RO20-1724对氯胺酮重复麻醉致未成年大鼠认知功能障碍的影响

目的 评价RO20-1724对氯胺酮重复麻醉致未成年大鼠认知功能障碍的影响.方法 健康SD大鼠48只,21日龄,雌雄不拘,体重45～55 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=12):对照组(C组)、氯胺酮组(K组)、氯胺酮+ RO20-1724组(K+R组)和氯胺酮+无水乙醇组(K+A组).K组腹腔注射氯胺酮70 mg/kg,1次/d,连续7d;K+R组和K+A组腹腔注射氯胺酮70 mg/kg,30 min后分别腹腔注射RO20-1724 0.5 mg/kg或等容量无水乙醇,1次/d,连续7d.C组腹腔注射等容量生理盐水,1次/d,连续7d.采用Morris水迷宫实验测定认知功能,记录逃避潜伏期和穿越原平台次数.Morris水迷宫实验结束当日,每组处死6只大鼠,取海马组织,电镜下观察超微结构.Morris水迷宫实验结束当日,每组处死6只大鼠,取海马组织,测定海马磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(p-CREB)表达.结果 与C组比较,K组和K+A组第3天和第4天时逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,海马组织p-CREB表达下调(P＜0.05),K+R组逃避潜伏期、穿越原平台次数和p-CREB表达差异无统计学意义(P＞0.05);与K组比较,K+R组第3天和第4天时逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增多,海马组织p-CREB表达上调(P＜0.05),病理学损伤减轻,K+A组逃避潜伏期、穿越原平台次数和p-CREB表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 RO20-1724可改善氯胺酮重复麻醉致未成年大鼠认知功能障碍,其机制与上调海马p-CREB的表达.     

异氟醚麻醉对老龄大鼠海马β淀粉样蛋白生成、c-Jun氨基末端激酶和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白磷酸化的影响

目的 探讨异氟醚麻醉对老龄大鼠海马β淀粉样蛋白(Aβ)生成、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化的影响.方法 雄性SD大鼠96只,18月龄,体重450～500 g,采用随机数字表法,将其分为3组:正常对照组(C组)、1％异氟醚麻醉组(S1组)和2％异氟醚麻醉组(S2组).S1组和S2组分别吸入1％和2％异氟醚4h.每组取12只大鼠,麻醉后1d行Morris水迷宫实验,每组分别于麻醉后1 d(T1)、7 d(T7)取12只大鼠,行旷场反应实验,旷场反应实验结束后,处死大鼠,取海马组织,采用Western blot法测定Aβ、磷酸化JNK(p-JNK)和磷酸化CREB(p-CREB)的表达.结果 与C组比较,S1组和S2组逃避潜伏期延长,原平台象限探索时间比减少,S1组T1时总运动距离、离开边界距离和内环内距离延长,海马组织Aβ表达上调,p-CREB表达下调,T7时离开边界距离和内环内距离延长,海马组织Aβ表达上调,S2组T1时总运动距离、快速运动距离、离开边界距离延长和内环内距离延长,海马组织Aβ表达上调,p-JNK表达上调,p-CREB表达下调,T7时总运动距离、快速运动距离、离开边界距离延长和内环内距离延长,海马组织Aβ表达上调(P＜ 0.05或0.01).结论 异氟醚麻醉导致老龄大鼠认知功能减退的原因与其促进海马Aβ生成、JNK激活和抑制CREB激活有关.     

尼莫地平复合7.5%高渗盐水对七氟醚诱导老龄大鼠海马神经元凋亡的影响

目的探讨尼莫地平复合7.5%高渗盐水对七氟醚诱导老龄大鼠海马神经元凋亡的影响。方法健康雄性Wistar大鼠96只,18月龄,体重450~500g,采用随机数字表法将其分为四组(n=24):对照组(C组)、尼莫地平组(N组)、高渗盐水组(HS组)和尼莫地平+高渗盐水组(NHS组)。C组腹腔和尾静脉注射生理盐水;N组腹腔注射尼莫地平1 mg/kg,尾静脉注射生理盐水;HS组尾静脉注射7.5%高渗盐水4 ml/kg,腹腔注射生理盐水;NHS组腹腔注射尼莫地平1mg/kg,尾静脉注射7.5%高渗盐水4ml/kg。30min后四组大鼠吸入3%七氟醚2h。于麻醉前1d、麻醉后1、3、7d行Morris水迷宫实验,实验结束后每组随机处死8只大鼠,取海马组织,采用流式细胞术测定海马神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度;采用RT-PCR法测定海马Bcl-2、Bax的mRNA表达量。结果与C组比较,N、HS、NHS组大鼠麻醉后1、3、7d逃避潜伏期明显缩短,穿越原平台次数明显增加,麻醉后1、7d海马神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度明显减低,Bcl-2 mRNA表达量明显上调,Bax mRNA表达量明显下调,Bax/Bcl-2比值明显降低(P0.05);与NHS组比较,N和HS组大鼠麻醉后1、3、7d逃避潜伏期明显延长,穿越原平台次数明显减少,麻醉后1、7d海马神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度明显增高,Bcl-2 mRNA表达量明显下调,Bax mRNA表达量明显上调,Bax/Bcl-2比值明显升高(P0.05)。结论尼莫地平复合7.5%高渗盐水可抑制钙超载,降低七氟醚诱导老龄大鼠海马神经元凋亡率,且其作用优于单独给药。     

吸入不同浓度异氟醚对老龄大鼠海马细胞色素c表达的影响

目的 评价吸入不同浓度异氟醚对老龄大鼠海马细胞色素c(Cyt c)表达的影响.方法 健康雄性老龄SD大鼠63只,月龄20月,体重500～600 g,随机分为3组(n=21),对照组(C组):吸入30%氧气2 h;0.75%异氟醚组(L组):吸入0.75%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h;1.5%异氟醚组(I2组):吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h.分别于麻醉30 min、1和2 h时,各组取5只大鼠,取动脉血样行血气分析.于麻醉结束后24 h时,各组取8只大鼠,测定认知功能;取8只大鼠,分别采用免疫组化法和Western blot法测定海马Cyt c 的表达水平.结果 与C组比较,Ⅰ1组和Ⅰ2组逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,穿越原平台次数减少,海马Cyt c表达上调(P＜0.05);与Ⅰ1组比较,Ⅰ2组逃避潜伏期、原平台象限停留时间缩短和穿越原平台次数差异无统计学意义(P＞0.05),海马Cyt c表达上调(P＜0.05).结论 吸入异氟醚可通过上调海马Cyt c的表达导致老龄大鼠认知功能障碍.     

手术创伤对不同月龄大鼠认知功能及海马小胶质细胞活化的影响

目的 评价手术创伤对不同月龄大鼠认知功能和海马小胶质细胞活化的影响.方法 健康雄性SD大鼠72只,3～4月龄,采用随机数字表法,将其分为2组:成年对照组(n=30)和成年手术组(n=42).健康雄性SD大鼠72只,18 ～ 20月龄,采用随机数字表法,将其分为2组:老年对照组(n=30)和老年手术组(n=42).手术组腹腔注射5%水合氯醛4～6 ml/kg麻醉下行剖腹探查术,对照组腹腔注射生理盐水1 ml/kg.于术后1～7d开始行水迷宫实验,术后1d采用条件恐怖适应实验检测大鼠术后空间和恐怖记忆能力,术后第1、3、7天时处死大鼠,取海马,采用免疫组化法检测小胶质细胞OX42表达.结果 与成年对照组比较,成年手术组大鼠僵直时间占总时间百分比降低,术后第1天海马小胶质细胞OX42表达上调(P＜0.05),逃避潜伏期及穿过原平台次数差异无统计学意义(P＞0.05);与老年对照组比较,老年手术组大鼠逃避潜伏期延长,穿过原平台次数减少,僵直时间占总时间百分比降低,术后第1和3天海马小胶质细胞OX42表达上调(P＜0.05).结论 手术创伤可降低成年大鼠恐怖记忆能力,但对空间记忆能力影响不明显;手术创伤可降低老年大鼠空间及恐怖记忆能力,与海马小胶质细胞活化有关.     

地塞米松对老龄大鼠术后认知功能的影响

目的 评价地塞米松对老龄大鼠术后认知功能的影响.方法 雄性SD大鼠180只,18 ～ 20月龄,体重400 ～ 600 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=60)∶对照组(C组)、手术组(S组)和地塞米松组(D组).采用大鼠剖腹探查手术模型.D组于麻醉开始时腹腔注射地塞米松10 mg/kg.C组不进行手术,腹腔注射生理盐水2 ml/kg.于术后3h、7d时测定海马OX42(小胶质细胞激活特异性标志物)的表达水平；于术后3h、1d、3d和7d时测定海马IL-1β mRNA和TNF-α mRNA的表达水平.采用Morris水迷宫实验和条件恐怖适应实验检测大鼠术后认知功能.结果 与C组比较,S组和D组逃逸潜伏期延长,穿越原平台次数减少,术后僵直时间缩短,海马OX42表达、IL-1β mR-NA和TNF-α mRNA表达上调(P＜0.05或0.01)；与S组比较,D组逃逸潜伏期缩短,穿越原平台次数增多,术后僵直时间延长,海马OX42、IL-1β mRNA和TNF-α mRNA表达下调(P＜0.05或0.01).结论 地塞米松可抑制海马小胶质细胞过度激活,减轻炎性反应,从而改善老龄大鼠术后认知功能.     

右美托咪定预先给药对七氟烷麻醉下发育期大鼠海马神经元自噬的影响

目的评价右美托咪定预先给药对七氟烷麻醉下发育期大鼠海马神经元自噬的影响。方法清洁级健康SD大鼠36只, 雌雄不限, 7日龄, 体重12～15 g。采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、七氟烷组(S组)和七氟烷+右美托咪定组(S+D组)。出生第7～9天S+D组每天腹腔注射右美托咪定25 μg/kg后行3%七氟烷暴露(吸入氧浓度29%, 氧流量2 L/min, 2 h/d);S组腹腔注射等体积生理盐水后行七氟烷暴露;C组腹腔注射等体积生理盐水后行混合气体暴露。于大鼠出生20 d时开始Morris水迷宫训练, 进行定位航行实验和空间探索实验。水迷宫实验结束后, 麻醉大鼠处死后取海马, 采用Western blot法检测自噬微管相关蛋白轻链3抗体(LC3)、BECN1和P62的表达。结果与C组相比, S组和S+D组逃避潜伏期延长, 穿越原平台位置次数减少, 海马LC3和BECN1表达上调, P62表达下调(P<0.05);与S组相比, S+D组逃避潜伏期缩短, 穿越原平台位置次数增加, 海马LC3和BECN1表达下调, P62表达上调(P<0.05)。结论右美托咪定...     

异丙酚重复麻醉对新生大鼠海马CaMKⅡα表达的影响

目的 探讨异丙酚重复麻醉对新生大鼠海马钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱα(CaMKⅡα)表达的影响.方法 新生7d健康SD大鼠42只,体重12～16 g,雌雄各半,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=21):对照组(C组)和异丙酚重复麻醉组(P组).C组腹腔注射生理盐水7.5 ml/kg,连续7 d;P组腹腔注射异丙酚75 ml/kg,连续7d.出生后28 d时采用Morris水迷宫实验检测认知功能.水迷宫实验结束24h时断头处死大鼠,取脑组织,分别采用免疫组织化学法和Westernbolt法检测海马CAI区CaMKⅡα及磷酸化CaMKIⅡα(pCaMKⅡα)的表达.结果 与C组比较,P组逃逸潜伏期延长,空间探索时间缩短,海马CA1区CaMKⅡα和pCaMKIIα表达下调(P＜0.01).结论 异丙酚重复麻醉降低新生大鼠认知功能的机制可能与下调海马CaMKⅡα的表达和抑制其活性有关.     

异氟醚对老龄大鼠海马蛋白质组的影响

目的 探讨异氟醚对老龄大鼠海马蛋白质组的影响.方法 清洁级老龄雌性SD大鼠75只,22月龄,随机分为对照组(C组,n=35)和异氟醚组(I组,n=40).C组吸入含40%氧气的空气2 h,I组通过异氟醚挥发罐的调节使麻醉箱内异氟醚浓度为3%,待翻正反射消失后将异氟醚浓度降至1.2%,维持2 h.I组苏醒后24 h采用Y型迷宫实验检测认知功能,麻醉结束后24 h和72 h分别随机取5只大鼠,取海马行双向凝胶电泳和质谱分析.结果 与c组比较,I组麻醉结束后24 h和48 h正确反应次数和主动回避次数降低,全天总反应时间延长(P＜0.05);学习能力I组低于C组(P＜0.05).2组麻醉结束后24 h差异表达蛋白17种,其中6种蛋白质表达上调,11种蛋白质表达下调;2组麻醉结束后72 h差异表达蛋白16个,其中10种蛋白质表达上调,6种蛋白质表达下调.结论 异氟醚麻醉后早期老龄大鼠认知功能下降具有可逆性,这种现象可能与海马蛋白质组变化有关.     

异氟醚对老龄大鼠海马CA3区突触素表达的影响

目的 评价异氟醚对老龄大鼠海马CA3区突触素表达的影响.方法 雌性清洁级SD大鼠63只,月龄24月,体重400～650 g,随机分为3组(n=21):对照组(C组)、1.2%异氟醚组(E_1组)和1.8%异氟醚组(E_2组).C组吸入含40%氧气的空氧混合气体3 h;E_(1,2)组吸入3%异氟醚行麻醉诱导,待翻正反射消失后再分别吸入1.2%、1.8%异氟醚维持3 h.各组随机取12只大鼠,于麻醉结束后第1天采用Morris水迷宫系统测定大鼠认知功能(逃避潜伏期和探索时间),连续测定7 d;随机取9只大鼠于麻醉结束后第1、3和7天处死,测定海马CA3区突触素的表达水平.结果 与C组比较,E_1组和E_2组麻醉结束后第2、3天逃避潜伏期延长(P<0.05或0.01),第4～6天逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),麻醉结束后海马CA3区突触素表达持续下调(P<0.05).三组探索时间比较差异无统计学意义(P>0.05);与E_1组比较,E_2组逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),海马CA3区突触素表达下调(P<0.01).结论 异氟醚致老龄大鼠认知功能障碍与海马突触素表达无关.     

Culture and characterisation of human urothelium in vivo and in vitro

The aim of this study was to culture human urothelium and generate enough cells for subsequent reconstructive surgery. Using a modification of the Rheinwald-Green method for the routine culture of keratinocytes from patients with burns, we successfully cultured 91% of 57 biopsies from the renal pelvis, ureter, bladder and urethra of paediatric patients. The cells could be split one to three up to 9 times at 7–10 day intervals, giving a surface area of 1000 cm² after a 2 month culture period. Primary cultures could not be initiated in defined medium MCDB153, although cells initiated using the Rheinwald-Green method could subsequently be propagated in this medium. Cytokeratin patterns in vitro were similar to those in vivo in the expression of keratins 7, 18 and 19 (characteristic of simple epithelia) and keratin 13 (characteristic of non-cornified stratified epithelia). Cultured urothelium also expressed keratin 14 (characteristic of cornified stratified epithelium) in about 25% of cells and keratin 16 (characteristic of fast-growing cells). These findings indicate that urothelial cells can be propagated in vitro for autologous grafting, and the next step is to identify substrates suitable for urothelial cell growth and differentiation and surgical manipulation.     

血栓弹力图在普通外科围手术期静脉血栓栓塞症防治中应用及价值

尽管静脉血栓栓塞症(VTE)是外科手术病人可防控的潜在并发症和致死的主要原因,但临床对其认识仍不充分,也缺乏特异性的识别工具,对机械预防和药物预防的反应也很小。因此,迫切需要特异性更好的工具来评估VTE的风险。此外,监测抗栓药物疗效以达到最优效果也是必须的。或许,血栓弹力图能够提供一些帮助。     

PTCH和SMO在大鼠肝癌中的表达及意义

目的：探讨PTCH和SMO两种基因在大鼠肝癌中的表达及其意义。
方法：用二乙基亚硝胺诱导SD大鼠肝癌模型,实时荧光定量PCR法检测大鼠肝癌组织及相应癌旁良性组织中PTCH mRNA和SMO mRNA的表达。
结果：13例肝癌癌组织中与其旁良性组织PTCH mRNA表达量为6.33±0.62与7.18±0.99,而SMO mRNA表达量为7.93±1.00与8.76±0.83,两组间均有统计学差异（P＜0.05）。
结论：PTCH和SMO是Sonic Hedgehog（SHH）信号通路激活的重要因子;SHH通路可能参与肝癌的发生。

     

我国基层骨质疏松症防治的问题及策略

人口老龄化势不可挡，慢性非传染性疾病（以下简称“慢病”）已成为严重影响人民健康安全的公共卫生问题。骨质疏松症作为一种增龄性的慢病，有着发病率高、致残率高、医疗费用高、病程长、疗程长、生存质量低的特点，社会关注度仍旧不足。基层医疗机构（以下简称“基层”）作为我国医疗体系中的重要组成部分，在防治骨质疏松症中起着至关重要作用。然而基层仍存在知晓率低、药物选择不明确、自我定位不清晰、医疗信息共享平台尚未建立及人才水平有待提高的问题。本文结合基层的实际情况及特点，认为中西医结合的防治模式是关键，提出“营养、阳光、运动”六字方针，建议不断推进学科及学术组织建设，加强公众健康教育及基层医务人员继续教育，呼吁骨质疏松症纳入慢病管理，推进分级诊疗，以实现全程管理及综合管理。     

刺激内关穴和足三里穴防治术后恶心呕吐的研究进展

背景 术后恶心呕吐(postoperative nausea and vomiting,PONV)是术后最常见的并发症之一,可引起刀口裂开、水电解质紊乱等并发症.大量的研究成果表明针刺对PONV具有很好的预防作用. 目的 概述PONV的发生机制和危险因素,以及针刺内关穴(PC6)和足三里穴(ST36)对PONV防治作用的临床应用进展. 内容 针刺PC6和ST36可以减少PONV的发生及严重程度,也可以减轻患者术后的疼痛. 趋向 针刺PC6和ST36对PONV具有很好的疗效,而且其生理干扰小、无创、安全,可以被很好地应用于PONV的防治.     

骨质疏松症的中医病因病机认识与治疗进展

随着我国骨质疏松症的发病率逐年增加,防治形势变得更加严峻,目前单纯的西医药物防治骨质疏松症尚存在各种不良反应与疗效不确切等问题,这为临床上通过其他方式寻找满意的治疗方法提出了迫切的要求。中医药对骨质疏松症的病因病机有独到的见解,其治疗方法也是多种多样,笔者对近年来与骨质疏松相关的中医药研究概况作一总结,为中医药治疗骨质疏松的研究提供理论及临床依据。     

人和小鼠Dspp基因的克隆及其在成牙本质细胞中的表达检测

目的 克隆人和小鼠牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因片断,建立一种从分子水平检测成牙本质细胞分化的方法.方法 制备特异性的人和小鼠Dspp基因片断的mRNA反义探针,再将其分别与人和小鼠具有成牙本质细胞的牙胚组织进行原位杂交,检测Dspp基因表达情况.结果 本实验制备出的人和小鼠Dspp基因的mRNA反义探针在特定条件下能对各自的成牙本质细胞中Dspp基因的表达进行检测.结论 本方法可以作为一种从分子水平检测人或小鼠成牙本质细胞分化的工具.     

新型冠状病毒肺炎疫情期间创伤显微外科病区的感染防控经验

目的总结新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情期间创伤显微外科病区的感染防控经验。方法回顾性分析2019年12月31日至2020年2月14日期间武汉大学中南医院创伤与显微骨科51名医务人员和收治患者感染COVID-19的情况。2020年1月20日升级感染防控措施,包括病区的预防性消毒、终末消毒及人员消毒管理,急诊患者管理,住院患者管理,疑似患者管理,医务人员的培训、防控管理及心理干预。对比2020年1月20日前后不同感染防控措施的结果。结果2019年12月31日至2020年1月20日期间科室共有COVID-19确诊病例3例,疑似病例2例。确诊病例包括1名医师、1名技师、1名护士,疑似病例包括1例患者、1名护士。截至2020年2月14日,4名医护技人员均已治愈出院,1例患者死亡。从2020年1月20日感染防控措施升级后,科室共收治29例急诊患者,其中12例患者出现发热(体温≥37.3℃),无一例患者感染COVID-19;科室在岗的47名医务人员培训率达100%,无一名医务人员感染COVID-19和出现心理疾患。结论COVID-19疫情期间,随着疫情的变化,科室采取的感染防控措施不断调整升级,最终科学、有效地杜绝了院内感染的发生,保障了科室医务人员及患者的生命安全。