血神经屏障和Claudin-1蛋白在大鼠慢性神经病理性疼痛中的作用

目的:观察慢性神经病理性疼痛大鼠坐骨神经的血神经屏障(BNB)变化,并探讨紧密连接蛋白Claudin-1在其中的作用.方法:健康雌性SD大鼠分为3组:对照组(Control组)、假手术组(Sham组)和慢性坐骨神经压迫损伤组(CCI组).对照组不做处理;Sham组仅分离暴露大鼠右侧坐骨神经,不结扎;CCI组暴露大鼠右侧...     

脑实质内神经鞘瘤临床病理分析

目的探讨脑实质内神经鞘瘤的临床病理特征、免疫组化表型和鉴别诊断。方法报道1例罕见的脑实质内神经鞘瘤,并结合文献对其临床资料、病理特征、免疫组化表型及治疗和预后等进行分析。结果患者年龄44岁,肿瘤为单发,境界清楚。镜下肿瘤细胞呈梭形,形态温和,细胞排列呈栅栏状,可见典型Antoni A区和Antoni B区,未见核分裂象。免疫组化结果:S-100(+++),Vimentin(+),GFAP(灶+),Nestin(灶+),CK(-),EMA(-),Syn(-),NF(-),CD34(-),BCL-2(-),CD99(-),Neu N(-),Ki-67(2%+)。结论脑实质内神经鞘瘤发病罕见,较易误诊为转移瘤,诊断主要依靠组织形态学特征,影像学表现、免疫组化有助于和其他肿瘤鉴别诊断。手术完整切除可治愈。患者随访两年预后良好。     

17例骨肉瘤伴神经内分泌分析

目的 探讨骨肉瘤伴神经内分泌分化的形态特征和组织发生。方法 应用光镜、电镜观察组织学结构和细胞形态;应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）检测１７例骨肉７瘤中神经特异性烯醇化酶（ｎｅｕｒｏｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｅｎｏｌａｓｅ,ＮＳＥ）、嗜铬素Ａ（ｃｈｒｏｍｏｇｒａｎｉａ Ａ,ＣｇＡ）、突触素（ｓｙｎａｐｔｏｐｈｙｓｉｎ,ＳＹ）,和Ｓ－１００蛋白的表达水平。结果 ＮＳＥ、ＣｇＡ、ＳＹ和Ｓ－１００蛋白的阳性表达     

丁苯肽对慢性低灌注大鼠血-脑脊液屏障保护作用的研究

目的:观察慢性低灌注大鼠血-脑脊液屏障(BBB)通透性的变化及丁苯肽对其通透性的影响。方法:Wistar大鼠144只,双侧颈总动脉结扎方法制作慢性低灌注模型,随机分为假手术组,缺血组和丁苯肽组,各48只,于术后7、14、306、0 d(每时间点12只)比较各组大鼠脑组织BBB通透性。结果:伊文思蓝染色显示缺血组7 d亚组大鼠脑组织伊文思蓝含量显著高于假手术组(P0.01),高于丁苯肽组(P0.05),缺血组14 d亚组大鼠脑组织伊文思蓝含量高于假手术组和丁苯肽组(P0.05),30 d、60 d亚组大鼠脑组织伊文思蓝含量在各组间差异无统计学意义。结论:慢性低灌注状态下,大鼠的BBB通透性增高,丁苯肽可缓解BBB通透性的增高。     

17例骨肉瘤伴神经内分泌分化

目的探讨骨肉瘤伴神经内分泌分化的形态特征和组织发生.方法应用光镜、电镜观察组织学结构和细胞形态;应用免疫组织化学(ABC法)检测17例骨肉瘤中神经特异性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)、嗜铬素A(chromograniaA,CaA)、突触素(synaptophysin,SY)和S-100蛋白的表达水平.结果NSE、CgA、SY和S-100蛋白的阳性表达率分别为82%(14/17)、70%(12/17)、52%(9/17)和88%(15/17),阳性细胞率分别为25%、20%、21%和29%.阳性细胞的分布没有明显规律.17例电镜观察,在部分瘤细胞内均见神经内分泌颗粒.结论骨肉瘤伴神经内分泌分化起源于原始间叶细胞,并可分化为形态各异的瘤细胞.没有特殊的形态学特征.     

糖尿病酮症酸中毒兔血-脑脊液屏障的变化

目的　探讨糖尿病酮症酸中毒的血脑脊液屏障损伤机制。方法　新西兰家兔随机分模型组(n=6 )和生理盐水对照组 (n=6 )。模型组从耳缘静脉注射四氧嘧啶和链脲佐菌素各 15 0 mg/ kg,对照组给予等量生理盐水 ,72 h后检测血糖、尿酮体。两组静脉内均注射伊文氏蓝 ,6 h后检测动脉血气 ;处死动物 ,取脑组织用紫外分光光度计测定伊文氏蓝吸光度 (A) ,并观察光镜、超微结构、碱性磷酸酶细胞化学及诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)免疫组织化学结果。结果　 72 h后模型组 :血糖全部大于 17mm ol/ L,尿中出现酮体 ;伊文氏蓝 A值略增高 ,和对照组相比无显著性差异。组织学和超微结构观察模型组脑血管周围水肿 ,内皮细胞损伤 ,神经元变性、坏死。碱性磷酸酶细胞组化显示血管内皮上酶活性明显弱于对照组。免疫组化可见脑实质内血管壁上 i NOS染色阳性。结论　在四氧嘧啶和链脲佐菌素诱发的糖尿病酮症酸中毒动物模型中出现脑水肿 ,其产生与血脑脊液屏障的破坏及一氧化氮 (NO)参与有关。     

慢性高眼压模型大鼠血视网膜屏障损伤观察

目的观察慢性高眼压大鼠血视网膜屏障损伤情况。方法建立慢性高眼压大鼠模型,并检测眼压,分为A、B 2组。分别于1、4、8周时行股静脉注射30 g/L伊文思蓝,2 h后以温生理盐水灌注动物,立即摘除双侧眼球,A组行冰冻切片,荧光显微镜下观察;B组分离视网膜,称湿重,提取其内伊文思蓝,测光密度值,计算大鼠视网膜伊文思蓝渗透率。结果激光造模后大鼠眼压持续缓慢升高,与对照组存在显著差异;4周时眼压达最高值,为(24.8±3.2)mmHg;12周时眼压仍未见明显下降。激光后1、4、8周时荧光显微镜下观察视网膜内未见明显伊文思蓝渗透;1、4、8周时大鼠视网膜标准化EB含量分别为16.63±4.48、17.25±3.71、16.94±3.59(ng/mg),与对照组(12.16±3.32)ng/mg比较无显著差异。相关分析慢性高眼压大鼠视网膜通透率与眼压呈正的直线相关。结论慢性高眼压情况下尚不能破坏大鼠血视网膜屏障。     

以神经病变为表现的脑-面血管瘤病

【病例】　女 ,5 9岁。因发作性意识丧失 ,伴口唇及手指抽动 1年 ,加重伴右侧肢体活动受限及视物障碍 1天入院。病人于 1年前出现发作性意识丧失 ,伴口唇及右手指抽动 ,到多家医院就诊 ,行脑电图检查示中度异常伴性放电 ;头颅CT扫描示左额顶区脑皮质萎缩并钙化。拟诊为“癫     

缺血缺氧性血-视网膜屏障损伤机制及药物治疗的研究进展

缺血缺氧性血-视网膜屏障(BRB)损伤是许多眼病和某些全身疾病所共有的病理损害,严重损害患者视力。BRB损伤的发病机制目前尚不明确,近年来有文献报道,炎症反应以及血管内皮生长因子(VEGF)、色素上皮源性生长因子(PEDF)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、白细胞介素(IL)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎性因子与该病变的发生发展密切相关,应用糖皮质激素、抗VEGF抗体、非甾体类抗炎药(NSAIDs)、褪黑激素抑制炎症反应过程为保护BRB开辟了新的途径。本文就缺血缺氧性BRB炎症损伤机制及利用抑制炎症反应及炎性因子的方法治疗BRB损伤的机制进行综述。     

类似于神经变性疾病发病机制的部分神经胶质瘤的初步研究

目的 探讨神经胶质瘤的发生机制是否与部分神经变性疾病的形成存在某些共性.方法 收集通过病理检查证实的神经胶质瘤患者的脑组织标本12例和瘤旁正常脑组织,用免疫组织化学方法分别检测基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、Ubiquitin蛋白的表达情况.结果 神经胶质瘤组中检测到GFAP阳性12例;MMP-9强阳性3例、阳性4例、弱阳性1例,阴性4例;Ubiquitin强阳性3例,阳性7例,弱阳性1例,阴性1例.正常对照组中检测GFAP阴性11例、弱阳性1例;MMP-9阳性2例、弱阳性1例、阴性9例;Ubiquifin弱阳性2例,阴性10例.神经胶质瘤组织中Ubiquitin的阳性表达明显伴随着癌组织的较高分化(x2 =4.69,P＜0.05).结论 与神经变性疾病发病相关的Ubiquitin在神经胶质瘤中有较高表达提示部分神经胶质瘤的发生发展可能与神经变性疾病的发病机制有某些共性.     

丙泊酚对脓毒症小鼠血脑屏障损伤的影响

目的:探究丙泊酚对脓毒症小鼠血脑屏障(BBB)损伤的影响及可能的作用机制.方法:30只雄性SPF级C56BL/6小鼠随机分为对照(Con)组、脓毒症(LPS)组和丙泊酚(PF)组,每组10只.LPS组和PF组小鼠采用腹腔注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg)制备脓毒症小鼠模型,注射LPS后的即刻和6 h后给PF组小鼠...     

创伤性脑损伤后AQP4表达与血脑屏障通透性的关系

【目的】研究创伤性脑损伤（TBI）后水通道蛋白04（AQP4）的表达变化与血脑屏障（BBB）通透性之间的关系。[方法】健康成年Wistar大鼠,随机分成TBI组和假手术（S0）组。自由落体硬膜外撞击方法致重度脑创伤模型。S0组除不予以撞击外,其余操作与TBI组相同。分时段取脑,观察以下指标：①测创伤脑组织中伊文氏蓝（EB）外渗量;②透射电镜下观察创伤后BBB和细胞的超微病理改变;③免疫组化和原位杂交检测AQP4蛋白及其mRNA的表达变化;④氯化三苯四唑染色后,用图像分析软件测定每张脑片的面积和坏死区面积。【结果]BBB通透性、超微病理变化和坏死区体积百分比在s0组中变化不大。脑损伤后,BBB通透性增加,其增加有两个高峰,分别在TBI后12h和TBI后3d,以后者更明显。透射电镜下可见血管及其周围神经元、胶质细胞的超微结构有明显改变,在TBI后3d改变最明显。脑损伤后脑组织坏死区体积百分比增加,最大值也在TBI后3d。免疫组化和原位杂交显示,脑损伤后AQP4在脑组织中的表达逐渐上调,1d达高峰,持续至3d后下降,7d接近S0组水平。【结论】大鼠TBI后BBB通透性的增加与脑水肿的形成密切相关;TBI后BBB通透性增加,可能与AQP4表达上调有关,两者的变化影响TBI后脑水肿的发生、发展。     

自由落体致大鼠脑损伤后血脑屏障变化的研究

目的 用IgG免疫组化染色方法研究大鼠自由落体脑损伤后血脑屏障的变化。方法 复制大鼠自由落体脑损伤模型．在外伤后1h、6h、24h及7d时取脑组织．分别进行光镜、电镜检查，同时用IgG免疫组化染色方法观察血脑屏障的变化，并对免疫组化结果进行半定量分析。结果 大鼠自由落体脑损伤后，损伤部位出现片状出血及明显水肿，电镜观察显示有毛细血管内皮细胞损伤及星形细胞肿胀，免疫组化染色显示IgG在脑损伤后1h即有漏出，6h漏出最严重，持续至24h，7d时降低。结论大鼠脑损伤后出现血脑屏障通透性改变；IgG免疫组化染色是研究血脑屏障功能变化简单、敏感的方法。     

脑超声造影中超声强度对血脑屏障通透性的影响

目的探讨不同机械指数的诊断性超声在超声造影中对血脑屏障通透性的影响,以了解脑超声造影检查中超声强度的安全应用范围。方法50只清洁级SD大鼠,经尾静脉注射剂量为1ml/kg的“脂氟显”超声造影剂,辅以不同机械指数的超声进行辐照,观察超声照射后血脑屏障通透性的变化。结果在MI等于0.4时,血脑屏障通透性与对照组相比无统计学差异,当MI≥0.8时,血脑屏障通透性增加,且随着超声能量的进一步提高血脑屏障的通透性增加。结论高机械指数的体表超声在超声造影中可导致血脑屏障通透性增加,但应用适当强度的超声在进行大脑超声造影时仍是安全的。     

高频重复经颅磁刺激对大鼠神经元及血脑屏障超微结构的影响

目的:研究高频重复经颅磁刺激(rTMS)对大鼠神经元及血脑屏障超微结构的影响。方法:健康成年SD大鼠14只,随机分为对照组和rTMS组各7只,rTMS组以20 Hz、80%最大输出强度行rTMS,鼠脑中线旁左眼后眦与左耳前缘连线的中点接受最强磁刺激,每天1次,15 min。连续2周后取脑,制作超薄切片,在电子显微镜下观察神经元及血脑屏障的超微结构。结果:在刺激过程中,rTMS组未出现肢体强直、阵挛等异常活动。扫描电子显微镜下发现,rTMS组与对照组比较,神经元,核内染色质聚集边集,粗面内质网附着的核糖体数量和线粒体减少,部分线粒体水肿;毛细血管内皮细胞、基膜及周细胞出现明显水肿,部分神经元及毛细血管内皮细胞失去正常形态和结构。结论:长期高频rTMS可一定程度破坏大鼠神经元细胞器及血脑屏障。提示在将高频rTMS应用于大脑时应谨慎。     

Blood-Brain Barrier Water Permeability and Brain Osmolyte Content during Edema Development

Objective: To determine mechanisms that limit changes in brain water content during acute edema development. Methods: A controlled, laboratory investigation of the physiologic and biochemical correlates of osmotic edema was performed in rats. Hypoosmotic hyponatremia was induced by intraperitoneal injection of distilled water. Serum osmolality and electrolytes and regional blood-brain barrier water permeability surface area (P · S) product, osmolyte contents, and capillary size were determined during 120 minutes of hypoosmotic brain edema development. Cerebral water content predicted from these data using a mathematical model of brain water movements was compared with measured changes in brain water content. Results: Fifteen minutes after distilled water injection, mean ± SEM blood serum osmolality and sodium concentration decreased from 291 ± 3 mOsm and 131 ± 13 mmol/L to 267 ± 3 mOsm and 102 ± 9 mmol/L, respectively. Specific gravity of cerebral gray matter, cerebral white matter, and basal ganglia decreased throughout the hypoosmotic exposure period and, for gray and white matter, correlated with blood serum osmolality and sodium plus potassium content. Glutamate, but not glutamine, glycine, or taurine, decreased 120 minutes after water injection. The regional water P · S product decreased by 40% to 60% within 60 minutes of the water injection, while capillary diameters in gray and white matter were unchanged. Brain water movements calculated from the mathematical model correctly predicted actual brain water content only if the hydraulic conductivity of the blood-brain barrier was allowed to vary in proportion to the measured P · S product and the measured loss of brain osmolytes was incorporated into the formulation. Conclusions: During the first hours of hypoosmotic hyponatremia, changes in brain volume are limited by increased resistance to osmotic flux of water into the brain and reduction in the brain content of inorganic and, to a smaller degree, organic osmolytes.     

罗格列酮对家兔脑出血模型病灶周围内皮素-1表达 及血脑屏障通透性的影响

目的:探讨罗格列酮对家兔脑出血(ICH)模型血肿周围脑组织内皮素1(ET-1)表达及血脑屏障通透性的影响。方法:45只健康家兔随机分为正常对照组(NC组)、模型对照组(MC组)及罗格列酮灌注组(RSG组),各15只。自体血注入法制备基底核区ICH模型。造模后6 h,RSG组给予罗格列酮病灶区灌注,各组分别在处理后1、3和7 d处死,每时间点5只。处死前行Purdy神经功能评分,伊文思蓝法判断血脑屏障通透性,比较血肿周围脑组织ET-1表达,分析ET-1表达水平与血肿周围脑组织伊文思蓝含量及Purdy神经功能评分相关性。结果:与NC组比较,MC组和RSG组出现显著神经功能损害(P<0.05),病灶周围ET-1表达、血脑屏障通透性均显著增加(P<0.05);与MC组比较,RSG组神经功能损害减轻,病灶周围ET-1表达、血脑屏障通透性均降低(P<0.05);血肿周围脑组织ET-1表达水平与血脑屏障通透性及Purdy神经功能评分呈显著相关性(P<0.01)。结论:ICH后血肿周围脑组织ET-1表达及血脑屏障通透性增加,罗格列酮灌注治疗可降低血肿周围脑组织ET-1表达及血脑屏障通透性,减轻神经功能损害。     

MRS2179对大鼠缺血性脑卒中后MMP-9表达及血脑屏障通透性的影响

目的:观察P2Y1受体抑制剂MRS2179对大鼠缺血性脑卒中后MMP-9表达及血脑屏障(BBB)通透性的影响。方法:45只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、MRS2179组各15只。假手术组及模型组经侧脑室注射5μL人工脑脊液(aCSF),MRS2179组侧脑室注射5μL MRS2179(2 nmol)。制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,假手术组不予缺血。缺血再灌注24 h后,应用干湿重法检测脑组织含水量;伊文思蓝染料(EB)溢出量定量检测BBB通透性改变;Western blot法检测MMP-9蛋白表达。结果:模型组、假手术组、MRS2179组的脑含水量分别为(81.72±0.23)%、(77.65±0.27)%、(79.92±0.24)%(n=6),模型组高于假手术组(P<0.01);MRS2179组较模型组有所下降(P<0.01),但仍高于假手术组(P<0.01)。模型组梗死侧脑组织血管外EB溢出量为(1737.60±67.46)ng/g,显著高于假手术组(324.18±63.35)ng/g(P<0.01);MRS2179组梗死侧脑组织血管外EB溢出量为(1165.15±93.26)ng/g,较模型组明显下降(P<0.01)(n=6)。假手术组、模型组、MRS2179再灌注24 h梗死边缘区脑组织中相对MMP-9蛋白含量分别为(0.52±0.05)、(1.69±0.08)、(0.99±0.10)(n=3),模型组与假手术组相比明显升高(P<0.01),MRS2179组与模型组比较显著下降(P<0.01)。结论:P2Y1R抑制剂MRS2179可能通过降低MMP-9表达,降低BBB通透性,减轻缺血性脑卒中后脑水肿程度。     

实验性脑出血血肿周围血脑屏障超微结构的动态观察

【目的】动态观察实验性脑出血血肿周围血脑屏障的形态学变化。【方法】建立稳定的脑出血大鼠模型，观察脑出血后不同时间血肿周围血脑屏障超微结构变化。【结果】脑出血后24h，毛细血管内皮细胞出现肿胀；48h，内皮细胞高度肿胀，胞质突向管腔，紧密连接消失；d7血管内皮细胞胞膜、核膜溶解．核固缩．紧密连接开放、管周高度水肿，可见红细胞阻塞毛细血管。【结论】采取措施预防脑出血血肿周围血脑屏障的损伤，是脑出血治疗的一个重要方面。     

Focused Ultrasound Microbubble Destruction‐Mediated Changes in Blood‐Brain Barrier Permeability Assessed by Contrast‐Enhanced Magnetic Resonance Imaging

Objective. The purpose of this study was to use enhanced magnetic resonance imaging (MRI) to evaluate the changes of blood‐brain barrier (BBB) permeability in target and nontarget areas of rabbit brains after BBB disruption induced by focused ultrasound‐mediated microbubble destruction. Methods. Focused ultrasound (1.1 MHz) in combination with a sulfur hexafluoride microbubble contrast agent was applied at 2 or 3 target locations in 1 hemisphere of 29 rabbit brains to induce BBB disruption. The opposite side was used as a control, and a normal group contained another 14 rabbits that did not undergo sonication. The MRI signal intensity enhancement in the target locations was detected to evaluate gadolinium (Ga) retention after sonication, and extravasation of Evans blue (EB) dye was detected to evaluate the BBB disruption quantitatively at different times after sonication (0.5, 2, 4, 6, 8, and 24 hours and 1 week). Results. Compared with the control group, Ga retention, changes in EB content, and extravasation in the cerebral cortex of the sonicated group peaked at 2 hours (P < .01) and decreased to the normal level 8 hours after sonication (P < .01). There was no visual evidence of injury or hemorrhage within the brain parenchyma of all of the rabbits' treated hemispheres. Conclusions. Magnetic resonance imaging–guided focused ultrasound can disrupt the BBB reversibly and can allow targeted delivery of some molecules that normally cannot cross the BBB to locations in the brain. Changes in BBB permeability develop within minutes after sonication as a result of a combination of factors. The BBB has a self‐repairing characteristic, which is activated after ultrasound sonication. This may offer an improvement in future clinical applications for central nervous system diseases.