去甲斑螯素诱导K562细胞凋亡的影响

目的：探讨去甲斑蝥素（ＮＣＦＤ）对人白血病细胞株Ｋ５６２细胞增殖的抑制作用。方法：用流式细胞仪测定ＮＣＰＤ对Ｋ５６２细胞体外培养过程中细胞毒性、雕恨及细胞周期的影响。结果：ＮＣＴＤ对Ｋ５６２细胞有较强的增殖抑制使用。在作用２４小时后达到凋亡到凋亡高峰;２４小时各浓度ＮＣＰＤ作用后,Ｇ１期细胞百分数均减少,Ｓ期与Ｃ２＋Ｍ期阻滞现象。结论ＮＣＰＤ可诱导Ｋ５６２细胞凋亡,抑制瘤细胞分裂增殖,且有明显的时     

α—双炔失碳酯诱导人白血病K562细胞凋亡

目的：研究α－双炔先碳酯（Ａｎｏ）的抗肿瘤作用，方法：形态学研究分别应用光学显微镜和电子显微镜，细胞膜完整性检测用台盼蓝排除法，用流式细胞仪及琼脂糖凝电泳检测ＤＮＡ断裂，结果：Ａｎｏ２．５－５０μｍｏｌ．Ｌ＾－１处理Ｋ５６２细胞４８ｈ，细胞生长被明显抑制，５０μｍｏｌ．Ｌ＾－１时抑制率达６７％，细胞主要阻滞在Ｇ１期，处理后的细胞染色质凝缩，核断裂，体积缩小，呈典型的凋亡改变，Ｋ５６２细胞经Ａｎｏ５     

白血病骨髓间充质干细胞对K562细胞凋亡的影响

目的采用血清饥饿法诱导K562细胞凋亡,比较K562细胞与人白血病骨髓间充质干细胞(LMSC)共培养前后,K562细胞凋亡的变化,并进一步探讨其可能涉及到的信号转导通路(PI3K/Akt/Bad),为临床靶向治疗白血病提供依据。方法采用膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)荧光标记法检测血清饥饿后和与LMSC共培养后K562细胞凋亡的变化。蛋白印迹法检测与LMSC共培养后及加入磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性阻断剂LY294002后,K562细胞中Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的变化。结果 10%胎牛血清(FBS)培养时,K562细胞凋亡率为(4.87±0.09)%,FBS饥饿培养24h后,K562细胞凋亡率为(10.14±0.50)%,较10%FBS培养明显升高(P<0.05)。与LMSC共培养后,K562细胞凋亡率为(7.15±0.06)%,细胞凋亡率较FBS饥饿培养下降(P<0.05)。进一步蛋白印迹法检测发现,K562细胞在单独悬浮培养条件下,即有Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的表达;与LMSC共培养后,p-Akt、p-Bad的表达量显著升高(P<0.05),在共培养体系中加入PI3K特异性抑制剂LY294002后,p-Akt、p-Bad的表达量明显下降(P<0.05);而3组间Akt、Bad蛋白的表达量未见明显变化(P>0.05)。结论①LMSC能够抑制血清饥饿诱导的K562细胞凋亡。②其涉及到的信号转导通路可能为PI3K/Akt/Bad。③PI3K/Akt/Bad可作为白血病靶向治疗的新的作用靶点。     

东亚钳蝎毒诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的 研究东亚钳蝎毒（BMK）在体外诱导白血病细胞株K562凋亡的作用。方法 流式细胞仪检测细胞凋亡率，应用RT．PCR检测野生型p53基因的表达。结果 经BMK作用于细胞后，细胞的总凋亡率均有升高；RT—PCR检测提示经BMK作用后的K562细胞p53基因的表达上调。结论 BMK能诱导K562细胞凋亡，可能促进P53基因表达上调是其机制之一。     

白藜芦醇诱导K562细胞凋亡过程中活性氧水平的改变

目的：探讨白藜芦醇对K562细胞的凋亡诱导效应和对K562细胞内活性氧水平的影响。方法：应用噻唑蓝(MTr)比色法、光镜、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡；FCM测定细胞内活性氧(ROS)水平。结果：白藜芦醇显著抑制K562细胞增殖，并呈现典型的凋亡形态学改变；DNA电泳可见梯状条带出现；FCM分析显示S期细胞数明显增多，出现S／G，期阻滞，ROS水平升高。结论：白藜芦醇诱导K562细胞凋亡与细胞内活性氧水平升高有关。     

一叶秋碱诱导K562细胞凋亡

目的研究一叶秋碱（ＳＥＣ）能否诱导Ｋ５６２细胞凋亡。方法细胞增殖抑制采用ＭＴＴ法;形态学研究采用电子和荧光显微镜;流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测ＤＮＡ断裂。结果ＳＥＣ１０～１６０ｍｇ·Ｌ－１呈剂量依赖性抑制Ｋ５６２细胞增殖（ｒ＝０９６１３,Ｐ＜００５）;ＳＥＣ作用４８ｈ后,电镜下可见细胞膜完整,核染色质边聚和凋亡小体;荧光显微镜下核染色质凝聚成点状结构;流式细胞仪出现凋亡峰;ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳可见“梯状”图谱。结论ＳＥＣ可诱导Ｋ５６２细胞调亡。     

毫米波和阿霉素对K562细胞的影响

目的 :研究一种较好的毫米波和阿霉素的联合方法 ,用于白血病细胞的体外净化。方法 :将毫米波和阿霉素分别单独以及联合作用于K56 2细胞株 ,通过MTT测定细胞活力和流式细胞仪结合Annexin V/PI测定细胞的凋亡、坏死率来评价体外净化的效果。结果 :毫米波和阿霉素对细胞活力均表现出抑制作用 ,毫米波的抑制作用不呈现功率相关性 ,阿霉素的抑制程度呈现出浓度相关性 ;毫米波和阿霉素联合作用对K56 2细胞株的杀伤作用比单用阿霉素有显著性增加 (P <0 .0 1 )。结论 :毫米波和阿霉素联合作用于人白血病K56 2细胞能产生协同效应。     

DuP-697对K562白血病细胞凋亡诱导作用观察及机制研究

目的：观察选择性COX-2抑制剂DuP697对慢粒白血病K562细胞的凋亡诱导效应,并探讨其作用机制。方法：细胞培养加入DuP-697作用后,透射电镜观察细胞凋亡的形态,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,Western印迹检测K562细胞Caspase-8蛋白表达;用Z—IETD—FMK阻断Caspase8活性,以证实Caspase-8蛋白表达和细胞凋亡的关系。结果：DuP-697能诱导K562细胞凋亡,其作用呈浓度依赖性,这-效应与Caspase-8蛋白表达上调和裂解激活有关;用Z-IETD—FMK阻断Caspase-8的活性,细胞凋亡明显受抑。结论：DuP-697能诱导K562细胞凋亡,其机制涉及Caspase-8活化的信号转导途径。     

色胺酮对人白血病细胞株K562细胞增殖抑制、凋亡诱导的影响

目的探讨色胺酮(Tryptanthrin,Try)对人白血病细胞株K562细胞增殖和凋亡的影响。方法K562细胞进行常规培养后,利用MTT方法进行Try(1.56～50)mg.L-1的细胞增殖影响;Hoechst33258荧光染色观察细胞的形态学改变;流式细胞技术检测细胞周期及凋亡情况等指标;综合评价Try对K562细胞株增殖和凋亡的影响。结果Try在3.12～50mg.L-1浓度范围内能明显抑制K562细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性;Hoechst33258荧光染色及流式细胞仪结果显示,不同浓度Try作用48h后,K562细胞可发生明显的凋亡;同时Try也可影响K562的细胞周期,将细胞阻滞于G0/G1期,随Try剂量增大G0/G1期细胞比例也逐渐增高,并出现明显的亚二倍体凋亡峰;同时,S期细胞比例随剂量增大而逐渐降低。结论色胺酮能明显抑制K562细胞增殖并具有诱导K562细胞发生凋亡的作用。     

环孢菌素A诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的：本实验旨在观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响。方法：采用瑞氏染色、DNA电泳、流式细胞仪、TUNEL法观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响。结果：20μmol/L环孢菌素A作用24小时可诱导K562细胞凋亡，瑞氏染色呈瑞典型的凋亡形态学改变，DNA电泳呈“阶梯状”条带，流式细胞仪显示凋亡峰，细胞周期分析环孢菌素A可使K562细胞生长阻滞于G0－G1期，环孢菌素A处理组的凋亡率高于对照组（P＜0．01）。结论：环孢菌素A可诱导K562细胞株凋亡。     

硝普钠抑制K562细胞增殖并诱导细胞凋亡的实验研究

目的：观察外源性一氧化氮(NO)供体硝普钠对K562细胞增殖抑制及诱导细胞凋亡作用：方法：将不同浓度的硝普钠与K562细胞在体外培养，观察其作用时间效应和剂量效应；用活细胞计数、MTT法观察硝普钠对K562细胞增殖的抑制作用；用DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin—V／PI双标记和DNA片段原位末端标记法等分析细胞凋亡。同时设高铁氰化钾(PFC)对照组和空白对照组。结果：NO能抑制K562细胞生长，并在一定的剂量范围内呈现作用时间和剂量的量效关系．大部分细胞阻滞于G0／G1期；K562细胞与硝普钠作用后出现典型的细胞形态改变，DNA片断化，亚G1峰检出并显著增加，Annexin V／PI和DNA片段原位末端标记表达增加等均证实NO能诱导K562细胞凋亡。而对照组并无此类变化。结论：NO通过阻滞G0／G1期细胞显著抑制K562细胞的增殖，并有很强的致凋亡作用。     

乌索酸诱导K562/DNR细胞凋亡的实验研究

目的通过体外细胞实验,证实乌索酸对柔红霉素(DNR)诱导的K562耐药细胞株(K562/DNR)有细胞毒和诱导凋亡作用,并摸索出作用的最佳浓度和时间,为乌索酸治疗血液系统恶性肿瘤奠定理论基础。方法利用WST-8分析,研究不同浓度和作用时间的乌索酸对K562/DNR细胞的体外细胞毒作用情况;利用流式细胞仪技术,研究不同浓度和作用时间的乌索酸诱导K562/DNR细胞凋亡的情况。结果乌索酸对K562/DNR细胞增殖具有明显抑制作用,诱导凋亡作用亦显著,并呈现一定的时间、浓度依赖性。结论乌索酸对于K562/DNR细胞具有确切的抗肿瘤活性。     

人参皂苷compound K对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖抑制和凋亡诱导作用

目的探讨人参皂苷compound K（CK）对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖抑制和凋亡的影响。方法应用MTT法检测CK对K562细胞增殖的影响,用流式细胞仪分析细胞周期,DNA Ladder实验观察CK对K562细胞凋亡的影响。结果人参皂苷CK能显著抑制K562细胞的增殖,呈浓度依赖性,细胞阻滞于G2/M期;CK能诱导K562细胞的凋亡,呈浓度依赖性。结论人参皂苷CK具有抑制K562细胞增殖和诱导凋亡作用。     

人参总皂苷对白血病细胞K562凋亡及生存素表达的影响

目的探讨人参总皂苷（TSPG）对人白血病细胞株K562生长和凋亡的影响及其可能机制。方法采用噻唑兰比色法（Mar）观察TSPG对K562细胞生长的影响;流式细胞仪观察TSPG对细胞凋亡的影响;用RT-PCR检测TSPG诱导K562细胞凋亡中生存素（Survivin）基因的表达情况。结果TSPG对K562细胞生长有抑制作用,呈剂量依赖关系（P〈0．05）;10、100、200μg／ml组细胞凋亡率分别为16．67％、23．78％、33．98％,药物组与对照组差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）;随着TSPG浓度升高,Survivin基因的表达水平逐渐下调（P〈0．05）。结论TSPG可以抑制人白血病细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与下调Survivin基因的表达有关。     

灯盏花素促进阿霉素诱导的K562细胞凋亡

目的观察灯盏花素对淋巴细胞增殖和阿霉素致肿瘤细胞死亡的影响。方法MTT法检测细胞增殖,Western blot检测p53/bcl-2表达,Histone/DNA ELISA和流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA检测细胞色素C释放,分光光度法检测caspase-8和caspase-3激活。结果灯盏花素能增强小鼠淋巴细胞对阿霉素的抵抗,但促进阿霉素引起的K562细胞生长抑制、细胞色素C释放、caspase-8和caspase-3激活,上调其p53/bcl-2表达比率,增加细胞凋亡。结论灯盏花素有增强阿霉素抗肿瘤作用,激活肿瘤细胞凋亡通路可能是其化疗增敏的主要机制。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中血管内皮因子的变化

目的 通过观察三氧化二砷(As2O3)对人类慢性髓系白血病(CML)细胞株K562细胞的作用.探讨其治疗CML的作用机制.方法 将K562细胞与不同浓度As2O3共同孵育,于24、48、72 h用MTT方法检测K562细胞存活率,用AnnexinV-FITC检测凋亡细胞,同时用酶联免疫吸附法(ELISA)检测K562细胞上清液中血管内皮因子(VEGF)的浓度.结果 As2O3＜2 μmol·L-1时,对K562细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用与空白对照组比较,无统计学意义(P＞0.05);As2O3＞2 μmol·L-1时则具统计学意义(P＜0.05);在相同作用时间下,AS2O3 浓度升高对K562细胞的增殖抑制率及细胞凋亡率亦升高;当As2O3＞8 μmol·L-1时,对K562细胞的抑制及细胞凋亡率不再上升. As2O3＜2 μmol·L-1时上清液中VEGF浓度与空白对照组比较无显著性(P＞0.05);As2O3＞2 μmol·L-1时VEGF的浓度差异有显著性(P＜0.05),且随As2O3 浓度的增加VEGF浓度上升;当As2O3＞8 μmol·L-1时则变化不显著(P＞0.05).结论 As2O3可抑制K562细胞增殖,并具诱导凋亡作用, As2O3在2.0～10.0 μmol·L-1梯度浓度,作用在24～72 h时段,表现为时间和剂量依赖性,还可下调VEGF表达水平.     

BCR-ABL酪氨酸激酶抑制剂STI571选择性诱导K562细胞凋亡

目的 探讨STI571抑制慢性髓性白血病（CML）细胞株增殖的机理及特异性。方法 选用非特异性的凋亡诱导剂阿霉素和BCR－ABL阴性的白血病细胞株MO7E作为对照，观察两种抑制剂作用下两种细胞形态学的改变和胞浆DNA电泳图的改变。结果 STI571可诱导K562细胞凋亡，而对MO7E细胞无致凋亡作用；阿霉素可诱导MO7E细胞凋亡，而对K562细胞无诱导凋亡作用。结论 STI571通过阻断BCR－ABL酪氨酸激酶活力，促进K562细胞凋亡达到抑制细胞增殖的目的，而对不表达BCR－ABL的细胞株无诱导凋亡的作用，提示STI571的作用具有一定的特异性。     

异甘草酸镁对慢性髓细胞性白血病K562细胞系增殖的抑制作用

目的：观察异甘草酸镁对慢性髓细胞白血病K562细胞系增殖的抑制作用。方法：将异甘草酸镁以1640培养液倍比稀释成10,1,10-1,10-2,10-3,10-4,10-5,10-6g·L-1共8个浓度组,分别处理增殖期K562细胞,镜下观察不同时间点各浓度组细胞生长情况,应用CCK-8法检测细胞增殖能力,绘制生长曲线,计算抑制率和半数抑制浓度（IC50）。结果：在给药第3天,浓度大于10-3g·L-1的异甘草酸镁对K562细胞增殖具有抑制作用（P〈0.05）,细胞倍增时间为48h,并且具有时间和浓度依赖性。其中,10g·L-1和1g·L-1异甘草酸镁的抑制作用最强（P〈0.01）,IC50约为1.6g·L-1。结论：异甘草酸镁对K562细胞的增殖具有抑制作用,为临床应用异甘草酸镁预防和治疗白血病化疗相关肝损伤提供实验依据。