淫羊藿甙对急性早幼粒白血病细胞端粒酶活性的影响

目的：探讨淫羊藿甙（ICA）对急性早幼粒白血病细胞端粒酶活性的影响。方法：采用ICA与全反式维甲酸（AT-RA）对比试验。观察ICA对白血病细胞端粒酶活性及增殖分化的影响。结果：ICA可明显抑制端粒酶活性，对白血病细胞均有较明显的诱导分化和抑制增殖作用。且与ATRA合用可产生明显的协同效应。结论：ICA具有抑制急性早幼粒白血病细胞端粒酶活性的作用。     

淫羊藿苷对急性早幼粒白血病细胞体内外效应的研究

目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对急性早幼粒白血病细胞的诱导分化作用。方法：采用ICA与全反式维甲酸（ATRA）对比试验,观察ICA在体外及小鼠体内对白血病细胞增殖分化的影响。结果：ICA在体内外对白血病细胞均有较明显的诱导分化和抑制增殖作用。且与ATRA合用可产生明显的协同效应。结论：ICA具有明显的抗白血病细胞作用。     

淫羊藿甙诱导肿瘤细胞凋亡及其机制的研究

目的:采用淫羊藿苷icarrin(ICA,从朝鲜淫羊藿中提取的中药单体),作用于人急性早幼粒白血病细胞HL-60,较系统地对ICA诱导肿瘤细胞凋亡进行了观察,为ICA的开发应用提供实验依据.方法:采用电镜、流式细胞术、DNA片段化检测、RT-PCR等技术进行研究.结果:ICA在体外诱导HL-60细胞凋亡,呈典型的细胞凋亡形态学和生化特征,并具有时间剂量依赖性.ICA诱导肿瘤细胞凋亡的同时,下调相关基因bcl-2和c-myc基因mRNA和蛋白表达水平.结论:ICA体外诱导HL-60细胞凋亡,其机理可能与下调bcl-2和c-myc基因mRNA和蛋白表达水平密切相关.     

淫羊藿甙对人急性早幼粒白血病细胞分化的影响

目的　为寻找新的肿瘤细胞诱导分化剂 ,探讨了淫羊藿甙 ( icariin,ICA)的诱导分化作用及其机制。方法　选用从朝鲜淫羊藿中提取的单体成分 ICA,采用四唑氮蓝 ( NBT)还原试验 ,12 5I-标记的环磷酸腺苷 ( c AMP)和环磷酸鸟苷 ( c GMP)双抗体分离技术以及扫描电镜技术 ,观察了 ICA对人急性早幼粒白血病细胞 ( HL- 60 )分化的影响。结果　ICA( 0 .1g/ L)作用后的 HL- 60细胞 ,NBT还原能力明显增强 ,细胞内 c AMP/ c GMP比值升高 ,细胞膜表面发生明显变化 ,出现较多的皱褶和球状突起。结论　ICA对 HL- 60细胞有诱导分化作用 ,其机制可能与升高细胞内 c AMP/ c GMP比值有关。     

淫羊藿苷对急性早幼粒白血病细胞体内外效应的研究

目的 :探讨淫羊藿苷 (ICA)对急性早幼粒白血病细胞的诱导分化作用。方法 :采用ICA与全反式维甲酸 (ATRA)对比试验 ,观察ICA在体外及小鼠体内对白血病细胞增殖分化的影响。结果 :ICA在体内外对白血病细胞均有较明显的诱导分化和抑制增殖作用 ,且与ATRA合用可产生明显的协同效应。结论 :ICA具有明显的抗白血病细胞作用     

淫羊藿甙协同诱生细胞因子及增强抗癌效应细胞活性的研究

淫羊藿为小蘖科多年生草本植物，为历代常用的补益中药。采用的淫羊藿甙是从朝鲜淫羊藿中提取的单体成份．我们为寻找新的生物反应调节剂，研究了淫羊藿甙协同诱生白细胞介素-2、3、6和增强抗癌效应细胞(NK、LAK)活性的作用。结果如下：     

桂皮酸联合维生素C对HL-60的细胞诱导分化

目的　探讨桂皮酸和维生素C(V C)对人早幼粒白血病细胞 (HL 6 0 )的分化作用。方法　用2 .5mmol L桂皮酸和 0 .5mmol LV C单独和联合处理HL 6 0细胞后 ,观察细胞形态改变 ,测定细胞增殖速度、硝基四氮唑蓝 (NBT)还原反应、过氧化酶染色反应。结果　两者都能使HL 6 0细胞形态向成熟粒细胞转变 ,对细胞增殖有明显抑制作用 ,前者强后者弱 ;桂皮酸使细胞的NBT反应显著增强 (P <0 .0 1) ,过氧化酶染色为弱阳性或阴性 ;V C使NBT反应和染色反应改变不明显 (P <0 .0 5 ) ,两者联合作用 ,分化作用增强。结论　桂皮酸有很强诱导HL 6 0细胞分化的作用 ,v c的分化作用不明显 ,但有增强桂皮酸分化的作用。     

康莱特对HL-60细胞诱导分化的研究

目的　探讨康莱特对HL 60细胞诱导分化的影响。方法　应用不同浓度康莱特作用对数生长期HL 60细胞 ,采用细胞计数法测HL 60细胞生长曲线 ,显微镜观察细胞形态 ,应用台盼蓝吞噬和硝基蓝四氮唑 (NBT )还原实验检测细胞分化程度。结果　 1mg/ml康莱特作用HL 60细胞培养第 6天 ,细胞计数 ( 10 .3± 1.1)× 10 5个 /ml ,较未加药组细胞计数 ( 2 0 .5± 3 .5 )× 10 5个/ml低 ,P <0 .0 5。 1mg/ml康莱特作用HL 60细胞 96h ,HL 60细胞台盼蓝吞噬率 ( 3 2 .0± 8.3 ) %较未加药组 ( 4 .0± 2 .7) %高 ,P<0 .0 5。HL 60细胞NBT阳性率 ( 5 0 .3± 5 .3 ) %较未加药组 ( 15 .0± 3 .7) %高 ,P <0 .0 5。结论　康莱特对HL 60细胞生长有抑制作用。康莱特可诱导HL 60细胞形态向成熟粒细胞转变 ,增强HL 60细胞对台盼蓝的吞噬功能及对NBT的还原能力。康莱特具有诱导HL 60细胞分化的作用     

HL-60细胞淫羊藿甙诱导后信号传导因子表达变化与意义

目的检测急性早幼粒白血病细胞HL-60经过淫羊藿甙（ICA）诱导后信号传导与转录激活因子（STAT1、STAT3）和有丝分裂原激活蛋白激酶（p38MAPK、p42MAPK）表达变化在分化中的作用。方法建立ICA诱导分化模型，用瑞氏染色观察细胞形态，MTF实验测定细胞增殖的变化，NBT还原实验测定细胞分化状态，RT-PCR方法检测STATI、STAT3、p38MAPK、p42MAPK的mRNA的表达。结果HL-60细胞经ICA作用24h后，随着细胞增殖降低和分化的发生，p42MAPK的mRNA表达增加，STAT3的mRNA表达降低，STAT1和p38MAPK的mRNA未见明显的表达。结论p42MAPK和STAT3与ICA诱导HL-60细胞分化有关，而p38MAPK和STAT1则与ICA诱导HL-60细胞分化无关。     

HL-60细胞淫羊藿甙诱导后信号传导因子表达变化与意义

目的检测急性早幼粒白血病细胞HL-60经过淫羊藿甙(ICA)诱导后信号传导与转录激活因子(STAT1、STAT3)和有丝分裂原激活蛋白激酶(p38MAPK、p42MAPK)表达变化在分化中的作用。方法建立ICA诱导分化模型,用瑞氏染色观察细胞形态,MTT实验测定细胞增殖的变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,RT-PCR方法检测STAT1、STAT3、p38MAPK、p42MAPK 的mRNA的表达。结果 HL-60细胞经ICA作用24 h后,随着细胞增殖降低和分化的发生, p42MAPK的mRNA表达增加,STAT3的mRNA表达降低,STAT1和p38MAPK的mRNA未见明显的表达。结论 p42MAPK和STAT3与ICA诱导HL-60细胞分化有关,而p38MAPK和STAT1则与ICA诱导HL-60细胞分化无关。     

淫羊藿甙促进活性氧表达诱导甲状腺癌B-CPAP细胞凋亡的研究

背景与目的：淫羊藿甙(icariin,ICA),是从檗科淫羊藿属植物中提取的重要黄酮类活性化合物。研究表明,ICA对肺癌和胃癌等肿瘤有很好的抑制作用,有望开发为疗效较好的抗肿瘤药,但其作为有前景抗肿瘤药物在甲状腺癌中的研究较少,其作用机制罕见报道。该研究拟探究不同浓度ICA对甲状腺癌B-CPAP细胞系增殖凋亡、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)及抗氧化酶系统的影响,探究ICA对甲状腺癌活性影响机制是否具有浓度-时间依赖性。方法：采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度ICA对B-CPAP细胞系增殖的影响,采用流式细胞仪技术检测ICA对细胞凋亡及细胞内ROS的影响,采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒检测ICA对细胞内SOD表达影响,采用丙二醛(malondialdehyd,MDA)检测试剂盒检测ICA对细胞内MDA表达的影响,采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Bcl-2及γ-HA2X蛋白的表达。结果：ICA处理48 h后B-CPAP细胞活性降低,细胞凋亡率上升,呈剂量-时效依赖性(P＜0.01)。ICA 50和200 mg/L处理组ROS生成量依次是对照组(Control组)的(2.12±0.14)倍和(2.41±0.12)倍。ICA促进细胞膜脂质化产物MDA的累积,降低抗氧化酶SOD活性,活性比Control组下降(9.35±1.45)%和(21.5±1.52)%。ICA 200 mg/L处理组抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(13.64±1.71)%。结论：ICA具有良好的抑制甲状腺癌B-CPAP细胞活性的作用,并呈现剂量依赖性,其主要作用途径可能是促进细胞内ROS高表达,抑制SOD表达,抗凋亡蛋白Bcl-2低表达,导致细胞不可逆损伤,从而诱导细胞凋亡。     

曲古霉素A和淫羊藿甙诱导HL-60细胞分化过程中nm23和c-myc及G-CSF表达变化的研究

目的:研究曲古抑菌素A(TSA)、淫羊藿甙(ICA)诱导急性非淋巴细胞白血病HL-60细胞株分化过程中nm23基因的表达变化及其作用机制.方法:通过MTT试验检测HL-60增殖分化变化,观察细胞形态,分析表面标志和硝基四氮唑蓝(NBT)还原反应,观察HL-60细胞分化水平变化情况;通过流式细胞仪检测细胞周期的改变,RT-PCR检测nm23-H1、nm23-H2、G-CSF、c-myc基因表达的变化.结果:HL-60细胞经TSA、ICA作用后增殖受抑制,24、48和72h抑制率分别为(12.73±1.17)%、(38.15±3.32)%和(58.45±3.06)%,向成熟粒细胞系分化,细胞被阻滞在G1期,nm23、c-myc基因的表达下调,G-CSF基因表达上调.结论:HL-60细胞分化过程中c-myc基因的表达下调,G-CSF基因表达上调与下调nm23基因的表达有关.     

雷公藤多甙诱导HL-60细胞凋亡

目的：探讨雷公藤多甙对ＨＬ－６０细胞凋亡的作用。方法：应用细胞形态学检查,ＤＮＡ凝胶电泳及流式细胞仪分析检测。结果：ＨＬ－６０细胞加上雷公藤多甙１０ｍｇ／Ｌ孵育７２ｈ,流式细胞仪检测细胞凋亡率为２９．４％（与空白对照组比较,Ｐ〈０．０１）。电检查和光镜检查均可见细胞核固缩、碎裂等。ＤＮＡ电泳显示明显的梯状条带。结论：雷公藤多甙能诱导ＨＬ－６０细胞凋亡,提示雷公藤多甙可能具有抗白血病作用。     

人参茎叶总皂甙对人白血病细胞株的诱导分化作用

实验选用人参茎叶总皂甙(GSL)对人单核样白血病细胞株U937，早幼粒白血病细胞株HL-60进行了诱导分化作用的研究，结果表明：GSL对U-937细胞具有较强的诱导分化作用，形态及功能上均出现向单核细胞成熟分化的特征，并表现出分化后的细胞周期动力学的特征性变化。对HL-60细胞也有一定的诱导分化作用，但分化程度低于U-937细胞。     

淫羊藿甙逆转转化生长因子β ２免疫抑制作用的抗肿瘤研究 *

研究淫羊藿甙(ICA)对PG细胞分泌转化生长因子β ２(transforming growth factor β ２,TGFβ ２)的影响、ICA逆转TGFβ2介导的免疫抑制作用及其机制。方法: MTT法检测细胞增殖、杀伤活性,RT-PCR检测TGFβ 2、穿孔素,流式细胞术检测TGFβ ２、IL-２Ｒα水平。结果: ICA可抑制PG细胞中TGFβ 2的蛋白和mRNA表达,能够逆转受TGFβ 2抑制的LAK和CD3AK细胞的杀伤活性,并能部分恢复受TGFβ ２抑制的LAK细胞表面IL-2Rα表达和CD3AK细胞内穿孔素mRNA水平,以及CD3AK细胞的增殖活性。结论: 淫羊藿甙通过抑制肿瘤细胞免疫抑制因子TGFβ 2的产生,增强免疫效应细胞的杀伤活性等机制而发挥抗肿瘤作用。     

鲎血细胞多肽诱导HL-60 细胞凋亡时线粒体膜电位的变化

目的：探讨鲎血细胞多肽诱导HL-60细胞凋亡与线粒体膜电位变化的关系。方法：鲎血细胞多肽0、12.5,25、50、100μg/ml,分别处理HL-60细胞2、4、6、8、10、12、14小时，罗丹名123染色，流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化。结果：不加鲎血细胞多肽组处理0-14小时，线粒体膜电位稳定，鲎血细胞多肽12.5-100μg/ml各组均出现线粒体膜电位下降；线粒体膜电位的下降与鲎血细胞多肽浓度及作用时间相关。结论：鲎血细胞多肽诱导HL-60细胞凋亡与线粒体膜电位下降有关。     

c-myc特异性siRNA 对HL-60细胞作用的研究

目的研究针对c-myc基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对白血病细胞株HL-60细胞增殖及c-myc蛋白表达的影响,探讨应用siRNA进行白血病基因治疗的可能性。方法制备特异性对应c-myc基因的siRNA转染HL-60细胞,倒置显微镜观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞增殖状态,免疫细胞化学染色法检测c-myc蛋白表达的改变。结果siRNA转染HL-60细胞后,细胞生长受抑,增殖能力减弱,其增殖抑制作用于转染后48h、72h最明显,增殖抑制率分别为53.2%和51.5%;免疫细胞化学染色结果显示c-myc蛋白阳性率从空白组(76.67±4.35)%下降至(23.33±3.56)%。结论针对c-myc基因的siRNA对HL-60细胞增殖及c-myc蛋白表达有明显抑制作用,有望为白血病提供新的治疗途径。     

淫羊藿甙逆转转化生长因子β_2免疫抑制作用的抗肿瘤研究

目的：研究淫羊藿甙（ＩＣＡ）对ＰＧ细胞分泌转化生长因子β２（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒβ２,ＴＧＦβ２）的影响、ＩＣＡ逆转ＴＧＦβ２介导的免疫抑制作用及其机制。方法：ＭＴＦ法检测细胞增殖、杀伤活性,ＲＴ－ＰＣＲ检测ＴＧＦβ２、穿孔素,流式细胞术检测ＴＧＦβ２、ＩＬ－２Ｒα水平。结果：ＩＣＡ可抑制ＰＧ细胞中ＴＧＦβ２的蛋白和ｍＲＮＡ表达,能够逆转受ＴＧＦβ２抑制的ＬＡＫ和ＣＤ３ＡＫ细胞的杀伤活性,并能部分恢复受ＴＧＦβ２抑制的ＬＡＫ细胞表面ＩＬ－２Ｒα表达和ＣＤ３ＡＫ细胞内穿孔素ｍＲＮＡ水平,以及ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性。结论：淫羊藿甙通过抑制肿瘤细胞免疫抑制因子ＴＧＦβ２的产生,增强免疫效应细胞的杀伤活性等机制而发挥抗肿瘤作用。     

曲古抑菌素A促进As2O3诱导HL-60细胞分化与分子机制的研究

目的：研究曲古抑菌素A能否促进小剂量三氧化二砷（As2O3）诱导HL-60细胞分化并对其机制进行初步探讨.方法：用MTT实验测定药物对细胞增殖的变化;流式细胞仪检测细胞表面CD11b表达率观察药物对细胞的分化作用; RT-PCR方法检测p21和cyclin D3在mRNA水平的表达变化.结果：HL-60细胞经曲古抑菌素A和（或）小剂量As2O3作用24 h后,联合用药组较单用As2O3组能明显抑制细胞增殖,促进细胞分化,p21在mRNA水平表达增加,cyclin D3在mRNA水平表达降低.结论：曲古抑菌素A能促进小剂量As2O3诱导HL-60细胞的分化,其机制可能与细胞周期蛋白cyclin D3和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21的表达变化有关.     

维甲酸诱导分化白血病研究的现状与展望

维甲酸(Retinolc acid．RA)是最早被用来研究肿瘤分化诱导的化合物、也是最先获得临床治疗成功和国际认可的药物，1980年Breitman报告体外RA对人早幼粒白血病细胞株HL-60细胞与原代细胞增殖分化的影响。RA浓度在10^-6～10^-9M时均可HL-60细胞向终末阶段分化。