脐血T淋巴细胞亚群,LAK细胞表型和杀伤活性研究

应用单克隆抗体技术活细胞间接免疫荧光法及乳酸脱氢酶释放法分别检测了３０例脐血和３０例成人外周血Ｔ淋巴细胞亚群、ＬＡＫ细胞表型及杀伤活性，结果表明：脐血ＣＤ３、ＣＤ２及ＨＬＡ－ＤＲ的表达均明显低于成人外周血，而ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２５及ＣＤ５０的表达与成人外周血相似。经ＩＬ－２诱导后，脐血ＬＡＫ细胞表型较诱导前ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２５及ＨＬＡ－ＤＲ表达均明显增加，脐血ＬＡ     

脐血T淋巴细胞亚群、LAK细胞表型和杀伤活性研究

应用单克隆抗体技术活细胞间接免疫荧光法及乳酸脱氢酶释放法分别检测了３０例脐血和３０例成人外周血Ｔ淋巴细胞亚群、ＬＡＫ细胞表型及杀伤活性，结果表明：脐血ＣＤ３、ＣＤ２及ＨＬＡ－ＤＲ的表达均明显低于成人外周血，而ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２５及ＣＤ５６的表达与成人外周血相似。经ＩＬ－２诱导后，脐血ＬＡＫ细胞表型较诱导前ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２５及ＨＬＡ－ＤＲ表达均明显增加，脐血ＬＡＫ细胞杀伤活性较成人外周血ＬＡＫ细胞低。     

γδT细胞、NK细胞及LAK的生物学特性比较

过继性免疫治疗是肿瘤生物治疗的重要手段之一.80年代后期,开始进行LAK细胞抗肿瘤过继免疫治疗,并取得一定效果.近来,γδT细胞和NK细胞在非恃异性或半特异性免疫治疗中的作用逐渐被重视.我们通过体外分离和增殖培养γδT细胞、NK细胞和LAK细胞,比较研究了3种细胞的抗肿瘤的生物学特性,结果显示,以MACS分离γδT细胞,培养2周后细胞数扩增600～800倍,CD3,CD8和γδT表达阳性率分别是70.41%,42.69%和40.5%,γδT细胞对NK敏感细胞K562以及NK不敏感细胞Raji,XG-73种不同到细胞均有较高的杀伤率,分别为35.98%,32.27%和49.08%,高于对照组PBMC的19.56%,11.34%和10.58%;NK细胞对此3种细胞的杀伤率分别是45.21%,12.34%和11.94%;     

TIL细胞与LAK细胞体外杀伤活力的比较

应用改良ＬＤＨ释放法，对ＴＩＬ细胞与ＬＡＫ细胞的前体及培养激活的细胞进行杀伤活力的检测，结果显示无论前体细胞或培养激活的细胞，对自体瘤细胞及Ｋ５６２细胞的杀伤活性均以ＴＩＬ细胞为高，表明ＴＩＬ细胞对肿瘤的特异识别及杀伤力均较ＬＡＫ细胞为强。     

小儿白血病NK、LAK细胞活性的研究

本文对22例正常人及21例白血病患儿NK、LAK细胞活性检测结果表明,缓解期白血病患儿NK、LAK细胞活性正常,活动期白血病患儿NK、LAK细胞活性低下,分别为10.4%±9.7%(正常值28%±13.4%)P<0.01,对K562为34.3%±14.4%(正常值52.8%±15.3%)P<0.001,对Raji为32.6%±14.7%(正常值52.8%±14.3%)P<0.01。NK细胞活性低下的原因与血液中存在的抑制淋巴细胞无关,可能系NK细胞本身缺陷所致,rIL—2能恢复活动期白血病NK细胞活性。     

PHA—LAK细胞的制备

IL－2／LAK过继免疫疗法以其独特的疗效成为肿瘤治疗的新手段［1］，制备足量高效的淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK细胞）则是开展IL－2／LAK疗法的先决条件，但目前的制备方法尚不能满足临床应用的需求，故围绕如何有效的制备LAK细胞展开了广泛的研究。本文以PHA作为增强剂制备LAK细胞，报告如下：材料与方法三主要试剂，细胞IL－2：第四军医大学药物研究所，PHA－P：美国Signa公司，Daudi细胞株：引自协和医科大学基础所，健康人外周血：西京医院。2效应细胞的制备。①LAK细胞的制备。取健康献血员肝素抗凝外周血，用淋巴细胞…     

不同个体淋巴细胞转化成LAK细胞活性观察

不同个体淋巴细胞转化成ＬＡＫ细胞活性观察胡继旺顾益群吴吉勇作者单位：上海市第一肺科医院肺癌免疫研究室（上海２００４３３）关键词淋巴细胞ＬＡＫ细胞正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）经淋巴因子激活后能转化成具有较高抗瘤活性的杀伤细胞［１］即ＬＡＫ细胞，用ＭＴ...     

肝癌N-糖苷型糖蛋白的纯化及对NK和LAK细胞杀伤活性的影响

近年来发现肿瘤组织相关糖蛋白的异常糖基化作用与肿瘤的发生，转移及免疫调控密切相关，本实验收集手术切除病人肝癌组织标本，应用Tris-HCl溶液抽提人肝癌组织中的碳水化合物，以ConA-Sepharose 4B亲和层析方法，纯化人肝癌组织ConA相关的N-糖基化糖蛋白，经SDS-PAGE电泳后，考马斯亮兰染色，与低分子量标准蛋白比较，发现用ConA纯化的人肝癌组织糖蛋白有三条电泳带，分子量分别为70kd,30kd和20kd，细胞毒试验（LDH释放法）结果提示肝癌N-糖基糖蛋白对正常人NK和LAK细胞杀伤其靶细胞K562和H7402细胞性活有明显的抑制作用，但肝癌相关糖蛋白剂量增加抑制作用无明显增加。     

癌症患者群体LAK细胞的体外抗肿瘤的细胞毒活性

本研究应用~(125)I-UdR释放实验,测定了大量随机取样于111位癌症患者的外周血淋巴细胞以及从它们中诱导出的处于不同培养期的淋巴因子激活的杀伤细胞对K562和Raji肿瘤细胞的体外细胞毒活性.对560个有效数据的统计分析,获得以下结果:1.经过培养系统的作用,对K562细胞的细胞毒活性,从培养前的34.78±25%上升到8～13天培养期的68.04±17.3%之后基本稳定于近70%的水平,直至23～27天的培养期.此细胞毒活性的构成比模式表明,在培养之前,样品分布于很广的活性区域(10～90%);培养 8～13天和以后的培养期,约85%的样品集中到高活性区域(50～95%).2.对 Raji细胞的细胞毒活性,从培养前的8.9±8%上升到8～13天培养期的42.1±22%之后,在随后的培养期中,维持于约35%的水平.对Raji的细胞毒活性的构成比显示,在培养前,全部样品处于低活性区域(<25%);在培养过程中,部分样品(约30%)向高活性区域发生明显的扩展(50～90%),但另一部份样品(约40%)一直位于低活性区域(<35%).这样形成高低两个分布区域.这种现象的机理值得进一步探讨.     

树突状细胞对LAK细胞抗肿瘤活性的影响

树突状细胞（Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌ，ＤＣ）是一种高效的抗原呈递细胞，它在抗肿瘤免疫方面的作用已受到人们的关注。本文在成功分离获得人外周血ＤＣ的基础上，探讨不同浓度的ＤＣ对ＬＡＫ细胞抗肿瘤活性的影响，旨在探索ＤＣ提高ＬＡＫ细胞活性的最适剂量，为进一步...     

猪苓多糖对LAK细胞杀伤肿瘤活性的调节作用

猪苓(polyporus umbellatus)系真菌纲担子菌亚纲多孔菌科多孔菌属植物的菌核，从猪苓中提取的多糖(简称猪苓多糖，PUPS)具有抑制肿瘤生长和增加荷瘤动物及肿瘤病人机体免疫功能的作用．已往的研究已证实PUPS是一种非T细胞促有丝分裂素，对小鼠全脾细胞有明显的促有丝分裂作用及对小鼠细胞和体液免疫应答都有明显的增强作用．本文在此基础上研究了PUPS对LAK细胞杀伤肿瘤活性的调节作用。     

一种高效的LAK细胞——A—LAK细胞

LAK 细胞用于晚期癌症病人的过继免疫治疗已取得可喜成果。本文介绍了一种高效 LAK细胞——A-LAK 细胞的分离培养方法、体内外抗瘤活性,并分析了其用于肿瘤过继免疫治疗的优点。     

腹部肿瘤病人rIL-2/LAK治疗前后T细胞亚群、淋巴细胞转化试验及NK细胞活性变化

本文对30例晚期腹部肿瘤患者rIL－2／LAK治疗前后的免疫功能进行动态观察。检测指标包括T细胞亚群（CD3、CD4、CD8及CD4／CD8）。淋巴细胞转化试验（LymphocytesBlastogenesisTestLBT）和NK细胞活性。结果表明：肿瘤患者经rIL－2／LAK治疗后，CD3、CD4明显升高．CD8也略有升高．CD4／CD8明显升高；淋巴细胞转化率明显升高；经rIL－2／LAK治疗后，NK细胞活性增强。这反映肿瘤患者经rIL－2／LAK治疗后机体细胞免疫功能得到增强。     

LAK细胞治疗恶性肿瘤对T淋巴细胞rDNA转录活性的影响

 我院自1994年起 ,对 35例晚期难治性恶性肿瘤患者采用微量输液泵经外周淋巴管回输LAK细胞的方法进行了治疗 ,对治疗前后外周血T淋巴细胞核仁组成区嗜银 (Ag NORs)蛋白进行了测定 ,取得了一定的疗效 ,现报道如下.     

人νδT细胞细胞毒活性研究

细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤肿瘤细胞的作用是机体抗瘤机制的重要环节，也是肿瘤过继免疫疗法中的主要效应细胞之一。因此寻找能特异杀伤肿瘤细胞的CTL是目前肿瘤生物疗法中急待解决的焦点之一。νδT细胞是T细胞的另一亚类，大量的实验表明：这群细胞与LAK，NK细胞相似，其胞浆中富含穿孔素，     

影响LAK细胞抗肿瘤活性因素的研究进展

本文根据最新研究进展，对增强和抑制ＬＡＫ细胞活性的诸多细胞和分子因素及其作用机理进行了归纳和分析。这些结果充分说明，通过避免或去除抑制性因素及利用增强性因素提高ＩＬ－２／ＬＡＫ疗法的抗肿瘤效果是有大量实验与理论依据的，这为该疗法的临床应用提供了更广阔的前景。     

快速诱导人胎脾LAK细胞的实验研究

本文研究了大剂量IL-2短期冲击人胎脾单个核细胞(FSMC)后,其杀伤活性、增殖活性、表面抗原表达的时间动力学变化。结果表明:快速诱导人胎脾LAK细胞时,IL-2的最适剂量是5000UIL-2/1.0×10~7cell/ml。在第2、3d,快速诱导的人胎脾LAK细胞的杀伤活性及增殖活性均显著高于常规LAK(P<0.05,P<0.05)。且两者表型基本相同。快速诱导后不洗去IL-2的LAK细胞的杀伤、增殖活性显著、极显著地高于常规LAK(P<0.05,P<0.01),在后期,也不低于甚至高于常规LAK细胞。这些结果提示,快速诱导的人胎脾LAK细胞有可能用于临床,从而大大简化操作,减少污染机会;先用5000UIL-2/1.0×10~7cell/ml冲击1h,再按常规方法培养是一种独立且更优的方法。