Notch信号介导共培养脐带间充质干细胞和造血干细胞的相互作用

目的:探讨脐带间充质干细胞(UC-MSC)体外与造血干细胞共培养后Notch信号分子的改变。方法:通过胶原酶消化方法分离UC-MSC,通过流式细胞仪检测以及成脂、成骨和成软骨诱导鉴定UC-MSC具备间充质干细胞的特性。进而,将UC-MSC与脐血CD34+造血干细胞(HSC)体外培养,实时PCR方法检测MSC及CD34+细胞表面Notch配体及受体表达以及表达是否存在变化;在共培养体系中加入Notch信号阻滞剂DAPT(γ-secretase抑制剂),比较Hes-1基因活化状态的改变。结果:体外实验显示:UC-MSC在形态学、细胞表面表型和诱导分化能力上均具备间充质干细胞的特性。UC-MSC及CD34+细胞表面存在Notch信号配体及受体的表达,共培养后Jagged 1、Notch1基因表达明显增加;共培养后CD34+细胞中的Hes-1基因表达明显增加而加入DAPT后Hes-1基因表达未检出明显改变。结论:UC-MSC支持造血中,Notch信号可能发挥重要作用。     

成人骨髓间充质干细胞对造血干细胞体外增殖的影响

目的研究骨髓间充质干细胞（MSC）对脐带血（CB）CD34^＋细胞体外增殖和造血重建能力的影响。方法取人骨髓单个核细胞贴壁培养．梭形细胞完全融合后传代，用流式细胞仪检测免疫表型；将CBCD34^＋细胞接种到MSC或其他培养液中．比较不同培养条件对造血干细胞扩增能力、集落形成能力及黏附分子表达的影响。结果在加入IL-3的培养体系中．在MSC和细胞因子作用下，CD34^＋细胞扩增7d和14d后，有核细胞（NC）、CD34^＋细胞和CDl33^＋细胞数，实验组均显著多于对照组。CD34＋细胞在未加入IL-3的培养体系中培养8d后，实验组NC、CD34^＋细胞、CD34^＋CD38-细胞和造血祖细胞集落扩增倍数均显著高于对照组。扩增后CD34^＋细胞的ALCAM、VLA-α4、VLA-α5、VLA-β1、HCAM、PECAM和LFA-1表达较扩增前无显著变化。结论MSC可为造血干细胞（HSC）体外扩增提供适宜的微环境，有助于CD34^＋细胞体外增殖并抑制HSC分化，保持其造血重建潜能和归巢能力。     

脐血单个核细胞与骨髓间充质干细胞滋养层的共培养

背景：骨髓间充质干细胞具有维持骨髓正常造血功能,在造血调控中发挥重要的作用。 目的：观察骨髓间充质干细胞的生物学性状和多向分化能力,并检测其在体外支持造血的能力。 方法：利用密度梯度培养法分离骨髓单个核细胞进行培养,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表型;接种脐血单个核细胞于骨髓间充质干细胞滋养层培养板上共培养,观察粒-单系祖细胞集落变化。 结果与结论：骨髓间充质干细胞呈典型的成纤维样细胞形态,强表达CD44,CD29,不表达CD34和CD106。可促进脐血单个核细胞扩增并形成造血祖细胞集落。提示骨髓间充质干细具有造血支持作用。     

运动促进青春期小鼠造血干细胞造血重建功能

目的：探讨运动对青春期（4周龄）和成年（9周龄）小鼠骨髓造血干细胞造血重建功能的作用。方法：使用跑步机分别对青春期和成年C57BL/6J雄性小鼠进行跑步运动（运动14 d,前2 d运动速度为10 m/min,后12 d运动速度为12 m/min）。实验分为对照（安静）组和运动组（n=6）;使用流式细胞仪分析运动后小鼠骨髓中造血干/祖细胞比例;采用全血分析仪分析运动后小鼠外周血中白细胞、红细胞及血小板的数目;体外集落形成实验检测造血干/祖细胞的集落形成能力;体内竞争性移植实验检测造血干细胞重建造血能力;BrdU实验分析造血干/祖细胞的增殖水平;ELISA检测外周血中瘦素水平;流式细胞仪检测骨髓和骨内膜中间充质干细胞的数目;体外集落形成实验检测间充质干细胞骨髓集落形成能力。结果：（1）运动导致青春期小鼠外周血中血小板数目显著升高（P<0.05）;(2)运动处理后,青春期小鼠骨髓造血干/祖细胞的比例及体外短期集落形成能力无显著差异（P>0.05）,然而运动促进青春期小鼠骨髓造血干细胞体内长期造血重建能力显著增强（P<0.05）;(3)成年小鼠运动后骨髓中造血干细胞比例显著降...     

TNF-α增强人脐带间充质干细胞条件培养基的体外造血支持功能

 目的：研究肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α, TNF-α）刺激后所得的脐带间充质干细胞条件培养基对脐血CD34+细胞在半固体培养基中集落形成个数及种类的影响。方法：将3~6代人脐带来源间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC-MSCs）以2×106接种到75cm2培养瓶中,其中刺激组加入TNF-α（10 g/L）,48 h后收集上清作为条件培养基。Real-time PCR检测hUC-MSCs中各类造血因子mRNA的表达量。密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,磁珠分选CD34+细胞,流式细胞术检测细胞纯度后分5组接种到6孔板内：TNF-α刺激hUC-MSC上清+不完全甲基纤维素培养基;hUC-MSC上清+不完全甲基纤维素培养基;TNF-α+DMEM/F12完全培养基+不完全甲基纤维素培养基;完全甲基纤维素培养基;DMEM/F12完全培养基+不完全甲基纤维素培养基。10 d后显微镜下计数各类集落形成单位（colony-forming unit, CFU）的数目,收集集落形成细胞,流式细胞术检测其表型特征。结果：（1）TNF-α刺激后hUC-MSCs中粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF）和白细胞介素6（interleukin-6, IL-6）mRNA表达上调。（2）两种条件培养组均可见粒系CFU（granulocyte CFU, CFU-G）、巨噬系CFU（macrophage CFU, CFU-M）和粒巨噬系CFU（granulocyte-macrophage CFU, CFU-GM）,但TNF-α刺激组CFU-G和CFU-M的数目约为未刺激组的1.5倍,CFU-GM约为未刺激组的2倍;阳性对照组中除粒系、巨噬系集落外还可见红系集落;而DMEM/F12完全培养基加或不加TNF-α组10 d后均未见集落形成。（3）流式细胞术检测TNF-α刺激组与未刺激组集落细胞表型CD14、CD45和CD11b,未见明显差异。结论：hUC-MSC上清作为条件培养基可在体外促进CD34+细胞分化增殖为髓系细胞,具有造血支持作用,TNF-α刺激后此作用增强。     

脐带间充质干细胞对T细胞的免疫调控研究

目的:研究脐带源间充质干细胞(UC-MSCs)异源T淋巴细胞的免疫调节作用.方法:从脐带中分离和培养间充质干细胞,流式细胞术检测其表面标志以鉴定纯度;用Brdu法测定细胞增殖率,观察UC-MSCs对异体T淋巴细胞增殖的影响;流式细胞仪检测共培养体系中CD4 、CD8 水平检测及UC-MSCs对T淋巴细胞转化的影响;且用ELISA法检测共培养上清细胞因子IL-4、IFN-γ的表达水平.结果:从脐带获得的MSC免疫表型分析显示,其不表达HLA-Ⅱ抗原.对PHA刺激的脐带血T淋巴细胞,UC-MSCs对其的增殖反应具有抑制作用,呈细胞数量剂量依赖性;UC-MSC与脐带血单个核细胞共培养体系中,CD8 细胞比例降低,与对照组有显著性差异(P＜0.01),CD4 细胞比例无明显变化(P＞0.05);UC-MSC抑制了共培细胞养体系中IFN-γ分泌,然而促进了IL-4的分泌,与对照组有显著性差异(P＜0.01).结论:UC-MSCs抑制PHA刺激的T淋巴的增殖,能够改变T细胞亚群及T细胞分泌的细胞因子,这种抑制特性表明,UC-MSCs对免疫反应具负调节作用,可能为GVHD的防治以及自身免疫性疾病治疗提供一条新途径,有助于UC-MSC的临床应用.     

滑膜间充质干细胞分离培养、免疫表型鉴定及在混合淋巴反应体系中的抑制效应*

背景：滑膜组织中可分离出具有多向分化潜能干细胞特性的细胞。  目的：探索滑膜间充质干细胞体外分离、培养的可行性、免疫表型的鉴定及对混合淋巴细胞反应体系中淋巴细胞增殖的影响,评价其免疫学特性。  方法：关节镜下获取10例半月板损伤患者的膝关节滑膜组织,胶原酶消化获得有核细胞。挑选单细胞克隆,筛选获得滑膜间充质干细胞。检测其增殖能力、细胞活力,流式检测其细胞免疫表型,采用人双向混合淋巴细胞反应体系及植物血凝素刺激的淋巴细胞增殖反应体系,根据滑膜间充质干细胞与外周血单个核细胞的不同比例加入丝裂霉素处理滑膜间充质干细胞。MTT法检测并计算其抑制率。 结果与结论：10组滑膜间充质干细胞系增殖能力和细胞活力差异无显著性意义(P > 0.05)。10组细胞系免疫表型：CD44、CD90、CD105呈阳性,CD14、CD34、CD45和HLA-DR呈阴性。滑膜间充质干细胞抑制混合淋巴细胞反应体系中及植物血凝素刺激的淋巴细胞增殖反应体系中淋巴细胞的增殖、抑制率与加入的滑膜间充质干细胞数量成正比。提示关节滑膜组织可以分离、培养获得滑膜间充质干细胞,其具有间充质干细胞特异性表型,且滑膜间充质干细胞具有免疫调节作用。      

利用旋转式生物反应器快速扩增骨髓间充质干细胞

目的　探讨旋转式生物反应器是否能促进骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)的快速扩增。方法　将MSCs细胞放入盛有Myelocult(上标 TM)培养液生物反应器中动态培养,并在Myelocult(上标 TM)培养液中补充一些因子,如干细胞因子(SCF),白介素3和6(IL-3, IL-6)。检测和比较经反应器处理前后的MSCs的表型,增生和分化能力的变化。结果　在生物反应器中培养8d,总细胞数、Stro-l(上标 +) CD44(上标 +) CD34(上标 -)间充质干细胞和CD34(上标 +)CD44(上标 +) Stro-l(上标 -)造血干细胞分别增加了9、29和8倍。实验研究结果显示,生物反应器扩增的间充质干细胞表达了原始间充质干细胞的标记物内皮因子(SH2)和波形蛋白,却没有发现与细胞系的分化有关的标记物,包括骨钙素（成骨指标）,Ⅱ型胶原（成软骨指标）和C/EBPα（成脂指标）。生物反应器组的细胞集落生成效率（成纤维细胞集落／天）是对照组（无生物反应器组）的1.44倍。经诱导后,生物反应器扩增的间充质干细胞可以分化成成骨细胞,软骨细胞和脂肪细胞,其分化能力与未经生物反应器处理的MSCs无区别。结论　旋转式生物反应器结合改良的Myelocult(上标 TM)培养液可用于快速扩增间充质干细胞。     

胎肝条件培养液体外诱导人骨髓间充质干细胞定向分化为造血细胞的研究

目的：探讨人骨髓间充质干细胞（hMSCs）体外造血分化潜能。方法： 选用孕12.5-14.5 d（12.5-14.5 dpc）的昆明小鼠，分别制备小鼠胎肝基质细胞条件培养液（FLSC-CM）及胚胎成纤维细胞饲养层（FD），将体外扩增的CD34-CD45-hMSCs分别接种于含FLSC-CM、FD和IL-6及SCF组合的培养体系中，培养7 d后，通过形态学、表型、粒-单/巨噬细胞系集落培养（CFU-GM）对分化细胞进行鉴定。结果： hMSCs与FLSC-CM共培养组产生的非贴壁细胞明显增多，形态类似于单核或小淋巴细胞，部分细胞可表达人造血细胞特异性表面分子（CD34和CD45），在含人粒-单集落刺激因子（GM-CSF）的甲基纤维素培养体系中能够形成CFU-GM，而FD和IL-6+SCF诱导组无上述作用。结论： FLSC-CM可诱导CD34-CD45-hMSCs分化为造血细胞，提示hMSCs具有体外造血分化潜能。     

细胞因子短期扩增对造血干/祖细胞黏附和迁移能力的影响

目的：探讨干细胞因子（SCF）+白细胞介素-6（IL-6）短期扩增对CD34+造血干/祖细胞黏附和迁移能力的影响。方法:用密度剃度离心的方法分离脐血CD34+细胞，经SCF和IL-6孵育48 h，用CCK-8方法检测CD34+细胞增殖能力；用流式细胞仪检测处理前后的CD49d（VLA-4）、CD11a（LFA-1）、CD62L（L-selectin）及CD184（CXCR4）的表达。用纤连蛋白（FN）包被96孔板，检测经或未经因子扩增的CD34+细胞的黏附能力。扩增的CD34+细胞悬浮于transwell培养板的上层，下层添加基质细胞衍生因子（SDF-1），流式细胞仪检测迁移细胞数，计算迁移率。结果:经SCF+IL-6处理48h后CD34+细胞扩增近3倍；表达CD49d、CD11a、CD62L及CD184的CD34+细胞的百分数分别由原来的26.34%±5.37%、17.63%±4.57%、46.38%±6.61%和9.58%±1.56%增加到65.67%±8.72%、56.67%±6.34%、84.76%±9.57%和19.32%±3.64%（P<0.01）。扩增后的CD34+细胞对FN的黏附能力及在SDF-1诱导下的迁移作用都显著增强（P<0.01）。结论:SCF+IL-6短期扩增CD34+ 造血干/祖细胞显著增加细胞的黏附能力，增加SDF-1诱导的迁移作用，可能是SCF+IL-6促进归巢的主要机制之一。     

IL-15对骨髓增生异常综合征患者CD34+细胞增殖、分化的影响

目的 探讨IL-15对体外培养的骨髓增生异常综合征(MDS)患者CD34+细胞增殖和分化的影响.方法 应用单克隆抗体(mAb)免疫磁珠系统分离CD34+细胞, 将实验分为加IL-15的实验组和不加IL-15的对照组, 分别用液体培养基和甲基纤维素半固体培养基培养.计数培养后的细胞数和CFU-E、BFU-E、CFU-GM和CFU-GEMM的集落形成数,并用MTT比色法检测IL-15对MDS 患者CD34+细胞增殖的抑制作用.用流式细胞术检测上述培养的细胞上各种表型分子CD33、 CD13、 CD71、 CD19和CD3表达的变化和细胞周期的改变.结果 11例MDS患者CD34+细胞的平均回收率为(75.4±5.2)%, CD34+细胞的纯度为(90.3±6.3)%.富集倍数为(83.1±12.5)倍.用MTT比色法检测表明, IL-15抑制CD34+细胞增殖的最佳剂量为20 μg/L, 最佳时间为8 d.将对照组及20 μg/L 的IL-15(实验组)分别与MDS患者的CD34+细胞共培养8 d, 进行细胞计数显示, 增殖倍数对照组为4.6倍, 实验组为6.3倍(P＜0.05, n＝5); 各祖细胞的集落形成率, 实验组均明显多于对照组.CD34+细胞上各种表型分子的表达率(除CD3外), 实验组均明显高于对照组.IL-15作用后, CD34+细胞的细胞周期中G1、S、G2期的比率均有明显变化, 与对照组相比较, 差异显著(P＜0.05, n＝7).结论 IL-15对MDS患者的CD34+细胞具有明显地促增殖和诱导分化的效应, 对MDS患者的治疗可能开阔了广大的前景.     

人骨骼肌源性血管内皮细胞对造血干/祖细胞的体外支持

背景:人骨骼肌源性血管内皮细胞位于血管壁,共表达肌肉干细胞和血管内皮细胞的标记(CD56+CD34+CD144+CD45-).研究显示,人肌血管内皮细胞与间充质干细胞存在相似性,表达间充质干细胞表面标记物,具有多向分化潜能.目的:建立人肌血管内皮细胞作为滋养层与人脐血CD34+细胞体外培养体系,以培养前后CD34+细胞...     

Pesticide induced marrow toxicity and effects on marrow cell population and on hematopoietic stroma

Long term inhalation of toxic pesticides used for the domestic and industrial purposes have been shown to cause moderate to severe hematotoxicity and increased incidence of several marrow degenerative diseases, specifically hypoplastic bone marrow failure condition in humans. The progression of pesticide induced hematotoxicity and the exact underlying mechanisms of toxicity that play major role in limiting normal hematopoiesis are not quite well explained. In this present study, we have developed an animal model of hypoplastic bone marrow failure following pesticide exposure to show the deleterious effects of toxic pesticides on mouse hematopoietic system. Here we have presented the results of studying long-term marrow explant culture, IL-2, IL-3 and IL-5 receptors expression profile, fibroblast colony forming unit (CFU-F), hematopoietic progenitor cell colony formation and caspase-3 expression by the bone marrow cells. We have also identified the expression levels of several extracellular apoptosis markers (CD95/Fas) and intracellular apoptosis inducer proteins (pASK1, pJNK, caspase-3 and cleaved caspase-3) in the bone marrow cells of pesticide exposed mice. The long-term marrow explant culture demonstrated the impairment in proliferation of the stromal cells/stromal fibroblasts in culture. Decreased IL-2, IL-3 and IL-5 receptors expression profile essentially hinted at the suppressed cytokine activity in the pesticide exposed marrow. CFU-F analysis showed the defect in functional maturation of the stromal fibroblasts. The decreased hematopoietic progenitor cell colony formation indicated the toxicity induced inhibition of cellular proliferation and functional maturation of hematopoietic stem/progenitor cells in pesticide exposed marrow. We have detected a sharp increase in the expression levels of both the extracellular Fas-antigen and intracellular apoptosis inducer proteins in the bone marrow cells of pesticide exposed mice that explained well, the apoptosis pathway involved following marrow toxicity. The decreased proliferation and functional maturation of marrow stromal cells and hematopoietic progenitors with subsequent increase in marrow cellular apoptosis following pesticide toxicity provided the base necessary for explaining the increased incidence of hypoplastic bone marrow failure in humans exposed to moderate to high concentrations of pesticides.     

FK228促进IL-3介导的人红系前体细胞的增殖与分化

目的:探讨组蛋白脱乙酰化酶抑制剂FK228在IL-3介导的人红系前体细胞增殖与分化中的调节作用.方法:经粒细胞集落刺激因子动员的肿瘤患者外周血单核细胞中分离CD34 细胞,用含干细胞生长因子(SCF)、白细胞介素3(IL-3)或SCF IL-3及不同浓度FK228的无血清培养液培养7 d,分别用抗CD14、GPA、CD15及CD36单克隆抗体(mAb)染色并行流式细胞术(FCM)检测;将CD34 细胞用含SCF、IL-3或SCF IL-3及FK228的半固体培养液培养,并行细胞集落分析;将CD34 细胞用含SCF IL-3的培养液培养7 d,然后分离CD36 GPA-细胞,将细胞用含有IL-3 FK228的半固体培养液中培养,并行细胞集落分析.结果:FK228以一种剂量依赖方式促进CD36 细胞的产生,对CD14 细胞及CD15 细胞的产生无明显影响;0.5 μg/L FK228可明显增加含IL-3培养体系中CD36 细胞的数量;FK228可明显增加含IL-3的半固体培养基中集落形成的数量及组成单个集落的细胞数;FK228可明显促进CD36 GPA-细胞在含IL-3的半固体培养基中形成红细胞集落.结论:FK228可促进白细胞介素3介导的人红系前体细胞的增殖与分化.     

蛇六谷提取物抑制K562细胞增殖并诱导分化的作用

目的:探讨蛇六谷提取物(TuAKe)抑制人慢性髓系白血病K562细胞增殖和诱导分化的作用机制。方法:不同浓度的TuAKe处理K562细胞,MTT比色法和半固体集落形成实验检测K562细胞的增殖能力;瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态;流式细胞术检测分化相关抗原CD11b、CD14和CD42b的阳性表达率;Western blot法检测细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白E1(cyclin E1)和红系分化核转录因子GATA-1的蛋白表达水平。结果:TuAKe能够抑制K562细胞增殖,改变细胞形态,抑制K562细胞进入S期,并阻滞在G_2/M期,提高分化相关抗原CD11b、CD14和CD42b阳性表达率,上调GATA-1蛋白表达,同时下调CDK2和cyclin E1蛋白表达(P0.05)。结论:TuAKe可能通过调控细胞周期抑制K562细胞增殖,同时诱导K562细胞多向分化。     

人骨骼肌源性血管外膜细胞对人脐血CD34+细胞的体外造血支持作用#br#

文题释义： 血管外膜细胞：是血管周围星状细胞,分布于全身的毛细血管和微血管的管壁,是血管周围微环境的重要核心组成成分。它们表达CD146、NG2、PDGFRβ、LepR、Nestin等标记物,而不表达内皮细胞标记物CD144、vWF、CD31及造血细胞标记物CD34、CD45、CD14。研究显示血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,其表达间充质干细胞表面标记物,具有多向分化潜能,并可支持造血。 造血干细胞微环境：是造血组织中造血干细胞赖以生存并进行自我更新、多向分化的场所。它由骨内膜微环境和血管微环境组成,前者维持造血干细胞的静止及自我更新,后者促进造血干细胞动员、增殖、分化。 背景：研究显示血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,其通过细胞接触或旁分泌效应调节造血干细胞的行为并支持造血,人骨骼肌源性血管外膜细胞对造血的支持作用有待于研究。 目的：从人骨骼肌中分离培养血管外膜细胞并进行生物学特性鉴定,研究其对脐血CD34⁺细胞的体外支持作用。 方法：①利用多参数流式细胞术从人骨骼肌中分选表型为CD146⁺CD56^-CD34^-CD144^-CD45^-的血管外膜细胞,并对其进行生物学鉴定;②建立以CD146⁺人骨骼肌源性血管外膜细胞为滋养层的脐血CD34⁺细胞体外培养体系(实验组),以人骨髓间充质干细胞为滋养层的脐血CD34⁺细胞体外培养体系为阳性对照组,共培养1,2,4周检测培养体系的细胞数量、集落形成能力及免疫表型并进行统计分析。 结果与结论：①通过多参数流式细胞术分选出CD146⁺人骨骼肌源性血管外膜细胞,回测纯度为(91.5±1.85)% (n=5);其表达间充质干细胞表面抗原CD73、CD90、CD105、CD44,不表达造血细胞及内皮细胞表面抗原CD45、CD34、CD31;经诱导培养可向骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞及肌细胞分化;②实验组与阳性对照组相比,在细胞数、集落形成能力及免疫表型方面(CD45⁺、CD34⁺CD33^-、CD14⁺、CD10⁺/CD19)差异均无显著性意义(P > 0.05,n=6);无滋养层的空白对照组培养1周时细胞数量明显减少,2周时几乎无细胞存活;③结果表明,CD146⁺人骨骼肌源性血管外膜细胞与人骨髓间充质干细胞一样对脐血CD34⁺细胞具有体外支持作用。 ORCID: 0000-0002-6768-5273(郑波) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

Induction of proliferation and monocytic differentiation of human CD34+ cells by CD137 ligand signaling

CD137 is a member of the tumor necrosis factor receptor family and is involved in the regulation of activation, proliferation, differentiation, and cell death of leukocytes. Bidirectional signaling exists for the CD137 receptor/ligand system, as CD137 ligand, which is expressed as a transmembrane protein, can also transduce signals into the cells on which it is expressed. In this study, we have identified expression of CD137 in human bone marrow and expression of CD137 ligand on a subset of CD34+ cells. Cross-linking of CD137 ligand on CD34+ cells by CD137 ligand agonists induces activation, prolongation of survival, proliferation, and colony formation. CD137 ligand agonists induce differentiation of early hematopoietic progenitor cells to colony-forming units-granulocyte/macrophage and subsequently to monocytes and macrophages but not to dendritic cells. These data uncover a novel function of CD137 and CD137 ligand by showing their participation in the growth and differentiation of hematopoietic progenitor cells.     

人参皂苷Ro 促进THP-1 细胞向DC 分化的作用

目的:探讨人参皂苷Ro 联合细胞因子(GM-CSF 与IL-4)促进人单核白血病细胞(THP-1)向树突状细胞(DC)分化的作用。方法:筛选细胞因子诱导白血病源DC 敏感细胞株;采用细胞因子联合人参皂苷Ro 诱导筛选的敏感细胞株THP-1 向DC 分化。培养体系中分别加入小(5 μmol/ L)、中(10 μmol/ L)、大(20 μmol/ L)剂量人参皂苷Ro,流式细胞术检测白血病来源DC 表面标志CD1a、MHCⅠ、共刺激分子CD86 表达;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测白血病来源DCMHCⅠ、CD86 mRNA 转录水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清TNF-α、IL-6 蛋白水平。结果:THP-1 是细胞因子诱导DC 分化的敏感白血病细胞株,与单纯细胞因子诱导比较,细胞因子联合人参皂苷Ro 作用后,白血病来源DC 表面标志CD1a、MHCⅠ、共刺激分子CD86 比例显著升高(P<0.05),CD1a、CD86 及MHCⅠ转录水平显著升高(P<0.05),培养上清TNF-α、IL-6 蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:人参皂苷Ro 能明显促进细胞因子诱导THP-1 细胞向DC 分化。