抗独特型抗体对肿瘤的免疫治疗

1974年Jerne提出网络学说以来,对独特型(Id)、抗独特型(A-Id)、抗抗独特型调节网络进行了大量的研究,其中最受关注的是处于正负调节枢纽的Id环节,Id亦为抗原决定簇,为V基因编码的抗体和TCR表型.根据这一学说认为外在抗原为抗体中Id和T细胞受体所模仿,抗原注射于机体所产生的抗体为Ab1,而Ab1本身具有免疫原性产生A-Id抗体(Ab2),有一部分Ab2在三度空间模仿外在抗原,称     

抗独特型抗体在肿瘤主动免疫治疗研究中的进展

抗独特型抗体具有模拟抗原及免疫调节双重作用，能代替肿瘤抗原，诱发特异性免疫反应，临床初步应用显示出一定疗效。本文对抗独特型抗体及其在肿瘤主动免疫治疗研究中的进展作一综述。     

用抗独特型疫苗主动免疫治疗鼻咽癌病人的临床研究

目的：探讨抗独特型疫苗主动免疫治疗鼻咽癌病人的抗肿瘤效应。;用两标具有鼻咽癌相关抗原内像的抗独特型单克隆抗体２Ｈ４,５Ｄ３,经氢氧化铝凝胶沉淀示制备成抗独特型疫苗Ａｌｕｍ－２Ｈ４,Ａｌｕｍ－５Ｄ３,对１９例晚期鼻咽癌放疗病人作主动免疫治疗,９例放疗加生理盐水注射为对照组。用ＥＬＩＳＡ检测治疗前后病人血清抗体和细胞因子水平。     

鼻咽癌抗独特型抗体的基础和初期临床研究

基于抗独特型抗体在免疫网络中的特殊地位，尤其是抗独特型抗体在肿瘤免疫治疗及预防中的潜力引起了广泛兴趣，国外已对多种实体瘤制备了相应抗独特型抗体．并已(或准备)试用于临床。但未见有鼻咽癌抗独特型抗体的研究报导。鼻咽癌为我国有区域性分布的高发肿瘤，对其常规治疗之外的免疫治疗研究不够充分     

抗独特型肿瘤疫苗的研究现状及前景

抗独特型抗体可以模拟原始肿瘤抗原成为抗独特型肿瘤疫苗(Ab2β瘤苗),已在一些动物试验和临床试验中诱发了抗肿瘤免疫反应,显示其成为一种新的癌症免疫疗法的前景。改进Ab2β瘤苗的制备方法,建立快速、可靠的Ab2β瘤苗对免疫系统影响的监测方法,阐明独特型网络抗肿瘤免疫反应机制,将为Ab2β瘤苗的临床应用铺平道路。     

鼻咽癌抗独特型抗体疫苗的研究进展

抗独特型抗体因叮模拟肿瘤抗原，打破免疫耐受，已应用于卵巢癌、乳腺癌、黑色素瘤、结肠癌、淋巴瘤、胰腺癌等多种肿瘤的综合治疗中，并已取得一定疗效。文章就抗独特型抗体在鼻咽癌免疫治疗中的应用及发展趋势作一综述。     

鼻咽癌抗独特型疫苗的制备及临床研究

目的：制备具有内影像特征的抗独特型抗体,用于鼻咽癌病人的主动免疫治疗以探讨其抗肿瘤效应。方法：用杂交瘤技术制备针对Ａｂ１可变区的抗独特型单抗（Ａｂ２）,免疫同系动物诱导产生免疫应答并用氢氧化铝凝胶沉淀法制成抗独物型疫苗,对１９例晚期鼻咽癌放疗病人作主动免疫治疗,９例放疗加生理盐水注射为对照组,用ＥＬＩＳＡ检测治疗前后病人血清抗体和细胞因子水平。用原位Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测外周血单个核细胞（ＰＢＭ     

肿瘤基因工程抗体研究进展

综述单链抗体、抗体融合蛋白、抗独特型抗体、双特异性抗体的研究进展，显示它们在临床肿瘤治疗方面的良好应用前景。     

抗独特型抗体在B淋巴瘤治疗上的应用

恶性肿瘤是原先已停止分化的细胞元规律、无节制增殖的结果。因此,在每个肿瘤患者,其所有的肿瘤细胞均可表现出同样的表面形态。基于这种认识,如能检出只表达于肿瘤细胞上的抗原,就能以它为靶子对肿瘤进行特异性治疗。     

抗独特型疫苗在肿瘤治疗中的应用进展（下）——临床研究

肿瘤患者常处于自身肿瘤的免疫抑制状态，具有内影像作用的抗独特型抗体（ａｎｔｉ－Ｉｄ，Ａｂ２）可模拟肿瘤抗原。用ａｎｔｉ－Ｉｄ主动免疫可消除患者的免疫耐受状态，刺激机朱特异性的体液和细胞免疫反应，部分临床研究已显示ａｎｔｉ－Ｉｄ可延长肿瘤患者的生存期。     

鼻咽癌人源抗独特型单链抗体的制备及筛选

背景与目的:抗独特型抗体作为肿瘤抗原替代物可用于肿瘤治疗,这已在临床试验中得到证实。但由于目前所使用的抗独特型抗体多为鼠源性,用于人体可产生人抗鼠抗体反应,从而影响疗效。本实验拟构建噬菌体人源抗独特型抗体库,并从中筛选出能模拟鼻咽癌相关抗原的β型抗独特型单链抗体scFv(Ab2βscFv),以解决鼠源性抗独特型抗体用于临床所产生的人抗鼠抗体反应。方法:体外致敏并用EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)转化鼻咽癌患者的外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC),用RT-PCR分别扩增VH和VL基因并连接成scFv基因,将scFv基因与载体fUSE5连接后,转化大肠杆菌MC1061,构建噬菌体呈现型scFv库。在用单抗FC2对文库进行4轮筛选后,用SandwichELISA和结合抑制法从中筛选出β型Ab2scFv。结果:用单抗FC2体外致敏并经EBV转化的10例鼻咽癌患者的PBMC中,8例有鼻咽癌抗独特型抗体产生。经PCR分别扩增出5种VH(γ、μ)和7种VL(κ、λ)基因,经连接组成14种scFv基因。在与载体连接后,导入大肠杆菌MC1061,得到库容为1.5×108的初级噬菌体抗独特型抗体库。经富集筛选后,从中随机挑取270个克隆进行ELISA筛选,得到91个Ab2scFv单克隆,阳性率为33.7%。再用结合抑制法从中初步筛选出5个可能为β型的Ab2scFv。结论:联     

用抗独特型抗体主动免疫增强鼻咽癌放疗病人的免疫功能

针对鼻咽癌细胞膜抗原制备了一株单克隆抗体（Ａｂ１），且又对该（Ａｂ１）可变区制备了一株单抗（Ａｂ２），此Ａｂ２能象鼻咽癌细胞膜抗原一样与Ａｂ１可变区的抗原结合位结合，因此在功能上Ａｂ２能够模拟原抗原，刺激机体的免疫系统。用该Ａｂ２对鼻咽癌放疗病人作主动免疫治疗，并设放疗加生理盐水注射对照组。检测了血清中人抗鼠抗体（ＨＡＭＡ）的产生情况，并检测了治疗前后各项体液免疫指标，包括抗Ａｂ２抗体（Ａｂ３）和抗鼻咽癌细胞抗体（Ａｂ１）水平以及各项细胞免疫指标，包括血清中细胞因子ＴＮＦ－α、ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ的水平和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＩＬ－２ｍＲＮＡ的表达。结果表明，与对照组相比，鼻咽癌抗独特型抗体能使鼻咽癌放疗病人的免疫指标上升，有增强免疫功能的作用，可能是一种有益的辅助疗法。     

卵巢癌抗独特型微抗体刺激树突细胞激活的T细胞对自体卵巢癌细胞杀伤作用的研究

背景与目的：以抗原肽、蛋白、肿瘤细胞冻融物致敏树突细胞的肿瘤免疫治疗已在多种肿瘤展开。6B11抗独特型微抗体能模拟卵巢癌相关抗原OC166-9,本研究用6B11抗独特型做抗体体外刺激树突细胞,以诱导出对卯巢癌患者自体肿瘤细胞抗原特异性的细胞毒作用。方法：取10例卵巢癌患者的外周血,分离并诱导培养树突细胞,在培养过程中用6B11抗独特型微抗体刺激,促成熟后在体外激活自体T细胞。^3H-TdR掺入法测DCs对自体T细胞刺激增殖的作用;^51Cr6h释放实验测激活的T细胞对自体肿瘤细胞特异性的杀伤。结果：9例中有4例(#4,#5,#7,#10)6B11微抗体负载组DC刺激自体T细胞增殖^3H-TdR掺入的cpm值高于对照组;杀伤实验的10例患者中5例(#1,#2,#4,#7,#9)6B11微抗体负载组DC刺激自体T细胞(简称MINI-DC-T)对自体肿瘤细胞有特异性杀伤。在效靶比为20：1时,各组不同的效应细胞对自体肿瘤细胞的杀伤率分别为：MINI-DC-T组25％～100％、F(ab)’2-DC-T组18％～40％、unpulsed-DC-T组13％～43％、T细胞组9％～58％,MINI-DC-T组高于其它各组。在效靶比为20：1时,4例(#l,#2,#4,#9)患者MINI-DC-T对自体肿瘤细胞及SKOV3、HLE、K562细胞的杀伤率分别为25％～100％、5％～51％、2％～38％和2％～25％。MINI-DC-T对自体肿瘤细胞的杀伤高于对照组靶细胞,并且这种杀伤可以部分地被anti-MHC-Ⅰ类抗体阻断。说明不同抗原负载DC诱导的CTL对自体肿瘤细胞的杀伤有抗原特异性。结论：6B11抗独特型微抗体可以模拟卵巢癌相关抗原,用它刺激的树突细胞在体外可以诱导出抗原特异性细胞毒T细胞。     

鼻咽癌抗独特型单克隆抗体的主动免疫初探

用湖南鼻咽癌细胞株HNI2为免疫原,制备了数株抗鼻咽癌单抗(Abl).再用两株Abl(FC_2、HNI-5)为免疫原,制备了两株抗独特型单抗Ab2(2H4和5D3).体外和体内实验证实,2H4、5D3能替代鼻咽癌抗原,诱导体液和细胞免疫应答.因而认为它们可以作为新型抗鼻咽癌疫苗的候选物.选择19例晚期鼻咽癌病人用氢氧化铝凝胶沉淀的Ab2(Alum-2H4、Alum5D3),配合放疗进行主动免疫治疗;9例单纯接受放疗的晚期鼻咽癌病人作为对照组.经血清学检测发现,治疗组病人的抗抗独特型抗体(Ab3)、抗肿瘤抗体(Ab1’)水平均有不同程度增高,但也产生了人抗鼠抗体(HAMA).血清细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2水平在大多数治疗组病人中升高,而对照组Ab1 TNF-α、IFN-γIFM及IL-2血清水平均未升高.初步临床研究显示,鼠源性抗独特型单抗用于临床治疗是安全的,且Ab2能模拟肿瘤相关抗原,激发机体产生主动免疫应答.     

以粘蛋白(mucines)为靶点的肿瘤主动特异性免疫治疗

1．Mucin糖分子表位与肿瘤疫苗：2．Mucin核心肽表位与肿瘤免疫；3．以Mucin为靶点的细胞型拟肿瘤抗原疫苗及独特型疫苗设计。     

双特异性抗体在肿瘤免疫治疗中的应用

双特异性抗体能够同时识别肿瘤靶细胞和免疫效应细胞，因此兼有抗体特异性和介导效应细胞的细胞毒作用的双重功能。可以用化学偶联，二次杂交瘤技术和基因工程方法得到双特异性抗体。双特异性抗体能将效应细胞聚集于肿瘤部位并激活效应细胞发挥抗肿瘤作用，其杀伤肿瘤细胞的作用机理包括细胞增殖，细胞因子释放，细胞毒性多肽和酶的调控。     

DC瘤苗制备及其在肿瘤免疫治疗中的应用

树突状细胞(DC)是目前功能最强的抗原递呈细胞，能刺激初始型T细胞增殖，激发机体免疫应答。研究发现肿瘤患者体内DC数量明显减少，其表型及功能明显缺陷。近年来DC培养及DC瘤苗的研究取得较大进展，DC瘤苗有望成为肿瘤免疫治疗的新方法。     

小细胞肺癌抗独特型疫苗功能的试验研究

目的探讨小细胞肺癌(SCLC)抗独特型抗体3F6和其单链抗体(3F6ScFv)诱导体液和细胞免疫应答的能力,以证明其作为抗SCLC疫苗的可行性。方法3F6和3F6ScFv(Ab2)免疫BALB/c小鼠获得抗血清,以ELISA和Westernblot方法分别检测抗血清中Ab3结合SCLC细胞膜表面特异抗原(NCI H128抗原)的能力,用竞争Westernblot检测Ab3与2F7竞争结合NCI H128抗原的能力。以迟发型超敏反应(DTH反应)和小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验检测3F6及3F6ScFv诱发细胞免疫应答的潜能。结果ELISA和Westernblot方法均证明,3F6和3F6ScFv免疫同系小鼠所产生的Ab3能特异的与NCI H128抗原相结合,与对照血清相比,差异有统计学意义(P<0.001),且有很强的与2F7(Ab1)竞争结合靶抗原的能力。在DTH反应中,3F6和3F6ScFv所致小鼠足垫肿胀的程度均明显高于对照组(P<0.001)。小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应试验证明,用3F6和3F6ScFv免疫的小鼠脾脏淋巴细胞对靶细胞的再次刺激有明显的增殖反应,与阴性肿瘤细胞对照组和阴性抗体对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗独特型抗体3F6和3F6ScFv均有模拟SCLC细胞膜表面特异抗原的能力,成功诱导了相应的体液和细胞免疫应答,可作为抗SCLC疫苗进行深入研究。