μL p LVX-HSPA12B慢病毒液,7 d后构建MI/R模型。ELISA检测各组大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)含量,HE染色观察各组大鼠心肌组织病理学形态,TUNEL染色检测各组大鼠心肌组织内细胞凋亡情况,免疫组织化学染色检测各组大鼠心肌组织内环氧化酶-2(COX-2)和微管相关蛋白1轻链3β(LC3β)表达,Western blot检测各组大鼠心肌组织内LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及Parkin、PINK1蛋白的表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大...     

厄贝沙坦对大鼠梗死心肌组织中HGF mRNA和蛋白水平的影响

目的:通过观察厄贝沙坦对大鼠心肌梗死模型中缺血心肌肝细胞生长因子(HGF)mRNA和蛋白水平的影响,探讨厄贝沙坦减轻心肌纤维化的可能机制。方法:采用雄性Wistar大鼠建立心肌梗死模型,术后24 h将存活大鼠随机分为模型组和厄贝沙坦组,另设假手术组,每组9只大鼠。厄贝沙坦组予以厄贝沙坦50 mg·kg-1·d-1灌胃,模型组及假手术组给予等体积生理盐水灌胃,每天1次。4周后心脏取材,测量各组大鼠体重及左室重量,HE染色法观察缺血心肌病理改变,RT-q PCR和Western blot法检测各组大鼠心肌组织中HGF mRNA及蛋白水平的表达。结果:HE染色可见假手术组心肌细胞排列整齐,模型组及厄贝沙坦组心肌结构紊乱,药物组病理改变较模型组减轻;4周后各组大鼠体重无显著差异,各组间左心室重量差异有统计学意义(P0.01),厄贝沙坦组及模型组左室重量高于假手术组(P0.05),同时厄贝沙坦组低于模型组(P0.05);各组大鼠心肌组织中均检测到HGF的mRNA及蛋白水平,厄贝沙坦组及模型组HGF的mRNA与蛋白含量均高于假手术组(P0.05),厄贝沙坦组HGF的mRNA与蛋白水平低于模型组(P0.05)。结论:心肌梗死模型大鼠应用厄贝沙坦治疗4周时左室重量明显减轻,心肌组织病理变化得到改善,心肌组织中HGF的mRNA与蛋白水平降低。     

环孢霉素A诱导大鼠心肌纤维化和对基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响

目的:研究环孢霉素A(CsA)诱导的大鼠心肌损伤及心肌纤维化的程度,检测基质金属蛋白酶(MMP) 2和MMP9及其组织抑制物(TIMP) 2和TIMP1表达的变化,为探寻CsA诱导心肌纤维化的发生机制提供理论依据。方法:64只健康雌性6～8周龄Wistar大鼠随机分为4组:对照组、低剂量CsA组、中剂量CsA组和高剂量CsA组,分别腹腔注射生理盐水、5 mg·kg~(-1)·d~(-1)CsA、12. 5 mg·kg~(-1)·d~(-1)CsA和25 mg·kg~(-1)·d~(-1)CsA,分别在第1、2、3周时处死大鼠。利用HE染色观察心肌组织形态结构,Masson染色观察心肌胶原沉积情况,免疫组织化学和Western blot法检测MMP2、MMP9、TIMP2和TIMP1蛋白的表达情况。结果:HE染色可见,随着CsA作用时间的延长和剂量的增加,心肌组织形态结构损伤严重,逐渐出现心肌灶状坏死及纤维化。Masson染色结果亦可见心肌纤维化程度随着时间和剂量的增加逐渐加重。免疫组织化学及Western blot检测结果显示,在CsA导致大鼠心肌纤维化的过程中,同一时点MMP2和TIMP2随CsA剂量增加表达显著增高(P 0. 05)。第1周MMP2高表达,随着时间的延长表达逐渐减低; TIMP2则随时间延长表达逐渐增高(P 0. 05)。与对照组相比MMP9和TIMP1表达则减低。各用药组MMP9第1周低表达,第2周表达增高,第3周表达减低(P 0. 05);同一时点,CsA对于MMP9表达变化的差异无统计学显著性。TIMP1随CsA剂量增加表达增高(P 0. 05)。结论:CsA可引起大鼠心肌损伤及间质纤维化,随着用药时间的延长和剂量的增加,纤维化程度逐渐加重。CsA诱导的大鼠心肌纤维化与MMPs/TIMPs表达的改变及MMPs/TIMPs的失衡有关。     

LncRNA MALAT1在衰老大鼠心肌缺血后处理自噬水平降低中的作用

背景:缺血后处理可缓解心肌缺血再灌注损伤,但是其具体机制尚不清楚。目的:探讨lncRNA MALAT1在缺血后处理所引起衰老心肌自噬水平降低中的作用。方法:(1)27只22-24月龄SD大鼠随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组和缺血后处理组,每组9只,采用苏木精-伊红染色和Masson染色观察心肌组织形态学变化;(2)体外使用8 mg/mL D-半乳糖诱导大鼠心肌(H9C2)细胞9 d后,分为正常氧组、缺氧复氧组和缺氧后处理组。Western blot检测衰老心肌组织及衰老心肌细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ和p62蛋白的表达;采用qRT-PCR检测衰老心肌组织和衰老心肌细胞中MALAT1相对表达;转染自噬双标腺病毒(RFP-GFP-LC3)观察衰老心肌细胞自噬流的变化;衰老心肌细胞转染MALAT1干扰片段和过表达质粒,Western blot检测各组细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ和p62蛋白的表达。结果与结论:(1)与缺血再灌注组比较,缺血后处理组心肌组织结构基本清晰,细胞核完整,心肌组织间蓝色胶原纤维沉积减少;(2)与缺血再灌注组比较,缺血后处理组LC3Ⅱ/Ⅰ表达降低且p62表达增高(P <0.05)...     

腺苷A1受体诱导的心脏预处理与E-选择素和黏附分子-1表达的关系

目的了解腺苷A1受体能否诱导大鼠心脏预处理的延迟保护效应以及与其缺血-再灌注过程中心脏E-选择素(E-Selectin)和黏附分子-1(ICAM-1)表达的关系.方法雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(Z)、缺血对照组(C)、腺苷A1受体激动剂预处理组(A).离体心脏低温缺血180 min、复灌60 min.观察左室压力变化最大速率恢复率、心肌同功酶漏出活性,并以原位杂交或逆转录-PCR技术观察E-Selectin、ICAM-l表达水平.结果 A组左室压力变化最大速率恢复率明显高于C组(P＜0.05),心肌同功酶漏出活性明显低于C组(P＜0.05).A组E-Selectin、ICAM-l表达水平虽然高于Z组,但明显低于C组,差异有显著性(P＜0.01).结论腺苷A1受体可诱导大鼠心脏预处理的延迟保护效应,同时下调心脏E-Selectin、ICAM-l的表达.     

miR-214-5p靶向PAK4对缺血再灌注大鼠的心肌损伤和免疫反应的调节作用

目的:探讨微小RNA-214-5p(miR-214-5p)靶向p21活化蛋白激酶4(PAK4)对缺血再灌注(I/R)大鼠的心肌损伤和免疫反应的作用。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组、I/R组、Ad-Scramble组和Ad-miR-214组(n=9)。在大鼠左心室前壁6个不同的位点注入腺病毒;4 d后,缝合左前部下行冠状动脉构建I/R模型。RT-qPCR检测miR-214的表达水平,HE染色观察心肌损伤,ELISA检测心肌损伤标志物(CK-MB、Mb和cTnI)和炎症因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)的水平,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,试剂盒检测MDA含量和SOD活性,基因软件预测靶基因并通过双萤光素酶报告验证,Western blot检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax、PAK4、p-Akt和p-mTOR表达水平。结果:miR-214在I/R大鼠心肌细胞中低表达(P<0.01);miR-214-5p过表达减轻I/R大鼠心肌损伤程度,下调CK-MB、Mb和cTnI表达,降低心肌细胞凋亡率,上调Bcl-2表达,下调Bax、caspase-3和caspase-9表达,提高SOD活性,降低MDA、IL-6、IL-1β和TNF-α的含量(P<0.01);miR-214-5p与PAK4在3’-UTR存在结合位点,miR-214-5p过表达上调PAK4、p-Akt和p-mTOR表达(P<0.01)。结论:miR-214-5p过表达靶向PAK4减轻I/R大鼠的心肌损伤,并抑制心肌细胞凋亡、氧化应激反应和炎症反应,同时激活PI3K/Akt/mTOR通路。     

苯那普利对高血压大鼠细胞外信号调节激酶和B型钠尿肽的影响

目的：研究苯那普利对自发性高血压大鼠（SHR）细胞外信号调节激酶（ERK）和B型钠尿肽（BNP）的影响。方法：选择Wistar Kyoto（WKY）大鼠作对照，将21只14周龄雄性SHR随机分成3组：未治疗组、肼苯哒嗪组和苯那普利组，每组7只。药物溶于载体（0.5%羧甲基纤维素钠）以灌胃法给予，肼苯哒嗪10 mg·kg-1·d-1，苯那普利10 mg·kg-1·d-1，SHR未治疗组及WKY组灌喂载体，共10周。以左心室重量与体重的比值反映心肌肥厚的程度；用袖带式尾动脉测压法测量大鼠尾动脉血压；分别用Western blotting方法和RT-PCR法半定量测定大鼠心肌中磷酸化ERK（p-ERK）的蛋白表达以及BNP mRNA的含量；酶联免疫吸附法检测大鼠血浆BNP水平。结果：（1） 治疗后SHR苯那普利组和SHR肼苯哒嗪组血压相似，均显著低于SHR未治疗组（P<0.01）。（2） SHR苯那普利组心肌肥厚指数显著低于SHR肼苯哒嗪组和SHR未治疗组(P<0.01) ，与WKY组无显著差异(P>0.05)；SHR肼苯哒嗪组和SHR未治疗组心肌肥厚指数无显著差异(P>0.05)。（3）SHR苯那普利组大鼠心肌p-ERK表达显著低于SHR肼苯哒嗪组和SHR未治疗组(P<0.05) ，与WKY组无显著差异(P>0.05)。SHR肼苯哒嗪组和SHR未治疗组大鼠心肌p-ERK表达无明显差异(P>0.05)。（4） SHR苯那普利组大鼠心肌BNP mRNA和血浆BNP水平显著低于SHR肼苯哒嗪组和SHR未治疗组(P<0.05)，与WKY组无显著差异(P>0.05)；SHR肼苯哒嗪组和SHR未治疗组大鼠心肌BNP mRNA和血浆BNP水平无明显差异(P>0.05)。结论：苯那普利能通过抑制ERK活性逆转心肌肥厚，伴随BNP水平下降；而降压效果相似的肼苯哒嗪不能抑制心肌肥厚，对p-ERK和BNP水平没有影响，提示BNP水平可以反映逆转心肌肥厚药物疗效。     

P38 MAPK信号通路在漆树酸改善苯肾上腺素诱导的小鼠心肌细胞肥大中的作用

目的:探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38 MAPK)信号通路在漆树酸改善苯肾上腺素(phenylephrine,PE)诱导的小鼠心肌细胞肥大中的作用。方法:原代培养新生小鼠心肌细胞,PE诱导心肌细胞肥大。按随机数字表法将细胞分为空白对照组、溶剂对照组、PE组、PE+漆树酸组、PE+漆树酸+P38抑制剂组和PE+P38抑制剂组。收集干预48 h后的乳鼠心肌细胞进行以下检测:Western blot检测p-P38、第9位赖氨酸乙酰化的组蛋白H3(acetylated histone H3 at lysine 9,H3K9ac)和心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)的蛋白表达水平,免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)法验证p-P38与H3K9ac蛋白之间的相互作用,RT-qPCR检测肌细胞增强因子2C(myocyte enhancer factor 2C,MEF2C)mRNA表达水平,免疫荧光染色观察小鼠心肌细胞表面积。结果:Western blot及RT-qPCR结果表明小鼠心肌细胞中p-P38和H3K9ac水平在PE组显著高于空白对照组(P<0.05),心脏核心转录因子MEF2C及心肌肥厚标志物ANP表达水平在PE组显著高于空白对照组(P<0.05);而在PE处理的心肌细胞中,P38抑制剂和漆树酸能够显著降低p-P38和H3K9ac水平,且MEF2C转录水平及ANP蛋白表达水平在PE+P38抑制剂组和PE+漆树酸组也较PE组显著降低(P<0.05);Co-IP结果表明p-P38与H3K9ac存在相互调控关系;免疫荧光结果表明,与空白对照组相比,PE组心肌细胞表面积显著增大(P<0.05),而P38抑制剂和漆树酸干预后能显著降低PE诱导的心肌细胞肥大(P<0.05)。结论:漆树酸能改善PE诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能与调节P38 MAPK信号通路介导的组蛋白乙酰化修饰失衡有关。     

ECE1过表达通过eNOS/NO通路促进AngⅡ诱导的体外培养大鼠心肌细胞肥大和凋亡

目的:探讨过表达内皮素转换酶1(ECE1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的体外培养大鼠H9C2心肌细胞肥大和凋亡的影响.方法:采用AngⅡ作用于体外培养的H9C2心肌细胞,建立心肌细胞肥大模型.将细胞分为空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+质粒空载体(AngⅡ+NC)组和AngⅡ+ECE1过表达组.CCK-8法检测细胞活...     

伊贝沙坦和培垛普利对左心室肥大时心肌连接蛋白43、结蛋白与肌钙蛋白T表达的实验研究

目的：探讨左室肥大时血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型拮抗剂伊贝沙坦和血管紧张素转换酶抑制剂培垛普利对心肌连接蛋白43（CX43）、结蛋白与肌钙蛋白T（cTnT）表达的影响。 方法： 分假手术组、SD大鼠腹主动脉部分结扎的手术组及腹主动脉部分结扎的处理组即伊贝沙坦组（20 mg·kg-1·d-1 ig）、培垛普利组（2 mg·kg-1·d-1 ig）、两药联用组（伊贝沙坦组20 mg·kg-1·d-1 ig+培垛普利组2 mg·kg-1·d-1 ig），术后次周起干预8周，观察左室重量指数（LVMI）和心肌细胞横径（TDM），免疫组织化学检测心肌CX43、结蛋白与cTnT 表达。 结果： 培垛普利组、伊贝沙坦组和联合用药组LVMI和TDM均显著低于手术组（P<0.05），手术组心肌细胞闰盘区域和侧侧连接的胞膜上均有不规则CX43表达；伊贝沙坦组、培垛普利和其联用组的CX43表达分布较有规律，主要以带状表达于闰盘；手术组心肌CX43、结蛋白、cTnT表达量明显少于伊贝沙坦组、培垛普利组和其联用组（P<0.05）。 结论： 左室肥大时伊贝沙坦和培垛普利有利于心肌CX43、结蛋白与cTnT的表达与分布，能减轻左室心肌肥大，减少心肌细胞损伤，促进心肌细胞骨架结构与缝隙连接的基本正常恢复。     

心肌肥大大鼠心肌尾加压素II受体的变化

目的:观察心肌浆膜上新发现的强缩血管活性肽尾加压素II(UII)的受体在压力超荷性心肌肥大中的变化及意义。方法:在腹主动脉缩窄复制的大鼠压力超荷性心肌肥大模型上,采用放射性配基结合技术,测定术后1d(早期组)和30d(晚期组)大鼠心肌浆膜上UII受体的结合位点。结果:早期组血压较正常对照组和假手术组分别高54%和43%(P＜0.01),心重/体重比值无明显差异,受体数目(Bmax)分别上调184%和159%(P＜0.01),亲和力下降(Kd值分别高224%和206%,P＜0.01)。晚期组血压较对照组和假手术组分别高85%和67%(P＜0.01),心重/体重比值分别高18%和22%(P＜0.05),受体数目分别下调35%和41%(P＜0.05),亲和力增强(Kd值分别低30%和33%,P＜0.05)。结论:压力负荷引起心肌浆膜UII受体先增加后减少的双相变化,其变化可能参与心肌肥大的发病过程。     

肾性高血压大鼠左心室整合素β1和黏着斑激酶的表达

目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中整合素β1(integrinβ1)和黏着斑激酶(FAK)的表达变化。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,40只SD大鼠随机分为假手术组(sham)、术后2周组、术后5周组和术后7周组,血压及左心室重量指数评价造模成功后,取左心室组织,采用HE染色观察心肌细胞的形态变化,免疫组织化学和Western blotting检测各组左心室肌组织integrinβ1和FAK的表达。结果 HE染色结果显示,实验组大鼠左心室组织的心肌纤维走向紊乱,心肌细胞间隙变大;integrinβ1和FAK蛋白分别表达于心肌细胞膜和心肌细胞质近膜区,呈线样或细颗粒状分布;integrinβ1的表达强度在术后随时间呈逐渐上升趋势,至5周组趋于平稳;FAK在2周组的表达强度相对于假手术组明显下降(P0.01),实验组随术后时间增加表达量增强;Western blotting结果显示,integrinβ1和FAK在各手术组的表达均明显高于假手术组(P0.01),5周组较2周组下降明显(P0.01),7周组和5周组差异不明显(P0.05)。结论 Integrinβ1和FAK在心室肌的表达变化可能是高血压心肌肥厚的重要原因。     

坎沙曲联合缬沙坦与奥帕曲拉均减轻大鼠心肌肥厚

目的比较坎沙曲联合缬沙坦与奥帕曲拉(OMA)对大鼠心肌肥厚的保护作用。方法注射1 mg/kg异丙肾上腺素(ISO)制备大鼠心肌肥厚模型,随机分为对照组、心肌肥厚组、坎沙曲组、缬沙坦组、OMA组与坎沙曲+缬沙坦(半量及全量)组,每组n=8,染色后测定心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积;免疫组化学检测心肌组织p-PI3K和p-Akt表达;放免法测定血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、心房利钠肽(ANP)、缓激肽(BK)水平。结果 1)坎沙曲+缬沙坦(全量)及OMA组均可降低心肌肥厚组大鼠心脏重量指数(分别为3.64±0.30、3.62±0.28和4.32±0.58)、心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积的明显上升(P<0.01),两组间无明显差异。2)与心肌肥厚组相比,坎沙曲+缬沙坦(全量)及OMA组均可降低血浆AngⅡ含量[分别为(741±89)、(682±66)和(479±62)ng/L],并显著上调ANP[分别为(117±33)、(298±91)和(288±95)μg/L]及BK[分别为(124±12)、(232±21)和(309±24)ng/L]水平(P<0.01),但坎沙曲+缬沙坦(全量)较OMA组BK的上调幅度低。3)坎沙曲+缬沙坦(全量)与OMA均下调心肌肥厚组心肌组织p-PI3K和p-Akt蛋白表达,且两者间无明显差异。结论坎沙曲联合缬沙坦与OMA均可减轻大鼠心肌肥厚,但对血浆激素水平的影响有差异。     

精胺上调大鼠心肌缺血再灌注时beclin-1的表达

目的:探讨精胺(SP)对大鼠心肌缺血再灌注(IR)无复流现象的影响及机制。方法:SD大鼠(220~250 g)随机分为IR组(缺血30 min/再灌注60 min)、IR+SP组(再灌注前15 min静脉注射0.5 mmol/L SP)和假手术对照组(实施开胸手术并穿线,但不结扎)。再灌注60 min后以Evans蓝和thilflavin S染色测定心肌无复流面积,HE染色观察心肌形态学改变,同时检测血浆中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(c Tn I)的含量及心肌组织中髓过氧化物酶(MPO)的活性。再灌注结束时,取左心室肌组织,Western blot法检测心肌组织中beclin-1的蛋白水平。结果:光镜下显示IR+SP组心肌的损伤与炎性浸润减轻;心肌无复流面积、血浆CK-MB和c Tn I的含量及心肌组织MPO的活性与IR组相比均减少(P0.05);Western blot结果显示IR+SP组的beclin-1表达较IR组增加(P0.05)。结论:外源性精胺能减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与上调beclin-1有关。