复方两面针含片定量指纹图谱和体外全成分溶出方法测定研究

目的建立复方两面针含片(compound Liangmianzhen tablets,LMZT)的HPLC定量指纹图谱(HPLC-FP)和相对特征指纹图谱(HPLC-RCFP)以及全组分溶出紫外指纹图谱(DUV-FP),综合评价LMZT质量。方法采用HPLC建立LMZT 220 nm指纹图谱,以没食子酸(GA)为参照物峰,确立21个共有指纹峰并采用系统指纹定量法(SQFM)评价;以GA为单标,建立RCFP,并采用单标定量指纹法评价(Q1FM);采用流动注射法(FIA)测定溶出试验的供试品并用紫外指纹定量法(QUVFM)评价。结果 HPLC-FP的评价结果是S2质量等级为1,S3质量等级为2,S4、S9、S10、S12、S13和S15~S20质量等级为3,S1、S5~S7、S11和S14质量等级为4,S8质量等级为5。HPLC-RCFP的评价结果与HPLC-FP宏定量相似度P_m结果相差很小,质量等级相同。DUV-FP的评价结果显示所有样品在45 min时的溶出度不低于70%,均符合要求。结论 SQFM能定性定量评价中药制剂质量,Q1FM能突出评价单标含量差异,QUVFM能用于监测全组分溶出动力学的测定,实现整体药效物质基础监控和评价中药复方制剂整体组分体外溶出的监测。这为中药一致性评价提供了一种新方法实例。     

3种定量指纹图谱模式评价复方丹参片质量

目的考察3种定量指纹图谱模式利用系统指纹定量法(SQFM)对复方丹参片(FFDST)进行评价时误差变动。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为TEDA Chrom Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流速1.0 m L·min-1,紫外检测波长280 nm,柱温(35.0±0.15)℃,进样量10μL,采集22批FFDST的HPLC指纹图谱(NFP),对其变换得到比率指纹图谱(ROFP)和统一化指纹图谱(UFP),以各对照指纹图谱(RFP)为标准用SQFM计算22批FFDST超信息定量参数,阐述不同模式图谱的3个指标Sm,Pm和α间差异性。结果以丹酚酸B为参照物峰,确定46个共有指纹峰。超信息特征定量参数评价出FFDST指纹图谱指数处于中等程度。经SQFM评价结果表明NFP和ROFP图谱模式评价结果基本一致,S17^S20均为不合格品,S17S20均为不合格品,S17^S19是由于Pm过高所致,S20则是Pm过低引起。UFP图谱模式定性评价结果与前两者基本相同,定量结果出现显著差异,但乘以最大峰校正系数fi即可消除定量误差。结论 3种定量指纹图谱模式均能对样品进行准确地定性定量评价。     

双色谱系统定量指纹图谱评价石斛夜光丸质量

目的研究在双色谱系统条件下用系统指纹定量法(SQFM)对石斛夜光丸(SHYGP)进行评价所产生的变动情况,同时考察SHYGP同一75%乙醇提取液经5℃放置70 d后指纹图谱变化。方法 SQFM的3个指标宏定性相似度(Sm)、宏定量相似度(Pm)和变动系数(α)间存在密切相关特性,在洗脱程序EP1条件下用高效液相色谱测定12批SHYGPs在203、286和326 nm波长处的指纹图谱,分别以均值法整合三波长下定量指纹图谱的鉴定结果;经70 d后重新提取样品在显著变动的洗脱程序EP2条件下同法试验和评价指纹图谱,对2次获得指纹图谱群的评价结果进行误差对比,并讨论质量鉴定等级和宏定量相似度变化。同时对75%乙醇提取液5℃存放70 d后采用EP2方法试验,同法考察变化。结果以柚皮苷(NG)为参照物峰,EP1确定38(203 nm),34(286 nm)和30(326 nm)个共有指纹峰,EP2确定32(203 nm)、37(286 nm)和26(326 nm)个共有指纹峰。经SQFM评价后的三波长指纹图谱结果按照均值法整合,对S2、S3、S4和S12等4批样品鉴定结果一致,除S6、S11外,余下6批样品鉴定结果波动仅1级,不考虑S1、S6和S11,Sm平均波动<0.04,Pm误差基本<10%(S9、S10除外)。对EP1和EP2三波长HPLC-FPs鉴定数据取平均,最终鉴定S1、S2、S3、S5和S7质量极好(1级),S4、S8和S9质量很好(2级),S10和S12质量好(3级),S11质量较好(4级),S6质量中等(5级)。结论在有效期内SQFM对同一总体样品以定量指纹图谱进行评价时,系统梯度洗脱条件的显著变化基本不影响鉴定结果。     

统一化指纹图谱的规范数字化和定量评价研究

目的对中药统一化色谱指纹图谱的规范数字化和定量评价方法进行研究,增补5个新统一化消除参数。建立石斛夜光丸(SHYGP)的统一化指纹图谱(UFP),用30个相对统一化特征参数进行评价。方法采用RP-HPLC法建立12批SHYGP指纹图谱,用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统4.0"软件计算其统一化指纹图谱和30个相对统一化特征参数。用系统指纹定量法分析UFP结果并与正常HPLC谱评价结果进行比较,并用校正UFP评价了12批SHYGP质量。结果统一化参数评价以RFP和S11最佳,S5可以作标准制剂。结论 UFP能数字化评价图谱的优劣,同时能定性定量评价中药质量。     

色谱系统显著变动对定量指纹图谱评价中成药质量的影响

目的考察在色谱系统显著变动条件下用系统指纹定量法(SQFM)对中成药进行评价产生的误差,并进行t检验。方法在理论上阐述SQFM 3个指标Sm、Pm和α间的关联性,在洗脱程序EP1条件下用HPLC测定12批朱砂安神丸(ZSASPs)在228、286和326 nm指纹图谱,分别以均值法整合三波长下定量指纹图谱的鉴定结果;11个月后在显著变动的洗脱程序EP2条件下同法试验和评价指纹图谱。对2次获得指纹图谱群的评价结果进行误差对比和t检验,并讨论质量鉴定等级和宏定量相似度变化。结果以小檗碱为参照物峰,EP1确定53(228 nm)、50(286 nm)和52(326 nm)个共有指纹峰,EP2确定50(228 nm)、40(286 nm)和35(326 nm)个共有指纹峰。经SQFM评价后的三波长指纹图谱结果按照均值法整合后对S4、S6^S8、S10S8、S10^S12等7批样品鉴定结果一致,对余下5批样品鉴定结果波动仅1级,排除S7和S8,EP2下各样品的定性相似度平均降低0.03,定量相似度误差基本在±5%之内,对2次获得鉴定结果进行T检验证明无显著性差异。对EP1和EP2三波长HPLC-FPs鉴定数据取平均,最终鉴定S1S12等7批样品鉴定结果一致,对余下5批样品鉴定结果波动仅1级,排除S7和S8,EP2下各样品的定性相似度平均降低0.03,定量相似度误差基本在±5%之内,对2次获得鉴定结果进行T检验证明无显著性差异。对EP1和EP2三波长HPLC-FPs鉴定数据取平均,最终鉴定S1^S4和S9质量极好(1级),S5、S6、S10和S12质量很好(2级),S11质量好(3级),S7和S8质量劣(8级)。结论在有效期内SQFM对同一总体样品以定量指纹图谱进行评价时,色谱条件的显著变化不影响鉴定结果,SQFM对中成药进行质量评判时具有包容性和耐用性。     

系统指纹定量法评价牛黄解毒片毛细管电泳指纹图谱

目的建立牛黄解毒片(Niuhuang Jiedu tablets,NHJDT)高效毛细管电泳法(HPCE)指纹图谱,按系统指纹定量法评价其质量。方法采用高效毛细管电泳法,以甘草苷为参照物峰,确定19个共有指纹峰,建立了NHJDT-HPCE指纹图谱。以宏定性相似度Sm和宏定量相似度Pm为参量对15批NHJDTs进行聚类分析,确定用其中10批生成对照指纹图谱(RFP),以此RFP为标准用系统指纹定量法鉴别评价15批NHJDTs质量。结果鉴别出9批质量合格,1批均化系数相对偏差偏高,4批含量明显偏低,1批含量明显偏高。结论将系统指纹定量法评价HPCE指纹图谱的结果与HPLC结果相比较,结果基本一致,证明系统指纹定量法评价中药质量具有真实、可靠与准确的特点。     

三波长定量指纹谱结合4种化合物定量测定银翘解毒丸对照指纹图谱标准

目的建立双标定量指纹法精确恢复银翘解毒丸对照指纹图谱（RFP）标准,以实现动态指纹图谱标准的校正和复原。方法用RP-HPLC法对银翘解毒丸（YQJDP）中绿原酸、咖啡酸、连翘苷和牛蒡苷4组分进行定量分析。建立228、265和280 nm下YQJDP-HPLC指纹图谱,采用均值法整合三波长下定性定量全信息,应用六级系统指纹定量法对其进行评价。选择绿原酸和牛蒡苷为双参照物峰（双标）,采用双标定量指纹法恢复YQJDP-RFP。结果三波长整合指纹图谱评价结果如下：S3、S4、S6和S8质量为极好（1级）,S2、S5、S7和S9质量为很好（2级）,DS1质量中（5级）,S1、DS3、DS4、WS1和WS2质量次（7级）,DS2质量劣（8级）。含量测定结果与指纹图谱评价结果很一致。在此基础上建立YQJDP双标定量指纹法技术标准。结论基于多指标定量分析和多波长HPLC指纹谱的双标定量指纹法能够找到产生RFP的标准制剂和实现实时随行定量检测YQJDP指纹图谱。     

逍遥丸高效液相色谱数字化指纹图谱研究

目的建立逍遥丸(Xiaoyao Wan,XYW)HPLC数字化指纹图谱,为逍遥丸整体质量控制提供一个标准。方法采用RP-HPLC法,以色谱指纹图分离信息量指数RI为目标函数优化选择指纹图谱条件,以宏定性相似度Sm和宏定量相似度Pm评价逍遥丸质量。用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"软件挖掘体现逍遥丸质量的HPLC指纹图谱的潜信息特征数字化参数并进行评价。结果以芍药苷峰为参照物峰,确定56个共有指纹峰,建立了XYW-HPLC数字化指纹图谱。通过聚类分析确定用其中12批生成对照指纹图谱(RFP),以此RFP为标准用系统指纹定量法鉴别评价13批逍遥丸质量。鉴别出S3和S9的质量很好,S4、S6、S8、S10、S11和S12质量好,S1、S2、S5和S7质量良好,S13质量中。结论所建立的XYW-HPLC数字化指纹图谱可对逍遥丸进行整体定性分析和定量分析,可清晰反映XYW质量变异,是评价逍遥丸质量的有效方法。     

用乘方指纹图谱评价双黄连胶囊质量的方法探讨

目的建立双黄连胶囊（Shuanghuanglian capsule,SHLC）280 nm HPLC指纹图谱,提出基于系统指纹定量法（SQFP）的4种乘方指纹图谱评价模型。方法采用RP-HPLC法,以黄芩苷（baicalin,BCL）为参照物峰,确定44个共有指纹峰,建立了280 nm SHLC-HPLC定量指纹图谱（N-FP）、开立方指纹图谱（CT-FP）、开平方指纹图谱（ST-FP）、1.5次方指纹图谱（1.5 PFP）和平方指纹图谱（S-FP）,均采用SQFP评价12批双黄连胶囊质量。结果依据N-FP,用SQFP鉴别出12批次SHLCs的S1、S2、S4和S12质量很好（2级）;S3、S6、S9、S10和S11质量好（3级）;S8质量较好（4级）,S7质量一般（6级）,S5质量劣（8级）,除S7外定性相似度都〉0.9,只有S5的Pm相差很大,造成评级很大,结果表明11个不同批次的SHLC质量均一性很接近。N-FP能较好地反映SHLCs含量特征、指纹物质均一性及内在总质量变化状况,但忽视小指纹峰对评价的作用。CT-FPs和ST-FPs能拉平大小指纹峰信号而提高宏定性相似度,使宏定量相似度趋向100%,前者更能有效降低大峰掩蔽小峰来突出小指纹峰作用;对〉1的乘方指纹图谱能突出大峰权重而增加大峰掩蔽小峰,当指纹峰信号比较接近时可采用高方次指纹图谱评价模式来实现突出大峰差异化。结论所建立SHLC-HPLC定量指纹图谱可清晰反映SHLC质量差异,开方指纹图谱和〉1的乘方指纹图谱能分别增加小峰和差异化突出大峰对相似度贡献,但扭曲定量相似度。本文多维乘方指纹图谱评价模式为色谱指纹图谱评价方法提供了新思路。     

柴胡舒肝丸高效液相色谱数字化指纹图谱研究

目的建立柴胡舒肝丸（Chaihushugan Pills,CHSGPs）HPLC数字化指纹图谱。方法采用RP-HPLC法,以色谱指纹图谱分离量指数RF为目标函数优化选择指纹图谱条件,以宏定性相似度Sm和宏定量相似度Pm评价CHSGPs质量。用＂中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0＂软件计算CHSGP-HPLC指纹图谱的50个参数并进行超信息特征数字化评价,同时计算统一化指纹图谱技术的定点指数和定信号指数并进行评价。结果以黄芩苷峰为参照物峰,确定57个共有指纹峰,建立了CHSGP-HPLC数字化指纹图谱。通过聚类分析确定用其中13批生成对照指纹图谱（RFP）,以此RFP为标准,用系统指纹定量法鉴别评价20批柴胡舒肝丸的质量。鉴别出10批质量合格,7批化学成分数量和分布比例不合格,其余3批含量明显偏低。结论数字化指纹图谱可揭示中药质量控制的多维有效信息,结合系统指纹定量法可有效控制CHSGPs质量。     

基于HPLC-DAD-ELSD指纹谱的系统指纹定量法评价清热解毒注射液质量

目的建立自制清热解毒注射液HPLC-DAD-ELSD指纹图谱,以系统指纹定量法评价其质量。方法采用DAD-ELSD串联技术,以1%HAc溶液和1%HAc乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温（30±0.5）℃,进样量5μL;漂移管温度110℃,雾化室温度40℃,载气压力50 psi。结果以黄芩苷为参照物峰,确定DAD图谱中有60个共有峰;以绿原酸为参照物峰,确定ELSD图谱中有37个共有峰。采用＂中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0＂软件,按平均值法计算,生成对照指纹图谱（RFP）,以此RFP为标准,采用系统指纹定量法表征其质量,并与市售制剂和混合药材模拟样进行比较,初步确定了市售制剂含量低的原因为药材投料量不足或制剂被稀释。结论采用DAD-ELSD联用可以获得中药复方制剂真实质量重要信息,结合系统指纹定量法从整体定性分析和整体定量分析出发实现了对中药质量有效评价。     

系统指纹定量法评价牛黄解毒片质量

建立牛黄解毒片（Niuhuangjiedu tablets,NHJDT）HPLC指纹图谱,以系统指纹定量法评价其质量。采用RP-HPLC法,以黄芩苷为参照物峰,确定53个共有指纹峰,建立了NHJDT-HPLC指纹图谱。以宏定性相似度S_m和宏定量相似度P_m为参量对15批NHJDT进行聚类分析,确定用其中10批生成对照指纹图谱 (RFP), 以此RFP为标准用系统指纹定量法鉴别评价15批NHJDT质量。鉴别出9批质量合格,1批均化系数相对偏差明显偏高,5批含量明显偏低。系统指纹定量法是对系统化学指纹的整体定性分析和整体定量分析的密切整合, 是评价中药质量的便捷有效方法。

     

指纹定量法测定通宣理肺丸指纹归属度和药效物质工艺收率

目的建立通宣理肺丸（TLPs）HPLC指纹图谱,研究其化学指纹成分归属度和药效物质工艺收率。方法以水煎混合样品指纹图谱为评价标准,采用归属度pi、逸出度qi、宏定性相似度Sm和宏定量相似度Pm进行指纹归属的整体定性定量分析,用指纹定量法测定TLPs药效物质工艺收率。结果评价出S8黄芩为君药、S13枳壳为臣药、S6陈皮和S11甘草为佐药,其余为辅药。14批市售TLPs药效物质工艺收率的Pm较高,但Sm很低,说明其化学指纹分布比例与对照指纹图谱差异很大。结论指纹定量法能够客观、准确地定量描述单味药对TLPs化学指纹的贡献大小和整体定性定量评价药效物质工艺收率,为TLPs质量控制提供了新方法。     

多级系统指纹定量法评价复方丹参片质量

目的 建立多级系统指纹定量法(MSQFM)理论和技术并应用于复方丹参片(Fufang Dansen Pian,FFDSP) 280 nm HPLC指纹图谱评价.方法 从8个定量相似度(R、Q、M、W、P、QF、MF和C)中选取2个作平均作为宏定量目标函数,得到具有代表性的八级宏定量相似度,再与Sm及α评价中药质量等级分别构成一、二、三…八级系统指纹定量法,以均值P整合8个宏定量相似度,进而构成MSQFM,并对20批FFDSP-HPLC-FP进行评价.结果 八级宏定量相似度P1,P2,…,P8都能良好地反映中药化学指纹的总体含量.用MSQFM评价S10质量(1级)极好；S9质量(2级)很好；S4、S12、S14和S19质量(3级)好；S7、S8、S11和S17质量(4级)较好；S13、S15、S16和S20质量(5级)中等；S18质量(6级)一般,其余5批为次品或劣质品.结论 所建立MSQFM评价结果具有一致性,可清晰揭示FFDSPs-HPLC-FP反映的中药质量变异,是对SQFM的发展和完善.     

指纹定量法评估射干抗病毒注射液指纹归属度和药效物质工艺收率

目的应用指纹定量法建立评估射干抗病毒注射液（SGKBDI）化学指纹成分归属度和药效物质工艺收率的有效控制方法。方法采用反相高效液相色谱法,以水（含1％醋酸）-乙腈（含1％醋酸）为流动相,线性梯度洗脱,以紫外波长265nm检测市售SGKBDI、单味药材及自制模拟样、自制SGKBDI指纹图谱。用归属度A、宏定性相似度Sm、拟合定性相似度Ssyn、宏定量相似度Pm等指标进行评价,解决SGKBDI化学指纹归属的定量问题和测定其药效物质工艺收率。结果以S10自制模拟样为参照,评价出S11射干对SGKBDI化学成分贡献最大,为其君药,臣药是S12金银花、S14茵陈和S18大青叶。用宏定性相似度及宏定量相似度,评价出9批市售SGKBDI药效物质工艺收率均很低。结论指纹定量法能够客观、准确地定量描述单味药对复方制剂化学指纹的贡献大小和定量评价中药复方药效物质的工艺收率,是射干抗病毒注射液指纹归属定量控制以及工艺优化的可行方法。     

基于高效液相色谱指纹谱的系统指纹定量法鉴定玄参药材质量

目的建立玄参HPLC指纹图谱,以系统指纹定量法评价其质量。方法采用RP—HPLC法,以CenturySILC18BDS（200mm×4．6mm,5μm）色谱柱,1％乙酸-水和1％乙酸-乙腈为流动相,低压线性梯度洗脱,流速1．0mL·min^-1,柱温（30±0．15）℃,进样量5μL,紫外检测波长280nm。结果以哈巴俄苷为参照物峰,确定29个共有峰,建立了玄参HPLC指纹图谱。以10批玄参HPLC指纹图谱按平均值法生成的对照指纹图谱（RFP）为标准,用系统指纹定量法评价不同产地玄参质量,采用SPSS软件以Sm和Pm为指标进行系统聚类分析,10批玄参药材被分为四类。第1类含量偏低,第Ⅲ类含量偏高,第Ⅱ类质量最好,第Ⅳ类为不合格药材。结论系统指纹定量法以整体定性分析和整体定量分析密切结合,适用于玄参药材系统化学指纹的整体质量控制。     

指纹定量法测定中药复方指纹归属度和药效物质工艺收率

通过建立中药复方化学指纹有机加和模型来研究中药复方化学指纹成分归属度和药效物质工艺收率。该法首先进行指纹归属的定性分析，然后进行指纹归属定量分析。提出3种可供选择使用的判定单味药在复方中的化学成分数量和分布比例的方法。就紫外吸收成分来说，该法评价出S5黄芩对清热解毒注射液(QRJDI)的贡献最大，其次是S7龙胆、 S4金银花、 S8知母和S9栀子；评价出8批市售QRJDI药效物质工艺收率均很低。指纹定量法能够客观、准确地定量描述单味药对复方制剂化学指纹的贡献大小和定量评价中药复方药效物质的工艺收率。     

用双标定量指纹法定桂附地黄丸平行五波长高效液相色谱对照指纹图谱标准

目的 用双标定量指纹法研究桂附地黄丸(Guifu Dihuang Wan,GFDHW)对照指纹图谱(RFP)来实现指纹图谱标准的复原.方法 采用HPLC等吸收双波长法测定了桂附地黄丸中没食子酸、5-羟甲基糠醛、芍药苷、马钱苷和丹皮酚含量.在210、230、246、265和280 nm5个特征检测波长处建立GFDHW平行五波长指纹谱;以没食子酸和丹皮酚为双参照物峰,采用双标定量指纹法恢复GFDHW-RFP.结果 以GFDHW中5组分含量测定结果和平行五波长指纹谱鉴定结果分别聚类分析比较不同厂家产品质量差异,结果以后者更为准确可靠.建立了GFDHW双标定量指纹法技术标准.结论 基于多指标定量分析和平行五波长高效液相指纹谱的双标定量指纹法能够确定RFP的标准制剂和实现实时随行定量检测GFDHW指纹图谱,这是GFDHW现代化的有效新方法.     

指纹定量法鉴定龙胆泻肝丸化学指纹归属度和药效物质差异归因

目的应用指纹定量法鉴定龙胆泻肝丸化学指纹归属度和药效物质差异归因。方法采用反相高效液相色谱法,以水（含1%醋酸）-乙腈（含1%醋酸）为流动相,线性梯度洗脱,以265 nm检测波长检测LDXGP（模拟样和市售品）、单味药HPLC指纹图谱。用归属度pi、逸出度qi、宏定性相似度Sm和宏定量相似度Pm等指标鉴定LDXGP化学指纹归属度和测定药效物质工艺收率。结果以S1模拟样为参照,鉴定出S3黄芩对LDXGP化学指纹贡献最大,其次是S2龙胆。用系统指纹定量法鉴定12批市售LDXGP大部分质量较差,用Sm相对误差分析各批市售LDXGP药效物质差异原因和可能的解决方案。结论指纹定量法可清晰鉴定LDXGP质量和鉴定化学指纹归属度及药效物质差异归因,可为LDXGP生产质量控制提供新的指导方法。