肥大细胞与硬皮病

肥大细胞是介导速发型变态反应及炎症的重要枢纽，能起始或扩大炎症反应，参与多种疾病的炎症进程。在一些胶原纤维过度增殖的疾病如瘢痕疙瘩、创伤愈合、硬皮病的早期，常可观察到肥大细胞的聚集和激活。肥大细胞通过其表面的受体及合成、释放的细胞因子和炎症介质，在组织重建和胶原纤维分化、增殖过程中起重要作用。     

系统性硬皮病成纤维细胞研究进展

成纤维细胞在硬皮病纤维化过程中具有重要作用。体外培养的系统硬皮病皮损成纤维细胞发生了基质合成和生长增殖的异常以及粘附力的改变。能够合成高产量胶原及其它基质的成纤维细胞亚群在硬皮病皮肤纤维化中可能起重要的作用。硬皮病皮损中表害细胞间粘着分子１型ＨＬＡ－Ⅱ类抗原的成纤维细胞数目增加可能与局部炎症或免疫反应有关。     

体外培养硬皮病成纤维细胞的超微结构观察

为探讨硬皮病纤维化硬化形成的机制，应用透射电镜对培养的硬皮病皮损和正常皮肤中的成纤维细胞进行了超微结构观察。结果示硬皮病成纤维细胞中有丰富的，高度发达的粗面内质网，且多个区域有高尔基复合体及其形成的分泌泡存在。正常皮肤中的成纤维细胞内粗面内质网少，未见高尔基复合体的分泌泡。提示硬皮病成纤维细胞的蛋白合成及分泌功能活跃，因此胶原合成增高。     

系统性硬皮病患者缺氧与皮肤硬化关系的初探

目的 探讨缺氧对系统性硬皮病 (SSc)患者皮肤硬化的影响。方法 测定 SSc患者血氧分压和皮肤硬度积分,对二者进行直线相关分析,并测定低氧 (2.5％氧浓度 )对体外培养的 SSc患者皮肤成纤维细胞增殖的影响。结果 30例 SSc患者血氧分压为 6.38～ 12.06 kPa,平均 (9.53± 1.93)kPa; 20例正常对照组为 (10.67～ 13.33)kPa,平均为 (12.01± 0.81)kPa。前者比后者显著降低 (t=5.276,P     

系统性硬皮病皮损成纤维细胞研究进展

成纤维细胞在硬皮病纤维化过程中具有重要作用。体外培养的系统性硬皮病皮损成纤维细胞发生了基质合成和生长增殖的异常以及粘附力的改变。能够合成高产量胶原及其它基质的成纤维细胞亚群在硬皮病皮肤纤维化中可能起重要的作用。硬皮病皮损中表达细胞间粘着分子Ⅰ型和HLA-Ⅱ类抗原的成纤维细胞数目增加可能与局部炎症或免疫反应有关。     

细胞外基质与成纤维细胞的相互作用及其在硬皮病中的意义

细胞外基质与成纤维细胞相互作用的主要表现为，细胞外基质调控成纤维细胞的增殖与分化，对成纤维细胞趋化作用，负反馈抑制成纤维合成胶原，成纤维细胞表面介导细胞外基质－成纤维细胞相互作用的粘附分子主要是整合素β１β３亚族，与多种细胞外基质共同具有的精氨酸－基氨酸－天冬氨酸序列特异结合，硬皮病中成纤维细胞表面整合素α１，α３链表达较正常成纤维细胞明显增强β１整合素在皮损血管周围，淋巴样细胞聚集区及胶原束间明     

中医药治疗硬皮病的实验研究进展

硬皮病是一种皮肤变硬、指(趾)缺血伴关节、肌肉和内脏多系统损害的进行性皮肤病。分局限性硬皮病和系统性硬皮病两种类型，后者临床除了皮肤硬化、僵硬、萎缩影响功能致残外，还会侵犯食道、胃肠、肺肾等全身多脏器而危及生命，临床对本病的治疗已日益受到重视。近年，中医药在本病实验研究方面取得了较大进展，推动了     

血小板衍生生长因子在硬皮病成纤维细胞的表达

血小板衍生生长因子(platelet-de-rivedgrowthfactor,PDGF)是参与纤维化形成的主要因子[1],近年国外研究发现在硬皮病皮损处PDGF蛋白表达增高[2]。我们采用Northern杂交方法检测了培养硬皮病皮损成纤维细胞PDGF-B链mRNA的表达,现报道如下。一、材料和方法主要试剂:PDGF-B链cDNA探针,β-actincDNA探针,购自ATCC(Americantypeculturecollection),随机引物试剂盒购自美国Promega公司。研究对象:病例为北京医科大学第一医院确诊的局限性硬皮病3例、系统性硬皮病1例,诊断符合美国风湿病协会的标准。男1例,女3例,年龄21～56岁,病程0…     

活血化瘀中药对系统性硬皮病病人皮肤成纤维细胞增殖的影响

为了探讨活血化瘀中药治疗系统性硬皮病（ＳＳ）的药理机制，以体外培养的ＳＳ病人的皮肤成纤维细胞为研究对象，采用ＭＴＴ方法对２１种常用活血化瘀中药的水溶性提取物对该细胞增殖的影响进行了研究。结果显示，１７种药物对该细胞增殖具有抑制作用，其中以赤芍、丹参、红花、丹皮、茜草、乳香、没药、苏木、牛膝和泽兰的抑制作用显著，且分别呈剂量效应关系和时间效应关系。本研究结果可为今后ＳＳ治疗时中药组方选择药物提供依据     

细胞外基质与成纤维细胞的相互作用及其在硬皮病中的意义

细胞外基质与成纤维细胞相互作用的主要表现为:细胞外基质调控成纤维细胞的增殖与分化、对成纤维细胞趋化作用、负反馈抑制成纤维细胞合成胶原。成纤维细胞表面介导细胞外基质-成纤维细胞相互作用的粘附分子主要是整合素β_1、β_3亚族,与多种细胞外基质共同具有的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列特异结合。硬皮病中成纤维细胞表面整合素α_1、α_3链表达较正常成纤维细胞明显增强;β_1整合素在皮损血管周围、淋巴样细胞聚集区及胶原束间明显增多;胶原和前胶原肽对成纤维细胞合成胶原的负反馈抑制在硬皮病时消失。细胞因子、转化生长因子-β、干扰素等对细胞外基质-成纤维细胞相互作用有调节作用。     

血小板衍生生长因子受体在硬皮病皮损的表达

目的　探讨血小板衍生生长因子 (PDGF)在硬皮病发病中的作用。方法　选用特异性多克隆抗体以免疫组化方法检测了 8例硬皮病患者和 9例正常皮肤标本 PDGF受体的表达。结果　研究发现PDGF受体 α和 β亚单位在 8例硬皮病患者皮损表达均明显增高 ,而 9例正常皮肤中仅少数标本呈微弱表达 ,此差异经统计学检验显示有显著性意义 (P<0 .0 5 )。结论　 PDGF受体 α和 β亚单位表达的增高可能与硬皮病纤维化的形成相关。     

成纤维细胞与纤连蛋白粘附及其诱导的酪氨酸磷酸化蛋白在硬皮病原胶原基因表达中的作用

目的研究硬皮病成纤维细胞与纤连蛋白粘附 ,以及粘附诱导的酪氨酸磷酸化蛋白在成纤维细胞表达原胶原mRNA中的作用。方法将硬皮病成纤维细胞置于纤连蛋白包被的培养体系中粘附培养 ,运用RT PCR、免疫印迹法分别检测原胶原mRNA表达的变化及粘附诱导的酪氨酸磷酸化蛋白 ;并观察阻断酪氨酸磷酸化后 ,原胶原mRNA和酪氨酸磷酸化蛋白的变化。结果硬皮病成纤维细胞与纤连蛋白粘附 ,可诱导相对分子质量为98000、65000酪氨酸磷酸化蛋白生成 ,且原胶原 proα1(Ⅰ)mRNA的表达显著增加 ;经酪氨酸激酶抑制剂作用后 ,伴随着相对分子质量为98000、65000酪氨酸磷酸化蛋白的减少 ,原胶原proα1(Ⅰ)mRNA显著降低。结论成纤维细胞与纤连蛋白粘附 ,在硬皮病原胶原表达增加中具有重要作用 ,由粘附诱导的酪氨酸磷酸化是其中的一个重要环节。     

与系统性硬皮病相关的细胞因子

系统性硬皮病是以成纤维细胞过度增殖，多脏器进行性纤维化为特征的结缔组织疾病，多种细胞因子参与发病过程。如转化生长因子、肿瘤坏死因子和白介素-6等可通过调节成纤维细胞增殖及细胞外基质合成促进组织纤维化，而干扰素-γ则可以抑制成纤维细胞胶原蛋白的合成。     

活血化瘀中药对系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞胶原合成的影响

目的研究活血化瘀中药对系统性硬皮病(SSc)患者皮肤成纤维细胞胶原合成的影响.方法以组织块培养法建立3个SSc患者皮肤成纤维细胞株.将活血化瘀中药加入成纤维细胞培养液,其浓度分别为5g/L、2.5g/L和1.25g/L,于加药后第3、6 d,以分光光度法测定细胞培养上清液中羟脯氨酸浓度并折算成胶原浓度.结果积雪草和丹参在5g/L、2.5g/L及1.25g/L浓度下于作用第3 d和第6 d时能显著抑制SSc患者皮肤成纤维细胞的胶原合成(P＜0.05～0.01),红花在5 g/L、2.5g/L及1.25 g/L浓度下于作用第3 d和第6 d时能显著促进SSc患者皮肤成纤维细胞的胶原合成(P＜0.05).此外,当归在5g/L、茜草在2.5g/L浓度下于作用第6 d时也能显著抑制SSc患者皮肤成纤维细胞合成胶原(P＜0.05).结论不同的活血化瘀中药对皮肤成纤维细胞胶原合成的作用不一,该结果可为临床制定治疗SSc及其他相关疾病的中药方剂提供参考.     

丹参对系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的　探讨丹参治疗系统性硬皮病的药理机制。方法　用四甲基偶氮唑盐 (MTT)方法和光度检测法测定了丹参对成纤维细胞增殖和培养基中胶原含量的影响。结果　丹参水溶性提取物丹参注射液 (10 m g/m l、7.5 m g/ml、 5 .0 m g/m l、2 .5 m g/ml)及其活性单体丹参素 (6 0 μg/m l、 45 μg/ml、 30 μg/m l、15 μg/m l)和原儿茶醛 (40 μg/m l、2 0 μg/m l、10 μg/m l、5 μg/m l) ,以及丹参脂溶性总提取物 (1mg/m l、0 .5 m g/m l、0 .2 5 m g/m l)及其活性单体丹参酮 A (4μg/ml,2μg/m l) ,不仅对患者皮肤成纤维细胞的增殖具有显著的抑制作用 ,还能显著降低该细胞培养基中可溶性胶原的含量 (P<0 .0 5～ 0 .0 1)。上述抑制作用随药物浓度的增高或作用时间的延长而增强。采用流式细胞仪对该细胞周期的检测显示 ,丹参素组 G0 /G1 期细胞 ,原儿茶醛组和丹参酮 A组 G2 M期细胞的比例较正常人对照组细胞显著增高 (P<0 .0 1)。结论　丹参对体外培养的系统性硬皮病患者的皮肤成纤维细胞的增殖和胶原合成具有显著的抑制作用 ,可能是其治疗系统性硬皮病的药理机理之一。     

辛伐他汀对体外培养系统性硬皮病患者的成纤维细胞增殖和胶原表达的影响

目的探讨辛伐他汀对系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞增殖、胶原分泌和Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响。方法原代培养系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞,检测不同浓度的辛伐他汀作用于体外培养的成纤维细胞48h后细胞的存活力;观察不同浓度的辛伐他汀对细胞胶原分泌和Ⅰ型前胶原mRNA合成的影响。结果1.0×10-7,10-6,10-5和10-4mol/L浓度的辛伐他汀可以抑制患者皮肤成纤维细胞的增殖(P<0.05),并能显著减少成纤维细胞培养液中可溶性胶原的含量,与空白对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05),且抑制作用随着药物浓度的增高而增强,具有明显的浓度依赖性。1.0×10-7～10-4mol/L的辛伐他汀可以显著的减少Ⅰ型前胶原蛋白mRNA的表达(P<0.05)。结论辛伐他汀对系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞的增殖及胶原的分泌均有显著的抑制作用,对细胞Ⅰ型前胶原蛋白mRNA的合成具有抑制作用,其为治疗硬皮病提供了理论基础。     

氟伐他汀对系统性硬皮病成纤维细胞增殖及胶原分泌的影响

目的:确定氟伐他汀对系统性硬皮病(systemic scleroderma,SS)皮肤成纤维细胞(fibroblasts,Fb)增殖及胶原分泌的影响.方法:原代培养SS患者皮肤Fb 72 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的氟伐他汀对细胞的存活力,并绘制不同浓度氟伐他汀作用下Fb的生长曲线;观察不同浓度的氟伐他汀对Fb胶原分泌的影响.结果:与空白对照组相比,各浓度的氟伐他汀均明显抑制患者皮肤Fb的增殖,使细胞的生长速度减慢,显著减少Fb培养液中可溶性胶原的含量,差异有显著性(P<0.05),且随着药物浓度的增高而增强,具有明显的浓度依赖性.结论:氟伐他汀对SS皮肤Fb的增殖及胶原的分泌均有显著抑制作用,为其治疗硬皮病提供了理论基础.     

阿维A对系统性硬皮病成纤维细胞胶原合成及Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响

目的:明确阿维A对系统性硬皮病成纤维细胞胶原合成及Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响。方法:原代培养系统性硬皮病(SSc)患者皮肤成纤维细胞(FB),使用不同浓度的阿维A(10~(-5)、10~(-6)、10~(-7)、10~(-8)mol/L)作用48 h,用羟脯氨酸法测定胶原的质量浓度,RT-PCR法Ⅰ型前胶原mRNA的表达。结果:阿维A实验组FB胶原合成及I型前胶原mRNA的表达较对照组减少,且均与阿维A呈浓度依赖性关系。结论:阿维A可能通过抑制FBⅠ型前胶原基因的表达减少胶原合成。