艾滋病抗体检测室内质控血清的制备和应用

目的：为了提高抗-HIV的检测水平，制备室内质控血清以鉴别诊断试剂的质量和控制操作误差。方法：收集抗-HIV诊断试剂盒中阳性对照血清，采用不同厂家、不同批号的诊断试剂检测后将混合的阳性对照血清进行稀释分装成低值弱阳性作为室内质控血清。结果：试制的室内质控血清在-20℃条件下存放12个月在4℃条件下存放7d检测结果稳定。结论：该质控血清适宜作抗-HIV初筛试验室室内质控使用。     

血细胞分析仪室内质控方法探讨

目的：探讨自动化细胞分析仪的校正，室内质量控制的有效方法，确保血液常规检验结果的准确性和一致性；方法：采用美国亚培公司全血校正物校正CD－1700，用省临检中心的室内质控物在CD－1700上建立的质控系统对另外两台血细胞分析仪进行校正及质量监控，分别用三台细胞分析仪测定30份抗凝血的四项指标，对结果进行统计处理，结果：四项指标在三台仪器上的分析结果差异无显著性意义，结论：定期进行仪器校正，建立统一的室内质控系统是保证仪器间结果可比性的有效措施。     

TB AccuProbe、INNO-LIPATM RIF.TB探针和rpoβ DNA测序三种方法鉴定结核分枝杆菌的研究

目的：用3种先进的技术－TB AccuProbe DNA杂交法、INNO－LIPA^TM RIF.TB(LiPA)探针试验和rpoβ DNA基因序列测定的前瞻性研究，以鉴定结核分枝杆菌复合物（MTBC）和非结核分枝杆菌（NTM）及其成本效益。方法：在Bactec MGIT 960培养系统中将获得的105例阳性培养物筛选出70例MTBC和35例NTM，用3种技术鉴定并检测其rpoβ基因序列突变位点。结果：TB AccuProbe杂交阳性率是95．7％（67／70），LiPA DNA探针阳性率是98．6％（69／70），rpoβDNA序列测定阳性率是97．1％（68／70）。3种方法两两比较差异在统计学上均无显著意义（P＞0．05）。每份阳性培养物花费时间：TB AccuProbe杂交法和LiPA DNA探针法在24小时内完成，全部完成需6－37天，平均为15天；rpoβ基因序列测定需4－5天完成，全部完成需8－40天，平均17天。比传统的4－8周鉴定时间减少了很多。每份标本所需费用3种方法各为120、194和96元。在35例NTM中，3种方法均为MTBC阴性，同时rpoβDNA序列测定鉴定了NTM的种类。结论：TB AccuProbe杂交和LiPA DNA探针操作简便，所需时间短，只能鉴定MTBC和NTM。但LiPA DNA探针还能鉴定rpoβ基因位点突变；rpoβ基因序列测定所需时间稍长，要有特定仪器和专门人员，但所需费用较低，除能鉴定MTBC外，还能测定MTB rpoβ基因位点突变，同时能鉴定NTM的种类。     

浓度对数和Ct值在HBV-DNA定量检测室内质控中的应用

目的探讨浓度对数和Ct值两种参数在乙肝病毒-脱氧核糖核酸（HBV—DNA）定量检测室内质控中的应用。方法分别以室内质控品浓度对数和Ct值的均值、标准差绘制Levery—Jennings质控图。结果以质控品浓度对数为参数分析质控结果时出现22S失控;而以Ct值为参数分析质控结果时未发现失控。结论以质控品浓度对数为参数分析室内质控较Ct值更为敏感。能更好地保证HBV-DNA定量检测的质量。     

加热灭活的BCG加Eurocine^TML3佐剂的抗结核病免疫

预防结核病(TB)的有效手段是接种疫苗，目前常用的疫苗为减毒活疫苗卡介苗(BCG)，但这种疫苗在免疫缺陷人群中易引起感染的扩散。BCG能预防7岁以下儿童的播散性TB，但对预防肺TB几乎无效。     

BCG疫苗的效价比较高

据一个国际研究小组说，卡介苗（BCG）疫苗在预防严重儿童肺结核（TB）方面具有很高的效价比，并且应在TB高发国家推广。 研究者们评价了被分为9个世界亚区的194个国家过去五年的BCG价效比。他们采用已发表的有效性数据、疾病发生率数据和人群数据，评估在2002年出生的儿童发生严重TB（结核性脑膜炎和粟粒状TB）和BCG预防的病例数；每剂疫苗的费用估计为2～3美元。     

HPLC法测定复方依那普利片累计溶出度

目的：复方依那普利药物中的有效成分为马来酸依那普利与氢氯噻嗪，本研究采用HPLC法测定复方依那普利的累计溶出度。方法：采用LUNAC18柱，甲醇－乙醚－三乙胺－水（3：0．025：0．01：20）为流动相，检测波长为215nm和272nm。结果：含量测定方法较好地分离被测组分和有关杂质，被测组分的线性关系很好，回收率满意，溶出度为90％以上。结论：此质量标准能很好地控制成品质量。     

沙门氏菌质控样的研制及其在能力验证中的应用

目的：研制均一性和稳定性符合能力验证要求的质控样品,并将质控样品用于沙门氏菌的能力验证。方法（1）通过对沙门氏菌质控样品的储藏稳定性、运输稳定性及均一性的检验,对沙门氏菌质控样品进行评价。（2）实验室能力验证中考核方案的设计：一套考核样品包括18份沙门氏菌的质控样品,设置3个浓度水平,阴性空白对照、阳性对照、101 CFU水平和100 CFU水平。（3）防止数据串通措施：将参试实验室随机分成2组,每组实验室获得的质控样品不同;低浓度样品的结果是双盲。结果沙门氏菌的质控样品在均一性、储藏稳定性和运输稳定性均能满足质控样品使用的要求;在考核中,76家实验室有7家实验室不合格,35家实验室优秀,34家实验室合格。结论沙门氏菌的质控考核样品可以满足能力验证的需求,本次能力验证可以真实地反映参试单位的检测水平。     

口服脂质化卡介苗能预防小鼠肺结核

卡介苗(BCG)是全世界应用最广的疫苗，自发现以来已接种达30亿剂，但其保护效力变化不一，从0％至80％不等，研究表明BCG接种能使肺结核(TB)的危险性降低50%，TB的死亡率降低70％。本文报道了新型脂质化BCG配方的研制，及其在小鼠中的     

LAK细胞/nIL-2加BCG膀胱灌注预防表浅膀胱癌复发

采用LAK细胞／nIL－2（天然白细胞介素2）加卡介苗（BCG）膀胱灌注（A组）．并以单纯预防表浅膀胱癌复发用BCG（B组）进行对照。结果：A组20例，随访14～38个月，平均28个月，复发率5％（1／20）；B组14例，随访14～28个月，平均23.4个月，复发率21％（3／14）。两组比较差异有显著意义。治疗后A组外周血NK细胞活性、CD3、CD4以及CD3／CD8比值均较治疗前明显增高（P＜0．05），同时也高于B组。提示：LAK细胞／nIL－2加BCG膀胱灌注能显著提高细胞免疫功能，是一种较理想的预防表浅膀胱癌术后复发的方法。     

丙型肝炎病毒抗体酶标诊断试剂及国家质控参考品的关系

目的对丙型肝炎病毒（HCV）抗体酶联免疫诊断试剂和抗HCV国家质控参考品的过去、现在和未来进行回顾和展望。方法根据HCV抗体酶联免疫诊断试剂和抗HCV国家质控参考品的研制过程,对国产和进口抗-HCV酶联试剂的检测灵敏度、特异性进行论述,阐明国家质控参考品所起到的作用。结果与结论目前我国的丙型肝炎病毒抗体酶标诊断试剂已接近或达到国际发达国家同类产品的质量水平。与之相伴的HCV抗体国家质控参考品也随之不断完善,对抗HCV酶联免疫诊断试剂的质量控制起到了重要的作用。     

分泌人共刺激分子B7-2的重组卡介苗的构建及表达与鉴定

目的构建分泌表达人共刺激分子B7-2（hB7-2）的重组卡介苗（rBCG）。方法采用聚合酶链反应（PCR）以含hB7-2的质粒为模板扩增出hB7-2活性序列,利用基因重组技术插入pYL-MCS质粒构建出分泌型卡介苗穿梭表达载体pYL—hB7-2。用电穿孔方法将该质粒转入卡介苗得到rBCG,利用PCR扩增和测序检测其hB7-2的DNA表达,分别SDS-PAGE和ELISA法测定rBCG上清液中和菌内hB7-2蛋白。结果酶切鉴定、PCR扩增和DNA测序均表明rBCG含有的hB7-2DNA与文献结果一致,SDS—PAGE检测出有相应蛋白表达,ELISA法测定rBCG上清液中分泌的B7-2蛋白为3．8U／ml。结论构建的重组BCG可以分泌表达人共刺激分子hB7-2,能够提供激活免疫反应的共刺激信号,将会成为膀胱肿瘤免疫治疗的一种新型方法。     

WHO GPCL质量管理理念在细菌内毒素检测实验室的应用研究

目的研究GPCL质量管理理念在细菌内毒素检测实验室的应用,保障细菌内毒素检测的可靠性。方法从环境设施、仪器设备、数据处理设备、储存设施、标准物质、试剂、材料、外部能力验证、人员及其他共10个方面,将GPCL质量管理理念与细菌内毒素检测实验特点相结合,提出具体方法和参考经验。结果与结论构建了符合GPCL要求的细菌内毒素检测实验室框架。     

检验检测机构化学试剂QC实验室的关键要素分析

目的：验证实验试剂的质量,为检验工作选择符合要求的化学试剂提供数据依据。方法：对QC实验室成立以来已完成的2批常用化学试剂的检测情况进行总结,并对样品、人员、仪器设备、实验材料、方法标准、环境等6个控制要素进行分析。结果与结论：检验检测机构所使用的实验材料品质,是影响其工作结果的重要因素,建立质量控制实验室（QC实验室）并进行化学试剂质量控制具有重要意义,便于筛选合格供应商,指导并规范实验用试剂及耗材的采购,从而进一步满足食品药品各项检验检测工作的需要,确保检验检测数据与结论的公正性、有效性。     

探讨3种痰TB-DNA提取方法在肺结核诊断中的应用价值

目的优选肺结核诊断中理想的痰TB-DNA提取方法。方法选择我院肺科门诊肺结核患者185例,提取其痰液样本,应用煮沸裂解法、酚/氯仿法、以及进口离心柱法进行分析,对比实时荧光PCR结果。结果进口离心柱法下TB-DNA阳性检出率为81.08%(150/185),明显高于煮沸裂解法以及酚/氯仿法,P<0.05。结论在对疑似肺结核患者痰液标本进行检测中,可优先选择进口离心柱法作为TB-DNA的有效提取方法。     

卡介菌及其衍生制品鉴别实验用BCG DNA国家参考品的研制

目的建立BCG DNA定性用国家参考品,供BCG菌株、卡介菌多糖核酸注射液等卡介菌衍生制品鉴别实验用。方法以紫外分光法检测260nm和280nm的吸光度值,比较A260/280的比值,考量国家参考品BCG DNA的纯度指标;以多重PCR法检测BCG DNA特异性缺失区RD1区是否存在,验证所制备的BCG DNA可作为定性用国家参考品,组织3家实验室对该参考品进行验证;并在不同时间,观察其稳定性。结果所制备的BCG DNA A260/286=1.96〉1.8;BCG DNA国家参考品经多重PCR扩增BCG缺失区RD1的产物为约200bp DNA片段,与卡介菌巴斯德株DNA结果相同,3家实验室的验证结果一致,该制品经37℃4周,4℃3个月、6个月、12个月放置后,PCR结果不变。结论该BCG DNA制品纯度高,稳定,可作为BCG DNA定性用国家参考品,在卡介苗相关制品的质量控制中,做为BCG菌株、卡介菌多糖核酸注射液等卡介菌衍生制品鉴别实验用的国家参考品。     

胶体金免疫层析定性检测试剂的质量控制与评价

目的：探讨胶体金免疫层析定性检测试剂质量控制技术关键要求，为生产企业、检验机构质量控制及评价提供参考，有效地促进该类体外诊断试剂质量水平的提高。方法：结合胶体金免疫层析定性检测试剂质量标准要求及分类管理，对该类试剂质量的关键性能要素进行剖析，提出相应建议，提高试剂质量。结果与结论：质量控制与评价是贯穿产品全流程的核心要素，膜条宽度、液体移行速度、阴性符合率、阳性符合率、检出限、重复性是胶体金免疫层析定性检测试剂质量控制及评价的关键性能指标，对于试剂的质量至关重要。相关生产研发企业要合理设计性能要求，完善质量管理体系；检验机构要根据产品性能要点做好质量评价；监管部门要根据行业需要和监管需要，加快标准制修订工作，加强上市后监管；从生产、检验及监管各环节对这些关键性能指标进行控制，提高试剂的质量标准，从而满足临床和监管的需求。     

三参三黄口服液的质量标准研究

目的建立三参三黄口服液的薄层鉴别方法。方法通过改变实验环境,筛选出适宜的层析条件。结果黄芪、丹参、党参三种主药分离效果好,阴性样品无干扰。结论该法简便可靠、重现性好,可用于三参三黄口服液的质量控制。     

干扰素释放试验(γ-干扰素)、腺苷脱氨酶、结核分枝杆菌脱氧核苷酸在结核性胸膜炎诊断中的对比

目的 探讨干扰素释放试验(γ-干扰素)、腺苷脱氨酶(ADA)、结核分枝杆菌脱氧核苷酸(TB-DNA)在结核性胸膜炎诊断中的效果.方法 128例患者分为结核性胸腔积液(结核组)与非结核胸腔积液组(非结核组),并通过对2组患者的ADA、TB-DNA及IFN-γ三种因子进行检验,观察2组检查指标及其3组因子对结核性胸腔积液患者检测的灵敏度与特异性分析并评价其效能.结果 结核组与非结核组检测结果表明ADA及IFN-γ这两种种因子的检测含量及其检出阳性率差异有统计学意义(P<0.05),且2组间TB-DNA阳性检出率间差异有统计学意义(P<0.05).表明三种检测方法在对于结核性胸腔积液的诊断具有显著意义.单因子效能比较中,ADA的灵敏度要高于金标准,但特异性ADA检测相较于其他方法则相对较低,差异有统计学意义(P<0.05).TB-DNA灵敏度为41.28%其较之于涂片法的4.56%,差异有统计学意义(P<0.05).但相比与金标准培养法的灵敏度即在本试验中36.9%依然存在优势.IFN-γ指标测试结果为其灵敏度为76.49%、特异度为94.77%,暗示其检测指标具有很好的指导效能.在并联实验中,ADA或IFN-γ组合具有最高的灵敏度,与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.05).而组合为TB-DNA或IFN-γ具有最高的特异性,与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.05).其中约登指数最高的组合为TB-DNA或IFN-γ,串联结果特异度最高(99.98%).结论 三种检测方法分别单独使用局限性不能作为单独的诊断标准.使用其中2种大大增强对于该疾病的检出灵敏度与特异度.成为临床检测过程中阳性检出率低、活检过程复杂等相关问题的一大解决方案.     

聚合酶链式反应法在中药材和饮片鉴别中的相关问题探讨

目的：为促进聚合酶链式反应法在中药材和饮片鉴别中的应用,提高检验质量提供参考。方法： 梳理《中华人民共和国药典》收载的中药材和饮片鉴别聚合酶链式反应法在应用过程中发现的问题,从取样代表性、基因组提取、PCR扩增、标准物质和实验室布局等方面探讨聚合酶链式反应法的注意事项,并提出针对性的建议。结果与结论：应结合性状和其他鉴别提高取样的代表性;基因组提取时应注意排除污染,根据样品类型选择合适的提取方法并检验提取基因组质量;PCR扩增用引物设计和DNA聚合酶选择存在局限,使用合适的标准物质、注意实验室布局合理才能提高检验质量。