缺氧对骨肉瘤SaOS-2细胞系HIF-1α和VEGF表达的影响

目的：观察缺氧条件下骨肉瘤SaOS-2细胞系缺氧诱导因子HIF-1α和血管生长因子VEGF表达的变化。方法：建立骨肉瘤细胞体外缺氧培养模型，观察缺氧培养不同时相(8、16、24h)HIF-1α和VEGF的表达。半定量RT—PCR方法检测HIF-1α和VEGF mRNA的转录水平，免疫组化(SP法)和免疫印迹(Western blot)检测HIF-1α蛋白表达情况，免疫组化和ELISA法检测细胞和培养上清液中VEGF蛋白表达。结果：缺氧处理后，HIF-1α mRNA转录水平没有明显改变，蛋白表达随缺氧时间延长而升高。VEGF mRNA以及蛋白的表达在缺氧条件下均显著增强。结论：骨肉瘤细胞系SaOS-2在缺氧条件下．缺氧诱导因子HIF-1α和血管牛长因子VEGF蛋白表达上调。     

干扰RNA沉默HIF-1α在缺氧状态下对骨肉瘤细胞VEGF表达的影响

背景与目的:研究表明H IF-1α是肿瘤适应低氧微环境、诱导血管新生的一个主要调控因子。本研究通过观察体外低氧培养条件下骨肉瘤细胞系SaOS-2中H IF-1α和VEGF的表达,探讨H IF-1α在骨肉瘤缺氧激活血管新生调控途径中的作用。方法:CoCl2化学缺氧法模拟肿瘤缺氧环境。半定量RT-PCR和免疫组化法分别检测不同缺氧时相中H IF-1α和VEGF在m RNA和蛋白水平的表达。构建针对H IF-1α的短发夹状小干扰RNA真核表达载体并转染SaOS-2细胞。免疫印迹沉淀观察转染后H IF-1α的基因沉默效果,RT-PCR和ELISA双抗体夹心法检测H IF-1α短基因沉默后SaOS-2细胞中VEGF的变化。结果:低氧条件下,SaOS-2细胞H IF-1αm RNA水平稳定,蛋白表达显著升高;而VEGF m RNA和蛋白的表达均显著升高。构建的H IF-1α短发夹状小干扰RNA表达载体转染SaOS-2细胞后能够显著下调H IF-1α基因的表达,同时VEGF基因的表达也受到明显抑制。结论:缺氧促使SaOS-2细胞H IF-1α在蛋白水平表达升高,H IF-1α通过转录激活VEGF的机制促进骨肉瘤缺氧状态下的血管新生。     

RNAi抑制HIF-1α基因逆转卵巢癌多药耐药的实验研究

目的 探讨靶向缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)载体表达的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)逆转卵巢癌细胞多药耐药的可行性.方法 构建靶向HIF-1α短发夹状siRNA 基因表达载体,脂质体介导转染人卵巢癌COC1/DDP细胞.Western blot法检测HIF-1α蛋白和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达;实时定量PCR(real time PCR)检测HIF-1α和多耐药基因1(mdr-1)mRNA的表达;MTT法检测COC1/DDP细胞对化疗药物顺铂的抗性.结果 转染HIF-1α短发夹状siRNA真核表达载体的COC1/DDP细胞,低氧条件下HIF-1α蛋白及mRNA表达水平下降,同时mdr-1基因的mRNA及其编码的P-gp蛋白水平也明显下降,对顺铂的药物敏感性增加.结论 HIF-1α短发夹状siRNA真核表达载体可有效地抑制卵巢癌COC1/DDP细胞HIF-1α和mdr-1基因的表达,逆转卵巢癌细胞的多药耐药.     

HIF-1α基因干扰对大鼠CBRH-7919肝癌细胞HIF-1α与VEGF表达影响的研究

目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对肝癌细胞在缺氧状态下表达HIF-1α及血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法:选用大鼠CBRH-7919肝癌细胞株作为研究对象,利用氯化钴(CoCl2)模拟缺氧状态,构建3组特异性较强的HIF-1α siRNA表达载体,采用小分子RNA干扰技术沉默细胞HIF-1α的基因表达,分别利用real time RT-PCR和蛋白质印迹法检测肝癌细胞HIF-1α和VEGF在mRNA及蛋白水平的表达变化.结果:在不同浓度CoCl2模拟缺氧条件下,随着CoCl2浓度的增高及时间的推移,肝癌细胞HIF-1α和VEGF的表达(mRNA及蛋白水平)较常氧对照组(0 μmol/L CoCl2)显著增多,差异均有统计学意义,P＜0.05.应用3组不同HIF-1α和siRNA表达载体转染缺氧条件下的肝癌细胞后,细胞的HIF-1α和VEGF的基因(mRNA)表达量与未转染HIF-1α siRNA表达载体对照组相比较明显减少,同步检测两者的蛋白表达亦明显减少,与对照组差异均有统计学意义,P＜0.05.结论:缺氧可以诱导肝癌细胞HIF-1α和VEGF的表达,siRNA沉默HIF-1α能显著抑制缺氧状态下诱导的VEGF表达.     

HIF-1α反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞系MG-63 HIF-1α和VEGF表达的影响

目的：观察缺氧诱导因子HIF—1α反义寡核苷酸（antisense oligonucleotides，ASODN）在缺氧环境下对骨肉瘤细胞系MG-63 HIF—1α和血管内皮生长因子VEGF表达的影响。方法：设计针对HIF—1α RNA亚基模板序列的反义、正义寡核苷酸（sense oligodeoxynucleotides，SODN），并建立骨肉瘤细胞体外缺氧培养模型，观察缺氧培养不同时相HIF-1α反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞系MG-63 HIF-1α和VEGF的表达的影响。RT-PCR方法检测HIF-1α和VEGF mRNA水平，免疫组化和免疫印迹方法检测HIF-1α和VEGF蛋白表达情况。结果：与常氧组比较。单纯缺氧组及SODN缺氧组的HIF-1α转录水平未见明显改变。蛋白表达水平却随缺氧时间延长明显升高：而VEGF mRNA以及蛋白的表达水平较常氧组均显著增强。然而在ASODN缺氧组。HIF-1α、VEGFmRNA活性以及蛋白的表达水平明显减弱，且HIF-1α蛋白水平与VEGF转录活性有明显的相关性。结论：在缺氧环境下，转染HIF-1α反义寡核苷酸能够抑制HIF-1α活性。从而使VEGF mRNA和蛋白的表达水平明显下降。     

基因沉默HIF-1α在结直肠癌SW480细胞的缺氧与上皮-间质转化中的作用

目的通过基因沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),研究其对结直肠癌SW480细胞的生长增殖、侵袭迁移能力,及对锌指转录因子(Snail)与上皮钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响和作用。方法利用氯化钴(CoCl2)化学诱导建立结直肠癌SW480细胞的缺氧模型,设计合成HIF-1α的小干扰RNA(HIF-1α-siRNA)并将其转染入细胞内。通过四甲基偶氮唑兰(MTT)法检测细胞的体外生长增殖活性,体外侵袭实验(Transwell法)检测细胞的体外侵袭迁移力,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫蛋白印迹(Western blot)检测细胞中HIF-1α、Snail及E-cadherinmRNA与蛋白的表达情况。结果 MTT法检测结果显示,缺氧条件下,基因干扰组的OD值及细胞存活率均降低(P<0.05);体外侵袭实验结果显示,基因干扰组侵袭迁移率降低(P<0.05);RT-PCR与Western blot检测结果显示,基因干扰组中HIF-1α和Snail mRNA和蛋白的表达明显降低,E-cadherin mRNA和蛋白的表达明显增强(P<0.05),对3种因子进行相关性分析,结果显示HIF-1α和Snail的表达呈正相关,HIF-1α和Snail均与E-cadherin的表达呈负相关(P<0.05)。结论 RNA干扰沉默HIF-1α基因可抑制结直肠癌SW480细胞的体外生长增殖和体外侵袭迁移能力,其机制可能是由于基因沉默HIF-1α导致细胞中Snail低表达,E-cadherin高表达,抑制了EMT发生、发展所致。     

低氧影响卵巢癌细胞对泰素的敏感性及其机制

目的研究低氧、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对卵巢癌细胞多药耐药基因(mdr-1)及其编码P-糖蛋白(P-gp)表达的调控,探讨低氧影响卵巢癌细胞对泰素的敏感性及其机制。方法对常氧(21%O2)和低氧(1%O2、5%O2)培养的A2780细胞,应用免疫细胞化学、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)和四氮唑蓝(MTT)法等,检测HIF-1αmRNA、蛋白以及mdr-1、P-gp的表达水平和对泰素的敏感性。利用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对HIF-1α的短发夹状干扰RNA真核表达载体pSiHIF-1α,并转染A2780细胞,检测转染后HIF-1α的基因沉默效果、对mdr-1和P-gp表达的影响及其对泰素敏感性的改变。结果低氧能显著诱导A2780细胞HIF-1αmRNA和蛋白表达水平的上调,HIF-1αmRNA的表达水平与低氧浓度无关,而HIF-1α蛋白表达呈低氧浓度依赖性;低氧能诱导A2780细胞的表达上调,且呈低氧浓度依赖性;低氧A2780细胞对泰素的敏感性较常氧明显降低(P<0.05)。pSiHIF-1α转染后,低氧A2780细胞能显著下调HIF-1α的表达,明显抑制mdr-1和P-gp的表达,其对泰素的敏感性显著增加。结论低氧能降低A2780细胞对泰素的敏感性,其机制可能是通过HIF-1α调控mdr-1和P-gp的表达而实现的。     

siRNA 沉默HIF-1α在缺氧状态下对食管鳞癌细胞VEGF表达的影响

 目的 观察体外乏氧培养条件下食管鳞癌细胞系EC9706中HIF-1α和VEGF的表达，探讨HIF-1α在低氧条件下对食管鳞癌血管生成的调控作用。方法 CoCl2化学缺氧法模拟肿瘤缺氧环境，RT-PCR、免疫组化法和免疫印迹法分别检测缺氧状态下HIF-1α和VEGF在mRNA和蛋白水平的表达。采用化学合成小干扰RNA（siRNA）介导的RNA干扰技术（RNAi）用siRNA转染EC9706细胞。观察转染后HIF-1α沉默效果。结果 低氧条件下，EC9706细胞HIF-1amRNA水平稳定，蛋白表达显著升高，而VEGFmRNA和蛋白的表达均显著升高。SiRNA转染EC9706后能够显著下调HIF-1α的基因表达，同时VEGF基因的表达也受到明显抑制。结论 缺氧促使EC9706细胞HIF-1α在蛋白水平表达升高，并通过转录激活VEGF的机制调控食管鳞癌血管生成。     

RSUME和HIF-1α/VEGF通路与垂体腺瘤侵袭之间的关系

目的 :探讨RSUME(RWD containing sumoylation enhancer)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路与垂体腺瘤侵袭之间的关系。方法:应用实时荧光定量PCR法检测垂体腺瘤组织中RSUME、HIF-1α和VEGF-A mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测垂体腺瘤组织中小泛素相关修饰因子-1(small ubiquitin-related modifi ers-1,SUMO-1)、HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达水平。将靶向RSUME基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染至小鼠垂体腺瘤AtT-20细胞后,实时荧光定量PCR法检测细胞中RSUME、HIF-1α和VEGF-A mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测细胞中SUMO-1、HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达水平,Transwell法检测细胞侵袭能力的改变。结果:侵袭性垂体腺瘤组织中RSUME、HIF-1α、VEGF-A mRNA的表达水平和SUMO-1、HIF-1α、VEGF-A蛋白的表达水平明显高于非侵袭性垂体腺瘤组织和正常垂体组织(P均<0.05)。并且,侵袭性垂体腺瘤组织中SUMO-1与HIF-1α的表达呈正相关(r=0.687,P<0.05),HIF-1α与VEGF-A的表达呈正相关(r=0.773,P<0.05)。RSUME siRNA转染组AtT-20细胞中RSUME和VEGF-A mRNA以及SUMO-1、HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达水平均明显低于转染阴性对照siRNA组和未转染的空白对照组(P均<0.05)。RSUME siRNA转染组AtT-20细胞的侵袭能力被明显抑制(P<0.05)。结论:RSUME可能通过增强HIF-1α/VEGF通路的作用而促进垂体腺瘤的侵袭。沉默RSUME基因可抑制垂体腺瘤细胞的侵袭。     

siRNA表达载体对人HeLa细胞中caspase-8基因的干涉作用

目的:构建针对人caspase-8 基因mRNA的siRNA表达载体,并观察其对转染细胞中的caspase-8的抑制作用.方法:化学合成用于产生针对caspase-8的发夹状RNA的寡核苷酸,将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接入经HindⅢ和BglⅡ双酶切后的pSUPER真核表达载体.对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定.通过脂质体介导,把重组质粒瞬时转染入HeLa细胞,RT-PCR、Western blot以及immunofluorescence staining检测其对mRNA和蛋白表达的干涉效果.结果:成功地构建了针对人caspase-8基因的RNA干涉真核表达载体pSUPER-C1和pSUPER-C2,并在人HeLa细胞中有效发挥了对caspase-8基因的干涉作用,而且pSUPER-C1对于caspase-8基因的抑制作用要优于pSUPER-C2.结论:成功地构建了针对人caspase-8基因的siRNA载体,转染HeLa细胞后可抑制caspase-8基因的表达.     

HIF-1α和HIF-2α在肾透明细胞癌中的表达及意义

背景与目的：低氧诱导因子是广泛存在于多种细胞的转录因子，在低氧时肿瘤细胞相关基因的表达发挥着重要的调控作用。本研究探讨了低氧诱导因子HIF-1αmRNA和HIF-2αmRNA在肾透明细胞癌中的转录及其临床意义。方法：采用逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）方法检测56例肾透明细胞癌组织、对照组43例远离肿瘤的癌周肾脏组织及9例良性疾病肾脏组织中HIF-1αmRNA和HIF-2αmRNA的阳性率。结果：HIF-1αmRNA在肾透明细胞癌组织中的阳性率为87．5％，较对照组织13．5％高，差异具有显著性（P〈0．001）；HIF-2αmRNA在肾透明细胞癌标本组织中的表达率为94．6％，较对照组织7．7％高，差异有显著性（P〈0．001）。结论：HIF-1αmRNA和HIF-2αmRNA的转录可能对肾透明细胞癌的发生和发展有重要作用。     

Livin异构体特异性siRNA表达载体的构建及其在SPC-A1细胞中的稳定表达

目的：利用基因转染和RNA干涉（RNA interference．RNAi）技术在肺腺癌SPC-A1细胞株中分别建立2种Livin异构体的基因沉默体系，旨在进一步体外观察两种异构体基因沉默诱导SPC-A1细胞凋亡效应。方法：构建Livin两种异构体小干涉RNA（small interfering RNA，siRNA）表达载体；以电穿孔法转染SPC-A1细胞，经G418筛选获得稳定转染的细胞克隆；通过半定量RT-PCR和Western blot验证Livin异构体在SPC-A1细胞中的基因沉默效率，建立高效Livin异构体基因沉默体系。结果：成功获得Livin异构体siRNA表达载体，经基因转染以及G418抗性筛选，成功建立Livin异构体特异基因沉默SPC-Al细胞克隆。结论：RNAi能高效特异阻断两种Livin异构体表达，为进一步研究其不同的抗凋亡生物学功能，探讨其作为诱导肺癌细胞凋亡治疗分子靶点以及提高肺癌细胞放化疗敏感性打下基础。     

RNA干扰沉默PPARγ对人胃癌细胞生长的影响

目的:采用RNA干扰技术探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)表达在人胃癌中的作用.方法:根据人 PPARγ基因序列设计获得3个小干扰RNA(small interfering nRNA,siRNA)靶位点,并构建了3个针对靶位点的一个载体编码一个短发夹状RNA(shRNA)的质粒表达载体(Y1、Y2和Y3),同时合成了1个阴性对照质粒表达载体(HK),采用阳离子脂质体将质粒转染人胃癌MGC803细胞,FCM法观察转染效率.分别采用RT-PCR和Western印迹法检测PPARγ mRNA和蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖,相差倒置显微镜、Hoechst33342染色和FCM检测细胞凋亡.结果:RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默PPARγ表达后抑制人胃癌MGC803细胞增殖并诱导其凋亡.结论:PPARγ高表达可能通过促进细胞增殖和抑制细胞凋亡促进人类胃癌的形成,PPARγ有望成为治疗胃癌的新靶点.     

沉默乙酰肝素酶对人胃癌细胞侵袭迁移能力的影响

目的:探讨RNA干扰沉默乙酰肝素酶(heparanase, HPA)基因表达对人胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移的影响.方法:根据人HPA基因序列转录RNA的位置及小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)设计原则,设计了4个靶位点,并构建了4个分别针对靶位点的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的质粒表达载体,同时合成了阴性和阳性对照质粒表达载体.采用阳离子脂质体法将以上质粒转染入人胃癌SGC-7901细胞,分别采用RT-PCR和Western印迹法检测转染前后HPA mRNA和蛋白表达的变化,选出对HPA沉默效果最佳的质粒,再应用Transwell小室基质侵袭实验和划痕损伤实验分别研究HPA表达沉默后对人胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移能力的影响.结果:质粒载体pGPU6/GFP/Neo-HPA-1085沉默人胃癌SGC-7901细胞HPA mRNA和蛋白表达的效果最好.pGPU6/GFP/Neo-HPA-1085转染组中穿透Transwell小室基质的SGC-7901细胞数(289.90±18.11)明显高于对照组(44.00±15.22) (P<0.05),SGC-7901细胞的迁移距离在48、72和96 h内 pGPU6/GFP/Neo-HPA-1085转染组明显低于对照组(P<0.05). 结论:RNA干扰技术可沉默人胃癌SGC-7901细胞中HPA mRNA和蛋白表达,从而抑制SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力.HPA可能是治疗胃癌侵袭和转移的一个新靶点.     

短发夹状RNA在人细胞诱导RNA干扰

背景与目的：RNA干扰是一种通过细胞内导入双链RNA而导致特异基因表达抑制的进化保守的转录后基因沉默现象,目前RNA干扰已成为研究基因功能的重要方法。本研究旨在利用DNA载体在细胞内产生短发夹状RNA(short hairpin RNAs,shRNA),通过这些shRNA来诱导RNA干扰(RNAm interference,RNAi),为基因功能分析提供新的实验手段。方法：利用双荧光素酶报告系统来检测DNA载体在细胞内产生的shRNA诱导RNAi的效果。比较该载体产生的shRNA在不同条件下的RNA干扰效果。结果：DNA载体产生的shRNA在人细胞能诱导RNAi,序列特异地抑制基因表达。抑制效果与所选基因靶位点高度相关。结论：shRNA在人细胞能诱导RNA干扰,序列特异地抑制基因表达,这一方法可用于基因功能分析。     

HIF干扰表达载体psilencer3.0-HIF-α siRNA的构建和鉴定

背景与目的：肾透明细胞癌是最常见的肾实质恶性肿瘤．生物学行为极为复杂，对放疗和化疗均不敏感。研究发现缺氧诱导因子HIF-α（和HIF-2α与肾透明细胞癌发生发展过程存在相关性．．本研究拟通过RNA干扰的方法构建psiletwer3．0-H1F-αsiRNA重组质粒，从而为进一步探讨HIF在肾细胞癌发生发展中的功能提供有效的工具。方法：设计并化学合成编码HIF-1α和HIF-2αsiRNA的DNA片段，通过基因重组的方法将其构建进siRNA的表达载体。采用实时定量PCR和Western blot检测构建成功的siRNA表达载体在mRNA及蛋白水平对目标基因表达的抑制。结果：786-0细胞转染psilem、er3．0-HIF-1αsiRNA和psilencer3．0-HIF-2α后，HIF-1α和HIF-2α的mRNA表达的抑制率分别达到r82．1％和87．4％；OS—RC-2细胞转染psilelwer3．0-HIF-1αsiRNA和psilencer3．0-HIF-2α后．抑制率分别达到了91．2％和81．2％。在786-0细胞和OS—RC-2细胞中转染HIF-1α干扰质粒和HIF-2α干扰质粒的实验组蛋白表达量较空白对照均有不同程度的减低、结论：构建成功的siRNA表达载体可以有效抑制目标基因HIF-1和HIF乏在mRNA硬蛋白水平的表达.     

特异性沉默Eca109 细胞系stat hmin 基因siRNA 表达载体的构建

 目的 构建并筛选特异性沉默stathmin基因的pSUPER-S逆转录病毒载体以及稳定表达的细胞克隆。方法 用DNA重组技术,将64nt能转录产生靶向stathmin小发夹RNA（shRNA）的寡核苷酸序列,定向克隆入逆转录病毒载体pSUPER-EGFP,应用脂质体将重组逆转录病毒载体pSUPER-S转染细胞系Eca109,G418筛选建立稳定产生逆转录病毒的细胞克隆,RT-PCR检测转染细胞stathminmR-NA的表达。结果 重组逆转录病毒载体经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切,可见4692nt和285nt条带;测序结果表明插入序列正确;重组载体转染Eca109细胞,可表达绿色荧光蛋白（EGFP）,经G418筛选得到抗性细胞克隆,转染细胞stathmin mRNA的表达较对照组明显减弱。结论 特异性沉默stathmin基因的pSUPER-S逆转录病毒载体以及稳定表达的细胞系构建和筛选成功。     

低氧诱导因子-1αRNAi表达质粒对卵巢癌细胞影响的实验研究

目的:探讨人HIF-1α短发夹(sh)RNA表达质粒对卵巢癌SKOV3细胞HIF-1α基因的表达及对紫杉醇敏感性的影响.方法:构建HIF-1α(sh)RNA表达质粒,脂质体法转染,RT-PCR和Western blot检测癌细胞HIF-1α mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测癌细胞对紫杉醇的敏感性.结果:转染质粒48 h后,H质粒转染组SKOV3细胞紫杉醇作用24 h的IC50值明显降低(P<0.05),同时P-糖蛋白表达水平显著降低,差异有统计学意义(F=7.24,P=0.01).结论:针对HIF-1α的RNAi表达质粒可下调低氧培养的卵巢癌细胞SKOV3 HIF-1α基因mRNA和蛋白及P-gp的表达,从而提高癌细胞对紫杉醇的敏感性.     

沉默高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ表达对人胃癌BGC-823细胞侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨RNA干扰沉默高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgi a-mannosidase Ⅱ,GM Ⅱ)基因表达对人胃癌BGC-823细胞侵袭和迁移的影响.方法:为沉默GM Ⅱ基因,构建了4个分别针对不同靶位点的短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)质粒表达载体,同时合成阴性对照质粒表达载体.应用LipofectAMINE2000将质粒转染入BGC-823细胞.分别采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染后GM Ⅱ mRNA和蛋白表达的变化,选出沉默效果最佳的质粒.应用Transwell侵袭实验和划痕损伤实验分别检测GM Ⅱ基因沉默对人胃癌细胞BGC-823侵袭和迁移能力的影响.结果:质粒载体pGPU6/GFP/Nco-1303沉默GM Ⅱ基因的效果最好.转染pGPU6/GFP/Neo-1303组穿透小室基质的细胞数明显少于空白对照组和转染阴性对照组(P＜0.05).无血清培养液培养24 h后,转染pGPU6/GFP/Neo-1303组细胞的迁移能力较空白对照组和转染阴性对照组明显降低(P＜0.05).结论:RNA干扰技术可沉默人胃癌BGC-823细胞中GMⅡmRNA和蛋白的表达,从而抑制BGC-823细胞的侵袭和迁移能力.GM Ⅱ可能成为胃癌治疗的新靶点之一.