模拟高原缺氧复合梭曼中毒脑损伤特点及其救治

梭曼以毒性大、作用快、中毒难防难治而著称,是外军重点装备的化学战剂之一。脑是对梭曼极为敏感的重要靶器官。梭曼进入脑内迅速与胆碱酯酶（ＣｈＥ）结合并抑制其活性,使乙酰胆碱（ＡＣｈ）在突触间隙大量蓄积,从而破坏神经中枢正常功能,导致一系列生理功能的改变［１,２］。脑也是对缺氧极为敏感的器官之一［３］。人员急速进驻高原地区,常因高原缺氧而发生适应不全或高山病,甚至脑水肿,其发生率和严重程度随进驻速度和海拔高度的增加而增加。国内外对高原缺氧复合梭曼中毒研究报道不多。早期结果业已证实,模拟４０００ｍ高原缺…     

缺氧条件下有机磷毒剂梭曼对大鼠心肌损伤的实验研究

有机磷毒剂——梭曼是难防难治的神经性毒剂之一,其主要中毒机理是对机体乙酰胆碱酯酶(AChE)的抑制,造成胆碱能神经系统功能紊乱,引起中毒症状[1,2]。缺氧条件下梭曼中毒是可能发生在高原缺氧地区的一种特殊的化学中毒损伤,是在一种损伤(缺氧或梭曼中毒)的基础上加上另一种致伤效应(梭曼中毒或缺氧),无疑将使这种特殊损伤伤情和致伤机制复杂化,并增加救治难度。1　材料与方法1.1　动物和药品Wistar大鼠,体重(210±20)g,雌雄不限,由第三军医大学实验动物中心提供;梭曼,纯度94.6%,由军事医学科学院毒物药物研究所提供,临用时配制丙二醇-生理…     

缺氧条件下梭曼中毒大鼠血清和心肌磷脂酶A2活性的变化

目的探讨高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠磷脂酶A2(PLA2)活性变化与心脏损伤的关系.方法实验大鼠随机分为正常对照组、高原缺氧组、平原中毒组和高原中毒组,采用放射免疫法测定模拟高原4 000 m缺氧条件下梭曼中毒后大鼠血清和心肌PLA2活性的变化.结果缺氧和梭曼中毒单一或复合损伤均可引起PLA2活性升高.与平原中毒组比较,高原中毒组大鼠血清PLA2活性在各时间点均明显升高(P＜0.01),心肌PLA2活性在12小时和24小时显著增强(P＜0.01).结论PLA2活性增强可能是导致高原梭曼中毒心脏功能损伤加重的重要原因之一.     

急性低压缺氧复合梭曼中毒对大鼠肺微血管损伤作用

应用伊文思蓝标记白蛋白法，微量滴定法和紫外法观察了急性低压缺氧复合梭曼中毒肺组织伊文思蓝含量，磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活力以及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＰＬＡ２活力，血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性和蛋白含量的变化。结果表明，低压缺氧（模拟海拔４０００ｍ）６ｈ后，给大鼠梭曼７２μｇ·ｋｇ－１ｓｃ，继续减压可引起肺组织伊文思蓝含量增加，ＢＡＬＦ中ＡＣＥ活性和蛋白含量升高，同时伴有肺组织和ＢＡＬＦ中ＰＬＡ２活性明显升高，提示急性低压缺氧复合梭曼中毒导致的肺损伤可表现为肺微血管通透性（ＰＭＶＰ）增高，微血管内皮细胞损伤和ＰＬＡ２的作用是引起ＰＭＶＰ增高的主要原因。     

缺氧复合梭曼中毒大鼠心脏毒性效应的研究

目的　探讨胆碱能系统在缺氧复合梭曼中毒心脏毒性效应增强机制中的作用 ,为提高在高原地区有机磷中毒的防治水平提供依据。方法　实验大鼠随机分为正常对照组、高原缺氧组、平原中毒组和缺氧中毒组。利用RT PCR技术检测心肌m2 受体mRNA的表达 ,Westernblot检测抑制性G蛋白含量 ,放射免疫法测定环磷酸腺苷 (cAMP)浓度及酶放射化学分析测定腺苷酸环化酶、蛋白激酶A活力。结果　与平原中毒组相比 ,缺氧条件下梭曼中毒 1 2、2 4h时m2受体表达增强了 1 7 9% (P <0 0 5)和 1 5 4% (P <0 0 5) ,抑制性G蛋白含量分别降低了 8 4% (P <0 0 5)和 7 5 % (P <0 0 5) ,cAMP浓度及腺苷酸环化酶 (AC)、蛋白激酶A(PKA)活力显著升高 (P <0 0 1 )。结论　复合损伤引起的m2 受体表达增强和cAMP PKA信号系统的异常升高 ,可能是高原缺氧条件下梭曼中毒心脏毒性效应增强的重要原因之一     

梭曼中毒对大鼠心功能的影响

梭曼中毒对大鼠心功能的影响刘勇王仕丽魏相德（第三军医大学毒理学教研室，重庆６３００３８）本研究采用大鼠离体灌流工作心脏为模型，观察梭曼对心脏的直接作用．初步结果表明，急性梭曼中毒后，大鼠心功能在早期出现暂时兴奋后转入进行性抑制，表现为反映大鼠心脏整体...     

芥子碱对PC12细胞内游离钙升高的影响

目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopiazonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PCI2细胞内游离钙升高的影响.方法:PCI2细胞用终浓度为5 μmol·L-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避光负载孵育.细胞内游离钙([Ca2 ]i)用Victor Ⅱ1420多功能标记分析仪检测,以荧光强度(FI)表示.结果:当有外钙存在时,PCI2细胞静息[Ca2 ]i的FI值为(1188±163),75 mmol·L-1 KCl和10 mmol·L-1谷氨酸引起细胞外钙内流,使[Ca2 ]i增高,FI峰值分别增至(4270±982)和(3096±402).芥子碱(0.01,0.1,1.0,10,100 μmol·L-1)对静息[Ca2 ]i没有明显的影响,但浓度相关性地抑制高钾和谷氨酸诱发的[Ca2 ]i增高,抑制率分别为10.2%,39.5%,53.7%,71.8%.88.4%和30.3%,55.7%,68.5%,79.2%,94.1%.当无外钙存在时,PCI2细胞静息[Ca2 ]i的FI值为(813±112).咖啡因(40 mmol·L-1)和CPA(30 μmol·L-1)分别引起Caffeine-ryanodine和三磷酸肌醇(InsP3)敏感型-钙池释放而使[Ca2 ]i升高,FI值分别增至(2944±371)和(1844±332).芥子碱(0.1,1.0,10,100μmol·L-1)浓度相关性地抑制咖啡因和CPA诱发的[Ca2 ]i增高,抑制率分别为23.7%,61.9%.77.5%.88.2%和10.9%,23.8%,44.6%,68.3%.结论:芥子碱能显著抑制电压依赖性和受体依赖性钙通道开放所引起的外钙内流,且对受体依赖性钙通道的抑制作用更强.此外,芥子碱对Caffeine-ryanodine受体和InsP3敏感型钙池的内钙释放也有明显抑制作用,且对Caffeine-ryanodine受体敏感型钙池的抑制作用更强.这提示芥子碱有望成为很有研发前景的新型钙阻滞剂.     

缺氧条件下梭曼中毒大鼠血清和心肌磷脂酶A2活性的变化

目的探讨高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠磷脂酶A2(PLA2)活性变化与心脏损伤的关系.方法实验大鼠随机分为正常对照组、高原缺氧组、平原中毒组和高原中毒组,采用放射免疫法测定模拟高原4 000 m缺氧条件下梭曼中毒后大鼠血清和心肌PLA2活性的变化.结果缺氧和梭曼中毒单一或复合损伤均可引起PLA2活性升高.与平原中毒组比较,高原中毒组大鼠血清PLA2活性在各时间点均明显升高(P＜0.01),心肌PLA2活性在12小时和24小时显著增强(P＜0.01).结论PLA2活性增强可能是导致高原梭曼中毒心脏功能损伤加重的重要原因之一.     

缺氧条件下梭曼中毒大鼠血清和心肌磷脂酶A_2活性的变化

目的　探讨高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠磷脂酶A2 (PLA2 )活性变化与心脏损伤的关系。方法　实验大鼠随机分为正常对照组、高原缺氧组、平原中毒组和高原中毒组 ,采用放射免疫法测定模拟高原 40 0 0m缺氧条件下梭曼中毒后大鼠血清和心肌PLA2 活性的变化。结果　缺氧和梭曼中毒单一或复合损伤均可引起PLA2 活性升高。与平原中毒组比较 ,高原中毒组大鼠血清PLA2 活性在各时间点均明显升高 (P <0 0 1) ,心肌PLA2 活性在 12小时和 2 4小时显著增强 (P <0 0 1)。结论　PLA2 活性增强可能是导致高原梭曼中毒心脏功能损伤加重的重要原因之一。     

蝙蝠葛苏林碱对PC12细胞内游离钙浓度的影响

目的进一步探讨蝙蝠葛苏林碱（Dau）的抗脑缺血／缺氧损伤与其钙拮抗作用间的关系。方法：培养的PC12细胞用Fura－2／AM负载，用AR－CM－MIC阳离子测定系统观测Dau对单细胞内游离钙（[Ca(2+)]_i）升高的影响。结果：Dau（0．1～100μmol·L(－1)）可浓度依赖性抑制高钾和caffeine引起的[Ca(2+)］_i增加，对肌浆网钙泵抑制剂cy－clopiszonicacid引起的[Ca(2+)]_i升高也有抑制作用。结论：Dau不仅抑制电压依赖性钙通道开放引起的细胞外钙内流和caffeine引起的内钙释放．而且对钙泵也可能有影响，这可能是其抗脑缺血／缺氧损伤的重要机制。     

缺氧条件下梭曼中毒大鼠的心脏损伤

以大鼠急性梭曼中毒为模型,在常氧及缺氧条件下,观察动物心脏功能指标、血液酶学指标和心肌含水量等的变化,结果如下：平原状态下,梭曼中毒后大鼠心脏功能指标包括ＨＲ、ＬＶＰ、＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、－ｄｐ／ｄｔｍａｘ、ＬＶＥＤＰ的变化特点是：中毒后先出现短暂兴奋而后转入抑制,且具有量效和时效性,中毒剂量大时以抑制为主。在高原缺氧条件下,梭曼中毒对大鼠心脏功能的抑制加重,表现出缺氧和梭曼中毒两种损伤因素的复合效应,复合效应的表现形式有相加效应和相互加重效应。反映心肌组织损伤的血液心肌酶学指标包括ＣＰＫ、ＬＤ…     

模拟高原梭曼中毒犬血气变化

模拟高原梭曼中毒犬血气变化赵吉青欧阳子倩刘勇魏相德吕宏宇（第三军医大学预防医学系毒理学教研室，重庆６３００３８）梭曼（ｓｏｍａｎ）是一种主要引起胆碱能神经紊乱的有机磷酸酯类化合物，也是化学战剂中难防难治的毒剂之一；其急性中毒死亡的主要原因是呼吸衰竭［...     

梭曼对体外培养神经细胞的影响

目的　研究梭曼对体培养神经细胞的直接作用 ,为在细胞水平上构建出评价梭曼毒性和抗毒药物救治效果的模型奠定基础。方法　小鼠神经细胞的体外培养方法 ,乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性测定法 ,细胞死亡率及LC50 等。结果　梭曼浓度为 0 .96mg·L- 1时 ,对神经细胞的形态变化无明显影响 ,当梭曼浓度增加到 96 0mg·L- 1时 ,神经细胞形态学发生变化 ,表现为突触收缩 ,细胞收缩、变圆、死亡等。梭曼在 2 4h对神经细胞LC50 值为 2 0 .35mg·L- 1。神经细胞培养液中AChE活性随培养时间的延长 ,AChE活性有显著增加的趋势 (P <0 .0 1) ,而梭曼能显著抑制培养液中AChE活性 (P <0 .0 1)。结论梭曼对体外培养的神经细胞AChE活性的影响与整体动物一致 ,提示该细胞可作为快速评价梭曼细胞损伤及抗毒药物筛选的方法之一     

可乐定对梭曼中毒动态过程的影响

用ChE组织化学结合图像分析技术,探讨了可乐定对梭曼中毒动态过程的影响。结果可乐定对梭曼抑制ChE的最大抑制程度没有作用,而显著地降低了ChE抑制速率。脑组织的皮质和延脑区域ChE动态抑制过程受可乐定影响明显,而底节影响较轻,说明梭曼中毒的毒性表现主要由脑皮质和延脑ChE抑制所致。     

卡托普利对大鼠血液中梭曼消除的影响

啮齿类动物对梭曼有很强的解毒能力,但在梭曼解毒中,肝脏及肠道等外周器官中羧酸酯酶强大的解毒能力并未得到充分发挥,如能调法提高它们的利用度,就有可能减少梭曼到达靶器官的量,并降低梭曼的毒性,梭曼中毒后,可以引起外周血管痉挛,使更多的梭曼向脑中分布,因此加重脑功能性乙酰胆碱酯酶的抑制程度。尼莫地平通过外周血管扩张作用,山莨菪碱通过改善外周微循环作用,增加了梭曼与外周解毒酶的结合而加快了梭曼的消除。为了解其他因管扩张机制的药物是否也有类似作用,我们观察了卡托普利对大鼠血液中梭曼消除的影响。     

乙酰唑胺对PC12细胞缺氧损伤的保护作用及其机制研究

目的研究乙酰唑胺对缺氧PC12细胞的保护作用及其机制。方法用三气培养箱建立缺氧模型培养PC12细胞,筛选乙酰唑胺作用于缺氧PC12细胞的最佳浓度,观察细胞形态,测定细胞活力、LDH的含量、细胞周期,实时荧光定量PCR法检测HIF-1α及Caspase-3 mRNA的表达。结果与缺氧模型组相比,乙酰唑胺可明显提高缺氧PC12细胞存活率、降低培养基中LDH的含量,降低G1期、提高S期细胞百分比、提高HIF-1αmRNA的表达、降低Caspase-3 mRNA的表达水平。结论乙酰唑胺具有保护PC12细胞缺氧损伤的作用。     

As-80方救治猴梭曼中毒

目的　双吡啶单肟HI 6是目前救治小鼠和家犬等神经性毒剂中毒较为有效的胆碱酯酶重活化剂 ,但仍需进一步验证HI 6对高等动物的疗效 ,为HI 6过渡到人体临床应用提供依据。As 80方是作者以HI 6为主药组成的抗神经毒复方。本研究采用与人较为接近的灵长类动物猕猴 ,通过救治猕猴梭曼中毒进一步验证As 80方的效价。方法　 6只健康猕猴随机分为 2个实验组和 1个对照组。第一实验组猴im 10 μg·kg- 1梭曼 ,第二实验组猴im 2 5μg·kg- 1梭曼。待中毒猴出现惊厥时 ,立即给实验动物一次imAs 80方注射液 0 .1mL·kg- 1,对照动物注射等剂量的生理盐水。观察猴肌注梭曼后中毒症状出现时间 ,实验动物用As 80方救治后中毒症状缓解情况及时间 ,实验动物 3,5 ,7d活存率及恢复情况。结果　猴肌注梭曼后其中毒症状与狗梭曼中毒的症状相似 ,主要表现为肌颤、流涎、惊厥等 ,瞳孔缩小不明显 ,中毒症状的轻重及出现时间快慢与梭曼剂量大小呈正相关。As 80方救治猴梭曼中毒的效价明确。第一实验组 (10 μg·kg- 1梭曼 ) 7d活存率为 2 /2 ,第二实验组 3,5 ,7d活存率分别为 3/3,2 /3,1/3。对照组 1只动物于中毒 15h内死亡。实验结果还表明 ,As 80号复方对猕猴梭曼中毒症状控制好 ,治疗后机体恢复快。结论　实验结果均表明HI 6、