Survivin及其变异体在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及意义

目的探讨survivin及其变异体在急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及意义。方法用RT-PCR检测27例ALL患儿survivin、survivin-2B和survivin-△Ex3 mRNA的表达,用免疫组化法检测52例ALL患儿和40例同期住院非恶性血液病患儿survivin蛋白的表达。结果 Survivin在ALL患儿的表达率为40．38％,比对照组高(P<0．01)。27例ALL患儿中survivin、survivin-2B、survivin-△Ex3 mRNA阳性率分别为51．85％、37．04％、25．93％,与对照组相比差异有统计学意义(P<0．05)。Survivin表达阳性者完全缓解(CR)率比survivin表达阴性者低(P< 0．05),且survivin-△Ex3阳性者CR率低,而survivin-2B阳性者CR率高。结论(1)Survivin及其变异体在ALL中的表达提示它们可能参与ALL的发生和发展。(2)Survivin和survivin-△Ex3 可能抗凋亡,survivin-2B促凋亡。     

Survivin、PTEN在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨Survivin、PTEN与胃癌的发生、发展、浸润转移及预后的关系。方法运用原位杂交、免疫组化及TUNEL法检测Survivin、PTEN在胃癌中的表达以及细胞凋亡情况。结果survivin在胃癌中的表达率明显高于癌旁正常胃组织（P〈0．01）;并且在临床分期较高、组织分化较差的胃癌中Survivin表达率较高（P〈0．01,P〈0．05）。而PTEN在胃癌中的表达率明显低于癌旁正常胃组织（P〈0．01）;在临床分期较高、组织分化较差的胃癌中PTEN表达率较低（P〈0．01）。此外,胃癌中survivin与凋亡指数呈负相关（r=-0．861,P〈0．01）,PTEN与凋亡指数呈正相关（r=0．832,P〈0．01）。结论Survivin可以作为早期胃癌检测及胃癌愈后判别的标志物之一;PTEN基因的失活可能促进了胃癌的发生、发展和浸润转移的进程。     

Survivin表达在大肠黏膜癌变过程中的作用

目的 探讨survivin基因表达在大肠黏膜癌变过程中的作用。方法 利用免疫组织化学法检测各种大肠黏膜组织中survivin基因的表达。结果 survivin在大肠癌组织中阳性表达率为62．5％，显著高于其他三种组织17．2％、0和0（P〈0．01）。survivin表达与大肠癌分化程度、是否转移无相关性（P〉0．05）。结论 Survivin对大肠癌的发生发展起着重要的作用。     

MAGE-A3基因与MDR1基因在非M3型急性白血病患者中的表达及其临床意义

目的观察MAGE-A3与MDR1在非M3型急性白血病（AL）患者中的表达及其与治疗反应的关系。方法应用逆转录-聚合酶链反应法观察77例初治非M3型AL患者MAGE-A3和MDR1的表达,结合临床观察。结果MAGE-A3及MDR1在非M3型AL患者中表达阳性率分别为50．6％与23．3％。MAGE-A3表达阳性与阴性者MDR1阳性率分别为46．2％与13．2％（P〈0．01）。MAGE-A3表达阴性与阳性者治疗完全缓解（CR）率分别为86．8％与64．1％（P〈0．05）;MDR1表达阴性与阳性者CR率分别为83．3％与56．5％（P〈0．05）。MAGE-A3和MDR1表达均为阳性者与均为阴性CR率分别为55．6％与87．9％（P〈0．05）。结论非M3型AL MAGE-A3表达阳性者MDRI有较高的表达率,MAGE-A3及MDR1表达均为阴性者治疗缓解率高。提示联合检测MAGE,A3和MDR1对判断初治非M3型AL的疗效有良好的预测作用,可作为临床判断疗效的一项有意义的指标。     

紫杉醇诱导胰腺癌细胞凋亡Survivin表达的变化及意义

目的研究紫杉醇（PA）体外化疗对胰腺癌细胞凋亡抑制蛋白Survivin基因表达的影响。方法培养人胰腺癌细胞株SW1990，加入低浓度的PA，用流式细胞仪分别检测加药前和加药后24、48h的细胞凋亡率，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹技术（Western blot）检测Survivin mRNA和蛋白的表达。结果SW1990细胞给予低浓度的PA后，加药前和加药后24、48h的细胞凋亡率分别为（2．59±0．35）％、（14．75±1．29）％、（22．65±2．80）％；其Survivin mRNA的表达则分别比加药前提高了1．1倍和2．9倍；Survivin蛋白的表达分别增加了1．3倍和3．6倍。结论应用PA化疗可促使胰腺癌细胞内Survivin表达的增加，抵抗化疗诱导的细胞凋亡。     

大肠癌中survivin表达及相关性

目的研究凋亡抑制蛋白家族的新成员survivin表达变化及其与大肠癌生物学行为、bcl-2、ki-67标记指数的关系。方法应用免疫组化链霉菌抗生物素-过氧化物酶（SP）法分别检测大肠癌及其癌瘤手术切除的切缘组织survivin蛋白、bcl-2蛋白的单一及联合表达情况及其与ki-67标记指数的关系。结果（1）Survivin蛋白在大肠癌组织中的表达阳性率为63．6％，在切缘组织中的表达阳性率为0％，肠癌组织与切缘组织的表达阳性率相比差异有统计学意义（P〈0．01）。Survivin蛋白表达与患者年龄、肿瘤分化程度、肿瘤大小、部位、Dukes分期、淋巴转移无显著相关性（P〉0．05），与患者性别呈显著相关（P〈0．05）；（2）Bcl-2表达阳性与survivin蛋白表达阳性无显著相关性（P〉0．05）；（3）Survivin蛋白阳性表达组ki-67标记指数显著高于阴性组（P〈0．01）。结论Survivin基因通过调控细胞增生，参与大肠癌的发生和发展，其蛋白过表达是大肠癌发生中的一种独立事件。     

PCNAmRNA和Survivin mRNA在不同大肠肿瘤性病变腺管开口组织中表达关系的研究

目的探讨腺瘤癌变过程中其表面腺管开口变化与PCNA、survivin mRNA在各型腺管开口中表达关系的研究。方法标本分别以腺管开口类型及病理组织学分为6组。采用RT—PCR法检测组织中PCNA mRNA及survivin mRNA的表达。结果PCNAmRNA在大肠黏膜腺管开口Ⅰ型、Ⅱ型、ⅢL型、Ⅳ型、Ⅴ1型、ⅤN型6组中阳性表达率分别为0％（0／13）、12．5％（1／8）、38．9％（7／18）、66．7％（12／18）、75．0％（3／4）、100．0％（9／9）,survivin mRNA为0％（0／13）、12．5％（1／8）、22．2％（4／18）、44．4％（8／18）、50．0％（2／4）、77．8％（7／9）。PCNA mRNA阳性表达率在正常大肠黏膜、炎性息肉、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、腺瘤伴不典型增生及癌6组中分别为0％（0／10）、16．7％（2／12）、35．3％（6／17）、63．6％（7／11）、75．0％（6／8）、91．7％（11／12）,survivin mRNA为0％（0／10）、8．3％（1／12）、23．5％（4／17）、45．5％（5／11）、50．0％（4／8）、和66．7％（8／12）,均呈逐渐升高趋势。结论PCNA mRNA及survivin mRNA在腺管开口类型分组其表达强度变化,能较客观反映肿瘤细胞的增殖活性及凋亡状态,并且与病理类型分组得出相同的结果,能即刻将形态学与分子生物学联系起来。     

Survivin基因的表达及其与鼻肿瘤细胞增殖的关系

目的探讨Survivin基因的表达及其与鼻肿瘤细胞增殖的关系,以期为研究鼻癌的临床诊疗提供依据。方法鼻正常组织5例,鼻腺瘤组织10例,鼻癌组织15例分别进行Survivin基因的RT—PCR分析。同时选择鼻癌组织进行TUNEL分析。结果SurvivinmRNA在鼻正常组、鼻腺瘤组、鼻癌组阳性表达率分别为0．0％、50．0％和93．3％。随分化程度的降低阳性表达率呈上升趋势（P〈0．05）。同时鼻癌纽的rnRNA水平最高,其上升趋势与SurvivinmRNA表达水平的趋势一致的。Survivin蛋白高表达的鼻癌组织中凋亡指数为（1．61±0．36）,明显低于Survivin蛋白低表达的鼻癌组织中的凋亡指数（3．37±0．36）,差异有显著性（P〈0．05）。结论Survivin在鼻肿瘤的形成和恶性演进过程中,扮演着重要角色,鼻肿瘤组织中Survivin蛋白的表达很高,与凋亡指数存在负相关性．可作为鼻癌基因诊断的一个重要的标记物和鼻癌生物治疗的分子靶点。     

Survivin和bcl-2在膀胱移行细胞癌中表达及其相关性研究

目的探讨凋亡抑制基因Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及与bcl-2蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织链酶卵白素-过氧化物酶复合物（SP）方法，检测40例膀胱移行细胞癌组织标本中Survivin、bcl-2蛋白的表达，并与15例正常膀胱粘膜移行细胞进行对照研究。结果40例膀胱移行细胞癌中，Survivin蛋白的阳性表达率为58．14％，而正常膀胱粘膜组织中未见Survivin蛋白阳性表达（P〈0．01）。Survivin蛋白表达与膀胱移行细胞癌的WHO肿瘤分级有相关性。根据Spearman相关分析表明Survivin与bcl-2蛋白表达正相关（P〈0．01）。结论Survivin基因可通过抑制膀胱移行细胞癌细胞凋亡，对膀胱移行细胞癌的发生发展起重要作用。Survivin的表达与膀胱癌组织中bcl-2蛋白的异常表达密切相关。     

Survivin在冬凌草甲素介导下对人前列腺癌细胞PC-3凋亡的作用

目的观察冬凌草甲素对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株-PC-3细胞的诱导凋亡作用,探讨Survivin在此过程中的作用。方法用不同浓度的冬凌草甲素干预PC-3细胞,MIT试验分析观察其对PC-3细胞活力的影响;通过用流式细胞仪分析PC．3早期凋亡细胞的百分率;用Western印迹检法、实时荧光定量PCR方法检测PC-3细胞Survivin的蛋白和mRNA表达的变化。结果（1）细胞生长抑制力呈一定的时间、剂量依赖性,冬凌草甲素浓度为2．5、5、10、20、40μmol／L时,干预48h后相对应的平均细胞生长抑制率依次为9．2％、25．3％、39．3％、77．2％、92．5％,药物抑制PC-3细胞活力的IC50约为10．29μmol／L;流式细胞仪检测经不同浓度的冬凌草甲素（0,10,20,40μmol／L）干预48h后,PC-3细胞的早期凋亡率分别为4．8％,15．4％,19．5％和27．4％（P〈0．05）。（2）冬凌草甲素以浓度依赖性方式抑制PC-3细胞的Survivin的蛋白和mRNA表达。结论冬凌草甲素能以浓度依赖性方式诱导PC-3细胞凋亡。冬凌草甲素通过影响Survivin的表达来诱导PC-3细胞凋亡。     

Survivin和bcl-2在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨Survivin和bcl-2在结肠癌中的表达及临床意义。方法免疫组化方法检测20例正常结肠黏膜组织及92例结肠癌组织Survivin,bcl-2蛋白的表达。结果结肠癌与正常结肠黏膜组织中Survivin阳性表达率分别为68．5％和0％,二者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;Survivin的高表达与结肠癌组织学分级、Dukeg分期相关（P〈0．01）,与淋巴结转移密切相关（P〈0．01）。结肠癌与正常结肠黏膜中bcl-2阳性表达率分别为59．8％和0％,二者差异有统计学意义（P〈0．01）;bcl一2蛋白的高表达与结肠癌Dukeg分期及肠系膜淋巴结转移相关（P〈0．05）。经Spearman等级相关分析,Survivin与Bcl-2之间呈正相关（r=0．333,P〈0．05）。结论Survivin和bel-2的表达与结肠癌发生、临床进展及预后密切相关,二者在结肠癌中起相互协同作用。     

p63蛋白和Survivin蛋白在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义

目的探讨p63蛋白和Survivin蛋白在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测p63蛋白和Survivin蛋白在60例NHL患者和10例反应性增生淋巴结石蜡标本中的表达。结果p63和Survivin在NHL中的阳性率分别为33．3％、71．7％。二者表达在NHL和反应性增生淋巴结之间及惰性淋巴瘤和侵袭性淋巴瘤之间差异均有统计学意义（P〈0．05）。p63、Survivin阳性组CR率和生存期与阴性组之间差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论p63和Survivin在NHL中异常表达，二者表达是临床治疗和预后的不利因素。     

组蛋白去乙酰化酶2基因在苯并（a）芘致神经细胞凋亡中的量效和时效表达

[目的]通过体外培养细胞途径研究组蛋白去乙酰化酶2（HDAC2）基因在苯并（a）芘[B（a）P]所致神经细胞凋亡中的量效和时效表达。[方法]大鼠原代培养的神经元细胞分为两批：第一批分4个组,以B（a）P同时加入s9对细胞染毒,分别为二甲基亚砜（DMSO）组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,使其终浓度为0、10、20、40gmol／L,继续培养48h;第二批分5个组,以20gmol／LB（a）P染毒,分别于染毒0、6、12、24、48h处理细胞。用流式细胞术检测神经细胞的凋亡率,实时荧光定量PCR法检测caspase-3,HDAC2基因的量效和时效表达情况。[结果]①流式细胞术结果显示,与DMSO组相比,中、高剂量组神经细胞的凋亡率明显增加（P〈O．05）;与低剂量组相比,高剂量组凋亡率增加（P〈0．05）。与0h组相比,染毒24、48h组神经细胞的凋亡率明显增加（P〈0．05）。②与DMSO组相比,高剂量组caspase-3、HDAC2mRNA的表达量明显增加（P〈0．01）;与低剂量组相比,高剂量组caspase-3mRNA表达量明显增加（P〈0．05）。与0h组相比,染毒48h组caspase-3、HDAC2mRNA表达量明显升高（P〈0．01,P〈0．05）。[结论]B（a）P可引起神经细胞凋亡,HDAC2基因表达上升,该基因可能在B（a）P所导致的神经细胞凋亡中起重要作用。     

银杏叶提取物对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后Survivin表达的影响

目的观察银杏叶提取物（extract of ginkgo biloba,EGB）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic—ischemic braindamage,HIBD）后缺血侧脑组织Survivin表达的影响,探讨其神经保护机制。方法健康7日龄Sprague—Dawley新生大鼠72只随机分为假手术组（n=24）、对照组（n=24）及EGB治疗组（n=24）。采用经典的PAce法制成HIBD模型,应用TUNEL法检测细胞凋亡情况。并采用免疫组织化学二步法检测Survivin表达的变化。结果与假手术组相比,对照组伤后1、3、7、14d的细胞凋亡数及Survivin表达水平均明显升高（P〈0．01）;与对照组相比,EGB治疗组伤后7、14d的细胞凋亡数明显降低（P〈0．01）,且在伤后1、3d的Survivin表达明显升高（P〈0．05）。结论EGB可促进抗凋亡因子Survivin的表达而减少HIBD后的细胞凋亡,发挥神经保护作用。     

Survivin基因在胃癌中表达的研究

目的 研究凋亡抑制基因survivin在胃癌组织中的表达。方法 运用S-P免疫组化技术，检测survivln基因在93例胃癌组织、20例正常胃黏膜组织以及胃癌细胞株MGC-803中的表达。结果 Survivin基因在20例正常胃黏膜组织中不表达，而93例胃癌组织中有66例表达阳性，占71％，两者差异有统计学意义（P〈0．01），胃癌细胞株MGC-803中survivin呈高表达。Survivin基因表达阳性率与胃癌组织的分化程度、淋巴结转移、TNM分期相关，而与浸润程度不相关。结论 Survivin基因的特异性高表达在胃癌的发生发展中起重要作用，其过度表达可能提示胃癌预后不良。     

LOX-1介导苯扎贝特对内皮细胞凋亡的影响

目的研究苯扎贝特对氧化型低密度脂蛋白（ox—LDL）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡的影响及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1（LOX-1）在其中的作用。方法用流式细胞仪观察HUVECs凋亡，用RT-PCR技术观察LOX-1基因表达的变化。结果ox—LDL组与正常组比较凋亡明显增加（P〈0．05），LOX-1 mRNA表达明显增加（P〈0．05），苯扎贝特干预后凋亡减少，LOX-1 mRNA的表达降低（P〈0．05），呈浓度依赖关系。用LOX-1阻滞剂多聚肌苷酸预先干预2h后与苯扎贝特组比较细胞凋亡及LOX-1mRNA表达进一步减少（P〈0．05）。结论苯扎贝特可改善ox-LDL对内皮细胞的影响，下调LOX-1表达，减少内皮细胞凋亡，部分机制可能通过LOX-1介导。     

胆囊癌组织中p-STAT3、survivin的表达及意义

目的探讨胆囊癌中p-STAT3和survivin蛋白表达及其在胆囊癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测45例胆囊癌组织、20例慢性胆囊炎组织中p-STAT3及survivin蛋白的表达,并分析其与临床病理特征、预后的关系。结果本组45例胆囊癌组织中p-STAT3和survivin蛋白阳性率分别为55．6％（25／45）、64．4％（29／45）,明显高于慢性胆囊炎组织5．0％（1／20）、10％（2／20）（P〈0．01）。在胆囊癌组织中p-STAT3的表达与survivin表达呈正相关（r=0．830,P〈0．01）。p-STAT3和survivin蛋白的表达与胆囊癌病理组织分级、Nevin分期、有无淋巴结转移和3年生存率有关（P〈0．01,P〈0．05）。结论p-STAT3、survivin参与了胆囊癌的发生、发展,可能作为判断胆囊癌转移、预后的临床指标。     

宫颈癌组织survivin表达的意义

目的检测宫颈癌组织中凋亡抑制蛋白生存素（survivin）的表达,分析survivin与宫颈癌临床特征的关系。方法采用免疫组织化学技术检测46例宫颈癌组织和癌旁宫颈组织中survivin的表达。结果46例宫颈癌组织中survivin基因表达28例,癌旁宫颈组织中无survivin基因的表达。Survivin的表达与结肠癌的发病年龄、性别、分化程度无关（P〉0．05）,而与宫颈癌的转移有关联性（P〈0．05）。结论在结肠癌中survivin的表达能促进宫颈癌的发生发展和转移。     

子宫内膜异位症患者凋亡相关基因的研究

目的通过对临床子宫内膜异位症（endometriosis，EMS）患者异位内膜及在位内膜survivin mRNA，bcl-2 mRNA及COX-2 mRNA表达的测定，探讨Survivin，Bcl-2及Cox-2在子宫内膜异位症发病及发展中的分子生物学机制及其三者的相关性。方法选取2006年1月至2006年11月，在新疆医科大学第一附属医院妇科接受开腹手术或腹腔镜手术治疗的子宫内膜异位症患者32例为研究对象（EMS组），并在术中取得异位内膜组织、在位内膜组织，另取正常妇女（除外激素依赖性疾病或激素治疗患者）正常子宫内膜32例（对照组）（分组征得患者本人的知情同意），应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法，测定survivin，bcl-2及COX-2的mRNA表达水平。结果与对照组相比，EMS组患者异位内膜的survivin mRNA，bcl-2 mRNA的表达水平上调，COX-2 mRNA的表达水平也明显上调，且总体survivin，bcl-2及COX-2的mRNA表达与子宫内膜异位症呈正相关，三者有明显相关性。而EMS组在位内膜与之相比，Survivin上调，Bcl-2，Cox-2变化差异无显著意义。结论子宫内膜异位症患者Survivin，Bcl-2及Cox-2上调，可能是子宫内膜异位症发生发展的分子生物学机制之一，与异位内膜的发生和种植有关，且三类基因在疾病的发展中关系密切。     

缺氧诱导因子-1对缺氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的调控作用

[目的]探讨细胞凋亡在缺氧肺损伤的作用及缺氧诱导因子-lα（hypoxia inducible factor-lα, HIF-lα）对细胞凋亡的调控作用。[方法]体外培养大鼠肺泡上皮细胞加入氯化钴（cobalt chloride, COC12 ）制作细胞缺氧模型，将小分子干扰缺氧诱导因子-l（ HIF-lαsmall interference RNA, HIF-lαsiRNA）有效的转染至细胞内，检测常氧、缺氧4、24h、小分子干扰后缺氧4、24h后HIF—lαmRNA的表达水平变化，同时应用荧光显微镜以及流式细胞术检测非转染以及转染组不同缺氧时间细胞凋亡率的变化。[结果]常氧下HIF-lαmRNA表达水平较低，随缺氧时间增加HIF-lαmRNA的表达水平明显升高（P〈0．05）；HIF-lαsiRNA可有效沉默HIF-lα，下调率为56％、57％（P〈0．01）。细胞凋亡率随着缺氧时间延长而增加（P〈0．05），48h细胞开始出现坏死现象；通过HIF—lα预处理细胞后，可降低缺氧诱导的细胞凋亡的发生率（P〈0．05）。[结论]缺氧引起肺泡上皮细胞的凋亡，随缺氧时间增加凋亡增加，HIF-lα在缺氧诱导细胞凋亡中起着重要的作用，HIF-lαsiRNA可以减少肺泡上皮细胞凋亡的发生。