亚硒酸钠对肿瘤细胞生长增殖和细胞内环核苷酸水平的影响

把ＨＬ－６０细胞与含或不含亚硒酸钠（１５μｍｏｌ／Ｌ）的培养液一起培养，用放名法测定ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ，以探讨亚硒酸钠对肿瘤细胞内环核苷酸水平的影响。研究发现１５μｍｏｌ／Ｌ的亚硒酸钠能显著地抑制ＨＬ－６０细胞的生长增殖，并降低静息的肾上腺（５０μｍｏｌ／Ｌ）ｃＧＭＰ的水平，但对ｃＡＭＰ水平无影响。研究结果提示，亚硒酸钠的抗肿瘤作用可能是通过降低细胞内ｃＧＭＰ水平而发挥。     

视黄酸和亚硒酸钠对人肝癌细胞生长和DNA合成抑制的相加作用

本文观察了亚硒酸钠和视黄酸对人肝癌细胞株SMMC—7721生长和DNA合成的影响。发现视黄酸(1—101μmol/L)和亚硒酸钠(2.5～10μmol/L)能显著抑制细胞的生长,且对细胞生长的抑制作用呈现饱和性。当1μmol/L 视黄酸和2.5μmol/L亚硒酸钠合用时,对细胞生长和~3H—TdR掺入抑制有相加作用。且1μmol/L视黄酸抑制作用与2.5μmol/L亚硒酸钠作用相当。     

富硒大蒜对体内外人胃癌细胞生长的影响

目的 比较富硒大蒜、普通大蒜、亚硒酸钠以及普通大蒜与亚硒酸钠混合（蒜硒联合）处理影响人胃癌细胞生长的能力。方法 利用细胞计数、流式细胞术、Western blot和裸鼠瘤体积测定等方法,观察富硒大蒜水溶物对离体培养的MGC803胃癌细胞系及其在裸鼠皮下生长的影响。结果 （1）在离体条件下,富硒大蒜对MGC803细胞增殖有明显抑制作用,与等蒜量普通大蒜作用强度相似;等硒量亚硒酸钠抑制作用最弱,蒜硒联合抑制作用最强。（2）富硒大蒜、普通大蒜和亚硒酸钠处理24h后,未同步化的细胞G1期增多,已同步化的细胞S期增多;蒜硒联合处理则使未同步化和已同步化细胞G2＋M期增多。（3）4种处理24h后,同步化细胞的Cdk2-CyclinE和Cdk4-CyclinD1复合物蛋白含量均降低。（4）饲喂Balb/C裸小鼠含1．67％富硒大蒜粉（含硒2μg/g)的饲料,对移植瘤生长的抑制率达29．92％;0．83％富硒大蒜、1．67％普通大蒜和4．38μg/g亚硒酸钠（含硒2μg/g)处理组未见明显抑制作用。（5）0．83％富硒大蒜处理可诱发裸鼠单核细胞包裹肿瘤。结论 富硒大蒜能够抑制MGC803细胞在体外的生长,主要作用在于蒜。富硒大蒜对裸鼠移植胃癌有抑制作用,作用比普通大蒜和亚硒酸钠强。     

硒化亚油酸与亚硒酸钠抗突变作用的比较研究

本文应用人全血白细胞非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验,对硒化亚油酸（Ｓｅ－ＬＡ）和亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）两者抑制ＭＮＮＧ诱发ＤＮＡ损伤作用进行了观察和比较。结果表明：Ｓｅ－ＬＡ（０．０２３～３．４２４μｇ／ｍｌ）对ＭＮＮＧ诱发ＵＤＳ反应有明显抑制作用,其抑制率远大于含硒量相同的Ｎａ２ＳｅＯ３;０．０５μｇ／ｍｌＮａ２ＳｅＯ３（含Ｓｅ量为０．０２３μｇ／ｍｌ）对ＵＤＳ反应呈最强的抑制率（２１．７％）,随Ｎａ２ＳｅＯ３浓度增高,其抑制作用反而降低,说明Ｎａ２ＳｅＯ３作为抗突变剂,它在高剂量时又呈现遗传毒性;当含Ｓｅ量≥０．０４６μｇ／ｍｌ时,Ｎａ２ＳｅＯ３对ＭＮＮＧ诱发ＤＮＡ损伤的抑制作用显著下降,而Ｓｅ－ＬＡ仍保持较高的抑制率（４２．２％～４３．９％）,表明Ｓｅ－ＬＡ明显降低了硒的毒性     

维生素A和亚硒酸钠对菜油烟冷凝物致小鼠毒性作用的影响

本文报道了维生素Ａ和亚硒酸钠对菜油烟冷凝物致小鼠毒性作用的影响。结果表明：①菜油烟冷凝物组小鼠的体重明显低于补充维生素Ａ组和亚硒酸钠组（Ｐ＜０．０１）；②菜油烟冷凝物组小鼠的心脏器系数高于补充维生素Ａ和亚硒酸钠组（Ｐ＜０．０５）；③补充维生素Ａ和亚硒酸钠后，可显著地降低菜油烟冷凝物所致的小鼠微核率和精子畸形率（Ｐ＜０．００１和Ｐ＜０．０１），而单纯菜油组则无致小鼠微核率和精子畸形率升高的作用（Ｐ＞０．０５）。     

硒化亚油酸及硒化亚麻酸对肿瘤细胞DNA合成的影响

本文报道用氚一胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法研究了新型抗癌药－硒化亚油酸及硒化亚麻酸对小鼠Ｓ１８０细胞ＤＮＡ合成的影响。结果表明，这两种新型抗肿瘤药物能明显抑制＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入肿瘤细胞，在１００μｇ／ｍｌ的浓度下，它们对Ｓ１８０瘤细胞ＤＮＡ合成的抑制率分别达到８９．０％和８８．３％，这些结果表明硒化亚油酸及硒化亚麻酸的抗癌机理之一是它们对＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入肿瘤细胞的干扰。     

甲基硒酸对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981增殖和凋亡作用及其分子机制的初步研究

背景与目的 已有的研究表明硒具有防癌作用和抑制乳腺癌、前列腺癌细胞株增殖的作用，但有关甲基硒酸（MSA）是否具有抗肺癌的作用目前尚不清楚。本研究的目的是探讨MSA对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981是否具有生长抑制及诱导凋亡的作用，并对其分子机制作初步探讨。方法应用体外细胞培养技术，以MSA处理L9981细胞株，应用台盼蓝计数法、克隆形成实验和流式细胞术检测MSA处理L9981细胞株前后细胞株体外增殖、克隆形成和凋亡水平的变化。应用流式细胞术检测MSA处理L9981细胞株前后细胞周期、细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白表达水平的变化。结果①MSA在大于0．5μmol／L的浓度时可显著抑制L9981细胞株的增殖（P〈0．05），细胞被阻滞于G0／G1期。②MSA浓度在2．5μmol／L时可诱导L9981细胞株进入凋亡（P〈0．05）。③MSsA在5μmol／L时可明显抑制L9981细胞株的克隆形成能力（P〈0．05）。④MSA能显著上调P53、P21、Fas、FasL和Bax蛋白表达水平。结论①MSA可显著抑制人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的体外增殖和克隆形成能力，并诱导细胞凋亡；②MSA的抗肺癌作用可能与其调控肺癌细胞株L9981细胞周期和细胞凋亡相关基因表达有关。     

硒化亚油酸与亚到钠抗突变作用的比较研究

本文应用人全血白细胞非程序ＤＮＡ合成试验，对硒化亚油酸和亚硒酸钠两者抑制ＭＮＮＧ诱发ＤＮＡ损伤作用进行了观察和比较。结果表明：Ｓｅ－ＬＡ对ＭＮＮＧ诱发ＵＤＳ反应有明显抑制作用，其抑制率远大于含硒量相同Ｎａ２ＳｅＯ３；０．０５μｇ／ｍｌＮａ２ＳｅＯ３对ＵＤＳ反应呈最强的抑制率，随Ｎａ２ＳｅＯ３浓度增高，其抑制作用反而降低，说明Ｎａ２ＳｅＯ３作为抗突变剂，它在高剂量以呈出遗传毒性。     

硒酸酯多糖对癌症患者血清MDA含量及CuZn-SOD活性的影响

目的：了解硒酸酯多糖对肿瘤患者体内ＭＤＡ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性的影响。方法：对６０例肿瘤病人随机分成３组：不服硒组，服硒４００μｇ／ｄ组及服８００μｇ／ｄ组并与１５名正常人对照比较。结果：癌症患者血清ＭＤＡ明显高于正常人（Ｐ＜０．０１），血清Ｓｅ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性明显低于正常人（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）；服硒酸酯多糖者化疗后血清Ｓｅ较不服者明显升高（Ｐ＜０．０５），ＣｕＺｎ－ＳＯＤ也明显升高（Ｐ＜０．０１），ＭＤＡ含量显著下降（Ｐ＜０．０５）；服４００μｇ／ｄ组与服８００μｇ／ｄ组之间上述各指标均无明显差异。结论：肿瘤病人摄入适量（４００μｇ／ｄ）硒酸酯多糖可能增加体内ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性，减轻了化疗药物对正常细胞的过氧化损伤。     

硒化蓖麻酸多相脂质体抗癌作用的初步报告

将作者首次合成的硒化蓖麻酸及蓖麻酸分别制成乳剂和多相脂质体，进行各种剂型的动物体内外抗癌活性研究。结果，在体外５００μｇ／ｍｌ的浓度下，蓖麻酸乳剂和硒化蓖麻乳剂都能１００％地杀伤Ｓ１８０腹水型瘤细胞，而对照组瘤组织有９７％存活。在体内蓖麻酸乳剂给小鼠腹腔注射２００ｍｇ／ｋｇ，对Ｓ１８０实体瘤的抑制率为３０．６％（Ｐ＜０．０５）；相同剂量下硒化蓖麻酸乳剂的抑瘤率为３３．３％（Ｐ＜０．０５）；蓖麻酸多     

三氧化二砷逆转人肺腺癌A549/ R 细胞耐药及对GSTs 表达的影响

 目的 探讨三氧化二砷（As₂O₃）对人肺腺癌A549／R细胞耐药的逆转及谷胱甘肽S转移酶（GSTs）表达的变化。方法 分别采用生化方法及RT-PCR方法检测GSTs活性及GST-πmRNA表达水平的变化。结果 0．15μmol／L As2O3可使A549／R细胞内阿霉素（ADM）浓度增加，其IC50值由原来的0．495μmol／L降低至0．217μmol／L，逆转倍数为2．3倍。耐药细胞中GSTs活性增高，GST-πmRNA呈过表达状态。不同浓度的As2O3作用后，GSTs活性下降（P〈0．05），GST-πmRNA表达水平下调，呈浓度依赖性变化。结论 As₂O₃可部分逆转A549／R细胞对ADM的耐药性，GST-π的改变参与其耐药机制。     

Serum selenium and thromboxane in patients with gynaecological cancer

To explore the relationships between the antioxidant seleniumand pro-aggregatory thromboxane A₂ in patients with gynaecologicalcancer, we measured the serum concentrations of selenium andthe production of thromboxane B₂ (TxB₂, a stable metaboliteof thromboxane A₂) by the aggregating platelets in patientswith endometrial (n = 35), ovarian (n = 30) and cervical cancer(n = 25), and in 32 control women. The selenium concentrationin endometrial (1.14 ± 0.04 µmol/1; mean ±SE), ovarian (0.96 ± 0.04 µmol/1) and cervicalcancer (0.97 ± 0.06 µmol/1) was significantly lowerthan in control subjects (1.26 ± 0.03 µmol/1).The release of TxB₂ into serum during spontaneous clotting ofthe blood was significantly increased in ovarian cancer (229.2± 15.9 ng/ml), decreased in endometrial cancer (142.6± 12.4 ng/ml) and normal in cervical cancer (185.9 ±14.8 ng/ml) as compared with control subjects (185.9 ±11.9 ng/ml). The levels of selenium and TxB₂ did not correlatewith each other in the whole series or in any subgroup. Thus,selenium does not seem to be an important determinant in thebiosynthesis of TxB₂ in patients with gynaecological malignancy.     

Selenium-mediated inhibition of 7,12-dimethylbenz[a]anthracene-induced mouse mammary tumorigenesis

The effect of supplemental selenium on 7,12-dimethyl-benz[a]anthracene(DMBA)-induced mammary tumori-genesis was investigated in severalmouse strains. Selenium, administered as SeO₂ in the drinkingwater, inhibited mammary tumor formation in DMBA-treated (C57BLx DBA/2f)F₁, C3H/StWi and BALB/c female mice. In addition, seleniuminhibited the occurrence of DMBA-induced ductal hyperplasiasin (C57BL x DBA/2f)F₁ and BALB/c mice and mammary tumor virus-inducedalveolar hyperplasias in BALB/cfC3H mice. Selenium did not alterthe growth of established mammary tumors. These results demonstratethat supplemental selenium inhibits both chemical- and viral-inducedmouse mammary tumorigenesis, and secondly, that the developmentof preneoplastic lesions, an early stage in mammary tumorigenesis,is very sensitive to selenium-mediated inhibition.     

SeO2诱导肺癌细胞凋亡中Bcl-2和P53表达及细胞内活性氧和Ca2+水平影响的研究

目的 探讨SeO2对三种肺癌肿瘤细胞A549,GLC-82和PG的增生,凋亡,Bcl-2和p53表达,活性氧和Ca2 水平的影响。方法 本实验采用流式细胞术测定了细胞的凋亡率,细胞中活性氧和Ca2 的水平以及Bcl-2和p53的表达。结果 10μmoL/L的SeO2作用48 h就能诱导47.8％的A549和40.8％的GLC-82细胞凋亡,而30 μmol/L的SeO2也能诱导37.8％的PG细胞凋亡。用不同浓度(3-30 μmoL/L)的SeO2处理细胞48 h,在A549细胞中,代表细胞Bcl-2表达的平均荧光强度从65.8下降至9.6,而在其它两种细胞中,Bcl-2的表达下降都不明显。P53的表达在三种细胞中都有不同程度的上升,在A549细胞中,从3.5上升至7.1,在GLC-82细胞中,从4.7上升至7.4,在PG细胞中,从7.8上升至9.0。SeO2能显著降低三种细胞内活性氧和Ca2 水平。结论 SeO2对三种肺癌肿瘤细胞均有诱导凋亡的作用,在凋亡过程中涉及到Bcl-2下调和p53上调,以及细胞内活性氧和Ca2 水平下降。     

三氧化二砷对人宫颈癌细胞Fas 表达和钙含量的影响

 目的 研究人宫颈癌Hela细胞经三氧化二砷(As₂O₃)处理后的Fas表达和钙含量变化。方法利用MTT法观察As₂O₃对Hela细胞的生长抑制作用，Annexin V-FITC+PI双参数检测细胞凋亡。流式细胞仪测定As₂O₃处理后Hela细胞Fas阳性百分率及胞内钙离子(IECa²⁺)含量变化。结果 (1) As₂O₃可显著抑制Hela细胞生长，且剂量-效应和时间-效应关系显著(P<0．05)，其24h、48h和72h的IG50值分别为8．62μmol／L、6．77μmol／L和4．89μmol／L。(2) As₂O₃处理后Hela细胞凋亡率明显增加。(3) As₂O₃能显著增加Fas蛋白表达和IECa²⁺含量(P<0．01)。结论 As₂O₃在体外可显著抑制Hela细胞生长并引起凋亡，其机制可能与上调Fas表达和IECa²⁺含量有关。     

鞣酸对LLC/cMOAT细胞多药耐药性的逆转机制

目的本研究探讨鞣酸(Tannic acid,TA)对LLC/cMOAT细胞多药耐药性的逆转作用及其可能机制。方法采用MTT法检测LLC/CMV和LLC/cMOAT细胞对各种化疗药物的敏感性以及在不同浓度的TA处理下细胞的存活状态;确定TA的非细胞毒性浓度以及在该浓度下各梯度浓度处理时细胞的存活率;采用流式细胞仪技术检测使用非细胞毒性浓度的TA处理前后LLC/cMOAT细胞内柔红霉素(DNR)浓度变化、细胞周期阻滞及对凋亡的影响。结果LLC/cMOAT细胞对羟基喜树碱(CPT-11),阿霉素(ADM),顺铂(DDP)和长春新碱(VCR)均有不同程度的耐药,其耐药倍数分别是2.08、3.02、4.01和9.31,对依托泊苷(VP-16)、紫衫醇(TAX)无明显耐药,10.0μmol/L浓度以下的TA对LLC/CMV和LLC/cMOAT细胞无明显细胞毒性,2.5、5.0、10.0μmol/L浓度的TA能显著降低LLC/cMOAT细胞的IC₅₀(P<0.05),其逆转倍数分别为5.09、6.33、7.76倍;细胞内DNR荧光强度随着TA浓度的增高而明显增强;TA作用细胞12h可使G₁期细胞数百分比由(46.35±3.74) %增至(66. 43 ±5. 87) % , 阻滞细胞于G₁期; TA 与VCR 联合处理细胞24 h 和48 h 时凋亡率分别为12. 1 %和19. 0 % ,与处理前(1. 65 %) 相比提高明显;使用2. 5μmol/ L 、5.0μmol/ L 和10. 0μmol/ L 浓度的TA 与VCR 共同处理细胞24 h 后,凋亡率由处理前的4. 96 %分别提高到11. 2 %、17. 9 %和25. 1 %。结论　TA能部分逆转LLC/ cMOAT 细胞的多药耐药,显著提高耐药细胞内DNR 荧光强度并呈浓度依赖性,阻滞细胞周期于G₁ 期,并可诱导细胞凋亡,呈时间、剂量依赖性,其机制可能与抑制化疗药物外排、增加细胞内药物浓度以及诱导细胞凋亡有关。     

中药多糖在信号转导中诱导细胞凋亡的探讨

 目的 研究中药多糖在信号转导中诱导细胞凋亡的作用并探讨其作用机制。方法 培养1、8h后，经流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 茯苓多糖、黄芪多糖、猪苓多糖诱导S180肉瘤细胞的凋亡，其效果与茯苓多糖、黄芪多糖、猪苓多糖的浓度和作用时间有关。实验组培养液，分别加入茯苓多糖、黄芪多糖、猪苓多糖各100μg／mL、250μg／mL和500μg／mL，培养1、8h后细胞凋亡率有增高趋势。实验组细胞凋亡率与对照组相比有显著性差异（P〈0．05）。结论 中药多糖在早期能诱导细胞凋亡，在晚期能引起细胞坏死，抑制S180肉瘤细胞的增殖。     

柚皮苷逆转人卵巢癌耐药SKOV3／DDP细胞耐药性及逆转机制的研究

目的 研究柚皮苷对卵巢癌顺铂（DDP）耐药细胞SKOV3／DDP体外增殖的影响及耐药逆转作用,并初步探讨相关耐药机制。方法采用MTT法测定DDP对SKOV3和SKOV3／DDP细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）,柚皮苷对SKOV3／DDP细胞的增殖抑制作用及柚皮苷联合DDP对SKOV3／DDP细胞的增殖抑制作用。筛选出非细胞毒性的柚皮苷浓度,将实验细胞分为空白对照组、2.5 μg／ml DDP组、10 μmol/L柚皮苷组、10 μmol/L柚皮苷联合2.5 μg／ml DDP组,分别采用RT-PCR和Western blotting测定各组作用48 h后耐药基因MDR1 mRNA及MRP2 mRNA的表达及其相应的表达产物P-gp、MRP2蛋白的表达水平。结果1～32 μg／ml DDP处理SKOV3及SKOV3／DDP细胞48 h后,SKOV3细胞的IC₅₀为5.48 μg／ml,SKOV3／DDP细胞为14.93 μg／ml,耐药指数为2.72。柚皮苷对SKOV3／DDP细胞有明显的增殖抑制作用,且呈剂量和时间依赖性。选取10 μmol／L柚皮苷作为逆转耐药实验浓度,10 μmol／L柚皮苷联合DDP作用48 h后,SKOV3／DDP细胞对DDP的耐药指数为1.62,逆转倍数为1.68。RT-PCR及Western blotting检测显示,柚皮苷联合DDP组与DDP单药组比较,MDR1 mRNA、MRP2 mRNA表达及P-gp、MRP2蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论柚皮苷对卵巢癌SKOV3／DDP细胞的体外增殖具有明显抑制作用,并能逆转SKOV3／DDP细胞的耐药性,其逆转耐药的机制可能与下调耐药基因MDR1 mRNA及MRP2 mRNA及相应的P-pg、MRP2蛋白的表达有关。     

As2S2对人卵巢癌耐药株C13K/DDP细胞增殖和凋亡的作用

 目的：研究As₂S₂对卵巢癌耐药株C13K/DDP细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法：以 不同浓度(4、6、8、10μmol/L)的As2S2,分三个时间点(24、48、72h)干预C13K/DDP细胞,采用 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测As2S2对C13K/DDP细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋 亡率;Western blot检测BCL-2、BAX、AKT的表达。结果：MTT结果显示不同浓度(4、6、8、10 μmol/L)的As₂S₂作用C13K/DDP细胞后,与DDP组相比其增殖受到抑制,作用呈明显的时效和量效 关系,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞仪的结果显示6、8μmol/L As₂S₂诱导细胞的24h凋 亡率分别为(16.05 ±2）%、( 22.30±3）%,DDP组为(9.45 ±2)%,对照组为( 7.82±1.2)% ;6、8μmol/L As₂S₂诱导细胞48h凋亡率分别为(28.94 ±1.8）%、(37.85 ±3）%,DDP组为 （14.74±3.2）%,对照组为( 9.80±2.6）%,各组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示BCL-2、AKT表达下调,BAX表达明显上调。结论：As₂S₂对人卵巢癌耐药株 C13K/DDP细胞具有增殖抑制和诱导凋亡的作用,可能与BCL-2下调、BAX上调或AKT下调有关。     

辛基酚对MCF-7乳腺癌细胞周期及周期蛋白表达的影响

目的观察辛基酚对MCF-7乳腺癌细胞周期及周期蛋白表达的影响。方法以MTT试验、流式细胞分析、免疫细胞化学和RT-PCR等方法观察辛基酚对MCF-7乳腺癌细胞增殖、细胞周期相和细胞凋亡、CDK2和CDK4 mRNA表达、Cyclin D1 mRNA及蛋白表达的影响。结果4、8、16μmol/LOP作用MCF-7乳腺癌细胞72h时,细胞增殖率分别为107.31%、168.06%、62.00%,G0/G1期细胞分别为(52.46±6.67)%、(50.19±7.39)%、(67.31±5.47)%,对照组(55.27±7.53)%,细胞凋亡率分别为(4.84±1.12)%、(6.48±1.36)%、(19.26±3.57)%,对照组(5.56±1.125)%,16μmol/LOP减少了细胞中CDK2、CDK4、Cyclin D1 mRNA及Cyclin D1的表达。结论4、8μmol/LOP促进MCF-7乳腺癌细胞增殖,16μmol/LOP则抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,这可能与OP影响细胞中CDK2、CDK4、Cyc-lin D1 mRNA及Cyclin D1表达有关。