NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白

 目的：寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列（leucine-rich repeat, LRR）结构域相互作用的蛋白质分子。方法：克隆NALP3富含亮氨酸重复序列（NALP3-LRR）结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母双杂交载体,对人胚肺cDNA文库进行杂交筛选,经酵母回交实验验证蛋白质在酵母细胞内的相互作用并对阳性克隆的DNA进行序列测定和生物信息学分析。将筛选到的阳性克隆进一步用免疫共沉淀实验验证NALP3-LRR结构域与阳性蛋白之间相互作用的可靠性。结果：成功克隆NALP3-LRR结构域的DNA序列并经测序检验正确。用酵母双杂交技术对人胚肺cDNA文库进行酵母杂交筛选共获得4个阳性克隆。免疫共沉淀实验证实能与NALP3-LRR结构域发生相互作用的阳性蛋白是人细胞周期蛋白H和禽传染性支气管炎病毒株Cal99的ORF1a。结论：NALP3的富含亮氨酸重复序列结构域能与人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白发生相互作用。     

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1基因特异性RNA干扰表达载体的构建、鉴定和稳定株筛选

背景：有研究表明富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains 1,LRIG1)基因在神经胶质瘤细胞中呈低表达,LRIG1基因过表达后对神经胶质瘤细胞的 LRIG1 mRNA和蛋白表达均明显增强和抑制其生物学行为,但却很少有研究从阻断LRIG1基因的表达的角度进行论证。 目的：构建针对LRIG1基因的特异性RNA干扰质粒,稳定转染人脑胶质瘤GL15细胞系,观察其对目的基因LRIG1表达的影响。 方法：根据GenBank提供的LRIG1基因序列设计2条RNA干扰序列,命名为LRIG1-shRNA1和LRIG1-shRNA2,并设计1条非特异性序列作为阴性对照,命名为pGenesil2-negative shRNA。合成各自的寡核苷酸链,退火后与pGenesil2质粒载体连接,转化扩增后测定序列。用不同浓度的G418作用于GL15细胞确定G418对GL15细胞的筛选浓度。将3种重组表达载体转染GL15细胞,G418筛选后挑单克隆并扩增获得稳定株。Western blot检测LRIG1蛋白的表达。 结果与结论：构建的重组pGenesil2-LRIG1- shRNA质粒经限制性酶切及DNA测序分析证明其序列插入正确。转染pGenesil2- LRIG1-shRNA1(LRIG11)细胞和pGenesil2- LRIG1-shRNA2(LRIG12)细胞LRIG1蛋白表达水平较阴性对照组pGenesil2-negative shRNA分别下降47.9%(P < 0.01)和32.8% (P > 0.05)。结果证实,实验成功构建了针对LRIG1基因的特异性shRNA表达载体pGenesil2-LRIG1-shRNA1,其转染GL15细胞后可抑制LRIG1的表达。     

独立生长因子1作用机制与相关疾病

独立生长因子1(growth factor independence 1,GFI1)是锌指蛋白家族中重要的转录抑制子,其主要通过与染色质修饰分子结合从而抑制靶基因转录,并与造血细胞发生、免疫细胞分化和恶性肿瘤进展密切相关.近年来研究表明,GFI1分子在多种疾病中以不同机制发挥功能.因此,对GFI1分子的研究将有助于理解相关疾病的发病机制,并希望对预测恶性肿瘤的靶标有所提示.     

转录因子YY1在妇科肿瘤和妊娠疾病中的作用

转录因子Ying-Yang1(YY1)是正常细胞和癌组织中普遍表达的多功能转录调控蛋白,其参与调控多种细胞正常生理过程,如胚胎发育、细胞骨架蛋白结构和功能、染色体失活和修复、肿瘤发生和浸润转移等过程,在生物体内发挥着重要作用.已有大量证明YY1在多种肿瘤中有异常表达,并通过多种途径调控肿瘤的增殖过程,如宫颈癌、乳腺癌、卵巢癌等,在某些癌症类型中YY1的高表达可提高患者生存预后.并且,近年来YY1在妊娠中的作用也备受关注,以下将重点就YY1的作用机制和在妇科肿瘤方面和妊娠疾病中的研究进展作一综述.     

HACE1的生物学特性及其在恶性肿瘤的研究进展

HACE1不仅是一种重要的肿瘤抑制基因,通过介导细胞自噬、Rac1的泛素化等多种作用机制发挥重要的肿瘤抑制作用,而且还涉及到众多的生物学功能,在心脏保护、抗氧化应激和细胞学动力学等方面发挥着关键作用。HACE1基因表达下调或突变在人类多种恶性肿瘤的发生、侵袭转移等过程中扮演重要角色,且与预后密切相关。因此,HACE1可能成为肿瘤治疗的一个新靶标,为恶性肿瘤的治疗提供新的方向和机遇。     

新的抑癌基因tslc1研究进展

肿瘤抑制基因tslcl的低表达与肿瘤侵袭转移及患者愈后密切相关。研究表明在肺癌、脑膜瘤、食道癌、鼻咽癌、宫颈癌等肿瘤组织中,其表达下降或消失。已经证实非小细胞肺癌细胞株A549内导入tslcl表达载体,能明显抑制肿瘤生长。但关于TSLCl抑癌蛋白作用的分子机制和细胞内外信号传导通路还有待研究。     

X-盒结合蛋白1的生理及病理生理学作用

X-盒结合蛋白1(XBP-1)是未折叠蛋白反应的重要组分,有剪接型XBP-1(XBP-1S)和非剪接型XBP-1(XBP-1U)两种形式.当细胞处于内质网应激状态时,XBP-1由活化转录因子6(ATF6)诱导,经IRE1α非传统剪接,转录有功能的XBP-1S,活化未折叠蛋白反应.XBP-1是一种重要的转录因子,对细胞生...     

FOXP1在肿瘤演进中的研究进展

叉头框蛋白P1（FOXP1）基因是新近发现的一种转录因子,其蛋白产物在生物发育阶段起着重要作用,且在不同人类肿瘤中发挥抑制或促进肿瘤发生发展的作用。本文就FOXP1基因的结构、功能以及与肿瘤演进的关系作一综述。     

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1(LRIG1)增强顺铂诱导的人垂体瘤细胞凋亡

目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白结构域1(LRIG1)在人垂体瘤组织中表达情况,并观察过表达LRIG1后对顺铂(DDP)诱导的垂体瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测45例垂体瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织中的LRIG1表达,分析LRIG1阳性表达与患者临床病理指标的相关性。选取原代分离培养的人垂体瘤细胞,采用脂质体介导的基因转染技术将LRIG1基因过表达质粒p EGFP-N1-LRIG1转染进细胞中,筛选LRIG1过表达的细胞,同时选取转染空质粒p EGFP-N1的细胞作为对照组。两组细胞均经20μg/m L DDP诱导48 h,流式细胞术检测细胞凋亡情况,平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白BAX、胱天蛋白酶3(caspase-3)和Bcl2的相对表达量。结果垂体瘤患者肿瘤组织中LRIG1阳性率显著低于瘤旁组织,且LRIG1在侵袭性肿瘤表达显著降低。与对照组相比,过表达LRIG1后,DDP诱导的细胞凋亡率显著增加、细胞增殖显著降低、BAX、caspase-3的水平显著增加,而Bcl2水平显著降低。结论过表达LRIG1增加DDP诱导的人垂体瘤细胞凋亡并抑制其增殖。     

凋亡抑制蛋白livin的研究进展

Livin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族的新成员,在肿瘤组织中高表达。抑制livin表达能明显增加肿瘤细胞凋亡,有效抑制肿瘤生长,增加肿瘤对化疗的敏感性。Livin可作为肿瘤复发指标及预后指标,可为临床工作提供指导。以livin为治疗靶点的基因治疗、蛋白治疗、免疫治疗已成为肿瘤治疗的新热点。     

IGFBP-rP1与癌变:抑癌基因抑或癌基因蛋白?

ＩＧＦ(ｉｎｓｕｌｉｎｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ)信号传导系统主要由ＩＧＦｓ(包括ＩＧＦⅠ和Ⅱ )、ＩＧＦ受体 (ＲⅠ ,ＲⅡ )、ＩＧＦＢＰｓ (ｉｎｓｕｌｉｎｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓ)和ＩＧＦＢＰ蛋白水解酶四部分组成〔1〕。ＩＧＦＢＰｓ共有 15个 ,根据ＩＧＦＢＰｓ与ＩＧＦ亲和力的高低 ,可把ＩＧＦＢＰ超家族分成高亲和力和低亲和力两组〔2〕。前者包括ＩＧＦＢＰ 1～ 6 ,与ＩＧＦ有较高的亲和力 ;后者包括ＩＧＦＢＰ ｒＰ(ＩＧＦＢＰ ｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ) 1～ 9〔2〕。ＩＧＦＢＰ ｒＰ1是…     

lncRNA-CCAT1与消化道肿瘤关系的研究进展

结肠癌相关转录因子1(CCAT1)是结直肠癌组织中新近发现的一种异常高表达的长链非编码RNA(lncRNA),具有促进肿瘤细胞增殖及侵袭转移等作用。CCAT1通过内源竞争等机制与微小RNA(miRNA)或蛋白相互作用参与调控机体的诸多生理病理过程,尤其是消化道肿瘤的形成与发展,它有望成为有价值的肿瘤标志物和治疗靶点。     

X-盒结合蛋白1生物学功能研究进展

研究发现X-盒结合蛋白1(X-box binding protein1,XBP1)与内质网中蛋白质的折叠密切相关,参与调控未折叠蛋白的折叠、修饰、分选与包装;此外,XBP1是联系未折叠蛋白反应元件、脂类生物合成和内质网生物合成的纽带。细胞在异常情况下会诱导内质网压力,导致蛋白质不能折叠或者错误折叠,XBP1作为未折叠蛋白反应元件的转录调控因子,指导蛋白质再折叠和降解,帮助细胞缓解内质网压力。了解与阐明细胞中XBP1的分子生物学作用机制,有利于揭示内质网中蛋白质加工、包装的作用机理。     

转录因子GATA-1的研究进展

GATA1是最早发现的GATA家族成员,表达在早期红系细胞、巨核细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、睾丸基质Sertoli细胞及非造血胚胎干细胞中。转录因子GATA-1在正常红细胞增殖、分化过程中起重要的生物学作用,且控制着巨核细胞、肥大细胞和嗜酸性细胞的分化。转录因子GATA-1可以和许多生物大分子柜互作用,如红细胞生成素（EPO）、FOG（friend of GATA）、GATA-2等,在血小板减少症、多发性骨髓瘤、白血病等疾病发病中发挥着重要的生物学效应。     

胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)研究进展

胰岛素样生长因子结合蛋白 - 1(IGFBP- 1)参与生长、发育、生殖及血糖等生理过程 ,它是一个多功能蛋白 ,主要通过与 IGF- 1结合发挥作用。在 IGFBP- 1蛋白质结构中 ,N端是与 IGF- 1结合的重要区域 ;中心区决定了IGFBP的特异性 ;C端部分参与了与 IGF- 1结合并与细胞粘附相关。 IGFBP- 1是否磷酸化对其生物学作用有着重要影响。 IGFBP- 1基因转录受到多种转录因子共同调控 ,其中胰岛素是其主要的调控因子。     

KyoT2 结合蛋白KBP1对RBP-J介导的转录活性的影响

目的 :研究KyoT2与KyoT2结合蛋白 1(KyoT2 bindingprotein1,KBP1)之间的物理相互作用 ,以及这种相互作用对重组信号结合蛋白J (recombinationsignalbindingprotein Jκ ,RBP J)介导的转录活性的影响。方法 :体外GST pulldown、体内免疫共沉淀、哺乳动物细胞双杂交实验和报告基因实验证实 ,KBP1与KyoT2之间存在物理和功能上的相互作用。结果 :体内和体外证实 ,KBP1与KyoT2之间均存在相互作用。转录活性分析实验显示 ,过表达KBP1可拮抗RING1对RBP J介导的转录的抑制效应。结论 :KBP1可通过与RING1竞争结合KyoT2而间接参与对Notch信号途径的调控     

GSTM1基因内三核苷酸重复序列长度多态与肝癌遗传易感性…

为探讨谷胱甘肽－Ｓ－转移酶Ｍ１基因５＇端非编码区ＣＧＧ三核苷酸重复序列长度多态与肝癌遗传易感性的关系，采用ＰＣＲ－ＰＡＵＧＥ－ＤＮＡ银染方法，对６５例肝癌患者和１０６例健康对照的研究表明，病例组和对照组ＣＧＧ拷贝数小于６者，分别占４９．２３％和７．５５％，两组差异显著（Ｐ〈０．０００１）。ＯＲ值为１１．８８，ＥＦ值为０．４５０９。提示ＣＧＧ拷贝数小于６者，患肝癌的危险性增加１０．８８倍，由ＣＧＧ拷     

Vasohibin-1在常见肿瘤发生发展中作用的研究进展

肿瘤的形成、生长和侵袭转移依赖于肿瘤血管的生成。抑制肿瘤血管形成是阻止肿瘤进展的重要途径。肿瘤血管的生长受多种促进因子(如血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胸苷磷酸化酶等)和抑制因子(如血管抑素、内皮抑素、血管生成抑制蛋白等)的共同调节。Vasohibin-1(VASH-1)作为一种新型血管抑制因子,受VEGF诱导表达于内皮细胞,发挥负性调控作用。近年来越来越多的研究发现VASH-1在多种肿瘤组织中异常表达并发挥作用。该文旨在对VASH-1在一些常见肿瘤发生、发展中的作用及机制作一综述。