榄香烯诱导HL-60细胞程序死亡

药物学研究表明诱导肿瘤细胞程序死亡／凋亡(apoptosis)可能是许多化疗药物杀伤肿瘤细胞的机制之一，细胞凋亡与细胞坏死有本质区别，凋亡的特征有质膜保持完整性，核染色质固缩，内源性核酸内切酶激活将染色质DNA降解成寡聚核小体，电泳带谱表现为特征性梯状带。榄香烯(elemene)系我国自行研制的抗癌新药。     

血清核小体在宫颈癌新辅助化疗反应和预后中的意义

众所周知，自由或细胞外DNA（free DNA）在癌症患者和正常人血浆中循环，这些DNA至少有部分以细胞死亡标志物寡核小体和单核小体的形式存在。早期的数据表明核小体减少与肿瘤反应、患者的预后密切相关。研究者用酶联免疫法检测了一组接受新辅助化疗宫颈癌患者化疗前、后血清核小体的水平。     

小鼠肾小体发育过程中的细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因表达

目的探讨细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2和bax在小鼠不同发育阶段肾小体中表达的变化特征及其可能的生物学意义。方法采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL染色法)及bcl-2和bax蛋白免疫组织化学方法,对发育不同阶段小鼠肾小体的细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因蛋白表达进行观察。结果在小鼠肾小体发育的不同阶段均有TUNEL阳性细胞的表达,凋亡阳性细胞多出现在Ⅲ、Ⅳ期肾小体内,而此时bcl-2/bax比值明显降低。结论细胞凋亡高峰主要出现在Ⅲ、Ⅳ期肾小体,bcl-2/bax比值的降低可能是这一现象发生的重要机制之一。     

全反式维甲酸诱导人卵巢癌细胞凋亡的实验研究

目的：观察全反式维甲酸(A11一trans retinoic acid，ATRA)诱导人卵巢癌细胞CAOV3产生凋亡。方法：应用扫描电镜、透射电镜、DNA断裂分析及流式细胞术观察ATRA诱导人卵巢癌细胞CAOV3凋亡。结果：ATRA作用后电镜下细胞逐渐变圆，细胞表面微绒毛消失，核染色质更加致密，浓缩分块，胞质中有空泡形成，细胞表面出泡，脱落形成膜包裹的凋亡小体。流式细胞术不同浓度ATRA对CAOV3细胞凋亡作用的结果显示在DNA直方图上均出现低于G1期二倍体DNA含量的亚二倍体峰，随药物浓度增加，亚二倍体细胞从10^-8mol／L ATRA时的18．7％增加到10^-6mol／L的37．4％；10^-6mol／LATRA作用24h即诱导CAOV3细胞产生典型的梯形DNA条带(DNAlallder)，大小约180bp的整数倍递增，随ATRA作用时间延长而逐渐加强；结论：ATRA可以诱导卵巢癌细胞产生细胞凋亡，呈时间和浓度依赖性。     

三磷酸腺苷诱导U937细胞凋亡机制的探讨

目的：探讨三磷酸腺苷(ATP)诱导U937细胞凋亡过程中p73 mRNA的表达变化，以进一步研究p73基因在U937细胞凋亡中的作用。方法：用ATP诱导U937细胞凋亡，凋亡指标采用细胞形态学、DNA片段电泳、流式细胞术检测DNA含量及细胞周期的变化等方法；采用半定量反转录PCR(RT-PCR)检测p73 mRNA的表达变化。结果：ATP可诱导U937细胞凋亡。0.25 g／L的ATP作用于U937细胞24 h，光镜下见细胞出现较明显的聚集现象，胞膜皱缩，细胞体积缩小，Wright's+Giemsa．染色见胞核浓缩、核碎裂等现象，DNA片断电泳见清晰的梯形条带；流式细胞仪检测：0.25 g／L ATP作用于U937细胞24 h、36 h、48 h，细胞的凋亡率分别为2.33％、11.90％、35.49％，并使细胞阻滞在G2～M+S期，而对照组细胞凋亡率仅为1.09％；半定量RT-PCR结果：与对照组相比，仅48 h组p73 mRNA的表达下调。结论：ATP可诱导U937细胞凋亡。在U937细胞凋亡早期，p73 mRNA表达差异无显著性。     

鼻咽癌癌细胞程序性死亡的电镜观察

本文描述未经治疗鼻咽癌组织中癌细胞凋亡的超微结构表现。结果显示：凋亡现象出现于单个分散的癌细胞，发生凋亡的癌细胞体积变小，胞质密度增高，与相邻细胞接触变松，桥粒减少。最早的形态改变是核染色质分离及浓集，形成界线清楚的小颗粒状质块，紧靠核膜，胞质及细胞器仍保持完整；继则出现胞膜或核膜的卷折，凋亡细胞发生碎裂，形成凋亡小体。在肿瘤组织中，凋亡细胞及碎裂小体常为癌细胞所吞噬，出现许多被消化的形态结构。未     

多西他赛诱导HL60细胞凋亡的实验研究

目的：探讨多西他赛诱导HL60细胞凋亡的作用机制。方法：应用形态学方法、流式细胞术、DNA凝胶电泳和Annexin V标记等方法检测细胞凋亡的发生，应用RT-PCR检测凋亡相关基因Fas、bcl-2和c-myc表达的变化。结果：多西他赛对HL60细胞的生长有明显的抑制作用。多西他赛使细胞分裂阻滞于G2M期，并诱导肿瘤细胞发生凋亡：具有典型的凋亡形态，细胞固缩，核染色质呈周边凝聚，形成凋亡小体，胞膜完整；DNA凝胶电泳呈凋亡特有的ladder带；FCM检测出现Sub-G1峰，0．1μmol／L多西他赛作用72h的apo％最高为33．46％；凋亡相关基因Fas转录水平比用药前增强，bcl-2和c-myc无明显变化；结论：多西他赛可诱导HL60细胞凋亡，可能主要与促进Fas基因表达有关。     

肿瘤坏死因子诱导HL60细胞凋亡时核基质的改变及意义

已知核基质的功能与细胞的分化、增殖等生命活动过程有关,且与细胞的癌变和凋亡有关[1],我们比较了肿瘤坏死因子诱导HL60细胞凋亡前及凋亡时核基质的改变,并分析了核基质蛋白在HL60细胞凋亡过程的可能作用及其意义。材料与方法1．HL60细胞的培养的准备：HL60细胞为本实验室冻存复苏,细胞培养用RPMI1640液、小牛血清10％、青霉素100u／ml、链霉素ug／ml,培养条件：温度37℃、湿度100％、CO25％。2．肿瘤坏死因子诱导HL60细胞调亡：参照文献Voelkd．Johnson等［’j介绍的方法,用还原反应测定肿瘤细胞存活率,细胞DNA的提取及琼…     

顺铂诱导人结肠癌细胞凋亡的实验研究

 采用细胞培养方法，通过AO染色，DNA微电泳及电镜观察顺铂作用下结肠癌细胞凋亡过程。实验结果表明：结肠癌SW1116细胞在不同浓度的顺铂作用2小时后，呈现不同程度的凋亡。电镜观察到凋亡的细胞表现为细胞核皱缩，核内染色质结块状，趋边缘性分布；DNA微电泳呈拖尾现象，提示凋亡细胞内DNA片断化；凋亡细胞AO染色呈阳性反应，其阳性率随顺铂的浓度增高而递增，与对照组相比，差异有显著意义（P＜0．05）。因此认为顺铂可诱导和促进结肠癌细胞凋亡，这一现象可能是顺铂抗癌作用之一。     

卵巢肿瘤细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡是一种生化、形态特征明确的细胞死亡方式，其形态特征是细胞接受刺激后出现核固缩、染色体聚集、核裂解、细胞缩小、空泡化、细胞表面微绒毛消失、平滑化、细胞膜皱折并出泡形成油滴状小体（凋亡小体，内含完整的细胞器及致密染色质），这种死亡不同于坏死，不伴...     

铜皮石斛水提液诱导HL-60细胞凋亡的研究(英)

目的:探讨铜皮石斛水提液的抗癌活性及其诱导急性白血病细胞凋亡的发生机制。方法:运用MTT方法检测铜皮石斛对体外肿瘤细胞的细胞毒作用;应用光镜、电镜,琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪和蛋白印迹免疫法观察它诱导的HL-60细胞的凋亡模式。结果:HL-60细胞在铜皮石斛水提液作用下发生细胞凋亡,凋亡细胞表现为细胞固缩、核染色质凝聚,并出现凋亡小体。铜皮石斛水提液(内含干药6.25mg/ml)作用24～72h,细胞DNA裂解片段呈现典型的梯度条带。凋亡抑制基因bcl-2的表达在药物(6.25mg/ml)作用6～12h时增高,24h后开始下降。结论:铜皮石斛的抗癌活性与诱导细胞凋亡有关。     

铜皮石斛水提液诱导 HL 60细胞凋亡的研究

目的：探讨铜皮石 斛水提液的抗癌活性及其诱导急性白血病细胞凋亡 的发生机制。方法：运用MTT 方法检测铜皮石斛对体外肿瘤细胞的细胞毒作用;应用光镜、电镜,琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪和蛋白印迹免疫法观察它诱导的HL－60细胞的凋亡模式。结果：HL－60细胞在铜皮石斛水提液作用下发生细胞凋亡,凋亡细胞表现为细胞固缩、核染色质凝聚,并出现凋亡小体。铜皮石斛水提液（内含干药6．25mg/ml）作用24－72h,细胞DNA裂解片段呈现典型的梯度条带。凋亡抑制基因bcl－2的表达在药物（6．25mg/ml）作用6－12h时增高,24h后开始下降。结论：铜皮石斛的抗癌活性与诱导细胞凋亡有关。     

榄香烯诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究

背景与目的：榄香烯是从姜科植物莪术中提取的抗肿瘤药物,我们应用榄香烯治疗神经胶质瘤取得了较为显著的疗效,本研究探讨榄香烯的抗胶质瘤细胞增殖和诱导凋亡作用。方法：^3H-TdR掺入法检测榄香烯对鼠源性C6胶质瘤细胞及人源性SHG-44胶质瘤细胞的体外增殖抑制效应,Hoechst33258／PI荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞仪和DNA凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：榄香烯能有效抑制C6／SHG-44胶质瘤细胞的恶性增殖,^3H-TdR掺入法检测榄香烯处理不同时间(1～4天)的IC50,C6细胞为7．33--11．02mg／L,SHC-44细胞为13．29～27．16mg／L。在相同药物浓度下,C6细胞较SHG-44细胞敏感。经榄香烯作用后,C6／SHG-44胶质瘤细胞核固缩、边集,核浆比例减小并见有凋亡小体形成,DNA直方图观察到特征性亚倍体峰(Ap峰),DNA凝胶电泳出现有明显的梯状条带。结论：榄香烯有显著的抗胶质瘤细胞增殖作用,并能诱导胶质瘤细胞凋亡。     

HC3898基因的初步功能研究

目的：初步研究HC3898基因的功能。方法：通过细胞集落形成实验、裸鼠成瘤实验和计算机分析对HC3898基因的功能进行初步研究。结果：HC3898在蛋白质水平与酵母、果蝇、线虫中一些与细胞生长分化相关的蛋白质有很高的同源性。HC3898全长cDNA克隆转染SMMC－7721细胞能显著抑制集落的形成。 转染HC3898基因的SMMC－7721细胞在裸鼠中的抑瘤率为50％,统计学差异显著。常规病理切片显示实验组瘤中坏死灶内可见较多凋亡细胞及凋亡小体,在未坏死区可见散在凋亡细胞及凋亡小体。TUNEL染色证明有较多凋亡细胞。抽提实验组瘤块的组织DNA,经1．5％琼脂糖电泳分析,可发现典型的凋亡“阶梯状DNA条带”。结论：HC3898可能通过诱导细胞凋亡而抑制SMMC－7721细胞的生长,提示它是细胞生长分化相关的基因。     

γ-射线诱导胆管癌细胞凋亡致敏树突状细胞后的免疫应答

目的：建立γ-射线诱导癌细胞凋亡致敏从人外周血诱导扩增的树突状细胞（dendritic cells,DCs的方法。方法：从正常人外周血分离获得单核细胞，加入50ng/ml rhGM-CSF,1000U/ml rhIL-4，隔天1次，共4次，培养第3天，加入γ-射线诱导凋亡的胆管癌细胞，再继续体外培养4天后，用树突细胞富集柱收集DCs。结果：DCs高表达共刺激分子B7和CD1a，表达具有典型不规则突起，γ-射线诱导癌细胞凋亡形成的凋亡小体被DC捕捉、吞噬，负载抗原的DCs其激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力进一步增强。结论：γ-射线诱导癌细胞凋亡可以致敏rhGM-CSF加rhIL-4从人外周血单核细胞诱导、扩增出的DCs，DCs可以有效提呈凋亡胆管癌细胞的抗原，可望成为有效的肿瘤抗原致敏DC的新途径。     

华蟾素诱导NB4细胞凋亡及其作用机制

目的研究华蟾素(cinobufagin)对人早幼粒白血病细胞株NB4的诱导凋亡作用,并探讨可能的分子机制.方法通过细胞计数观察华蟾素对细胞的生长抑制作用,荧光染色观察细胞凋亡的形态学改变,DNA凝胶电泳观察DNA的片段化改变,流式细胞术定量分析细胞凋亡.免疫荧光结合流式细胞术检测bcl-2表达、半定量RT-PCR检测Fas和FasL的表达.结果与对照组相比,1:100～1:25浓度的华蟾素能明显抑制NB4细胞生长.经华蟾素作用后,NB4细胞出现凋亡典型的形态学改变,核浓聚、核碎裂、凋亡小体形成;DNA电泳出现凋亡特有的"梯子"条带;流式细胞术也证实凋亡的存在.在经1:100、1:50、1:25浓度的华蟾素作用2 d后,细胞凋亡率分别为12.49%、18.53%、37.76%.凋亡细胞的bcl-2的表达下调,Fas表达上调,FasL表达无变化.结论华蟾素能抑制NB4生长并诱导凋亡,可能是通过下调bcl-2的表达,增加Fas的表达来实现.     

高电压脉冲电场对K562细胞凋亡的影响

背景与目的： 探讨高电压脉冲电场诱导K562细胞凋亡的情况,寻求血液肿瘤治疗的新途径。 材料与方法： 采用高电压脉冲电场装置处理K562细胞,利用双标记流式细胞术(Annexin V_FITC/PI法)测定细胞凋亡率,通过透射电子显微镜观察K562细胞的超微结构。 结果： 经过高电压脉冲电场处理后的K562细胞,胞内出现大量空泡及裂隙,核内染色质向核周边聚集形成凋亡小体,呈典型细胞凋亡形态学改变;K562癌细胞的凋亡比例随着脉冲个数和电场强度的增加而增加。 结论： 高电压脉冲电场可以诱导K562细胞凋亡,该结果可为治疗癌症提供一个新的途径。     

北豆根提取成分PE2诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

背景与目的:探讨北豆根有效成分诱导肿瘤细胞凋亡的作用及其作用机制。材料与方法:北豆根干品醇提液,经三步法将醇提液纯化,得到三种纯化提取物(Purifiedextract,PE)PE1、2、3。应用流式细胞技术分析细胞周期DNA变化,并经荧光染色和荧光显微镜观察凋亡细胞形态学变化。并用电子显微镜观察了凋亡细胞的超微结构变化。用凝胶电泳实验检测了凋亡细胞DNA变化。结果:PE2可诱导BGC823细胞凋亡,呈明显的时效和量效关系;在低浓度PE2作用下,多数细胞被阻滞在G0/G1期,高浓度PE2作用后,多数细胞被阻滞在S期。肿瘤细胞经PE2作用后发生细胞凋亡的形态学变化:体积缩小,胞质浓缩,出现核固缩、核碎裂等;在电子显微镜下可见细胞胞体缩小,核染色质高度浓缩,边集于核膜,有的呈半月形,有的出现核碎裂,偶见凋亡小体。细胞DNA经凝胶电泳后,出现典型的梯状电泳模式。PE2处理的癌细胞,bcl-2基因表达降低,而bax基因表达升高。结论:PE2诱导肿瘤细胞凋亡,通过调节bcl-2及bax基因的表达发挥作用是PE2抗肿瘤作用的机制之一。该结果可促进北豆根的二次开发和临床应用。     

去甲斑蝥素对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其机制探讨

目的:探讨去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD) 对人胃癌SGC-7901细胞系增殖的影响及其机制.方法:实验分NCTD 组和对照组,分别应用MTT、流式细胞术、光学显微镜和电子显微镜检测 NCTD 对体外培养的胃癌SGC-7901细胞的杀伤抑制率、细胞周期、凋亡和细胞形态学改变.结果: NCTD对SGC-7901 细胞增殖有抑制作用,随浓度升高、时间延长作用增强,呈剂量- 时间依赖关系.在实验组,流式细胞仪示SGC-7901 细胞的G2 M 期细胞明显增多,S 期细胞减少,凋亡率上升;光镜和电子显微镜下出现细胞固缩,胞膜突出,核碎裂和凋亡小体.结论: NCTD 能抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长;其机制可能与其抑制SGC-7901 细胞增殖、干扰增殖周期、抑制DNA 合成代谢、诱导细胞凋亡有关.     

HCPT诱导肝癌细胞凋亡时AIF定位变化与DNA的损伤

目的：探讨羟基喜树碱（HCPT）诱导SMMC-7721细胞凋亡过程中凋亡诱导因子（AIF）不同时相的定位变化和DNA损伤的关系。方法：HCPT作用SMMC-7721细胞后在不同时间点收集细胞，用细胞组分分离试剂盒分离细胞质、线粒体与细胞核成分，用蛋白印迹法与共聚焦显微镜观察AIF的转位，用TUNEL法检测DNA损伤。结果：蛋白印迹结果显示线粒体中AIF在HCPT作用1h无明显变化，6h出现了明显转位，在12h与24h更明显；共聚焦结果也显示在HCPT作用6h后，AIF已从线粒体迁出，12h与24h后，大部分AIF已从线粒体迁至细胞核；TUNEL法检测结果表明伴随AIF的核迁移，DNA出现了明显的损伤。结论：HCPT作用SMMC-7721细胞后AIF的释放是凋亡的早期改变之一；伴随AIF的核转位，同时出现了DNA损伤。