人大细胞肺癌细胞系NL9980和L9981的建立及其生物学特性研究

目的 探讨从人大细胞肺癌细胞株WCQH-9801分离构建不同转移潜能肺癌细胞株的可能性，并鉴定其生物学和分子生物学差异。方法 应用单个细胞克隆技术分离建立不同肺癌细胞亚系NL9980和L9981；应用Southern blot、RT-PCR、Western blot检测NL9980和L9981细胞株中nm23-H1基因多态性、mRNA和蛋白转录表达水平；应用MTT法、平板法、Boyden小室法、染色体分型法以及动物实验检测NL9980和L9981细胞株的体内体外生物学特征。结果 ①成功分离建立具有不同转移能力的人大细胞肺癌细胞系NL9980和L9981；②L9981细胞系存在nm23-H1等位基因杂合性缺失、mRNA和蛋白表达缺失，而NL9980细胞株：nm23-H1等位基因结构和转录表达均正常；③L9981细胞株的体外增殖能力、克隆形成率和体外侵袭力均显著高于NL9980细胞株；④L9981细胞株在裸鼠体内的成瘤性和肺部转移率均显著高于NL9980；⑤NL9980和L9981染色体众数比较无显著性差异。结论 ①NL9980和L9981细胞株具有不同的生物学和分子生物学特征；②L9981细胞株的高侵袭和高转移潜能可能与nm23-H1等位基因缺失有关。     

肺癌中EphB4表达的生物学意义

目的 研究肺癌组织中EphB4表达，探讨其生物学意义。方法 采用免疫组织化学SP法检测54例肺癌和10例正常肺组织标本中EphB4蛋白的表达。结果 EphB4蛋白在实验组中的阳性表达率为50％(27／54)，对照组为阴性，二者之间具有显著性差异(P＜0．01)；EphB4表达阳性率和表达水平与肉眼类型、组织学分级和临床分期有关(P＜0．05)，而与性别、年龄、组织学分型及淋巴结转移无关(P＞0．05)。结论 EphB4-9肺癌的发生发展有关。检测肺癌中EphB4的表达情况可作为判断肿瘤预后的新靶点。     

Survivin在肺癌中的表达和生物学意义

目的 检测肺癌细胞中凋亡蛋白抑制因子Survivin的表达，并探讨其在肺癌发生、发展中的作用和意义。方法 采用免疫组化方法，检测62例肺癌，其中腺癌23例，鳞癌22例，小细胞癌10例，大细胞癌7例，及正常肺标本10例中Survivin蛋白的表达情况。结果 62例肺癌中有35例(56．5％)表达Survivin，其阳性率和表达强度均显著高于正常组(P＜0．01)；SCLC组表达强度显著高于NSCLC组(P＜0．05)；Survivin的表达强度和阳性率与淋巴结转移和临床分期显著相关(P＜0．05)，其中Ⅰ Ⅱ期表达水平显著低于Ⅲ Ⅳ期(P＜0.05)。结论 Survivin在肺癌组织中过表达，与进展和恶性程度相关，对肺癌的发生、发展起促进作用，为预后和疗效估计提供一定的依据。     

一株HGPRT缺陷型小鼠肺癌细胞株的建立及其生物学性质

目的 为研究肺癌疫苗提供适合细胞融合的抗原细胞。方法 用８－氮鸟嘌呤（８－ＡＧ）从小鼠肺癌细胞ＬＡ７９５渐进诱导次黄嘌呤－鸟嘌呤转磷酸核糖基酶（ＨＧＰＲＴ）缺陷型细胞株ＡＬＡ９７０２,并鉴定其生物学性质及成瘤性。结果 ＡＬＡ９７０２细胞在２０μｇ／ｍｌ－８－ＡＧ培养液中生长了一年,在ＨＡＴ培养液中不能形成集落,并保持了来源细胞ＬＡ７９５的生物学性质及成瘤性。结论 ＡＬＡ９７０２细胞株稳定表现为ＨＧ     

克隆化Lewis肺癌高、低转移株的生物学特性比较

 为了研究肿瘤转移的异质性,本实验通过使用单细胞克隆化技术,从体外培养的Lewis肺癌细胞中选出B、f 两亚细胞株,分别对它们进行扩大培养,再将其注射于小鼠足掌,发现B 细胞株的致瘤性和肺自发转移结节数均显着高于f 细胞株。进一步观察两株细胞其它方面的生物学特性发现：B细胞株体积大,粘附性差,呈铺展性生长。f 细胞株体积小,粘附性强。且B细胞株和较低浓度的ConA 发生凝集反应,而f 细胞株则在较高浓度ConA 中才发生凝集反应。这一结果提示：肿瘤细胞是由生物学特性不同的细胞亚群组成。     

Ⅰ期非小细胞肺癌生物学行为的预测

Ⅰ期非小细胞肺癌(ＮＳＣＬＣ)以手术切除为首选治疗方法,肿瘤完全切除后患者的5年生存率约为70%,较未手术者的10%明显升高[1]。然而由于肺肿瘤本身生物学行为的异质性,Ⅰ期ＮＳＣＬＣ完全切除后仍有20%～30%的患者治疗失败,主要原因为区域淋巴结和/或远处转移。理论上术后辅助治疗对这一高危亚群应有价值,但目前临床上尚缺乏公认指标来鉴别易出现治疗失败的高危人群,因而术后治疗缺乏针对性。为此,研究者试图从研究肺癌的生物学行为出发,筛选出Ⅰ期ＮＳＣＬＣ治疗失败的高危人群。为寻找预测Ⅰ期ＮＳＣＬＣ生物学行为的临床、病理和实验室…     

肺癌分期分类相关的解剖学、生物学及理念

尽管用于此修订本的大样本量患者数据库已极大地拓宽了我们的知识面,但最新提出的肺癌分期系统仍以解剖学特征为基础。可以预见,由于所鉴定出的患者亚群数目不断增加,肺癌分期系统变得愈加复杂。表述这些亚组的临床特征有可能为我们提供肿瘤亚组特殊的生物学行为特性的线索。本文探索了可用于以解剖学为基础的新分期系统的肿瘤生物学相关观念。     

MiR-26a在肺癌中的研究进展

肺癌的发病和死亡居全部恶性肿瘤的首位,同时肺癌患者的耐药情况愈来愈严峻,给国家经济和人民健康造成了极大负担。MiR-26a是一类小的非编码RNA,通过靶向调控相关蛋白与信使RNAs(mRNAs)而影响肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭等生物学作用。本文旨在对miR-26a在肺癌中的作用机制进行详细阐述,为肺癌的治疗与耐药提供临床生物标志物。     

KRAS突变晚期非小细胞肺癌生物学特征、临床治疗及预后研究进展

摘 要：KRAS突变是非小细胞肺癌（NSCLC）较为常见的基因突变,中国人群中KRAS G12C突变比例最高,其流行病学特征与西方人群存在差异。由于KRAS蛋白结构特殊、无明显结合位点,一度被冠以“不可成药靶点”。KRAS突变患者相比较于野生型患者生存期更短,预后更差。近年来KRAS G12C小分子抑制剂在临床初步研究中取得了突破性进展,为晚期NSCLC KRAS突变患者带来了生存希望,大量特异性靶点抑制剂、联合治疗等研究也不断深入。全文就晚期NSCLC KRAS突变流行病学特征、生物学特征、临床相关治疗及疗效预测等研究进展作一综述。     

survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制

目的 研究survivin反义寡核苷酸（ASODN）诱导肺癌细胞凋亡的作用,探讨survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制。方法 在脂质体介导下,分别以100mmol／L、300mmol／L和500mmol／L浓度的survivin ASODN,作用于肺癌细胞株NCI-H44624h、48h和72h后,用RT-PCR和Western blot检测survivin mRNA及蛋白表达,流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡;Rh123染色法检测细胞线粒体膜电位（△ψm）变化;ELISA法检测胞浆细胞色素C（cyt C）浓度;比色法检测胞浆内天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9（caspase-9）、caspase-3的活性;Western blot检测caspase-8蛋白表达;加入环孢霉素A（CsA）后,以FCM检测细胞凋亡。结果 与各对照组相比,survivin ASODN显著下调了survivin mRNA表达,且呈时间和浓度依赖性,其中以500mmol／L作用72h时效果最佳,抑制率达62．7％,其蛋白表达也显著下调。NCI-H446细胞的凋亡指数（AI）为48．35％,明显高于对照组（3．75％）、空脂质体组（3．41％）、无义寡核苷酸（NSODN）组（4．69％）、100和300mmol／LASODN组（19．85％和34．39％）;增殖指数（PI）为24．38％,明显低于上述各组（75．54％、73．12％、71．76％、51．03％和38．94％,P均〈0．01）。survivin ASODN导致细胞△ψm逐渐下降,并相继引起cytc的释放、caspase-9和caspase-3的激活,而caspase-8酶原无变化。CsA显著抑制了survivin ASODN诱导的细胞凋亡。结论 survivin通过调控线粒体凋亡途径发挥抗肺癌细胞凋亡作用;survivin ASODN能够显著下调survivin mRNA及蛋白表达,诱导肺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

一株HGPRT缺陷型小鼠肺癌细胞株的建立及其生物学性质

目的　为研制肺癌疫苗提供适合细胞融合的抗原细胞。方法　用8氮鸟嘌呤(8AG)从小鼠肺癌细胞LA795渐进诱导次黄嘌呤鸟嘌呤转磷酸核糖基酶(HGPRT)缺陷型细胞株ALA9702,并鉴定其生物学性质及成瘤性。结果　ALA9702细胞在20μg/ml8AG培养液中生长了一年,在HAT培养液中不能形成集落,并保持了来源细胞LA795的生物学性质及成瘤性。结论　ALA9702细胞株稳定表现为HGPRT缺陷型小鼠肺癌细胞,为建立有效的特异性肺癌疫苗治疗提供有利的抗原材料     

人突变K-ras基因修饰lewis肺癌细胞株的建立及其生物学特性

目的:探讨以K-ras基因为靶点,建立人K-ras(12位密码子点突变)基因修饰的lewis肺癌细胞株3LL-pcDNA3-K-ras/V12及其生物学特性.方法:应用脂质体法将人K-ras(12位密码子点突变)基因cDNA导入lewis肺癌细胞株3LL,应用流式细胞仪检测p21/V12蛋白的表达,同时检测3LL细胞株转基因前后生长、克隆形成率和体内成瘤的变化.结果:成功的将人K-ras(12位密码子点突变)基因cDNA导入lewis肺癌细胞株3LL,p21/V12蛋白在3LL-pcDNA3-K-ras/V12中稳定表达,转基因细胞株的生长曲线和克隆形成率与原代细胞株3LL无显著差异;但转基因细胞株在C57BL/6小鼠体内的成瘤性显著高于原代细胞株3LL.结论:成功的建立了导入K-ras(12位密码子点突变)的lewis肺癌细胞株3LL-pcDNA3-K-ras/V12.     

小鼠肺癌B7融合细胞的制备及生物学性质

目的 改善肿瘤细胞共刺激分子Ｂ７的表达。方法 将ＡＬＡ９７０２肺癌细胞与活化的Ｂ淋巴细胞用聚乙二醇进行细胞融合,经ＥＬＩＳＡ及免疫细胞化不筛选后,用Ｓ－Ｐ免疫细胞化学染色观察融合细胞的肿癌抗原及Ｂ７分子的表达,并观察融合细胞的体内外生长情况,结果 经筛选获得一株融合细胞ＦＬＢ２Ｃ,融合细胞既表达肺癌杭原,又表达Ｂ７分子,体外培养显示其巾壁性较ＡＬＡ９７０２肺癌细胞减弱,生长明显变缓,细胞倍增时间延长,不能在软琼脂中形成集落,接种融合细胞亦不能在小鼠体内成瘤,而接种ＡＬＡ９７０２细胞的１０只小鼠中６例腋下出现肿瘤生长,３例还发生肺转移。结论 通过细胞融合方法可以有效改善肿瘤细胞的Ｂ７分子表达,从而提高肿瘤细胞的的性,融合细胞ＦＬＢ２Ｃ的致瘤性明显减弱,为制备有效的肺癌轩奠定了基础。     

人体腹腔恶性间皮瘤细胞系AMS-82的生物学特性

本文报告人体恶性间皮瘤细胞系AMS—82的建株过程及其生物学特性标本来源于一62岁女性病人。经剖腹探查及病理活检诊断为恶性间皮瘤。经贴壁静置培养目前已稳定传代生长三年多。该细胞系在相差镜下观察多数为长棱形细胞,有丰富的伪足及微绒毛。H、E、染色巨瘤细胞及核分裂相多见。传代三天后呈对数生长,倍增时间43小时,分裂指数82％。染色体分析提示该细胞主要为4倍体及超4倍体细肿。组化分析提示该细胞系能产生透明质酸。用BALB/C无胸腺裸鼠作肿瘤移植试验,皮下注射5×10~6细胞后4天长出瘤块,移植瘤的病理特征、组化分析与原始接种的肿瘤相同。将该细胞系在液氮中长期冻存,复苏均获成功。     

细胞间隙连接通讯与肺癌

细胞间隙连接通讯 (ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒｃｏｍｍｕｎｉｃａ ｔｉｏｎ ,ＧＪＩＣ )是细胞间的 1种重要连接方式 ,在细胞分化、生长控制及维持体内环境平衡等方面起重要作用。近几年来 ,国内外对ＧＪＩＣ与癌变的关系进行了大量的研究 ,发现多数肿瘤细胞无ＧＪＩＣ功能 ,其间隙连接 (ＧＪ)少或无 ,邻近的正常组织或良性肿瘤的间隙连接正常。少数肿瘤细胞有脆弱的连接通讯 ,但很容易受到破坏 ,其间隙连接数量少 ;或连接通讯功能比正常细胞低。认为ＧＪＩＣ在癌变发生过程中扮演着极为重要的角色[1] 。已有学者对…     

HGPRT缺陷型Lewis肺癌细胞株的筛选及其生物学特征

目的 为细胞融合等实验提供次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）缺陷细胞株。方法 用8－氮杂鸟嘌呤（8－AG）对Lewis肺癌细胞株L3－8进行长期渐进式给药,从中克隆筛选出HRPRT缺陷细胞株,并观察其体内成瘤和肺转移特性。结果 经过1年的筛选鉴定,获得了在20mg/L8－AG和1640培养液中能长期稳定生长,在HAT选择性培养基中不能形成克隆的AL9901细胞株。AL9901和L3－8的染色体众数分别为58和62,在C57BL／6小鼠体内成瘤率均为100％（10／10）,肺转移率分别为305（3／10）和70％（7／10）。结论 HGPRT缺陷型AL9901细胞株基本保持了L3－8细胞的生物学特征,可作为制备Lewis肺癌DC融合疫苗的亲本抗原细胞。