人νδT细胞细胞毒活性研究

细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤肿瘤细胞的作用是机体抗瘤机制的重要环节，也是肿瘤过继免疫疗法中的主要效应细胞之一。因此寻找能特异杀伤肿瘤细胞的CTL是目前肿瘤生物疗法中急待解决的焦点之一。νδT细胞是T细胞的另一亚类，大量的实验表明：这群细胞与LAK，NK细胞相似，其胞浆中富含穿孔素，     

一种简单γδT细胞扩增培养方法及其抗肿瘤生物学功能研究

目的 :建立一种特异快速地诱导扩增人外周血γδT细胞的方法 ,并比较了γδT细胞 ,NK和LAK细胞的抗肿瘤的生物学特性。方法 :收集用不同单抗分别包被粘附的细胞 ,然后通过MACS细胞分选仪的分选 ,获取的细胞进行细胞增殖动力学、细胞表型、细胞杀伤活性的测定以及单抗阻断效应的分析。结果 :经MACS分离得到的γδT细胞 ,培养 2周后细胞数扩增 6 0 0～ 80 0倍 ,CD3,CD8和γδ细胞表达阳性率分别是 72 .2 9% ,5 8.0 2 %和 6 5 .98%。γδT细胞对NK敏感细胞K5 6 2以及NK不敏感细胞Raji和XG 7这 3种不同靶细胞均有较高的杀伤率 ,分别为 35 .98% ,5 2 .2 7%和 6 9.0 8% ;NK细胞对此 3种细胞的杀伤率分别是 45 2 1% ,12 .34%和 11.94% ;LAK细胞的杀伤率分别为 44 .0 1% ,2 9.2 7%和 2 5 .6 8%。γδT细胞对经MHC Ⅰ类单抗阻断前后的K5 6 2 ,Raji和XG 73种靶细胞的杀伤率无明显改变。结论 :γδT细胞、NK细胞和LAK细胞都具有一定的非特异性杀伤肿瘤细胞的作用 ;γδT细胞对MHC Ⅰ类单抗阻断后的肿瘤细胞的杀伤无明显变化。提示γδT细胞较NK细胞和LAK细胞有更广泛的抗瘤谱     

NK细胞抗肿瘤免疫效应机制研究进展

自然杀伤(NK)细胞无需抗原预先致敏即可直接杀伤靶细胞，通常被视为机体免疫防御系统的第一道防线。NK细胞主要通过诱导靶细胞凋亡、释放效应细胞冈子、介导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)作用等途径杀伤肿瘤细胞。现综述近年来NK细胞在以上效应机制方面的研究进展。     

树突状细胞和自然杀伤细胞与肿瘤细胞端粒酶的研究进展

树突状细胞(DC)将人端粒酶逆转录酶(hTERT)提呈给T淋巴细胞,可激发特异性的细胞毒性T细胞和CD4+T细胞反应.自然杀伤(NK)细胞与肿瘤细胞端粒酶的相关研究较少,而DC和NK细胞共同作用可以增加抗肿瘤活性,有可能与端粒酶共同参与抗肿瘤免疫反应.     

血小板对外周血纯化、扩增的NK细胞杀伤K562细胞的影响

目的探讨血小板对外周血纯化、扩增的NK细胞杀伤作用的影响.方法使血小板与K562细胞在体外共孵育,以显微镜和流氏细胞仪检测血小板与K562细胞的粘附.从外周血单个核细胞中分离纯化、扩增NK细胞,以MTT法研究血小板对纯化、扩增的NK细胞杀伤活性的影响.结果K562细胞体外能结合血小板,粘附率达到25%±4.3%.纯化NK细胞总计数为2.53×107个,比例为46.8%;经扩增后NK细胞总计1.34×108个,比例增加到62.2%,扩增倍数达5.32倍.血小板比肿瘤细胞为250:1时,能减少NK细胞43.15%的杀伤作用.血小板比肿瘤细胞为1000:1时,能减少NK细胞84.05%的杀伤作用.结论血小板能粘附肿瘤细胞、抑制外周血纯化、扩增的NK细胞对K562细胞的杀伤作用.     

树突状细胞通过交互提呈IL-15预激活NK细胞

自然杀伤（NK）细胞又称大颗粒淋巴细胞，在机体的抗感染免疫以及肿瘤免疫中发挥着重要的作用。然而在生理和不同病理条件下，NK细胞活化的细胞和分子机制尚不清楚。该文作者利用树突状细胞（DCs）特异性删除小鼠模型，首次在体内证实了NK细胞同B细胞、T细胞一样，也需要归巢进入引流淋巴结；NK细胞在淋巴结中由DCs预激活后回到外周发挥效应功能。     

DC和NK细胞诱导的抗肿瘤CTL反应

细胞毒性T淋巴细胞（CTL）介导的细胞毒效应能够高效、特异性杀伤肿瘤细胞而不损伤周围组织。树突细胞（DC）是已知体内抗原提呈功能最强的抗原提呈细胞,能摄取各种抗原,体内外能激发T细胞增殖,诱导特异性CTL生成。自然杀伤（NK）细胞在由DC引起的抗肿瘤免疫中发挥重要作用。近年来NK-DC细胞的相互作用在CTL反应中的作用引起关注。现综述DC、NK细胞在诱导抗肿瘤CTL反应中作用的研究进展。     

DC和NK细胞诱导的抗肿瘤CTL反应

细胞毒性T淋巴细胞(CTL)介导的细胞毒效应能够高效、特异性杀伤肿瘤细胞而不损伤周围组织。树突细胞(DC)是已知体内抗原提呈功能最强的抗原提呈细胞,能摄取各种抗原,体内外能激发T细胞增殖,诱导特异性CTL生成。自然杀伤(NK)细胞在由DC引起的抗肿瘤免疫中发挥重要作用。近年来NK-DC细胞的相互作用在CTL反应中的作用引起关注。现综述DC、NK 细胞在诱导抗肿瘤CTL反应中作用的研究进展。     

体外扩增人脐带血来源的NK细胞对食管癌细胞的促凋亡作用

目的：建立体外扩增人脐带血来源的NK细胞的方法,并研究其对多株人食管癌细胞系和食管癌患者原代肿瘤细胞的杀伤作用。方法：分离人脐带血单个核细胞,加入放射线灭活的人白血病K562细胞及IL-2、IL-15、IL-18细胞因子体外扩增培养2周,诱导NK细胞。采用流式细胞术检测NK细胞的扩增效果及其产生的IFN-γ等细胞因子杀伤靶细胞K562的能力,并检测体外扩增的人脐带血来源NK细胞对多种食管癌细胞系和食管癌患者原代肿瘤细胞凋亡的影响。结果：利用放射线灭活的K562细胞联合多种细胞因子,可以有效的扩增人脐带血来源的NK细胞。体外培养2周后NK细胞比率可达80%左右,并对靶细胞K562有明显促凋亡作用。此外,体外扩增的人脐带血来源NK细胞能够促进6株人食管癌细胞系和食管癌患者原代肿瘤细胞的凋亡。结论：本研究建立了体外扩增人脐带血NK细胞的方法,并证实这些NK细胞对食管癌细胞的促凋亡作用,可能为食管癌的免疫治疗提供新的手段。     

NK细胞抗肿瘤免疫效应机制研究进展

自然杀伤(NK)细胞无需抗原预先致敏即可直接杀伤靶细胞,通常被视为机体免疫防御系统的第一道防线.NK细胞主要通过诱导靶细胞凋亡、释放效应细胞因子、介导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)作用等途径杀伤肿瘤细胞.现综述近年来NK细胞在以上效应机制方面的研究进展.     

细胞因子诱导杀伤细胞的抗肿瘤机制及其应用研究

 细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）为自然杀伤（NK）细胞活性的T淋巴细胞,具有抗肿瘤活性。研究发现,CIK细胞通过分泌细胞毒颗粒及细胞因子、活化NKG2D受体、调节癌基因表达等发挥抗肿瘤作用。CIK不仅杀伤肿瘤细胞,而且可提高肿瘤患者的免疫力,改善生活质量。国内外研究显示CIK治疗无明显不良反应,是肿瘤治疗的一种全新模式,因此,可广泛应用于临床。     

γδT细胞对血液肿瘤细胞的体外杀伤活性

目的:建立γδT细胞培养体系,探讨γδT细胞对不同血液肿瘤细胞的杀伤活性.方法:选取2016年1月至2016年4月在解放军第307医院造血于细胞移植科收治的4例B细胞淋巴瘤患者和该院5例体检健康志愿者,分别分离其外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用唑来磷酸(zoledronate,Zol)和IL-2体外扩增γδT细胞,采用流式细胞术检测γδT细胞对血液肿瘤细胞Jurkat、THP-1、HL-60、K562、Raji、U-937和RPMI-8226的杀伤活性,比较CIK、NK和γδT三种细胞对K562细胞的杀伤作用,检测γδT细胞IFN-γ、TNF-α的分泌水平及CD107a分子的表达水平.结果:成功在体外扩增外周血γδT细胞;γδT细胞对Jurkat、THP-1、HL-60、K562、U-937和RPMI-8226细胞均有明显的杀伤活性(P＜0.05);γδT细胞对K562细胞的杀伤活性与NK细胞无统计学差异,但明显强于CIK细胞(P＜0.01);随着与K562细胞共孵育时间的延长,γδT细胞分泌IFN-γ的水平呈现出时间依赖性增加,TNF-α在8h后逐渐增加;与K562细胞或HL-60细胞共孵育后,γδT细胞CD107a分子的表达水平均显著增加(P＜0.01).结论:体外扩增的γδT细胞对血液肿瘤细胞具有较高的杀伤活性,为血液肿瘤的细胞免疫治疗提供实验依据.     

非何杰金氏淋巴瘤来源的NK92细胞杀伤异种细胞的细胞模型建立

目的 建立非何杰金氏淋巴瘤来源的NK92细胞杀伤异种细胞的细胞模型。方法常规培养NK92细胞和猪内皮细胞(PEC)，利用MTT法检测NK92细胞对PEC细胞的杀伤效应，通过β-hexosaminidase释放实验显示杀伤过程中，NK92细胞的胞吐量。结果效靶比为10：1时作用时间6h，NK92细胞的胞吐量最大，对PEC的杀伤率为100％。结论NK92细胞杀伤异种细胞的细胞模型建立成功。     

体外扩增的NK细胞运载溶瘤呼肠孤病毒对结直肠癌细胞的杀伤效应

[摘要] 目的：评价体外扩增的人NK细胞能否作为呼肠孤病毒的运载细胞并探讨其临床转化应用价值。方法：体外扩增人NK细胞,用NK细胞装载呼肠孤病毒,激光共聚焦显微镜观察呼肠孤病毒与NK细胞结合的部位。NK细胞运载呼肠孤病毒（Reo-NK）到达肿瘤细胞后,CCK-8 法检测在中和抗体的存在下病毒发挥的溶瘤作用;qPCR法检测肿瘤细胞内病毒RNA的相对表达量。CCK-8 法检测Reo-NK对结直肠癌KRAS基因突变型（DLD-1）和野生型（CaCo-2、HT29）细胞株的杀伤效应,ELISA 双抗体夹心法检测NK细胞释放的穿孔素水平。结果：呼肠孤病毒主要结合于NK细胞膜上,在人AB型血清的存在下体外扩增的NK细胞可将呼肠孤病毒传递到肿瘤细胞,且传递后的呼肠孤病毒仍具有显著溶瘤活性（P<0.01）;同时检测到肿瘤细胞内病毒RNA的表达量显著增高（P<0.01）。与NK组相比,Reo-NK组对KRAS基因突变型和野生型结直肠癌细胞株的细胞毒作用均显著增强（P<0.05）,穿孔素的释放均明显增加（P<0.05）。结论：体外扩增的人NK细胞适合作为呼肠孤病毒的运载细胞,且呼肠孤病毒能够增强NK细胞的细胞毒作用,两者联合后对结直肠癌细胞可发挥更强的杀伤作用,因而具有重要的临床转化应用价值。     

miR-152影响NK细胞对JEG-3细胞的杀伤效应

目的:研究miR-152分子对NK细胞杀伤JEG-3细胞效应的影响。方法:在滋养细胞肿瘤细胞系JEG-3细胞中分别转染pre-miR-152(实验组),Cy3标记的pre-miRNA-control(阴性对照),空白对照(NC)为未转染的JEG-3细胞。转染48h进行NK细胞的细胞毒测定,观察各组NK细胞对JEG-3细胞的杀伤效应。结果:与对照组相比,实验组NK细胞对JEG-3细胞的平均杀伤率显著增高(P<0.05),且随着效靶比的增高,杀伤率也增大。空白对照组与阴性对照组之间的NK细胞杀伤能力无显著差异(P>0.05)。结论:miR-152可以提高NK细胞对滋养细胞的杀伤作用。     

脐血来源的DC增强NK和NKT细胞对白血病细胞的杀伤作用

目的:探讨脐血来源的树突状细胞(DC)增强自然杀伤(NK)细胞和自然杀伤性T(NKT)细胞对白血病细胞杀伤作用的影响机制.方法:提取脐带血单个核细胞(PBMC),体外诱导培养DC、NK和NKT淋巴细胞.以人髓性白血病K-562细胞作为靶细胞,检测NK、NKT、NK+DC和NKT+DC对靶细胞的杀伤效应.检测共培养上清液...     

细胞因子疗法增强NK细胞杀伤肿瘤细胞能力

自然杀伤细胞（Naturalkillercell，NK）是免疫系统中的哨兵，可以快速响应并杀死病变细胞。NK细胞是能针对和消除表面缺乏蛋白MHCI类的细胞，然而许多肿瘤细胞缺少这种蛋白，能抵抗NK细胞的监视和杀伤。     

树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞抗肿瘤研究进展

细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)是一种非主要组织相容性复合体(MHC)限制性的细胞毒性T淋巴细胞.CIK用于杀伤肿瘤被认为是肿瘤过继免疫治疗的首选方案.树突状细胞(DC)在肿瘤细胞和T淋巴细胞的相互作用中起到桥梁和枢纽作用.二者共同培养后,不仅提高了CIK的增殖能力和杀伤活性,并且治疗范围广泛,对多个系统的肿瘤均具有较强的杀伤作用.     

肿瘤逃逸NK细胞攻击的分子机制及逆转作用

通过分析NK细胞活化性受体、抑制性受体以及它们相应的配体，概括了NK细胞的天然肿瘤免疫监视功能和肿瘤细胞逃逸NK细胞杀伤的分子机制，在此基础上提出阻断NK细胞的抑制性信号，激发活化性信号，可以提高NK细胞的杀瘤效应，为肿瘤生物治疗探索新路。     

树突状细胞与自然杀伤细胞相互作用研究进展

最近树突状细胞(DC)和自然杀伤(NK)细胞的相互作用引起各国研究人员的注意。体内、体外试验均证实两种细胞相互作用产生细胞毒效应，并能激活、促进DC成熟和NK细胞增殖．这些相互作用的效嘘在免疫反臆中起重要作用。现综述NK—DC相互作用机制及意义的研究进展。