脾切除对肝再生及肝细胞凋亡影响的实验研究

目的 探讨脾切除对正常肝、纤维化肝行肝部分切除术后肝再生和肝细胞凋亡的影响。方法建立小白鼠肝纤维化模型;正常小白鼠、肝纤维化小白各分为肝部分切除加脾切除组、肝癌切除保留脾脏组。有肝再生指数、增殖细胞核抗原阳性细胞指数、细胞凋亡指数、谷丙转氨酶作为指标,分别于术后第２４小时、３天、７天评价脾切除对肝再生和肝细胞凋亡的影响。结果 肝再生指数、有丝分裂指数、增殖细胞核抗原阳性细胞指数、正常和肝纤维化小鼠     

缺血预处理对大鼠肝大部切除后肝再生基因表达谱的影响

目的 应用基因芯片研究大鼠肝缺血预处理后残存肝组织再生过程中基因表达谱的动态变化.方法 Sprague-dawley(SD)大鼠肝在缺血冉灌注前行缺血预处理(10 min缺血后10 min再灌注),再灌注期间行70%肝叶切除建立余肝再生模型,用affmetrix RAT CeneArray 1.0 ST基因表达谱芯片筛选大鼠再生肝组织中差异表达基因进行功能分析及归类.结果 再生肝组织有差异表达基因1103条,涉及代谢相关基因、细胞周期调控基因、炎症反应相关基因、凋亡相关基因、信号传导相关基因、细胞因子相关基因、生长因子基因等,差异表达基因显著性的表达趋势有7种.结论 缺血预处理后肝再生的过程是多基因调控的动态变化过程,用基因芯片有助于研究肝再生的机制,为促进肝再生提供治疗的潜在靶点.     

外源性Noggin对肝大部切除大鼠肝再生率的影响

目的探讨外源性Noggin对肝大部切除大鼠肝再生率的影响。方法80只雄性Wistar大鼠,取72只行肝大部切除术（PH）,随机分为生理盐水组（NS）、Noggin低剂量组（NL）和Noggin高剂量组（NH）,余8只为正常对照组（NC）。以Nc组为0h观察点,在PH后12h、48h、72h测定肝再生率、骨形成蛋白2（BMP2）含量。结果PH后NS、NL、NH组肝再生率逐渐增高,NL、NH组与NS组间在12h差异有统计学意义（P〈0．01）。PH后NS、NL、NH组肝组织匀浆BMP2含量在12h降至最低,此时NL、NH组与NS组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论外源性Noggin显著抑制肝大部切除大鼠残留肝组织BMP2含量。通过BMP2对肝再生的负性调节作用间接提高肝再生率。     

大鼠肝部分切除后肝细胞再生时细胞形态的动态变化

本文着重介绍大鼠肝部分切除后肝再生过程中细胞结构的动态变化特点。实验结果表明其主要表现为核仁增大,双核细胞增多,核分裂相出现。而在肝硬化组尚可见汇管区纤维组织增生。纤维化和假小叶形成的特有改变。但每个实验组术后每个阶段表现又有不同。材料和方法:Wister大鼠146只,鼠龄70～80天。体重196～270克。饲养条件相同。随机分四组。①Ⅰ组(肝部分切除组):53只,分别测量每只动物术前及术后体重。肝切除40％。切肝后测量余肝的最大长宽厚数值,其乘积为相对最大体积点术前数值。随后分别于术后(10、15、20、25、30、35天)处死,再次测量肝的最大长宽厚数值,其乘积为相对最大     

高压氧对大鼠肝大部切除后再生作用的实验研究

目的：研究高压氧对大鼠肝大部切除后再生的作用。方法：比较大鼠在肝大部切除后经高坟氧治疗与不经高压氧治疗时于术后第２、７、１４ｄ的再生肝重、肝再生度、肝重／１００ｇ体重、有丝分裂指数。结果：大鼠肝大部切除后，再生肝重、肝再生度、肝生／１００ｇ体重及有丝分裂指数于术后第２、７ｄ，高压氧治疗组比未经高压氧治疗组有明显提高，差异有显著性意义。结论：高压氧具有促进大鼠肝大部切除后再生的作用。     

入肝血流阻断对正常大鼠部分肝切除术后肝再生的影响

目的 探讨人肝血流阻断对部分肝切除术后正常大鼠肝再生的影响。方法 健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为３组：ＰＴＣ组,肝门阻断１５ｍｉｎ切肝组;ＰＨ组,部分肝切除组;ＳＯ组,假手术组,测定术后肝脏重量的变化;用免疫组化法检测术后２４、４８、７２ｈ和７ｄ各时相点ＰＣＮＡ标记指数;观察各组术后血清前白蛋白（ＰＡ）的变化。结果 ＰＴＣ组较ＰＨ组术后肝再生率下降;ＰＣＮＡ标记指数降低,高峰延迟;ＰＡ水平恢复缓     

亮氨酸对大鼠肝部分切除术后肝再生的影响

目的：观察不同亮氨酸浓度的氨基酸配方对大鼠肝部分切除术后残肝再生能力的影响。方法：18只SD大鼠行70%肝切除术后,经胃造瘘管给予不同亮氨酸浓度的氨基酸配方（1 g/kg）,分别为平衡氨基酸、支链氨基酸、亮氨酸,7 d后检测残肝/体质量比、肝细胞Ki-67和PCNA阳性计数。结果：以平衡氨基酸组为对照,亮氨酸组的残肝/体质量比、Ki-67和PCNA阳性计数均有显著增加,且要高于支链氨基酸组（P＜0.05）;支链氨基酸组的Ki-67和PCNA阳性计数较平衡氨基酸组有显著增加（P＜0.05）,但残肝/体质量比差异无统计学意义。结论：亮氨酸有利于肝部分切除大鼠残肝的再生,其作用优于支链氨基酸。     

蛋白质组学技术筛选大鼠肝脏大部切除后肝再生相关差异表达蛋白

目的:应用蛋白质组学技术观察大鼠肝脏大部分切除术后蛋白表达情况,筛选肝脏切除后肝再生相关的差异表达蛋白.方法:大鼠随机分为肝大部切除组(n=35)和假手术对照组(n=5).肝大部切除组大鼠无菌条件下切除肝左外叶、左中叶和中叶共约70%肝脏;假手术组大鼠仅开腹,不行肝大部切除.肝大部切除术后不同时间点(2、12、24、36、48、72、168 h)各处死5只大鼠,取右叶肝组织,提取大鼠肝脏总蛋白,以假手术组为对照,进行二维电泳和质谱分析,筛选差异表达蛋白,并对其中差异显著蛋白进行Western印迹鉴定.结果:电泳图谱显示肝脏70%切除术后2 h差异表达蛋白点开始增多,36 h达到高峰;共筛选出78个差异表达蛋白点,质谱技术鉴定出其中35个有意义的蛋白点.35个差异蛋白根据动态变化趋势可分为5类:3类丰度上调蛋白和2类丰度下调蛋白(各自间上调或下调时间和幅度均有所差异);这些蛋白主要涉及以下代谢途径:氧化应激反应、急性期反应蛋白、脂类代谢蛋白、能量代谢的酶类、信号转导、神经递质降解等,部分蛋白功能未知.Western印迹鉴定证实其中的prohibitin蛋白在肝大部切除术后2 h开始上调,36 h达高峰,48 h后趋于正常水平.结论:多种信号和代谢途径参与肝脏大部切除后的肝脏再生过程.     

实验性肝硬变大鼠肝部分切除后的再生

本文用组织学及组织化学方法,对大鼠实验性肝硬变部分肝切除后剩余肝组织的再生及细胞的功能进行观察,发现肝硬变部分肝切除后剩余肝组织的再生活动持续时间短于正常,且大多数再生肝细胞不能发育成熟,缺乏正常功能,甚至部分发生变性、坏死。作者认为肝硬变部分肝切除后,再生肝细胞对术后肝功能的恢复作用较小,对肝硬变患者行部分肝切除术前应慎重估计其术后剩肝的代偿能力,不应过多地依赖再生肝细胞的代偿作用。     

肝硬化大鼠肝部分切除术后肝再生的干预研究

目的　以肝硬化大鼠为动物模型 ,研究药物对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝再生的影响。方法　取健康的Wistar雄性大鼠 6 4只 ,以 6 0 ?l4油溶液 0 .3ml/ 10 0 g皮下注射 ,同时饮用 5 %酒精溶液 ,4 5d后制成肝硬化动物模型。模型大鼠随机分为 4组 ,16只 /组。全麻下均行左、中叶肝切除术。术后各组按以下方案处理 :A组 (对照组 )注射生理盐水 1mg/ (kg·d) ,B组为泮托拉唑组 ,注射 0 .2mg/ (kg·d) ,C组为重组人生长激素组 ,注射 0 .5U/ (kg·d) ,D组为两药合用组 ,同时给予泮托拉唑注射 0 .2mg/ (kg·d) ,重组人生长激素注射 0 .5U/ (kg·d) ) ,连续给药 1周。抽取静脉血样 ,取肝脏组织 ,检测肝功能、有丝分裂指数 (MI)、增殖细胞核抗原 (PCNA)、细胞核DNA含量。结果　泮托拉唑组、重组人生长激素组、两药合用组MI、PCNA阳性染色细胞量、细胞核DNA含量均高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,两药合用组MI、PCNA阳性染色细胞量、细胞核DNA含量均高于泮托拉唑组、重组人生长激素组 (P <0 .0 5 ) ,但各组间肝功能变化无明显差异。结论　泮托拉唑组及重组人生长激素均对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝细胞再生有促进作用 ,两药联合应用肝细胞再生更明显 ,其详细机制须待进一步研究。     

Decorin accelerates the liver regeneration after partial hepatectomy in fibrotic mice

Background Considering the existence of a large number of liver cell degeneration and necrosis in fibrotic liver, liver function was damaged severely and could not effectively regenerate after partial hepatectomy （PHx）. The aim of this study was to investigate whether decorin （DCN） could promote the liver regeneration after PHx in fibrotic mice. Methods Forty mice （5-week-old, Balb/c） were injected with CCI4 intraperitoneally and liver fibrosis model was established after 5 weeks. The survival mice were randomly divided into two groups： control group and DCN group. Then, we performed 70% PHx on all these mice and injected DCN or phosphate-buffered saline plus normal saline （NS） to each group, respectively, after surgery. Liver body weight ratio （LBR）, quantitative real-time polymerase chain reaction, and immunohistochemistry were used to analyze liver regeneration and fibrosis degree in both groups, and to find out whether exogenous protein DCN could promote the regeneration of fibrosis liver after PHx. Results Expressions of a-smooth muscle actin （SMA） mRNA and LBR had significant increases in the DCN group at postoperative Day 3 （POD 3, P〈0.05）. The protein expressions of CD31, a-SMA, and tumor necrosis factor （TNF）-a were higher in the DCN group than those in the control group by immunohistochemistry at POD 3 （P〈0.05）. Conclusion Exogenous protein DCN could promote liver regeneration after PHx in fibrotic mice. Chin Med J 2014;127 （14）： 2679-2685     

非肝硬化性胆道梗阻对大鼠肝部分切除术后肝细胞再生的影响

目的 观察非肝硬化性胆道梗阻（ＢＤＯ）对大鼠７０％肝部分切除（ＰＨ）术后肝细胞再生的影响。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为正常肝部分切除组（Ｎ－ＰＨ）、胆道梗阻胆流再通（ＲＢＦ）肝部分切除组（ＢＤＯ－ＲＢＦ－ＰＨ）及胆道梗阻胆流再通组（ＢＤＯ－ＲＢＦ）。ＢＤＯ－ＲＢＦ－ＰＨ组大鼠胆总管梗阻１周后行胆流再通及７０％ＰＨ。免疫组化法检测再生肝细胞增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）及溴脱氧核苷尿嘧啶（ＢｒｄＵ）标记,Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ法检测肝细胞ＰＣＮＡ蛋白表达,ＲＴ－ＰＣＲ与ＥＬＩＳＡ法检测肝内ＴＮＦαｍＲＮＡ与ＴＮＦα表达。结果 Ｎ－ＰＨ组肝细胞ＰＣＮＡ表害及ＢｒｄＵ阳性标记指数于７０％ＰＨ术后２４ｈ达到高峰,而ＢＤＯ－ＲＢＦ－ＰＨ组肝细胞ＤＮＡ 民高峰延后至术后４８ｈ,其ＰＣＮＡ高峰表达量及ＢｒｄＵ高峰标记指数均低于Ｎ     

利用分叶顺次肝切除术建立小鼠肝脏大部切除后再生模型

目的:利用肝部分切除术,建立可准确量化和易于操控的小鼠肝脏再生模型,为研究肝脏再生的细胞和分子生物学机制及其病理学意义提供技术平台。方法:正常成年C57BL/6小鼠经心脏灌注固定后,逐叶分离肝脏、称重,计算各肝叶所占肝重的百分比;麻醉状态下,分叶顺次无菌切除小鼠肝脏的左外叶、左中叶和右中叶,建立肝脏大部切除的再生模型;利用RT-PCR方法动态检测术后肝脏甲胎蛋白基因的激活表达特征。结果: 肝左外叶、左中叶和右中叶合计约占小鼠肝脏总重量的68%,分叶顺次切除上述3个肝叶,术后动物恢复和存活状态良好,RT-PCR结果证实甲胎蛋白基因在小鼠肝脏再生中的激活表达。结论:利用分叶顺次肝切除术,成功建立了小鼠的肝大部切除后再生模型,该方法可准确量化肝脏切除的程度,具有可控性强、简便易行和成功率高等优点,为小鼠肝再生的研究奠定了基础。     

奥曲肽对肝部分切除术后大鼠肝再生影响的实验研究

目的：了解生长抑素8肽类似物奥曲肽对肝部分切除术后大鼠肝脏再生和肝的影响，探讨奥曲肽手术后应用的安全性。方法：将80只♂成年Wistar大鼠随机分为5组，每组16只。A，B组为单纯左肝切除组，其中B组腹腔注射奥曲肽（50μg/kg,Bid),C,D,E组均为左肝切除加右肝肿瘤种植组，D，E组分别在肿瘤种植后12，72h开始同样方法剂量应用奥曲肽，A组为空白对照，C组作为荷瘤对照。结果：术后1周，A，B组间及C，D，E组间肝脏重量，增殖细胞核抗原（PCNA）表达和DNA增殖以及术后肝功能等差异没有显著性（P＞0．05）。结论：生长抑素类似物奥曲肽对部分切除后大鼠肝脏再生没有影响，并且与是否荷瘤无关生长抑素在肝脏手术后应用具有安全性。     

肝硬化大鼠肝部分切除后IL-6/STAT3信号通路的变化

目的了解白细胞介素-6(IL-6)/信号转导及转录活化因子3(STAT3)信号通路在肝硬化大鼠肝部分切除后残肝再生障碍中的作用。方法采用皮下注射四氯化碳(CCl4)法建立肝硬化大鼠模型。正常大鼠为对照组。对照组及肝硬化组均行70%肝切除后,于不同的时间点收集残肝组织及血液标本,检测血清IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、肝组织增殖细胞核抗原(PCNA)及活性STAT3蛋白表达。结果肝切除后24 h,肝硬化组大鼠有丝分裂细胞数及PCNA阳性细胞数均明显小于对照组。肝切除后的前12 h,肝硬化组大鼠IL-6表达水平明显低于对照组。术后2 h,对照组残肝组织的活性STAT3蛋白远远高于肝硬化组。结论肝硬化肝切除术后早期IL-6的低表达导致STAT3蛋白活化不足是肝硬化大鼠肝部分切除术后残肝再生障碍的重要原因之一。     

Effects of partial portal vein arterialization on liver regeneration after hepatectomy in minipigs with obstructive jaundice

Background  Hilar cholangiocarcinoma is a malignant tumor that is difficult to cure. BACKGROUNDThe aim of this study was to observe the effects of flow-controlled partial portal vein arterializations (PPVA) on liver regeneration after hepatectomy in minipigs with chronic obstructive jaundice.

Methods  Eight minipigs were made into chronic obstructive jaundice models. United semi-hepatectomy, which imitates extended radical surgery for treatment of hilar cholangiocarcinoma, was then performed. The eight minipigs were randomly divided into groups A and B (n=4 minipigs each). PPVA was performed in Group A but not in Group B. The effects of flow-controlled PPVA on live regeneration after hepatectomy were observed for 30 days after hepatectomy.

Results  The portal vein PO₂ at the immediate time point and on postoperative day 30 was higher in Group A ((47.33±2.43) and (48.50±4.44) mmHg) than in Group B ((35.38±4.06) and (35.55±2.55) mmHg respectively, all P <0.01). The mitotic index of liver cells on postoperative days 14 and 21 was higher in Group A (12.55%±2.85% and 15.25%±1.99% respectively) than in Group B (6.85%±2.10% and 11.88%±1.15% respectively, all P <0.05). The regeneration rate of residual liver on postoperative days 14 and 21 was higher in Group A (24.56%±6.15% and 70.63%±9.83% respectively) than in Group B (11.96%±5.43% and 44.92%±7.42% respectively, P <0.05 and P <0.01 respectively).

Conclusion  Flow-controlled PPVA can promote liver regeneration after hepatectomy and prevent liver failure in minipigs with chronic obstructive jaundice.