应用液体蛋白芯片-飞行时间质谱系统研究乳腺癌血清差异蛋白表达

目的：分析乳腺癌与健康人血清蛋白质谱差异,筛选特异性蛋白标志物,建立乳腺癌诊断预测模型,评价其诊断价值。方法将58例乳腺癌和57例健康女性的血清,随机分为建模组和验证组,应用弱阳离子纳米磁珠（MB-WCX）结合基质辅助激光解吸离子飞行质谱（MALDI-TOF-MS）技术建立血清蛋白质谱,选择遗传算法建立乳腺癌诊断预测模型,利用诊断模型对验证组进行盲筛验证。结果通过蛋白质谱,筛选出29个显著差异蛋白质峰（P＜0．05）。其中乳腺癌中表达上调2个,表达下调27个,利用其中8个差异峰（质荷比分别为698．3、797.37、1449.56、1466．65、1520．74、1584．55、2379．26、2739．69）建立诊断模型,获得了96．55％（28/29）的敏感性和96.42％（27/28）的特异性,经独立样本双盲验证,得到灵敏度为93．10％（27/29）,特异度为96．55％（28/29）。结论应用弱阳离子纳米磁珠联合MALDI-TOF-MS技术可筛选出血清蛋白质谱中的差异蛋白质,据此建立的诊断模型具有较高的敏感性和特异性,对于乳腺癌的辅助诊断有一定的临床意义。     

应用蛋白芯片-飞行质谱技术筛选宫颈癌血清差异蛋白质

目的 筛选官颈癌患者与健康女性血清之间的差异蛋白质,寻找官颈癌早期诊断的生物学指标.方法 采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)和弱阳离子结合芯片(CM10),检测24例官颈鳞状细胞癌及25例年龄相匹配的健康女性的血清蛋白质,获得相应的指纹罔谱,经生物信息学分析,筛选出一组有分类意义的差异蛋白质.结果 宫颈癌与正常对照组比较,在分子量1.0～20kDa范围内,共有52种蛋白质质谱峰的差异有统计学意义(P<0.05),其中质荷比(M/Z)为4173.77、5903.09、6087.12、10716.9、6109.61、3397.41,在宫颈癌组的含量明显低于正常对照组(P < 10-5);由软件自动建立2个诊断树模型,其一以单个差异蛋白质4173.77(M/Z)作为分类变量,其诊断官颈癌的敏感性为75.0%,特异性为96.0%;其二以M/Z为5335.81、7562.99、9287.89的3个差异蛋白质建立分类模型,其诊断宫颈癌的敏感性为91.67%,特异性为96.0%.结论 宫颈癌患者与健康正常女性血清蛋白质的表达存在差异,其中6个蛋白质差异非常显著,有可能作为宫颈癌早期诊断的生物学指标;同时以差异蛋白质所建立的诊断树模型,有助于宫颈癌患者的早期筛查.     

应用液体蛋白芯片飞行时间质谱技术研究原发性肝癌门静脉癌栓形成相关标志物

 目的 应用液体蛋白质芯片飞行时间质谱技术研究肝癌门静脉癌栓（portal vein tumor thrombus,PVTT）形成相关标志物,并建立预测模型。方法 采取非PVTT和PVTT原发性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者血清各20例,采用磁珠分离系统纯化、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）分析及ClinProTools生物信息学方法研究其血清蛋白表达谱,通过神经网络算法（statistical neural networks,SNN）建立图谱诊断模型并进行验证。结果 经数据对比分析找到39个差异有统计学意义的质荷比（m/z）峰（P<0.05）,从中筛选出最具划分能力的8个质荷比峰（m/z=4 420.43、4 055.19、2 988.80、4 091.46、4 072.24、6 935.04、4 109.53和5 321.17）,并以此建立HCC的PVTT诊断模型,模型识别率达到97.5%,而预测率达到92.73%。非PVTT组和PVTT组的准确性分别为100%和95%。结论 筛选得到的蛋白可能成为原发性肝癌PVTT的相关标志物,诊断模型可能对预测PVTT的形成具有重要临床意义。     

医院获得性肺炎相关蛋白飞行质谱表达初步研究

目的 探索医院获得性肺炎(HAP)相关蛋白飞行质谱的表达特点.方法 方便选择2014年7月-2015年6月期间于福建省福州肺科医院接受血清蛋白质飞行图谱检测的HAP(细菌性)患者58例与健康者31名作为研究对象,进行血清蛋白飞行质谱检测,分析其相关蛋白峰值并进行统计学处理.结果 对58例HAP(细菌性)患者与31名健康者的血清蛋白飞行质谱数据进行比较,发现有4个蛋白峰(3336.53、3415.60、4651.22、6118.62 M/Z),比较差异有统计学意义(P<0.01).由此4个差异蛋白峰构成的诊断模型判别HAP的总有效率为98.88%(88/89),特异度为100.00%(31/31)、灵敏度为98.28%(57/58)、阳性预测值为100.00%(57/57)、阴性预测值为96.88%(31/32).结论 蛋白飞行质谱技术具有方法简便、检测快速,标本用量少等优点.该方法在HAP早期诊断方面具有一定价值,可能成为HAP早期诊断的辅助指标,值得进一步研究.     

运用激光解析电离飞行时间质谱技术检测肺腺癌的血清蛋白表达

目的 运用激光解析电离飞行时间质谱技术(ClinProt技术)寻找肺腺癌相关蛋白,以期对肺癌的早期诊断、治疗效果及预后等做出判断.方法 应用ClinProt技术对10例患者及10例正常人进行质谱分析寻找差异蛋白,观察差异蛋白在肺腺癌患者术后1周的变化.结果 正常人与肺腺癌患者血清比较,发现6个差异蛋白峰,其中相对分子质量为2661、2991的蛋白在肺腺癌组表达增高且术后继续呈增高趋势,相对分子质量为4091、4210、4644、5336的蛋白在肺腺癌组表达降低且术后继续呈降低趋势.结论 肺腺癌患者与正常人之间的差异蛋白可能成为潜在的肺腺癌血清标志物.发现差异蛋白在术后的变化,可能有助于治疗效果的检测及预后的判定.     

应用液体蛋白芯片筛查糖尿病性视网膜病变的血清蛋白标志物

目的应用液体蛋白芯片飞行时间质谱系统分析2型糖尿病性视网膜病变的血清蛋白质表达谱,寻找具有潜在诊断意义的血清标志物,以便于糖尿病视网膜病变的早期诊断。方法收集2型糖尿病但不伴糖尿病视网膜病变的患者24例,2型糖尿病合并糖尿病视网膜病变的患者21例血清样本,通过Clin Prot磁珠纯化、飞行时间质谱分析、Clin Pro Tools生物信息学方法研究糖尿病视网膜病变的血清蛋白表达谱。结果质荷比(m/z)为1945.53的蛋白峰能较好地鉴别糖尿病性视网膜病变。其识别率和预测能力分别为88.57%和82.08%。结论以液体蛋白芯片飞行时间质谱系统工具研究蛋白表达谱,筛选得到的质荷比为1945.53的蛋白可能为潜在的2型糖尿病性视网膜病变的血清标志物。     

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术在大肠癌患者中肿瘤标记物的早期检测研究

目的进行大肠癌肿瘤标志物的早期检测,为大肠癌患者早期诊断提供依据。方法应用飞行时间质谱技术对80例大肠癌及41例健康人血清标本进行检测。结果大肠癌患者与健康对照样本检测到72个蛋白质的质核比(M/Z)峰值有统计学意义。获得分子量为3961.44,4286.32,6438.39,3162.36,4301.49,4478.96,6844.42Da这7个蛋白质组成的模板,可将大肠癌与正常人正确分组。准确率为94.21%(114/121);敏感度为92.50%(74/80);特异度为86.96%(40/46)。结论飞行时间质谱技术可用于大肠癌肿瘤标志物的早期检测。     

电离飞行时间质谱技术在肺癌早期诊断中的应用现状及前景

肺癌是最常见的肿瘤相关性死亡原因,预后较差,胸部X线及痰细胞筛查不能有效提高生存率。表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)具有分析速度快、高通量、样品用量少、敏感度高和特异性强等特点,能直接分析组分复杂的生物样品。该技术也成功地用于研究肺癌的肿瘤标志物,在肺癌的早期诊断、治疗和预测预后等方面获得了明显进展。     

糖尿病肾病大鼠血浆差异表达蛋白的质谱分析

目的 探讨应用比较蛋白质组学分析糖尿病肾病大鼠血浆的差异表达蛋白,寻找和糖尿病肾病发生相关的蛋白质.方法 建立糖尿病肾病(DN)大鼠模型,将DN模型组和正常组大鼠血浆采用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离血浆蛋白,经PD-Quest软件分析结合人工对比确认差异蛋白点,MALDI-TOF/TOF鉴定差异表达的蛋白. 结果 成功建立2-DE血浆蛋白图谱,经质谱鉴定出8种差异蛋白,这些差异蛋白主要与氧化应激、炎症反应及脂质代谢紊乱等相关. 结论 双向电泳质谱技术可有效筛选糖尿病肾病相关蛋白,为进一步早期诊断提供依据.     

蛋白质飞行质谱技术在肝癌早期诊断中的应用

原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,严重的威胁着人们的健康.全世界每年大约有50万人患肝癌,而我国占全世界肝癌发病的一半以上[1],其中每年约11万人死亡,占全世界肝癌死亡人数的45%[2].据卫生部统计,20世纪原发性肝癌已上升为我国第二位癌症杀手,在城市和农村都仅次于肺癌[3].由于目前对肝癌的病因还不是很清楚,且尚无有效的治疗手段,所以对肝癌的二级预防就显得尤为重要.     

血清miRNA-128a和miRNA-128b表达对胃癌早期诊断和预后的影响

 目的 观察血清miRNA-128a和miRNA-128b表达在胃癌早期诊断和预后的影响。方法 选择2015年1月至2017年1月在复旦大学附属华山医院就诊且病理确诊的胃癌患者118例,设为胃癌组。选择同期在我院病理诊断为胃息肉者75例和健康体检者45例,分别为胃息肉组和健康对照组。用定量RT-PCR （qRT-PCR）法检测各组血清miRNA-128a和miRNA-128b表达水平。观察胃癌患者血清miRNA-128a和miRNA-128b表达水平与临床病理指标,及其诊断和预测2年内存活率的效能。结果 胃癌组血清miRNA-128a表达水平明显高于胃息肉组（q=26.388,P<0.01）和健康对照组（q=32.195,P<0.01）,手术后较术前明显降低（t=14.321,P<0.01）,胃息肉组明显高于健康对照组（q=7.198,P<0.01）;而胃癌组血清miRNA-128b表达水平明显低于胃息肉组（q=211.148,P<0.01）和健康对照组（q=249.984,P<0.01）,手术后较术前明显升高（t=15.139,P<0.01）,胃息肉组明显低于健康对照组（q=38.232,P<0.01）。血清miRNA-128a和miRNA-128b表达水平对诊断胃癌具有较高的灵敏度和特异性,联合检测的灵敏度为78.8%,特异性为97.3%,曲线下面积明显高于单个指标miRNA-128a （Z=3.436,P<0.01）和miRNA-128b （Z=2.658,P<0.01）。胃癌患者血清miRNA-128a和miRNA-128b表达水平与肿瘤细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移和浸润深度具有明显相关性（P<0.01）。病例随访2年,胃癌存活组血清miRNA-128a表达水平明显低于死亡组（P<0.01）;当其>98.47 fmol/L,预测2年内出现死亡的灵敏度为89.5%,特异性为81.8%,曲线面积为0.889。而存活组的血清miRNA-128b表达水平明显高于死亡组（P<0.01）,当其≤94.86 fmol/L,预测2年内死亡的灵敏度为94.7%,特异性为81.8%,曲线下面积为0.931。结论 联合检测血清miRNA-128a和miRNA-128b有助于胃癌诊断,对2年内出现死亡的预测具有重要参考价值。     

胃异型增生和早期胃癌AgNOR图像定量分析和PCNA表达

目的:探讨区嗜银蛋白(AgNOR)定量分析和增殖细胞核抗原(PCNA)表达在胃黏膜异型增生和早期胃癌中的意义.方法:对50例胃镜活组织检查标本的胃黏膜异型增生、早期胃癌的区AgNOR经图像分析系统进行定量分析和PCNA免疫组织化学染色.结果:正常胃黏膜和中高度异型增生之间AgNOR/细胞核与PCNA增殖指数差异均有显著性(P＜0.01);中～高度异型增生和早期胃癌之间AgNOR/细胞核和PCNA增殖指数差异均有显著性(P＜0.01).结论:胃黏膜中高度异型增生、早期胃癌与AgNOR/细胞核和PCNA增殖指数均有一定关系.     

胃癌组织中血管生成素样蛋白2和miR-211表达水平与其预后的关系

目的 探讨胃癌组织中血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)和miR-211表达水平与其预后的关系.方法 采用免疫组化法检测胃癌根治术治疗的62例患者胃癌组织及其相应癌旁组织中ANGPTL2和miR-211的表达水平,并分析其对胃癌患者预后的影响.结果 胃癌组织中ANGPTL2和miR-211阳性表达率分别为88.71%和83.87%,均显著高于其癌旁正常组织的3.23%和8.06%(P<0.05).62例患者随访3年的复发率、无病生存期(DFS)和3年生存率分别为45.16%、(16.62±4.78)个月和62.90%,且ANGPTL2和miR-211阳性表达患者的复发率高于阴性表达患者,DFS短于阴性表达患者,3年生存率则低于阴性表达患者(P<0.05).logistic线性回归分析结果显示,胃癌组织中ANGPTL2和miR-211阳性表达率均可明显影响其预后情况(P<0.05).结论 胃癌组织中ANGPTL2和miR-211阳性表达率较高且可影响其复发率、DFS和3年生存率等预后情况,胃癌组织中ANGPTL2和miR-211阳性表达可能作为其不良预后评估的参考指标.     

XAB2基因表达下调与胃癌发生的关系

目的观察胃癌组织XAB2基因及蛋白表达的变化,探讨其与胃癌发生发展的可能关系。方法选取34例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁正常组织,采用real-time RT-PCR技术检测XAB2 mRNA的表达;采用免疫组化方法检测胃癌组织、癌旁正常组织、胃炎组织XAB2蛋白的表达;分析不同临床病理指标下胃癌组织XAB2蛋白的表达差异。结果胃癌组织XAB2 mRNA表达显著低于癌旁正常组织(P<0.01),且在胃癌进展早期(Ⅰ+Ⅱ期)即明显下降。免疫组化检测显示:胃癌组织中XAB2蛋白表达的阳性率为50.0%(17/34),明显低于配对癌旁正常组织82.4%(28/34)和胃炎组织91.1%(31/34),差异具有统计学意义(P<0.01),而后二者间无统计学差异。胃癌组织XAB2蛋白表达与胃癌分化程度正相关(P=0.041),与肿瘤浸润深度、肿瘤大小负相关(P=0.019、0.027);在不同性别、年龄、肿瘤部位、有无淋巴结转移、TNM分期间无统计学差异。结论XAB2低表达可能与胃癌发生、进展密切相关,值得深入研究以利于临床胃癌诊治。     

血清多肿瘤标志物胃癌诊断判别方程的建立及其临床意义

目的 建立多肿瘤标志物C12检测系统诊断胃癌的判别方程以提高多肿瘤标志物C12检测系统诊断胃癌的准确率.方法 对135例初治胃癌患者、212例胃部良性疾病患者及6 741名健康体检者的12种常见肿瘤标志物检测结果及临床资料进行回顾性分析,通过SPSS18.0统计软件采用Fisher二分类判别分析建立判别诊断方程,比较12种肿瘤标志物和判别诊断函数对肿瘤诊断的准确率差异.结果 成功建立胃癌诊断判别方程,诊断正确率总体为95.0%,在正常组为96.1%,在胃癌组为43.7%,较12种肿瘤标志物单项检测均明显提高(P<0.05).结论 用C12多肿瘤标志物蛋白质芯片检测系统判别方程可提高胃癌诊断的准     

血管内皮抑制素治疗胃癌术后肝转移的疗效分析

目的 探讨血管内皮抑制素治疗胃癌术后肝转移的疗效。方法 选取2015 年2 月—2016 年6 月 六安市中医院收治的68 例胃癌术后肝转移患者,将患者分为对照组及研究组,各34 例。对照组采用奥沙 利铂肝动脉持续灌注联合经导管动脉栓塞化疗,研究组在对照组基础上加用重组人血管内皮抑制素肝动脉 持续灌注治疗,比较两组患者临床疗效、1 年生存率、疾病控制率、无疾病进展生存率、总生存率、不良 反应发生率及治疗前后血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化。结果 实验组治疗总有效率、1 年生存 率、疾病控制率、无疾病进展生存率及总生存率高于对照组（P <0.05）;实验组治疗后VEGF 水平下降程 度高于对照组（P <0.05）;对照组和实验组治疗前后的VEGF 水平组内比较,差异有统计学意义（P <0.05）。 结论 血管内皮抑制素治疗胃癌术后肝转移的疗效值得肯定,患者生存率进一步提升且VEGF 水平下降,用 药过程中不良反应发生率低,值得临床推广使用。     

166例早期胃癌的诊治分析

目的 总结早期胃癌的诊治经验.方法 回顾性分析1999年1月至2009年1月在北京协和医院收治的166例病历资料完整的早期胃癌患者的临床、手术及病理资料,随访患者的治疗结果,对相关数据进行统计学分析.结果 早期胃癌手术病例占同期全部胃癌手术病例的9.04%(176/1946).166例患者中,查体发现异常9例,29例(17.47%)有明确胃溃疡或慢性胃炎病史,20例(12.05%)有胃食管癌症家族史;64例行上消化道双对比造影检查,57例(89.06%)有异常发现;胃镜显示远端胃部、胃体部、胃底部病变分别为115例(69.28%)、26例(15.66%),25例(15.06%).手术范围小于或等于D1者126例,D1+以上者40例.术后病理显示病变平均直径为(2.52±1.62)cm,肿瘤局限在黏膜内者75例(45.18%),侵及黏膜下者91例(54.82%);淋巴结转移20例(12.05%),均为病变侵及黏膜下层者(20/91,21.98%);脉管瘤栓8例.术后总体5年生存率为87.9%;无淋巴结转移和有淋巴结转移者的5年生存率分别为89.7%和70.0%,差异有统计学意义(P=0.002).单因素分析结果显示,浸润深度(P=0.000)和脉管瘤栓(P=0.001)与早期胃癌淋巴结转移相关;多因素分析结果显示,脉管瘤栓与淋巴结转移显著相关(OR=15.67,95%CI:3.40～72.14).结论 早期胃癌占全部胃癌手术比例较低,淋巴结转移是影响治疗结局的重要因素.完善早期胃癌术前分期,明确肿瘤浸润深度,采取适当的、规范治疗是疗效的重要保证.     

多种肿瘤标志物蛋白质芯片在原发性肝癌检测中的应用

目的: 研究多种肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统(C12)12种肿瘤标志物的联合检测在原发性肝癌诊断中的价值。方法: 用C12定量检测128例原发性肝癌患者、23例肝硬化患者和98名正常人血清的12种常见的肿瘤标志物,包括糖链抗原125(CA 125)、血清铁蛋白(Ferritin)、癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、糖链抗原19-9(CA19-9)、糖链抗原15-3(CA15-3)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖链抗原242(CA242)、前列腺特异性抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原(Free-PSA)、人类生长激素(HGH)、人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)。结果: 通过多指标联合检测,128例原发性肝癌患者血清肿瘤标志物中有112例肿瘤标志物阳性,灵敏度从AF P单指标测定的58.6%提高到87.5%,特异性达83.5%;ferritin阳性率达41.4%,原发性肝癌患者血清中β-hCG、NSE、PSA、HGH、CA19-9、CA125、CEA、AF P、CA15-3、CA242与正常对照组和肝硬化组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论: 联合检测与传统的单指标检测相比灵敏度大大提高。     

89例胃癌的早期诊断及治疗临床资料分析

目的:通过89例临床资料,分析胃癌的早期诊断、治疗的方法及对预后的影响。方法:回顾性分析2004年1月至2010年1月我院EGC的临床资料。结果:本组EGC共89例,1、3、5年生存率分别为100%、95%和90%。肿瘤浸润至黏膜层及黏膜下层者5年生存率分别为95%和90%。D1和D2术者5年生存率分别为100%和95%。结论:胃癌的早期诊断可以明显提高胃癌患者的生存率,通过人群的筛查可以提高胃癌的早期诊断率。手术治疗仍是早期胃癌的首选治疗方案。