高温—固化瘤苗研究新进展

人类癌细胞的特异性弱抗原和多克隆膜性相关抗原混合粗制的瘤苗产生的“免疫二得性”，使临床争入疑惑而被废用。固化瘤苗的基础研究，得到国内外有关学者承认后，我所首创性研究实现了固化瘤苗的精制。     

肝癌（H22）固化瘤苗的免疫实验研究

应用高温固化结合手术切除治疗肝癌曾作介绍.随访发现高温免疫远位效应.为研究此种治疗方法与免疫的关系.应用小鼠移植性肝癌H_(22)在65℃/5min射频条件下制备成固化瘤苗.用该瘤苗免疫小鼠(BALB/C)发现能特异性主动免疫抗同源H_(22)3×10~8癌细胞的攻击,抗癌率为86.6%,未出现瘤苗促癌生长现象.与对照组鼠比较,具有显著细胞免疫效应.认为固化瘤苗的实验有临床应用研究价值.     

高温—固化瘤苗的研究

传统认为抗原经过高温处理；将失去抗原活性。自报道高温治癌产生远位效应后，深入高温固化癌细胞研究，发现经６５℃制各的Ｈ—固化瘤苗具有癌特异性抗原性质。通过细胞培养证实该瘤苗是以ＴＣＲ—ＭＨＣ—ＨＳＴＶ（高温固化癌苗）三分子复体形式，激发的特异性细胞免疫效应。用Ｈ—固化瘤苗免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，能够９２％抗同源１０８个癌细胞的功击，与对照组癌发率１００％比较有显著差异。经病理证实属特异性细胞免疫。据资料研究认为Ｈ—固化瘤苗具有肿瘤内源性抗原特性。关键词     

激活自主细胞免疫的抗癌特异性抗原（高温─固化瘤苗）

高温（６５℃）固化治癌经历近１０年的系列研究。发现癌细胞经高温固化制备的固化瘤苗（ＳＴＶ）是一种能激活宿主产生自主细胞免疫为主的肿瘤特异性抗原之一种。据１９９２年在布达佩斯召开的第八届国际免疫学大会（ＩＵＩＳ）公认性的认为，三分子复体及抗原递呈的研究，将有助于发现“肿瘤特异性抗原”。故重复应用动物肝癌（Ｈ２２）和人肝癌（Ｈｃｃ）制备的ＳＴＶ进行了（ＴＣＲ－ＳＴＶ－ＭＨＣ）三分子复体实验。奇迹般的证实“固化瘤苗激活的淋巴细胞（ＳＴＶ－ＡＬ）”达到９５％以上的溶癌细胞率（ｐ＜０．００１）。并发现该瘤苗有类白介素－２扩增淋巴细胞性质。如此效应得到进一步证实，固化瘤苗将成为抗癌、防癌的一种特殊生物制剂     

异构性固化瘤苗临床应用观察

目的为实现特异性细胞免疫抗癌治疗。自体固化瘤苗研究者,突破性将异体癌研制成功的异构性固化瘤苗,进行临床应用观察。方法瘤苗先经动物实验,药理和毒理试验,证明其制剂无毒付作用,和抗癌有效性后。我们院所合作,对１５６例多类（肺癌５３例,肝癌２２例,食道癌１４例,胃癌２５例,直肠癌１２例,乳腺癌３０例）癌,经手术切除主瘤但病理证实已有转移的中晚期癌症病人（自愿者）进行临床应用观察。结果获近期（三个月）临床抗癌有效率７５％（１１７／１５６）,远期（三年）疗效６６．６％（１０３／１５６）。发现Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）攻入癌细胞中,而使癌细胞凋亡。结论异构性固化瘤苗,能激活机体抗癌三分子复体免疫（ＳＴＶ－ＭＨＣ－ＴＣＲ）机制。实现了在人体内（ｉｎｖｉｒｏ途径）使癌细胞呈治疗性凋亡的特异性细胞免疫抗癌效果。     

IL-12瘤苗与131I-1E2 协同抗瘤作用研究

目的:建立稳定表达IL- 12的小鼠Lewis肺癌瘤苗LLC/mIL-12;评估尾静脉注射131I- 1E2（131I 标记抗肺癌单克隆抗体1E2）抑瘤效果及LLC/mIL-12对131I- 1E2 靶向治疗增效作用。方法:制备LLC/mIL-12;Na131I 标记1E2;建立C57BL/6 小鼠移植瘤模型,比较单纯尾静脉注射131I- 1E2 或联合瘤内注射LLC/mIL-12时131I- 1E2 在小鼠体内分布。成瘤小鼠随机分组,为GT、LLC/mIL-12）、RIT（Radioimmunotherapy,放射免疫治疗）、PBS 和GT+RIT组,治疗后测量肿瘤体积及重量,计算抑瘤率,检测CTL 和NK活性。结果:131I- 1E2 能有效靶向肿瘤组织,尤其联合LLC/mIL-12。与单用GT或RIT 比较,GT+RIT能有效地上调IL- 12表达、抑制肿瘤生长,GT及联合组有大量CD4+、CD8+淋巴细胞浸润,NK和CTL 细胞活性增强。联合组131I- 1E2 更多积聚在肿瘤组织。结论:131I- 1E2 明显抑制肿瘤生长,具有潜在的临床应用价值,有可能成为新的肿瘤靶向治疗药物。      

腺病毒介导IL-2基因转染的瘤苗体内抗肿瘤作用

目的 :探讨重组腺病毒介导的 IL- 2基因转染的瘤苗的体内抗肿瘤作用及其免疫学机制。方法 :应用腺病毒介导的鼠 IL- 2基因转染 CT2 6小鼠结肠癌细胞 ,灭活后用作瘤苗治疗荷瘤小鼠 ,观察皮下肿瘤生长及其存活期。采用乳酸脱氢酶释放法检测荷瘤小鼠脾细胞 CTL、L AK、NK细胞的杀伤活性。结果 :鼠 IL- 2基因转染瘤苗治疗能显著抑制荷瘤小鼠皮下肿瘤生长并明显延长其存活期 (P<0 .0 1)。体内免疫功能检测表明 ,鼠 IL- 2基因转染疫苗治疗组小鼠脾细胞 CTL 活性、L AK活性和 NK活性显著高于对照组 (P<0 .0 1)。结论 :腺病毒介导鼠 IL- 2基因转染的瘤苗体内具有较强的抗肿瘤效应 ,其机制可能是提高了荷瘤小鼠特异性和非特异性抗肿瘤免疫反应     

NDV联合热固化瘤苗的抗肿瘤作用

为了研究新城疫病毒（ＮＤＶ） 联合热固化瘤苗抑制肿瘤生长和免疫调节的作用,检测了荷瘤小鼠的抑瘤率和细胞免疫。结果显示,实验组Ⅰ与Ⅱ抑瘤率分别为２４．８％ 、４１．１％ ,２ 组的平均瘤重明显小于对照组,实验组Ⅱ在不同时间段的ＮＫ 细胞活性高于对照组（ Ｐ＜０ ．０１） 。提示ＮＤＶ联合热瘤苗对荷瘤小鼠的抑瘤作用和增强ＮＫ 细胞活性均比单独应用ＮＤＶ效果好。     

成纤维细胞介导的IL-2及IL-6基因疗法增强常规瘤苗抗肿瘤作用的实验研究

研究表明，IL-2、IL-6单独或联合应用具有较强的抗肿瘤作用，但当大剂量使用时，却伴随着一系列毒副作用的发生，IL-6相对其它细胞因子具有毒性小功能广泛等优点，它能刺激T细胞的分化与增殖、诱导IL-2及IL-2R的表达，IL-2在免疫反应过程中也发挥了重要调节作用．其作用之一是能刺激杀伤性T细胞的增殖并增强其杀伤活性。     

自体癌固化瘤苗的研究

为探讨高温固化癌所产生的免疫远位效应，作者进行了自体癌固化瘤苗实验与临床研究。结果显示：（１）免疫小鼠（ＢＡＬＢ／Ｃ）抗肝癌（Ｈ２２）３×１０８个癌细胞攻击，有效率为９３．３％，（２）对肝癌开展固化留置（瘤苗）免疫或自体癌固化瘤苗免疫，临床有效率为７６．８％，与相应对照组（４０．５％）比较，疗效差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。     

异构性固化瘤苗(溶癌因子)研究与临床免疫治疗肺癌的观察

目的　研究肿瘤的特异性细胞免疫。方法　应用分子生物学和基因工程技术 ,由同种异体同源癌细胞中提取全息性、异构性固化瘤苗 (Heteroiditysolidifiedtumorvaccine HSTV) ,进行动物 (小鼠 )细胞免疫功能测试和应用肺腺癌 (LA795 )制备HSTV免疫小鼠 (T739)抗肺癌 (LA795 ) 3× 10 8个癌细胞与对照组进行比较及临床用肺癌SHTV免疫治疗肺癌 5 3例 (志愿者 )对其疗效进行观察。结果　发现具有类PHA和类LI 2作用的HSTV。免疫小鼠抗肺癌 (LA795 )有效率 72 %。临床中晚期肺癌术后应用HSTV ,一年抗复发率 86 .4%(对照组 5 7.2 %)。三年抗复发率 72 %,比对照组提高 3倍 ,且生活质量明显提高。对晚期患者应用HSTV ,能延长生存期和抗癌性疼痛。认为HSTV属一种全息性抗原肽 ,它通过在机体内三分子复体免疫机制 ,可实现激活癌症患者产生 30 0～ 5 0 0倍自主特异性细胞免疫的临床抗癌效应。     

分泌不同水平IL-2的基因修饰瘤苗具有不同的治疗效果

通过一系列动物模型，已经对IL-2基因修饰的瘤苗的免疫调节作用和肿瘤治疗效果进行了广泛研究，并且IL-2基因修饰的瘤苗已进入临床试用阶段。本研究表明，此种瘤苗分泌IL-2水平不同会直接影响其治疗效果，为了进行实验，作者制备了体外分泌21种不同水平IL-2(0．01～7500U／10^5细胞／天)的M-3黑色素瘤细胞，此水平囊括了目前为止所有报道的IL-2基因转染瘤苗分泌IL-2的水平。     

高温固化ECS瘤苗免疫实验模型的确立及病理研究

本实验对高温固化瘤苗免疫和未免疫小鼠接种艾氏腹水癌ＣＥｃｓ）细胞，进行形态学和体征观察，发现免疫组小鼠能有效地预防和抑制肿瘤的发生和生长，免疫有效率为９２％，对照组小鼠１００％发癌，肿瘤呈浸润性生长。结果证实，ＥＣＳ高温固化瘤苗激活了动物机体对该肿瘤的特异性免疫反应，从而产生防癌抗癌作用。本实验方法为瘤苗的深入研究建立了较好的实验模型。     

石蜡包埋癌组织制备的瘤苗（PETV）对荷瘤615小鼠的治疗作用

应用石蜡包埋的Ｃａ７６１－ＫＦＰ８／Ｌ小鼠移植性乳腺组织制备的瘤苗，对荷瘤的６１５近交系小鼠的治疗作用进行了研究，结果显示：经ＰＥＴＶ治疗后小鼠的存活期明显延长，肿瘤的重量明显小于对照组，肺转移率也较对照组降低，应用ＰＥＴＶ配合选择性去除Ｔｓ细胞的小剂量ＣＴＸ和增强免疫 答反应的细胞因子ＩＮＦａ－２ｂ可进一步提高疗效。作者认为，ＰＥＴＶ应用范围广，可长期保存抗原等优点，值得 深入研究。     

GM-CSF基因修饰的不同肿瘤瘤苗体内诱导抗肿瘤免疫功能的比较

GM-CSF作为一种重要的造血生长因子，能刺激粒细胞、巨噬细胞和树突状细胞的增殖分化，此外它还具有重要的免疫调节作用，尤其是其增强机体抗肿瘤免疫功能的作用近年来倍受重视。曾有报道，GM-CSF基因修饰的肿瘤瘤苗能诱导机体产生有效的保护性抗肿瘤免疫应答，在同一肿瘤模型中其作用强于用IL-2、     

瘤内注射脂质体IL-2基因复合物治疗实验性肝癌

利用瘤内注射法将治疗基因直接转入体内的肿瘤细胞并获得表达，一方面可以提高治疗基因对肿瘤细胞的针对性，减少对非靶细胞可能带来的毒副作用，另一方面也较简便，更适应临床应用的需要。本文初步探讨了瘤内注射脂质体-IL-2基因复合物在实验性肝癌基因治疗中的应用将IL-2基因克隆人真核表达载体pME18S，     

TNF—α基因修饰瘤苗的抗肿瘤作用研究

本实验观察比较了H22肿瘤细胞TNF一x基因修饰前后的体内致瘤性及经照射后作为瘤苗的治疗作用.结果表明在实验剂量范围内,H22-TNF-x细胞较H22原肿瘤细胞致瘤性下降,且经照射后作为瘤苗对一定剂量的原肿瘤细胞有治疗作用.为基因修饰瘤苗的进一步研究打下基础.     

近交系TA2小鼠恶性淋巴瘤瘤苗的制备及抑瘤作用的初步观察

本文试图用半抗原二硝基氟苯(DNFB)修饰小鼠恶性淋巴瘤细胞，加入一些细胞因子，用佐剂一并包裹所制备的瘤苗，探讨该瘤苗在肿瘤上应用的意义。     

石蜡包埋癌组织制备的瘤苗(PETV)对荷瘤615小鼠的治疗作用

应用石蜡包埋的Ca761－YP8／L小鼠移植性乳腺癌组织制备的瘤苗，对荷瘤（Ca761－FP8／L）的615近交系小鼠的治疗作用进行了研究，结果显示：经PETV治疗后小鼠的存活期明显延长，肿瘤的重量明显小于对照组，肺转移率也较对照组降低，应用PETV配合选择性去除Ts细胞的小剂量CTX和增强免疫应答反应的细胞因子INFa－2b可进一步提高疗效。作者认为，PICFV应用范围广，可长期保存抗原等优点，值得深入研究。     

联合应用IL-2和IL-7对增强T细胞体外增殖及功能的作用

应用体外诱导扩增的抗原特异性T细胞治疗恶性肿瘤及某些病毒性疾病已成为一种有效的临床免疫治疗方法，这一方法常规需要用特异性抗原(灭活的肿瘤细胞或提纯抗原)以及抗原递呈细胞作周期性刺激诱导，并在含特定细胞因子，如IL-2的培养系统中扩增以获得具有足够治疗剂量的功能性T细胞。