LAK细胞过继免疫疗法的一种新途径

现已证明LAK细胞具有广谱抗肿瘤,抗转移作用,而不破坏正常组织细胞。这为其过继免疫疗法的临床应用奠定了基础。但传统的从外周血中分离淋巴细胞(PBL)作为LAK前体细胞。经rIL—2诱导具有抗肿瘤活性的LAK细胞,不但给患者带来了额外的负担,而且常常引起许多副作用。因而有必要寻找新的LAK前体细胞来源。本文对PIL(肿瘤浸润淋巴细胞)、HFSL(胎儿脾淋巴细胞)的体外扩增及LAK活性诱导及前体细胞频率作探讨。证明TiL与HFSL体外     

采用正常人LAK细胞治疗癌症病人的疗效观察

近年来,应用患者自体LAK细胞治疗各类癌症病人取得了一定的疗效。由于自体LAK细胞的应用存在一系列严重的副作用,在临床很难进一步推广应用。为了解决LAK细胞来源问题,我们将正常人外周淋巴细胞做为同种LAN(淋巴因子激活的杀伤)细胞的前体细胞,经重组白细胞介素—2激活后治疗了各类癌症病人,现将结果报告如下。     

PHA—LAK细胞的制备

IL－2／LAK过继免疫疗法以其独特的疗效成为肿瘤治疗的新手段［1］，制备足量高效的淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK细胞）则是开展IL－2／LAK疗法的先决条件，但目前的制备方法尚不能满足临床应用的需求，故围绕如何有效的制备LAK细胞展开了广泛的研究。本文以PHA作为增强剂制备LAK细胞，报告如下：材料与方法三主要试剂，细胞IL－2：第四军医大学药物研究所，PHA－P：美国Signa公司，Daudi细胞株：引自协和医科大学基础所，健康人外周血：西京医院。2效应细胞的制备。①LAK细胞的制备。取健康献血员肝素抗凝外周血，用淋巴细胞…     

LAK细胞治疗癌肿效果的尸检评价

 LAK细胞作为恶性肿瘤治疗的一种方法, 其疗效的临床评价已有许多报道, 但在人体内应用LAK细胞治疗后组织学改变尚不清楚。 本文收集了7例晚期恶性肿瘤应用LAK细胞治疗后进行尸检的材料进行系统分析, 结果说明, LAK细胞与癌肿坏死之间未见明确内在联系, 仅肿瘤内淋巴细胞浸润数量与癌肿坏死有关; 同时发现, LAK细胞治疗与心脏、肝脏内出现淋巴细胞浸润及肺间质纤维组织增生有一定关系。 这对于深入了解LAK细胞的体内作用是有价值的。     

骨肉瘤患者外周血淋巴细胞体外相关瘤细胞致敏和rIL-2诱导的杀伤细胞

本实验对骨肉瘤患外周血淋巴细胞(PBL)采用2种培养方法；(1)PBL在体外用患肿瘤组织学相关传代骨肉瘤细胞(灭活处理)刺激5天再经rIL-2诱导12天；(2)单独rIL-2激活培养PBL3～5天；分别获取rIL-2诱导体外刺激细胞毒淋巴细胞(rIL-2-CL)和LAK细胞。借助^51Cr释放试验对2种效应细胞形成及体外抗瘤能力进行比较性研究。结论：rIL-2-CL主要是一种特异性较高，杀伤活性强烈CTL细胞群，对抗LAK细胞的骨肉瘤细胞具有明显杀伤效应。     

人胎儿LAK细胞临床应用的可行性研究

LAK疗法是迄今最有效的抗肿瘤免疫过继疗法,但是在实施此疗法过程中存在的最棘手问题便是LAK前体细胞来源及数量问题。为了寻找能够代替自身PBL有新的LAK前体细胞来源,本文主要探讨了胎儿LAK细胞抗肿瘤活性以及体外扩增和增殖规律。材料和方法一、胎儿哈尔滨市妇产医院为本项研究提供水囊引产胎儿。胎龄为20～34周。二、LAK细胞诱导及体外扩增胎儿脾脏、肝脏或胸腺细胞以1.5×10~6/ml浓度混悬     

LAK细胞杀伤耐药胃癌细胞的实验研究

生物反应调节剂(Biological Response Modifiers,BRMs)已成为肿瘤治疗第四模式,尤其是白细胞介素2激活的淋巴细胞(LAK 细胞)用于肿瘤临床治疗取得一定的疗效.LAK细胞能否杀伤耐药肿瘤细胞是化疗后能否进行LAK治疗的关键.本研究采用体外诱导法建立了4株耐药胃癌细胞,体外药敏实验表明它们均对5氟尿嘧啶、丝裂霉素、长春新碱及氨甲喋呤耐药,耐药指数为9.1～15.63倍,但对顺铂敏感或低度耐药.LAK细胞与肿瘤细胞的结合实验显示细胞获得耐药性后与LAK细胞的结合增加.LAK细胞杀伤实验表明SGC7901耐药后对LAK细胞敏感性增加.结论:胃癌细胞耐药后对LAK细胞敏感性增加.化疗后选用LAK细胞治疗有可能改善肿瘤治疗效果.     

腹部肿瘤病人rIL-2/LAK治疗前后T细胞亚群、淋巴细胞转化试验及NK细胞活性变化

本文对30例晚期腹部肿瘤患者rIL－2／LAK治疗前后的免疫功能进行动态观察。检测指标包括T细胞亚群（CD3、CD4、CD8及CD4／CD8）。淋巴细胞转化试验（LymphocytesBlastogenesisTestLBT）和NK细胞活性。结果表明：肿瘤患者经rIL－2／LAK治疗后，CD3、CD4明显升高．CD8也略有升高．CD4／CD8明显升高；淋巴细胞转化率明显升高；经rIL－2／LAK治疗后，NK细胞活性增强。这反映肿瘤患者经rIL－2／LAK治疗后机体细胞免疫功能得到增强。     

A-NK细胞抗肝癌Walker256瘤株的实验研究

目的:观察A-NK细胞的体外生长与增殖,以及杀伤肿瘤细胞的能力,研究A-NK细胞局部注射的体内抗肿瘤作用。方法:用淋巴细胞分离液分离单个核细胞(PBMC),培养LAK细胞和A-NK细胞,分别将LAK细胞、A-NK细胞和Walker-256瘤株细胞接种于培养板中,培养24h后,用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法测定吸光度,计算肿瘤杀伤率。复制鼠肝癌模型,分别将LAK、A-NK细胞经肝动脉注入鼠肝癌模型中,观察两组动物的生存时间。结果:A-NK细胞的增殖明显快于LAK细胞(P<0.05),A-NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性比LAK细胞强(P<0.01),A-NK细胞能显著延长肝癌动物模型的生存期,与LAK细胞比较,具有显著性差异(P<0.01)。结论:A-NK细胞具有增殖快,抗瘤活性强,在体内能抑制肿瘤生长,延长荷瘤动物的生存期。     

LAK细胞对分裂期肿瘤细胞杀伤作用

自1986年开始,我们对淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)来源、扩增、激活及与白细胞介素2(rIL—2)联合临床应用等方面作了研究,证明LAK细胞具有广谱抗肿瘤,抗转移作用。但有些患者疗效不明显,根据肿瘤细胞的生物学特性,肿瘤细胞周期动力学及生物疗法与化疗方案的启发,本文对LAK细胞对有丝分裂期(M期)肿瘤细胞的杀伤作用进行了研究。     

LAK细胞一肿瘤免疫疗法的新途径

 LAK细胞是近几年新发现的一种特殊的淋巴细胞，它们对许多新鲜肿瘤细胞具杀伤作用.新近研究表明，过继移转LAK细胞与IL-2有可能成为一种有效的治疗肿瘤的方法。     

天然IL2诱导鼠LAK细胞的生长特性及形态学观察

本文介绍了用自制的IL_2(白介素Ⅱ)和粗提的lL2(?)(?)导LAK(淋巴因子活化杀伤细胞)的生成。用大鼠脾细胞制备IL_2乳腺癌小鼠脾细胞作为诱导LAK的单个核细胞。初步结果显示:1.IL_2培养上清能诱导出LAK样增殖特性。2.IL_2的粗提物可使LAK增殖作用增强。3.IL_2可使活化的和未活化的淋巴细胞同样增值。     

肝癌患者粘附性LAK细胞制备及抗瘤活性研究

本研究在常规LAK细胞制备基础上进行改进，用苯丙氨酸甲酯(PME)去除肝癌患者外周血中抑制LAK细胞活性的单核巨噬细胞。制备抗癌活性较高扩增迅速的粘附性LAK细胞，从实验结果分析。外周血处理后粘附性LAK细胞较未粘性LAK细胞具有较强的扩增能力，最大扩增倍数23～243倍，同时粘附性LAK细胞中TH细胞亚群有增加趋势，Ts细胞亚群有碱少趋势，其IL-2R^ 表达增加至64．3%。此外,在抗瘤活性方面粘附性LAK细胞与非粘附性LAK细胞存在一定差别，分别为64．6%和42．8%．因此。从临床实用出发。制备相对高效的粘附性LAK细胞可以提高LAK疗法的治疗效果。     

TIL与脐血LAK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用

肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）和脐血淋巴因子激活杀伤（LAK）细胞在含重组白细胞介素2（rlL－2）的完全培养基中可大量扩增培养，体外培养肿瘤组织的TIL及癌性腹水的淋巴细胞对自体瘤细胞（黑色素瘤，卵巢囊腺癌，大网膜转移性腺癌及癌性腹水）有明显的杀伤作用，胎儿脐血中分离培养的LAK细胞对肿瘤细胞也有较强的杀伤作用，在效靶比例分别为20：1和40：1时，对肿瘤细胞的杀伤作用后者均明显高于前者（P=0.025和P=0．01），且TIL对自体瘤细胞的杀伤作用明显高于脐血LAK细胞（P＜0．01），为临床应用TIL和脐血细胞提供实验依据。     

树突状细胞诱导的LAK细胞对肺癌的生长抑制作用

目的　研究肺癌细胞裂解物负载的树突状细胞 (DC)诱导的淋巴因子激活杀伤细胞 (LAK )对肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法　肺腺癌患者手术切除标本接种裸鼠皮下建立肺腺癌移植瘤模型 ,同时将手术切除标本用反复冻融的方法制备肿瘤细胞裂解物 ;同一患者外周血分离得到的单个核细胞中 ,贴壁的细胞加入DC生长因子 (DCGF)培养得DC ,未贴壁的细胞加入rhIL 2培养得LAK细胞。用肿瘤细胞裂解物负载自体DC ,诱导LAK细胞生成DC LAK细胞 ,注射荷瘤裸鼠腋下以观察DC LAK细胞对肺癌移植瘤的生长抑制作用。结果　用肺癌手术标本能成功建立裸鼠移植瘤模型。DC LAK组、LAK组、DC组和生理盐水对照组肿瘤瘤重平均值分别为 0 .47、1.0 5、1.3 0和 1.5 8g ,DC LAK组、LAK组和DC组肿瘤生长抑制率分别为 70 .3 %、3 3 .5 %和 17.9% ,DC LAK细胞具有抑制裸鼠肺癌移植瘤生长的作用而且强于LAK细胞 (P <0 .0 5 )。结论　通过荷瘤裸鼠体内抗瘤实验证实了DC LAK细胞的抗肺癌作用明显高于LAK细胞 ,提示DC LAK细胞治疗是更为有效的抗肺癌生物治疗方法 ,为DC疫苗用于肺癌的临床治疗提供依据     

CD3AK细胞体内外抗肿瘤活性及其临床应用

以TIL、LAK细胞联合rIL-2为代表的肿瘤过继免疫治疗在近年来的临床应用中取得了较为令人满意的临床疗效。特别是在肾癌、黑色素瘤、癌性浆膜转移等。但由于LAK、TIL前体细胞来源困难，且对IL-2呈现强依赖性，因此获得足量有效且1L-2依赖性低的抗肿瘤效应细胞是肿瘤生物治疗的主要研究内容之一。     

小儿白血病NK、LAK细胞活性的研究

本文对22例正常人及21例白血病患儿NK、LAK细胞活性检测结果表明,缓解期白血病患儿NK、LAK细胞活性正常,活动期白血病患儿NK、LAK细胞活性低下,分别为10.4%±9.7%(正常值28%±13.4%)P<0.01,对K562为34.3%±14.4%(正常值52.8%±15.3%)P<0.001,对Raji为32.6%±14.7%(正常值52.8%±14.3%)P<0.01。NK细胞活性低下的原因与血液中存在的抑制淋巴细胞无关,可能系NK细胞本身缺陷所致,rIL—2能恢复活动期白血病NK细胞活性。     

红细胞与LAK细胞共培养上清对Raji细胞的细胞毒作用

目的 研究人红细胞(RBC)对LAK细胞杀伤活性的影响及RBC及LAK细胞共培养上清(R—LAK—S)对Raji细胞的细胞毒作用。方法 采用MTT比色法测定LAK细胞的杀伤活性和R—LAK—S的细胞毒性。结果 不同浓度的RBC对LAK细胞的杀伤活性都有促进作用(P<0.01),随着RBC浓度的增加,其促进作用加强。不同RBC:PBMC比例的R—LAK—S对Raji细胞均有细胞毒性,且随RBC浓度的增加以及与Raji细胞作用时间的延长,其对Raji细胞的细胞毒也增强。结论 人RBC能增强LAK细胞的杀伤活性,R—LAK—S对Raji细胞有细胞毒性。     

人νδT细胞细胞毒活性研究

细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤肿瘤细胞的作用是机体抗瘤机制的重要环节，也是肿瘤过继免疫疗法中的主要效应细胞之一。因此寻找能特异杀伤肿瘤细胞的CTL是目前肿瘤生物疗法中急待解决的焦点之一。νδT细胞是T细胞的另一亚类，大量的实验表明：这群细胞与LAK，NK细胞相似，其胞浆中富含穿孔素，     

过继细胞免疫治疗肾癌的现状

自１９８４年LAK细胞用于治疗晚期肿瘤以来,随着现代分子生物学和免疫学的发展,过继细胞免疫治疗为转移性肾癌患者带来了新的希望。细胞免疫疗法的模式主要有细胞因子激活的杀伤细胞（lymphokineactivatedkillercell,LAK）、自身淋巴细胞（autolymphocytetherapy,ALT）、肿瘤浸润淋巴细胞（tumor－infiltratinglymphocyte,TIL）、细胞毒T淋巴细胞（cytotoxicTlymphocyte,CTL）、树突状细胞（dendriticcells,DCs）等,现从这几方面对过继细胞治疗肾癌的研究现状概述如下。１LAK外周血淋巴细胞（peripheralbloodlymphocyte,…