加减小金丹对胃癌术后患者的治疗作用

加减小金丹对胃癌术后患者的治疗作用上海市消化疾病研究所黄大慰，李德华上海第二医科大学中医教研组周阿高，郑梅芳本文采用随机化对照研究方法，报道了加减小金丹对胃癌术后患者一系列临床、血凝，纤溶，免疫指标观察结果，并对本组患者作长期随访。初步表明：加减小金...     

小金丹对肝癌细胞的抑制作用

小金丹出自清代·王洪绪的<外科证治全生集>,由麝香、白胶香、木鳖子、草乌、乳香、没药、当归、地龙、五灵脂、墨香等组成,具有解毒消肿、活血止痛的功效,传统上多用于瘰疬、阴疮的治疗.目前临床上广泛用于肿瘤的治疗,如中晚期胃癌、肺癌、乳腺癌、肝癌、慢性淋巴性白血病和癌性疼痛的镇痛等.目前,小金丹治疗肿瘤的研究以临床疗效观察为主,少见实验研究报道.为此,我们特进行小金丹对肝癌细胞抑制作用的实验观察.     

小金丹含药血清对肝癌细胞生长的影响

目的 观察中药复方小金丹的体外抗肿瘤活性. 方法 SD大鼠随机分组灌胃给药,采血制备含药血清,MTT法检测各组抑瘤率,应用SPSS统计软件分析各组数据的差异. 结果 小金丹可抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长,小、中、大剂量组和空白对照组相比差异非常显著(P<0.01),抑瘤率分别为小剂量组26.11%,中剂量组41.40%,大剂量组29.94%. 结论 小金丹体外时人肝癌细胞SMMC-7721具有显著的抑瘤活性.     

小金丹对5-FU治疗肝癌的减毒增效作用

观察小金丹对5-FU的减毒增效作用,采用白细胞计数方法计数模型小鼠的WBC、Hb、PLC及骨髓有核细胞,结果发现小金丹对5-FU具有减毒增效作用,5-FU加小金丹组与5-FU组相比,肿瘤抑制率、WBC计数、Hb含量、PLC计数和骨髓有核细胞计数差异非常显著(P＜0.01).     

小金丹对荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性的影响

小金丹出自清·王洪绪《外科证治全生集》,由麝香、白胶香、木鳖子、草乌、乳香、没药、当归、地龙、五灵脂、墨香等组成,具有解毒消肿、活血止痛的功效,传统上多用于瘰疬、阴疮等的治疗。目前临床上除广泛用于治疗胸腹腔炎性包块和脓肿、肿瘤型肺门淋巴结结核、顽固性坐骨神经痛、甲状腺瘤、急性颌下腺炎、瘀血型慢性肝炎、带状疱疹、前列腺肥大排尿困难、聚合型痤疮等多种疾病以外,也广泛用于肿瘤的治疗。1材料方法1.1实验动物:ICR清洁级小鼠(20±2)g,购自福建医科大学动物中心,合格证号:SGXK(闽)2004-0002。动物饲养在福建省医学科学…     

Axin与细胞信号转导的研究进展

0 引言 Axin(axis inhibitor)基因是1997年对天然小鼠突变系基因克隆分析中发现的编码AXIN蛋白质的基因,原名FUSED,为了避免与不相干果蝇FUSED基因 混淆,并推测FUSED基因在动物胚胎体轴分化中起重要作用,将其重新命名为AXIN,即轴抑制[1,2].     

基因表达芯片技术在肝癌研究中的应用

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC;简称肝癌)是世界上最常见、恶性程度最高的肿瘤之一.近年发展的基因表达分析平台--基因表达芯片技术能克服传统方法的缺点,已成为肝癌发生发展中的基因表达研究的强有力工具,其在肝癌发生的分子机制研究和临床诊断治疗中都具有非常重要的应用价值.     

三氧化二砷对人肝癌细胞周期相关基因表达的影响

目的研究三氧化二砷(As2O3)对人肝癌SMMC-7721细胞周期的阻滞作用及相关基因的表达.探讨As2O3抗肝癌作用的机理.方法体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用2μmol/L As2O3处理72h,流式细胞仪检测细胞周期变化;通过免疫细胞化学检测cyclin D1、PCNA基因编码蛋白的表达.结果 As2O3使SMMC-7721细胞周期阻滞在G0/G1期.与对照组比较,经As2O3作用的人肝癌细胞cyclin D1、PCNA基因编码蛋白的表达减少.结论 As2O3 通过干扰细胞周期的进程,下调cyclinD1、PCNA基因编码蛋白的表达,抑制肿瘤的增殖和转移,从而具有抗肿瘤的作用.     

加味丹栀逍遥散联合小金丸治疗结节性甲状腺肿的临床疗效观察

【目的】观察加味丹栀逍遥散联合小金丸治疗结节性甲状腺肿的临床疗效。【方法】采用区组随机化法将90例结节性甲状腺肿患者分配到对照1组、对照2组和观察组,每组各30例。对照1组口服加味丹栀逍遥散,对照2组口服小金丸,观察组口服加味丹栀逍遥散和小金丸,以1个月为疗程,共观察3个疗程。观察3组临床疗效及治疗前后甲状腺肿症状评分、甲状腺肿物最大直径的变化情况。【结果】(1)治疗后,观察组总有效率为90.00%,优于对照1组的73.33%和对照2组的66.67%,差异均有统计学意义(P0.05)。(2)治疗后,3组甲状腺肿症状评分均较治疗前显著改善(P0.05),甲状腺最大肿物的最大直径均较治疗前显著缩小(P0.05),且观察组的改善作用均优于对照1组和对照2组,差异均有统计学意义(P0.05)。(3)治疗过程中,3组均无不良反应发生。【结论】加味丹栀逍遥散联合小金丸治疗结节性甲状腺肿,能明显缩小结节性甲状腺肿及改善甲状腺肿症状。     

人原发性肝癌中p16基因表达及CpG岛甲基化状态的研究

目的：进一步探讨人原发性肝癌中p16基因mRNA转录水平变化与其基因启动子区CpG岛甲基化的关系，及其在肝癌发生中的意义。方法：采用狭缝印迹杂交检测20例人原发性肝癌及相应的癌旁、远癌组织及2例正常人肝组织中p16基因mRNA表达水平，以甲基化特异性PCR分析各组织中p16基因启动子区CpG岛的甲基化状况，并进行统计分析。结果：20例人原发性肝癌中14例（70％）p16 mRNA水平比远癌组织显著降低；13例（65％）显示p16基因启动子区CpG岛甲基化，其中84．6％（11例）伴p16 mRNA转录水平降低。结论：人原发性肝癌中存在高频率的p16基因表达失活，其主要机制可能是启动子区CpG岛甲基化抑制了基因的转录，在人原发性肝癌的发生发展中有重要作用。其临床诊断和治疗意义有待进一步深入研究。     

重组人内皮抑素对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的影响

目的 初步研究Wnt通路在重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,ES)诱导人肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡过程中的作用及可能机制.方法 分别以50、100、200、400 μg/ml ES体外处理人肝癌细胞株SMMC-7721,利用MTT比色法检测不同浓度、时间ES作用下的细胞增殖状态;利用流式细胞仪检...     

肝癌SMMC-7721细胞中PKB对β-连环蛋白的调控

目的　探讨在肝癌SMMC - 772 1细胞中蛋白激酶B(PKB)对 β 连环蛋白 (β catenin)的调控作用。 方法用WesternBlot和RT PCR等研究在肝癌SMMC - 772 1细胞中激活或抑制PKB后 ,β catenin基因及蛋白水平的变化。结果　以H2 O2 活化PKB ,则SMMC - 772 1细胞胞质内游离的 β catenin水平明显升高 ,而与E cadherin结合的 β catenin水平没有变化 ,β catenin的mRNA表达也未见明显改变 ;用Wortmannin抑制PKB的活性 ,可使胞质内 β catenin的含量下降。 结论　肝癌SMMC - 772 1细胞中PKB可以调控胞质中游离的 β catenin ,这为深入研究 β catenin在肝癌发生中的作用机制提供了重要线索     

丹参多酚酸盐对裸鼠HCC 系人肝癌细胞株SMMC-7721 移植瘤的影响

目的：观察丹参多酚酸盐对人肝癌细胞株SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤的影响,探讨其对肝癌肿瘤的作用 机制。方法：建立裸鼠肝癌肿瘤模型,将36只裸鼠(雌雄各半)随机分成6组,每组6只,分别为模型组、阴性对照组 (生理盐水组)、阳性对照组(顺铂组)、3种不同质量浓度(10,20,50 mg/kg)的丹参多酚酸盐给药组。在裸鼠长出肉眼 可见瘤体后注射丹参多酚酸盐治疗16 d收集皮下肿瘤标本。肿瘤标本进行HE检测观察组织形态变化和免疫组织化学 检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和肿瘤增殖抗原Ki67的表达情况,以验证是否抑制肿瘤 细胞生长、增殖。结果：各用药组的肿瘤生长受到抑制,肿瘤组织细胞形态较之模型组和阴性对照组呈现皱缩、破 碎、 不规则排列;且随着给药剂量的增大形态学改变更明显。丹参多酚酸盐给药组和顺铂组的VEGF和Ki67表达量均 较模型组和阴性对照组低(P<0.05)。结论：丹参多酚酸盐能抑制裸鼠HCC系人肝癌细胞株SMMC-7721移植瘤的生长, 其机制可能与下调Ki67和VEGF有关。     

LETM1在肝癌中的表达及其对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1(leucine bnzipper/EF-hand-containing transmembrane proteinl,LETMl)在肝癌组织中的表达水平及通过RNAi技术靶向LETM1基因对肝癌细胞株SMMC-7721的增殖及凋亡的影响.方法 采用免疫组织化学方法、Western blot检测重庆医科大学附属第一医院肝胆外科2012年9月至2013年4月共60例肝癌组织及其癌旁肝组织中LETM1蛋白表达情况.Western blot检测人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2及人正常肝细胞株LO2中的LETM1蛋白表达情况.将LETM1 siRNA经Lipofectamine 2000TM脂质体转染SMMC-7721(实验组为si-LETM1、对照组为si-NC),实时荧光定量PCR及Western blot分别检测LETM1转染后肝癌SMMC-7721细胞株中LETM1 mRNA及蛋白的表达.CKK-8及流式细胞术检测LETM1低表达对肝癌细胞增殖及细胞凋亡的影响.结果 ①免疫组织化学结果显示,LETM1蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为73.33％(44/60),明显高于癌旁组织中的表达率28.33％(17/60,P＜0.01);Western blot检测结果显示,LETM1蛋白在肝癌组织中的表达相对量(2.335±0.221)较癌旁组织(1.386±0.081)明显增高(P＜0.01).②LETM1蛋白表达与肝癌肿瘤直径及门静脉侵犯有关(P＜0.05),而与肝癌患者性别、年龄、甲胎蛋白、HBsAg、Edmondson分级及TNM分期无关(P＞0.05).③LETM1蛋白在SMMC-7721及HepG2中的表达相对量[(分别为(1.447±0.149)、(1.190 ±0.113)]均明显高于LO2[(0.918 ±0.027),P＜0.05].④si-LETM1组与si-NC组和空白组比较,si-LETM1组细胞的增殖受到抑制(P＜0.01),尤以72 h及96 h最为显著;si-LETM1早期细胞凋亡数(14.6±2.3)％与si-NC早期细胞的凋亡数(6.3±0.7)％比较,差异有统计学意义(P=0.04).结论 LETM1蛋白在肝癌组织的表达显著高于癌旁组织;基因沉默LETM1后的肝癌细胞其增殖能力明显减弱,凋亡能力明显增强.     

人DNA MTase反义基因转染对肝癌细胞DNA MTase基因mRNA表达的影响

目的：观察人DNA MTase反义基因转染对肝癌细胞系SMMC－7721内源性DNA MTase基因mRNA的表达的影响。方法：将将建的包含正、反义DNA MTase基因片段的真核表达载体用脂质体法将其转染入肝癌细胞系SMMC－7721；采用RT－PCR法观察DNA MTase基因mRNA表达变化。结果：PCR法扩增外源性NeoR基因证实证用脂质体法成功将重组载体转染入细胞：RT－PCR法检测DNA MTase基因mRNA表达，显示转染反义DNA MTase基因片段的SMMC－7721细胞中DNA MTase基因mRNA表达下调。结论：人DNA MTase基因反义基因转染是一种有效，可靠的抑制肝癌细胞系SMMC－7721DNA MTase基因表达的方法。它为更多了解DNA MTase在肝癌发生的作用提供了帮助。     

Shc1在肝癌组织中的表达及对肝癌SMMC-7721细胞增殖迁移能力的影响

目的 研究Shc1在肝癌组织中的表达情况及其对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移能力的影响。 方法 采用实时定量RT-PCR(Real-time polymerase chain reaction)、蛋白质印迹法（Western Blot）、免疫组织化学法检测33例肝癌及33例对应的癌旁组织中Shc1的表达情况,并分析Shc1蛋白表达量与临床特征间的关系;培养肝癌SMMC-7721细胞,siRNA干扰Shc1的表达,采用MTT法检测细胞增殖活力,细胞划痕试验检测迁移能力。结果 Shc1在33对样本中,肝癌组织中的表达高于癌旁组织（P＜0.05）;Shc1表达于肝细胞癌的胞浆上;无肝硬化的患者Shc1阳性率（100%）高于伴肝硬化者（54.2%）;术前Child-Pugh分级A级的患者Shc1阳性率（75.9%）高于B级或C级的患者（0%）;术前检测血中AFP阳性患者Shc1阳性率（79.2%）高于AFP阴性患者（33.3%）;术后病理EdmondsonⅢ、Ⅳ级患者Shc1阳性率（79.2%）高于Ⅰ、Ⅱ级的患者（42.9%）;差异均有统计学意义（P＜0.05）。干扰Shc1表达后,随时间延长, SMMC-7721细胞增殖、迁移明显受到抑制（P＜0.05）。 结论 Shc1在肝癌组织中高表达,且Shc1的阳性率与肝硬化、Child-Pugh分级、术前AFP、病理Edmondson分级相关;干扰Shc1的表达可抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移能力。     

肝细胞癌组织芯片环氧合酶-2表达的半定量图像分析

目的 分析环氧合酶-2(COX-2)在肝细胞癌(HCC)中的表达及意义. 方法 应用改良的手工制备组织芯片方法制备含150例肝细胞癌、92例癌旁肝硬化、45例癌旁慢性肝炎以及37例肝内转移灶和13例正常肝组织的组织芯片,结合免疫组织化学染色和图像分析技术检测COX-2蛋白的相对表达量. 结果 COX-2蛋白在HCC表达显著低于癌旁肝硬化、癌旁慢性肝炎(P<0.01),但高于正常肝组织(P<0.05),差别具有统计学意义.在HCC组织中,低分化HCC的COX-2表达量显著低于高分化的HCC,差别有统计学意义(P<0.01).COX-2蛋白的表达与性别、肿瘤大小、组织学类型、包膜侵犯及转移均无关(P>0.05). 结论 COX-2在HCC的发生中发挥重要作用,并与HCC的分化程度密切相关,但与HCC进展及侵袭转移关系不大.     

索拉菲尼与BrMC合用对SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞凋亡的影响

目的 :研究索拉菲尼(SO)、8-溴-7-甲氧基白杨素(Br MC)及两者合用对SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞凋亡的影响。方法 :不同浓度Br MC、SO及两者合用处理体外培养的SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞。流式细胞术测定细胞凋亡。Western blot分析NF-κB(p65)蛋白表达。结果 :SO(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L)与Br MC联合处理SMMC-7721细胞系球形成细胞24h,相比于SO单独用药和Br MC单独用药对照组,凋亡率显著增加,同时,NF-κB(p65)蛋白的表达明显下调。结论 :Br MC增强SO诱导SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞凋亡作用,其机制涉及下调NF-κB(p65)蛋白表达。     

白藜芦醇抑制人晶状体上皮细胞增殖的信号转导机制

目的 探讨白藜芦醇(Res)对重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导的人晶状体上皮细胞(HLEC)增殖的抑制作用,并从信号转导方面研究其抑制HLEC增殖的作用机制,为寻求防治后发性白内障的有效药物提供实验依据. 方法 采用rhbFGF诱导体外培养的HLEC增殖,流式细胞术(FCM)检测一定浓度的Res对增殖状态的HLEC增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的抑制作用:FCM检测不同的细胞内信号转导阻断剂(钙调素抑制剂W7、蛋白激酶C抑制剂H7)对其抑制作用的影响. 结果 Res对HLEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用(P<0.01);W7、H7均明显上调了HLEC内PcNA蛋白表达(P<0.01). 结论 Res有抑制HLEC增殖的作用,其机制可能是通过CaM、PKC等来介导的.     

三氧化二砷对人肝癌细胞株SMMC-7721中p27~(kip1)及其相关分子Skp2表达的影响

目的 通过检测三氧化二砷(As2O3)对肝癌SMMC-7721细胞周期素依赖性激酶抑制剂(CDKI)p27kip1及S期激酶相关蛋白2(Skp2)的影响,探讨其抗癌作用机制.方法 体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用2μmol/L As2O3处理72h,流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡率,应用Western blot方法检测p27kip1、Skp2及CDK2基因编码蛋白的表达.结果 与对照组比较,As2O3使SMMC-7721细胞周期阻滞在G2/M期.经As2O3作用的人肝癌细胞p27kip1基因编码蛋白表达增加,而p27kip1相关分子Skp2及CDK2的表达减少.结论 As2O3可干扰细胞周期的进程,抑制SMMC-7721细胞的增殖.其作用机制与上调p27kip1蛋白及下调Skp2、CDK2有关.