ATM基因与恶性肿瘤发生关系的研究进展

肿瘤的发生、发展与其相关基因的表达程度相关,其中ATM基因与肿瘤的关系尤其密切。共济失调毛细血管扩张性症(AT)是一种罕见的常染色体隐性遗传病,其致病基因——ATM(Ataxia-telangiectasia mutated)是一种肿瘤抑制基因,其与细胞周期的调控、细胞凋亡、细胞损伤(尤其是放射导致的DNA     

乳腺癌相关基因p16、PTEN、ATM的研究进展

乳腺癌已经超过肺癌成为全世界女性最常见的恶性肿瘤,据统计,2008年乳腺癌新发病例达138万,在欧美国家乳腺癌的发病率占女性恶性肿瘤发病的首位。目前我国虽属乳腺癌低发国家,但随着社会经济水平发展及人们生活方式西方化改变,其发病率增长迅猛,同时我国人口基数大,而且发病高峰年龄较欧美国家偏低,这些因素促使我国乳腺癌发病例数快速增加,严重威胁着广大女性的健康和生命。现有研究提示绝大部分肿瘤在分子水平上都会有基因异常变化,包括某些癌基因的激活、抑癌基因的失活及相关凋亡蛋白的异常,导致细胞的增殖分化异常,最终累积而导致肿瘤的发生。和其他类型肿瘤一样,乳腺癌基因相关性研究很多,但机制尚未完全阐述明确,应用到临床的也为数不多。但随着分子生物学的发展及国内外实验室技术水平的提高,通过对乳腺癌患者及易感人群的基因分析、治疗及预后相关基因的多态性研究,已经有了不少发现和成果。现对 p16、PTEN、ATM 3种抑癌基因的结构、作用机制及其与乳腺癌的相关性作一综述,以期对乳腺癌的基因研究提供一定帮助。     

PIK3CA基因在乳腺癌不同分子亚型中突变的研究

目的探讨PIK3CA基因在乳腺癌不同分子亚型中突变的关系。方法选取200例乳腺癌患者组织标本,其中luminal A、luminal B、HER-2过表达型、besal-like型各50例。提取DNA,用紫外光分光光度仪来测定浓度及含量,对exon9及exon20进行PCR扩增,扩增产物纯化后测序,另取20例乳腺腺病组织标本用作为对照,与基因库序列对比分析其突变的情况。结果200例乳腺癌组织中发现突变64例,突变率32％,其中exon9突变26例（40％）,exon20突变38例（60％）,在乳腺癌分子亚型中：luminal A型中22例（44％）,luminalB型中16例（32％）,HER-2过表达型20例（40％）,besal—like型6例（12％）,突变分布有统计学意义（P〈0．05）。在20例良性对照组中均没发现突变。PIK3CA基因突变与乳腺癌肿瘤患者肿瘤大小、年龄、淋巴结状态之间无明显相关性（P〉0．05）。结论PIK3CA基因在乳腺癌不同分子亚型中的突变有差异,与乳腺癌其他临床病理特征之间无明显相关性。     

细胞周期调控相关基因与乳腺癌发病机制的研究

目的了解细胞周期p21 waf1/cip1调控途径中p53、p21 waf1/cip1、cyclinD1、cyclin E基因在乳腺癌发病机制中作用及相互间关系.方法用免疫组化方法于17例乳腺良性组织、19例癌前病变、69例乳腺癌(20例导管内癌、49例浸润性导管癌)中检测4种基因蛋白表达,原位RNA分子杂交、原位DNA分子杂交方法于25例乳腺癌、15例癌前病变(大部为cyclinD1蛋白过表达)中检测cyclinD1 mRNA水平及基因状况.结果①p53在良性、癌前病变组织中失表达,在乳腺癌中阳性表达率为28%;②p21表达与p53表达无负相关性;③p21在乳腺癌中过表达率为29%;cyclinD1、cyclin E过表达率为46%、51%,显著高于癌前病变及良性组织;cyclinD1过表达与淋巴结转移、cyclinE过表达与肿块大小呈正相关;④cyclinD1蛋白过表达的乳腺癌中其相关的基因扩增率为32%;⑤p21表达与cyclinD1、cyclinE表达正相关.结论①突变型p53基因参与乳腺癌发生;②乳腺癌中p21表达不完全依赖于野生型p53基因;③正、负性调控因子p21、cyclinD1、cyclinE基因表达异常及cyclinD1基因异常是乳腺癌早期频发的分子事件,参与乳腺癌发生发展,证实了周期失控是肿瘤发生的重要机制;④基因扩增是cyclinD1 mRNA过表达及蛋白过表达的分子机制之一;⑤p21可能间接调控cyclinD1、cyclinE表达.     

乳腺癌变过程中的P53基因点突变

目的：探讨乳腺癌变、发展与P53基因点突变的关系。方法：应用聚合酶链反应－单链构象多态性（PCR－SSCP）方法对87例癌前状态、癌症初期、癌症后期及正常乳腺组织的P53基因5－8外显子点突变进行检测。结果：3例癌前状态、8例癌症初期和14例癌症后期者发生点突变（突变率分别为15．8％、34．8％和63．6％）,三者（亦即乳腺癌变、发展过程）P53基因突变率（统计学结果）呈明显渐进性。结论：P53基因突变是乳腺癌的早期、多发事件,是引起乳腺癌变、发展的因素和标志之一。     

乳腺癌中抑癌基因PTEN与cyclinD1的表达及意义

目的研究乳腺良性、恶性病变中抑癌基因PTEN及细胞周期调控因子cyclinD1的蛋白表达及临床病理特征的关系.方法应用免疫组织化学S-P法检测23例癌旁正常乳腺组织、28例乳腺增生组织(其中20普通型增生,8例非典型增生)、8例导管原位癌、98例浸润性乳腺癌组织PTEN和cyclinD1蛋白的表达,并进行微血管密度计数.结果非典型增生上皮和导管原位癌的PTEN蛋白水平高于正常乳腺腺上皮(P<0.01);浸润性癌组织中PTEN高表达率为49.0%,与正常乳腺组织比较差异有显著性(P<0.05),与增生的乳腺组织和导管原位癌组间差异无显著性.浸润性乳腺癌中PTEN的表达与分级、腋淋巴结转移、TNM分期、微血管密度计数均呈负相关,与cyclinD1蛋白表达呈负相关,PTEN表达低下时乳腺癌中cyclinD1蛋白的高表达率与腋淋巴结受累、组织学分级呈正相关,PTEN高表达时cyclinD1蛋白的高表达率与腋淋巴结受累、组织学分级无关.结论 PTEN与细胞周期调控因子cyclinD1表达的改变是乳腺癌发生的早期事件,共同参与乳腺癌的发生.PTEN的表达水平低下可作为乳腺癌分化和转移的一个潜在的生物学标志.CyclinD1对乳腺癌分化和腋淋巴结转移的影响可能部分受到PTEN的调控.     

应用非同位素PCR-SSCP方法检测乳腺癌p53基因点突变

目的　探讨乳腺癌组织中p53基因点突变。方法应用非同位素PCR -SSCP技术检测 4 8例石蜡包埋乳癌组织中p53基因点突变。结果　 4 8例乳腺癌中 2 0例出现异常电泳 ,表明这些病例相应DNA片段中发生了点突变 ,其中 8例位于第 5- 6外显子 ,9例位于第 7外显子 ,3例位于第 8外显子。免疫组化检测突变p53蛋白的表达 2 5例为阳性 ( 52 % ) ,其中 5例SSCP未发现基因突变 ,突变可能发生在所检测的基因片点以外。结论　非同位素PCR -SSCP是一简便、快速、有效的检测基因点突变的方法 ,特别适用于大量标本基因点突变的筛选 ;p53基因点突变与突变型蛋白表达呈相关关系     

p53基因与乳腺癌的相关性

乳腺癌居女性恶性肿瘤的首位，每年全球约有4JD万人死于该病，其发病率逐年上升。大量研究表明，癌基因(oncogene)、肿瘤抑制基因(抗癌基因)(tumour suppressor gene antioncogene)的异常与乳腺癌的发生、发展密切相关。乳腺癌的癌变过程中相关基因的改变具有重要的诊断和预后价值。在与乳腺癌有关的多项指标研究中，p53癌基因蛋白是判断原发性乳腺癌较好的指标。     

乳腺癌P53基因点突变的检测

目的：探讨Ｐ５３基因点突变检测在乳腺癌预后判断中的意义。方法：应用聚合酶链反应———单链构像多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）方法对３５例乳腺癌患者的Ｐ５３基因位点的点突变进行检测。结果：３例出现点突变，经ＤＮＡ序列分析，１例为第１３６密码子ＣＡＡ（Ｇｌｎ）被ＣＡＧ（Ｇｌｎ）替代，１例为第２２７密码子ＴＣＴ（Ｓｅｒ）被ＧＣＴ（Ａｌａ）替代，１例为第２７３密码子ＣＧＴ（Ａｒｇ）被ＣＡＴ（Ｈｉｓ）替代。结论：Ｐ５３基因突变可能是引起乳腺癌分化不良的因素之一，并可能预示着乳腺癌预后较差。     

乳腺癌中细胞周期素D1基因扩增和过表达及其与c-erbB-2的关系

目的：探讨细胞周期素D1基因和表达的改变在乳腺癌中的作用及其与c-erbB-2表达的关系。方法 采用原位分子杂交和免疫组织化学技术检测59例乳腺癌组织细胞周期素D1基因扩增、mRNA及其蛋白和c-erbB-2的表达。结果 27例（45．8％）细胞周期素D1蛋白过表达,其过表达与腋淋巴结转移相关（P＜0．05）。细胞周期素D1 DNA扩增、mRNA高表达和蛋白过表达三者基本一致,与c-erbB-2过表达无相关。结论 细胞周期素D1蛋白过表达在乳腺癌频发,其基因扩增和转不增加是其重要机制之一。细胞周期素D1和c-erbB-2在乳腺癌中各自发挥独立作用,两者同时检测更有助于判断预后。     

乳腺癌易患基因1、2基因突变的研究进展

乳腺癌作为女性常见恶性肿瘤之一,近年来,在国内外发病率逐年上升,且越发年轻化。在乳腺癌患者中,一部分表现出家族聚集性、发病早,且累及家系中多个成员。乳腺癌易患基因1、2(BRCA1、2)是乳腺癌遗传性易患基因。有研究证实,BRCA1、2基因参与乳腺癌的发生、发展过程,并在其中扮演重要角色。该文对国内外乳腺癌BRCA基因突变研究现状进行总结,并就BRCA基因突变在乳腺癌防治和预后方面的研究进展予以综述。     

乳腺癌患者 BRCA-1蛋白表达与 HER-2基因扩增的相关性

目的探讨乳腺癌组织乳腺癌易感基因1(BRCA-1)蛋白表达与原癌基因人类表皮生长因子受体2(HER-2)的基因扩增关系.方法分别采用免疫组化法和荧光原位杂交法检测84例乳腺癌(导管内癌32例,浸润性导管癌36例,纤维腺瘤16例)组织中的BRCA-1蛋白表达和HER-2基因扩增情况.结果BRCA-1蛋白阳性表达63例,阳性表达率为75.0%(63/84). BRCA-1蛋白表达与淋巴结转移有关(P<0.05).与不同组织类型无关(P>0.05). HER-2基因扩增阳性40例,HER-2基因扩增阴性44例.36例有淋巴结转移患者HER-2扩增阳性率为86.1%(31/36),明显高于48例无淋巴结转移患者的27.1%(13/48)(P<0.01). HER-2基因扩增阳性组BRCA-1蛋白阳性表达率为90.0%(36/40),高于HER-2基因扩增阴性组的22.7%(10/44)(P<0.01).结论BRCA-1蛋白表达、HER-2基因扩增与乳腺癌的发生发展有关,BRCA-1蛋白表达与HER-2基因扩增可能存在相关性.     

乳腺癌组织抑癌基因PTEN的表达及其意义

目的研究抑癌基因PTEN在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化技术（S-P）检测72例乳腺癌中PTEN的表达情况。结果PTEN总的表达缺失率为62.5%（45/72）。PTEN表达缺失率与乳腺癌的组织学分级,TNM临床分期,腋窝淋巴结转移和生存时间有关（P〈0.05）,而与肿瘤的大小和ER、PR状况无关。结论检测乳腺癌PTEN在蛋白水平的表达缺失状况可能有助于对其预后的判断。     

乳腺癌基因治疗的研究进展

我国乳腺癌发病率呈逐年上升趋势,已居女性恶性肿瘤的首位。尽管以手术治疗为主,多种治疗为辅的临床综合治疗模式明显提高了乳腺癌患者的生存率,但晚期和复发性乳腺癌的治疗仍是困扰临床医师的难题。随着乳腺癌相关基因研究的进展及靶向药物的临床应用,乳腺癌的基因治疗显示出了良好的应用前景,基因靶向治疗有望成为治疗晚期及复发性乳腺癌的有效手段。     

RNAi抑制Survivin基因的表达对乳腺癌SKBr-3细胞的影响

目的 应用RNA干扰技术抑制人Survivin基因表达,观察其对乳腺癌SKBr-3细胞增殖和凋亡的影响.方法 设计、合成靶向Survivin基因的siRNA基因片段,应用脂质体包埋转染乳腺癌SKBr-3细胞,采用MTT比色法检测细胞增殖率、RT-PCR和Western blot法观察乳腺癌细胞Survivin mRNA和蛋白质的表达、流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 MTt检测显示Survivin-siRNA组对细胞增殖有明显抑制作用(P<0.05),其细胞最高抑制率为(43.1±O.3)%;RT-PCR检测显示Survivin-siRNA组mRNA表达明显下调(P<0.01),其相对表达量分别为0.203 ±0.018、0.229±0.019,抑制率分别为55.2%、49.4%;Western blot检测显示Survivin-siRNA组蛋白表达下调(P<0.01),其蛋白相对表达量分别为0.702±0.007、0.684±0.016,抑制率分别为34.8%、36.4%;流式细胞仪检测显示Survivin-siRNA组细胞凋亡率明显增高(P<0.01),分别为(14.2±1.4)%、(16.8±0.6)%.结论 Survivin-siRNA能有效封闭Survivin的表达,抑制SKBr-3细胞增殖并诱导细胞凋亡,推测Sur-vivin基因可能成为乳腺癌基因治疗的一个新靶点.     

As_2O_3对K562 ATM/ATR基因表达和细胞凋亡的影响

目的探讨不同浓度As2O3对K562细胞ATM（Ataxia Telangiectasia Mutated）／ATR（ATM—Rad3-Related）基因表达的影响及相应的细胞周期变化和细胞凋亡机制。方法以不同剂量的As2O3作用于K562细胞株，RT—PCR半定量检测ATM／ATR基因表达，流式细胞术检测P53、AnnexinV和细胞周期。结果随药物浓度升高，ATM基因表达量增强而ATR基因表达量降低。P53水平升高，细胞凋亡显著，亚二倍体和G1期细胞数增多，S期和G2／M期细胞减少。不加入药物的K562细胞ATM和ATR几乎不表达。结论ATM和ATR基因表达变化呈As2O3浓度依赖的形式，且与P53水平、细胞周期和细胞凋亡率的改变相关。     

荧光原位杂交检测乳腺癌HER2基因的表达及其意义

目的：探讨荧光原位杂交（FISH）在检测乳腺癌组织HER2基因表达的临床意义。方法：应用FISH法对50例乳腺癌患者进行HER2基因检测,分析基因表达程度与临床特征之间的关系,比较基因和免疫组化（IHC）法蛋白表达的差异性。结果：FISH法与IHC法检测结果总符合率为88%,我院女性乳腺癌人群中HER2基因过表达率为44%,其过表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期之间差异无统计学意义（P〉0.05） 孕激素受体（PR）阳性组高于PR阴性组,差异有统计学意义（P〈0.01） 雌激素受体（ER）阳性组与ER阴性组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：HER2基因的过表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及ER无关,与PR成负相关。FISH法检测乳腺癌HER2基因敏感性及稳定性较高,可作为最终确诊HER2基因状态的方法。     

乳腺癌易感基因BRCA1在家族性乳腺癌中的表达

为探讨BRCA1在乳腺癌中的表达和在家族性乳腺癌中的作用，应用免疫组织化学S-P法检测BRCA1在家族及非家族性乳腺癌各42例中的表达。结果显示，在42例家族性乳腺癌中26例表达BRCA1，阳性表达率为61.9%。其中 ， ， ， 级分别为3、5、10、8例，平均发病年龄为38.6岁。在42例非家族性乳腺癌中仅5例BRCA1呈阳性，其阳性表达率为11.9%，其中 ， ， ， 级分别为0、1、2、2例，平均发病年龄为52.3岁。BRCA1的阳性表达率在家族性乳腺癌及非家族性乳腺癌中有显著性差异（P＜0.01)。结果表明：BRCA1在家族性乳腺癌的发生过程中可能起着十分重要的作用。其发病年龄有相对提前的趋势。研究BRCA1突变对阐明乳腺癌的发病机理及早期诊断具有重要的临床意义。     

乳腺癌转移基因的研究进展

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤。每年约有30%的乳腺癌患者发生癌细胞转移现象,导致发病率及死亡率上升,成为影响其疗效的主要原因。了解乳腺癌转移、侵袭相关基因对于预防和治疗乳腺癌转移具有重要作用。我们对近年来发现的乳腺癌转移、侵袭相关基因作一综述。     

改良荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER2基因

目的探讨改良荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization,FISH）技术在检测乳腺癌HER2基因中的应用。方法对52例经免疫组化（immunohistochemistry,IHC）法检测HER2的乳腺癌标本行改良FISH法检测HER2基因扩增情况,Kappa检验法对两种检测结果的一致性进行统计分析。结果改良FISH法成功率高,与IHC法检测结果一致性好,两者实际一致率为88.5%（K=0.757,P=0.000）。结论改良FISH技术可作为最终确诊HER2基因状态的方法 。