水通道蛋白-8对结肠癌细胞凋亡及凋亡抑制蛋白的影响

目的：通过表达水通道蛋白-8（AQP-8）真核表达载体,观察水通道蛋白AQP-8对HT-29细胞凋亡及凋亡抑制蛋白（ IAPs）表达的影响。方法取对数生长期的人结肠癌HT-29细胞株用于实验。构建AQP-8真核表达载体并转染HT-29细胞,通过Western blot检测GFP-AQP-8转染效率;采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;通过Real Time-PCR和Western blot检测转染GFP-AQP-8的HT-29细胞凋亡抑制蛋白（ IAPs）家族成员c-IAP1、c-IAP2、XIAP、NIAP、Survivin和Livin表达水平。结果 Western blot结果显示,GFP-AQP-8转染后结肠癌HT-29细胞AQP-8基因表达显著上调（ P ＜0{．05）。 MTT分析结果显示,转染了GFP-AQP-8的结肠癌HT-29细胞增殖抑制率显著增加（ P ＜0．05）;流式细胞分析发现,转染了GFP-AQP-8的HT-29细胞凋亡率显著增加（ P ＜0．05）。Real Time-PCR和Western blot结果显示,与转染GFP-N1的阴性对照组相比较,转染了GFP-AQP-8的HT-29细胞c-IAP1、c-IAP1、XIAP、Livin和Survivin的mRNA和蛋白表达水平下降（ P ＜0．05）,NIAP表达变化不明显（ P ＜0．05）。结论过表达AQP-8可抑制HT-29细胞生长,并能通过下调c-IAP1、c-IAP1、XIAP、Livin和Survivin表达诱导HT-29细胞凋亡。     

外源性干扰 PVT1表达对结直肠癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的：外源性干扰PVT1表达对结直肠癌（CRC）细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法体外转染小干扰RNA（siRNA）干扰RKO和HCT116细胞PVT1表达（si‐PVT1组）;另设阴性对照siRNA（si‐NC）组。MTT实验和克隆形成实验检测 RKO和 HCT116细胞增殖力,Transwell实验检测RKO和HCT116细胞侵袭力,qRT‐PCR及Western blot检测相关抑癌基因SMAD4的表达。结果与si‐NC组相比,si‐PVT1组RKO和HCT116细胞增殖力抑制（P＜0．05或P＜0．01）,细胞克隆数减少（P＜0．01）,细胞侵袭数目减少（P＜0．05或P＜0．01）,且SMAD4 mRNA和蛋白表达水平均升高（P＜0．05）。结论 PVT1能促进CRC细胞增殖和侵袭,抑制CRC细胞凋亡。     

辛伐他汀对人甲状腺未分化癌细胞凋亡的影响

目的：探讨辛伐他汀对人甲状腺未分化癌（ATC）细胞株 HTh‐74生长抑制和凋亡的作用。方法 MTT法检测细胞生长率;结晶紫染色观察细胞克隆形成情况;膜联蛋白Ⅴ／碘化丙啶（Annexin Ⅴ／PI）双染检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶3（Caspase‐3）、B细胞淋巴瘤‐白血病2（Bcl‐2）和Bcl相关X蛋白（Bax ）的表达。结果辛伐他汀对H T h‐74细胞有显著生长抑制作用,呈浓度和时间依赖性（ P＜0．05或P＜0．01）。辛伐他汀处理后可抑制细胞克隆形成、使细胞凋亡率显著增高、Caspase‐3剪切体和Bax蛋白表达量增加、Bcl‐2蛋白表达量降低、Bax／Bcl‐2比值增加,且均呈浓度依赖性（P＜0．05或P＜0．01）。结论辛伐他汀可诱导人 ATC 细胞株HTh‐74凋亡,其可能机制是与Bcl‐2表达下调、Bax表达上调以及Caspase‐3活化有关。     

丙氨瑞林对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨丙氨瑞林对卵巢癌细胞株CoC1／cDDP增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法：将丙氨瑞林与CoC1／cDDP一起培养，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率，流式细胞仪进行细胞周期时相及凋亡分析，瑞氏-姬姆萨染色后观察凋亡细胞形态，放射免疫法测定培养液中CA125的变化，半定量RT—PCR法检测作用前后CoC1／cDDP细胞Survivin—△Ex3及Caspase-3 mRNA的表达。结果：（1）随着丙氨瑞林浓度的升高，作用时间的延长，细胞生长抑制率逐渐上升（P〈0．01）。（2）丙氨瑞林作用后的CoC1／cDDP细胞，G0/G1期细胞比例增加，S期及G2/M期细胞比例减少，细胞增殖指数（PI）降低（P〈0．01）；培养液中CA125的水平下降，与PI正相关（r=0．893，P〈0．05）；并且这些变化与丙氨瑞林的浓度相关。（3）作用后亚G1期及Annexin V^＋／PI^-细胞的百分率较对照组明显升高（P〈0．01），并出现明显的凋亡细胞形态的改变；Survivin—△Ex3 mRNA表达与对照组比较无明显变化（P〉0．05），而Caspase-3 mRNA的表达上调，并随着丙氨瑞林浓度的升高而表达增加（P〈0．01），且与亚G1期及Annexin V^＋／PI^-胞的比例呈正相关（r分别为0．994及0．978，P〈0．01）。结论：丙氨瑞林能直接抑制卵巢癌细胞株CoC1／cDDP细胞的增殖，并诱导其凋亡，作用机制与丙氨瑞林上调Caspase-3 mRNA的表达有关。     

消癌平辅助丝裂霉素对肺癌细胞化疗增效的研究

目的：通过消癌平联合丝裂霉素对肺癌 A549细胞增殖,细胞周期、凋亡及相关基因表达的影响,探讨化疗增效机制。方法MTT 检测消癌平（2、8、21μl／ml）联合丝裂霉素（2μg／nl）对肺癌 A549细胞生长抑制（联合用药 A、B、C 组）,并设立对照组、丝裂霉素组和消癌平组;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;RT－PCR 检测 P53、CyclinD1基因表达。结果MTT 检测显示在24、48、72 h 联合用药 A、B、C 组 OD（光密度）均比丝裂霉素低（ P ＜0．05）;流式细胞术检测表明消癌平、丝裂霉素与对照组相比,肺癌细胞均阻滞于 G0／G1期,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。联合用药组 G0／G1期细胞比率、细胞凋亡率与丝裂霉素组比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。消癌平组、丝裂霉素组与对照组比较,均能提高 P53 mRNA 表达（ P ＜0．05）,联合治疗组 P53 mRNA 表达高于丝裂霉素组（ P ＜0．05）。消癌平组、丝裂霉素组与对照组比较均能降低 Cyclin D1基因的表达（ P ＜0．05）。与丝裂霉素组比较,联合用药可显著减低CyclinD1基因的表达（ P ＜0．05）。结论消癌平辅助丝裂霉素对肺癌细胞化疗增效可能与上调 P53 mRNA 表达,增强细胞凋亡作用,以及下调 CyclinD1 mRNA 表达,阻滞细胞周期于 G0／G1期有关。     

丹参单体 IH764-3对马兜铃酸致人肾小管上皮细胞损害的保护机制研究

目的：探讨丹参单体IH764-3在马兜铃酸（aristolochic acid,AA）导致人肾小管上皮细胞系（HK-C）损害中的保护作用及机制。方法以含体积分数0．10胎牛血清的DMEM培养液培养HK-C细胞72 h。实验分为3大组（8小组）,AA组在培养液中加入浓度为20 mg／L的AA;观察组在培养液中加入浓度为20 mg／L的AA和不同浓度丹参单体IH764-3;对照组培养液中不加AA。培养24、48、72 h后,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各细胞培养液中转化生长因子β1（TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）、金属蛋白酶2（MMP-2）;采用MTT法观察HK-C细胞活性,实时荧光定量PCR技术检测凋亡蛋白Caspase-3mRNA的表达情况。结果 AA刺激后,诱导TGF-β1、TIMP-1、PAI -1表达增加,MMP-2表达减少（ P ＜0．05）。经丹参单体IH764-3干预后,TGF-β1、TIMP-1、PAI-1表达减少,MMP-2表达增加,其中以IH764-380 mg／L效果最佳（ P ＜0．05）。 AA组及观察组较对照组HK-C细胞的活性均受到抑制,细胞的凋亡率增加,Caspase3-mRNA表达增高（ P ＜0．05）。观察组较AA组细胞活性明显增高,细胞的凋亡率明显下降,Caspase-3mRNA表达降低,观察组中以丹参单体IH764-380 mg／L效果最佳（ P ＜0．05）。结论丹参单体IH764-3可明显提高HK-C细胞抵抗AA导致细胞损伤的能力,保护HK-C细胞,其具体途径可能与抑制TGF-β1、TIMP-1、PAI-1、Caspase-3mRNA,升高MMP-2的表达而发挥作用。     

乌司他丁对脓毒症大鼠肠道肠三叶因子mRNA表达的影响

目的探讨脓毒症大鼠肠道肠三叶因子mRNA表达变化及乌司他丁对其的影响。方法60只SD大鼠随机分为对照组、脓毒症组、预处理组及治疗组（n=15）。后三组采用盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture,CLP）制作大鼠脓毒症模型。预处理组在CLP前2h经尾静脉注射UT125,000u/Kg,治疗组在CLP后2h经尾静脉注射UT150,000u／Kg。于模型建立后12h取回肠黏膜,观察其病理改变并以RT—PCR法检测TFF3mRNA的表达。结果TFF3mRNA在脓毒症组显著下降（P〈0．05）,预处理组及治疗组较脓毒症组有明显升高（P〈0．05）,预处理组较治疗组明显升高（P〈0．05）。结论脓毒症大鼠TFF,mRNA表达明显下降,乌司他丁可显著上调其表达,保护肠黏膜,预防用药较治疗给药可能更有意义。     

1，25二羟维生素 D3诱导喉癌细胞 Hep-2细胞凋亡及其对Bax／Bcl-2蛋白表达水平的影响

目的：研究1,25二羟维生素 D3抑制人喉癌 Hep-2细胞增殖作用,诱导细胞凋亡及其凋亡相关机制。方法用不同剂量（10－8、10－7、10－6 mol／L）1,25二羟维生素 D3处理 Hep-2细胞24 h、48 h、72 h,四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测 Hep-2细胞的增殖情况,计算抑制率。流式细胞术检测 Hep-2细胞的凋亡率。Western blot 检测用药前后细胞中 Bax 和 Bcl-2蛋白的表达水平。结果1,25二羟维生素 D3可以抑制 Hep-2细胞增殖（P ＜0．05）,最高抑制率可达30．71％,在上述浓度内随着浓度增加、时间延长抑制作用逐渐增强,呈时间－剂量依赖性。10－7、10－6 mol／L 1,25二羟维生素 D3作用48 h 后,Hep-2凋亡细胞比例显著增加,凋亡率高于空白对照组（P ＜0．05）。1,25二羟维生素 D3处理48 h 后,Hep-2细胞 Bax 蛋白表达上升,Bcl-2蛋白表达水平下降。结论在一定浓度范围内1,25二羟维生素 D3能够抑制人喉癌 Hep-2细胞的增殖,呈时间－剂量依赖性,其抑制作用与诱导细胞凋亡有关;1,25二羟维生素 D3可通过上调 Bax 蛋白表达、下调 Bcl-2蛋白表达诱导 Hep-2细胞凋亡。     

胃癌核转录因子-κB 和三叶因子的表达特征及其临床意义

目的：研究核转录因子-κB（NF-κB）p65和三叶因子3（TFF3）在胃癌组织中的表达及相关性,评价两者在胃癌发生、发展中的临床意义,以及与幽门螺杆菌（ Hp）感染的关系。方法采用免疫组化方法检测30例正常胃黏膜、32例不典型增生与70例胃癌组织中NF-κBp65和TFF3的表达情况,同时检测Hp感染情况。结果 NF-κBp65在正常胃黏膜、不典型增生、胃癌中表达水平呈递增强趋势（与正常胃黏膜组比较,χ^2＝18．632、44．291,均P＜0．01）,胃癌中表达最高,高于不典型增生组（χ^2＝5．205,P＜0．05）。 TFF3表达水平亦呈递增强趋势（与正常胃黏膜组比较,χ^2＝16．944、22．917,均P＜0．01）,胃癌中表达最高,但与不典型增生之间差异无统计学意义（χ^2＝0．162,P＞0．05）。不典型增生组织中Hp感染者NF-κBp65、TFF3表达显著高于Hp阴性病例（P＜0．01或P＜0．05）。胃癌组织中NF-κBp65表达与TFF3表达呈显著正相关（r＝0．350, P＝0．003）。结论 NF-κBp65、TFF3高表达可能是胃癌发生的早期事件,NF-κBp65和TFF3的异常表达呈正相关,两者在胃癌的发生、发展中可能存在协同作用。     

造影剂对单侧输尿管梗阻大鼠血中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白及肾 Bax mRNA的影响

目的：研究造影剂对单侧输尿管梗阻大鼠血中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（ NGAL）及肾Bax mRNA的影响。方法 SD大鼠制备可复性的完全性左侧输尿管梗阻模型,随机分为假手术组、对照组与造影剂组;检测肾形态学变化、血NGAL、肾小管细胞凋亡及肾组织Bax mRNA的表达。结果造影组在注射后第1天,大鼠左右肾体积、肾实质厚度和重量差异显著,造影剂组NGAL含量及Bax mRNA表达与对照组比较显著升高（ P＜0．05）,注射药物后第1天及第3周造影剂组大鼠血清NGAL及Bax mRNA与对照组比较均显著升高（ P＜0．05）,注射药物后第3周后造影剂组大鼠左侧肾小管细胞凋亡与模型组比较显著升高（ P＜0．05）。结论造影剂对单侧肾积水大鼠肾有一定的损伤作用,Bax介导的肾小管细胞凋亡可能是重要机制。     

应用PASS系统分析我院2010年住院医嘱

目的:了解我院2010年住院患者的合理用药情况,探讨如何利用合理用药监测系统( PASS)提高合理用药水平.方法:利用PASS对我院2010年15 966例住院患者的1 184 997条用药医嘱进行监测,以黑色警示医嘱为依据,收集不合理用药信息,并对监测结果进行统计、分析.结果:不合理用药医嘱50 261条,发生率为4.24％.绝对禁止黑色医嘱5441条,主要为药物相互作用(66.54％)、注射液体外配伍(17.86％)、用法用量(15.46％)、儿童警告(1.14％).结论:应用PASS系统能有效监测医嘱中的不合理用药情况,有利于提高临床合理用药水平,但PASS系统尚存在局限性,有待进一步完善.     

2009年某院住院患者抗真菌药用药调查

目的:分析讨论某院抗真菌药使用的合理性,为临床安全有效地使用抗真菌药提供参考。方法:回顾性统计分析某院2009年住院患者抗真菌药用药信息。结果:2009年某院住院患者抗真菌药DDDs排名前3名分别为:氟康唑、制霉菌素和伊曲康唑;使用金额排名前3名分别为:氟康唑、米卡芬净及卡泊芬净;更换一种抗真菌药进行治疗的患者数为176人,在全部患者中占13.4%。结论:应进一步强化用药指征的意识,提高标本送检率,同时改善某些抗真菌用药不合理更换的现象,以避免耐药性发生,从而更好更长远地体现抗真菌药的治疗价值。     

微透析取样技术在中药体内分析中的应用研究进展

本文综述了微透析取样技术在中药体内分析中的应用,介绍微透析取样技术的原理、组成、探针类型、特点,重点阐述了微透析取样技术在测定脑、血液、皮肤等组织器官中中药有效成分浓度的应用实例。表明微透析取样技术在中药药效研究中具有广阔的前景。     

应用PASS系统对我院2008年住院医嘱的分析

目的监测分析2008年我院住院患者用药情况。方法将PASS系统嵌入医生工作站、临床药学工作站等子系统,构建合理用药计算机网络系统,对住院医嘱进行及时监测,将监测结果向医生反馈,并对其进行统计、分析。结果2008年共监测医嘱3 620 241条,不合理医嘱908条,占0.02%。不合理医嘱中,配伍禁忌(381条)占41.96%,用法用量(381条)占41.96%,药物相互作用(108条)占11.89%,儿童用药(38条)占4.19%。经与医生沟通后,更改不合理医嘱856条,占94.27%。结论PASS系统可有效监测医嘱中的不合理用药,通过与医生交流,大大减少药物不良事件的发生,值得临床推广应用,也为临床药师开展工作带来了极大的便利。但PASS系统尚存在局限性,有待进一步完善。     

Chondroprotective Effects of Wogonin in Experimental Models of Osteoarthritis in vitro and in vivo

We evaluated the chondroprotective effects of wogonin by investigating its effects on the gene expression and production of matrix metalloproteinase-3 (MMP-3) in primary cultured rabbit articular chondrocytes, as well as on production of MMP-3 in the rat knee. Rabbit articular chondrocytes were cultured in a monolayer, and RT-PCR was used to measure interleukin-1β (IL-1β)-induced expression of MMP-3, MMP-1, MMP-13, a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs-4 (ADAMTS-4), and type II collagen. In rabbit articular chondrocytes, the effects of wogonin on IL-1β-induced production and proteolytic activity of MMP-3 were investigated using western blot analysis and casein zymography, respectively. The effect of wogonin on MMP-3 protein production was also examined in vivo. In rabbit articular chondrocytes, wogonin inhibited the expression of MMP-3, MMP-1, MMP-13, and ADAMTS-4, but increased expression of type II collagen. Furthermore, wogonin inhibited the production and proteolytic activity of MMP-3 in vitro, and inhibited production of MMP-3 protein in vivo. These results suggest that wogonin can regulate the gene expression and production of MMP-3, by directly acting on articular chondrocytes.     

Role of glutathione in reduction of arsenate and of gamma-glutamyltranspeptidase in disposition of arsenite in rats

Arsenate (AsV), the environmentally prevalent form of arsenic, is converted sequentially in the body to arsenite (AsIII), monomethylarsonic acid (MMAsV), monomethylarsonous acid (MMAsIII), and dimethylarsinic acid (DMAsV) and some trimethylated metabolites. Although the biliary excretion of arsenic in rats is known to be glutathione (GSH)-dependent, involving transport of arsenic-GSH conjugates, the role of GSH in the reduction of AsV to the more toxic AsIII in vivo has not been defined. Therefore, we studied how the fate of AsV is influenced by buthionine sulfoximine (BSO), which depletes GSH in tissues. Control and BSO-treated rats were given AsV (50 micromol/kg, i.v.) and arsenic metabolites in bile, urine, blood and tissues were analysed by HPLC-HG-AFS. BSO increased retention of AsV in blood and tissues and decreased appearance of AsIII in blood, bile (by 96%) and urine (by 63%). The biliary excretion of MMAsIII was also nearly abolished, the appearance of MMAsIII and MMAsV in the blood was delayed and the renal concentrations of these monomethylated arsenicals were decreased by BSO. Interestingly, appearance of DMAsV in blood and urine remained unchanged and the concentrations of this metabolite in the kidneys and muscle were even increased in response to BSO. To test the role of gamma-glutamyltranspeptidase (GGT) in arsenic disposition, the effect of the of the GGT inhibitor acivicin was investigated in rats injected with AsIII (50 micromol/kg, i.v.). Acivicin lowered the hepatic and renal GGT activities and increased the biliary as well as urinary excretion of GSH, but failed to alter the disposition (i.e. blood and tissue concentrations, biliary and urinary excretion) of AsIII and its metabolites. In conclusion, shortage of GSH decreases not only the hepatobiliary transport of arsenic, but also reduction of AsV and the formation of monomethylated arsenic, while not hindering the production of dimethylated arsenic. While GSH plays an important role in the disposition and toxicity of arsenic, GGT, which hydrolyses GSH and GSH conjugates, apparently does not influence the fate of the GSH-reactive trivalent arsenicals in rats.     

合肥市某“三甲医院”2009年住院患者抗菌药物应用分析

目的:分析该"三甲"医院2009年住院患者抗菌药物的使用情况,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法:收集该"三甲"医院2009年抗菌药物使用资料,并对抗菌药物应用的品种、销售金额和用药频度(DDDs)等进行分析。结果:住院患者使用抗菌药物涉及96种,销售金额(4597.57万元)占医院药品销售总金额(15123.58万元)的30.40%,其中列前3位的依次为头孢菌素类28种(2386.49万元),其他β-内酰胺类16种(1124.52万元)及氟喹诺酮类8种(319.03万元);用药金额与用药频度(DDDs)前3位为头孢甲肟、头孢替安、头孢孟多酯。结论:该院住院患者抗菌药物应用结构基本合理,但仍应重视其安全性、有效性,合理选择使用。     

罗哌卡因在分娩镇痛中的应用

目的：观察不同浓度罗哌卡因（ropivacaine,Rop)用于分娩镇痛的临床效果,探索其理想的浓度和剂量。方法：随机选择ASAⅠ-Ⅱ级临产初产妇45例,平均分为三组：0．16％Rop组和0．2%Rop组作为观察组,以及对照组15例。观察组于宫口开至2－3cm时于L2－3间隙行硬膜外腔穿刺置管,以罗哌卡因维持镇痛;对照组未作分娩镇痛。围分娩镇痛期地监测血压（BP）、脉氧饱和度（SpO2)、EKG、PETCO2、宫缩及胎心音,记录产程时间：镇痛效果采用VAPS评分法进行疼痛评分,运动神经阻滞以Bromage分级评分;新生儿出生后1－5min进行Apgar评分,分娩后24h新生儿NACS评分。结果：围分娩期三组生命体征稳定;VAPS评分观察组较对照组明显降低,但0．2％Rop对运动神经的阻滞频率和程度最重,对宫缩有轻微的抑制,催产素用量相对增加;对产的影响均短于对照组,但差异不显著,三组对围分娩期胎心、Apgar评分无影响;分娩后24hNACS评分观察组较对照组增高明显;剖宫产率0．16％、Rop组最低。结论：罗哌卡因独特的感觉和运动阻滞明显分离,对子宫胎盘血流无明显影响,有利于分娩镇痛。0．2％Rop较0．16％对运动神经阻滞的频率和程度更重0．16％Rop对分娩镇痛是一种比较理想的局部麻醉药。     

基层医院护士在临床合理用药中的作用

目的充分利用护士在医师和患者间的特殊地位和作用,促进基层临床合理用药。方法从护士的工作性质出发,论述护士参与促进合理用药的方便和优势。结果通过实践,护士在促进合理用药中的作用得到有效发挥,基层合理用药环境得到极大改善。结论充分利用护士与医师和患者间的特殊桥梁作用,在基层医院促进合理用药,规范医师用药行为,防止药物滥用,引导患者安全用药,降低药源性疾病。     

西南4省市63家医院2002年呼吸系统用药分析

目的 :分析 2 0 0 2年西南 4省市 6 3家医院呼吸系统用药的现状及趋势。方法 :收集 2 0 0 2年西南 4省市 6 3家医院的呼吸系统类药物的用药数据 ,对其每季度用药金额、用药品种及生产公司进行调查。结果 :2 0 0 2年呼吸系统用药金额为 3345 1786元 ,1季度～ 4季度用药金额分别为全年用药金额的 19 7%、19 3%、2 7 0 %和 34 0 % ;止咳祛痰药占总用药金额的 5 9 4 % ,平喘药占总用药金额的 4 0 6 % ,氨溴索和卡提素两种药物占用药金额的 5 1 4 7% ,国外公司生产及进口药品用药金额约占 2 7%。结论 :呼吸系统用药随季节而变化 ,冬秋季节呼吸系统用药金额明显大于春、夏季节