123株肺炎链球菌的分离鉴定及分子分型

目的对临床诊断为大叶性肺炎、气管炎、中耳炎、胸膜炎、心内膜炎和败血症等病人进行血液等标本的采集、细菌培养和分型鉴定,为补充河北省肺炎链球菌菌型资料和疫苗的正确选择提供科学依据。方法对分离的123株肺炎链球菌进行分子鉴定和分子分型研究,普通PCR对肺炎链球菌进行种属鉴定,多重PCR方法对菌株进行菌型分析。结果经PCR检测,123株菌的cps A基因扩增均为阳性,阳性标本经多重PCR分型检测,19F和6A/6B型所占比例最大,分别为39. 02%和11. 38%,且型别类型多达20种。结论 123株肺炎链球菌19F和6A/6B型所占比例最大,且菌型丰富,为全省制定肺炎链球菌疫苗使用策略提供了科学依据。     

A组链球菌血清学分型与风湿热发病的研究

自20年代末以来,由于对链球菌细胞壁的抗原成分,特别是对乙型溶血性链球菌的C多糖,M、T蛋白抗原和血清混浊因子(SOF)的探入研究,不仅阐明了链球菌分组的物质基础,而且也为细菌组内分型以及分型与致病作用的研究创造了有利的条件。目前,虽然人群中急性风湿热的发病在减少,严重性在减轻,尤其在北美和欧洲比较富裕的人群中甚为明显,但在发展中国家,特别是我国南方学龄儿童     

50株肺炎链球菌耐药性分析

近几十年来 ,耐青霉素肺炎链球菌 (PRP) ,多重耐药肺炎链球菌 (MDRP)菌株逐渐增多 ,因此掌握肺炎链球菌的耐药动态 ,合理用药 ,成为治疗肺炎链球菌感染的关键。本文就我院5 0株肺炎链球菌耐药性分析 ,报告如下。1　材料与方法1 1　菌株来源 :肺炎链球菌 5 0株均分离自 2 0 0 2年 1月至 2 0 0 3年 1月 ,我院门诊及住院患者的痰、脓、血、胸腹水等标本。1 2　培养与鉴定 :按照《实用临床微生物诊断学》[1] 及《临床检验操作规程》[2 ] 1～ 2进行培养鉴定 ,培养基及生化鉴定系列增购自浙江省后勤部防疫检验所。1 3　药物敏感实验 :采用Kirb…     

武汉地区肺炎链球菌的红霉素耐药性分析及血清分型研究

目的 研究武汉地区肺炎链球菌的红霉素耐药率、耐药表型及肺炎链球菌血清分型分布情况.方法 以琼脂稀释法测定红霉素、青霉素及其他大环内酯类等抗菌药物对304株肺炎链球菌的最低抑菌浓度(MIC),采用荚膜肿胀试验进行血清分型,以双纸片法测定红霉素耐药菌株的耐药表型.结果 304株肺炎链球菌红霉素耐药率高达84.21%(256/304).红霉素耐药菌株中,cMLSB型耐药占98.44%(252/256),M型耐药仅占1.56%(4/256).血清分型涉及20个血清型、群,主要集中在19、23、6、15和14血清群,其中PNSSP集中分布在6、19、23和未分型血清群.结论 武汉地区红霉素不敏感肺炎链球菌的发生率较高,其耐药表型以cMLSB型为主,双纸片法对此耐药表型的检测有很好的预见性.血清分型,尤其多重耐药菌株以6、19和23血清群为主,推荐采用疫苗免疫预防肺炎链球菌感染.     

保定市致病性肺炎链球菌分子分型研究

目的了解保定市肺炎链球菌血清型分布,为肺炎疫苗的免疫预防提供依据。方法收集2013-2015年保定市3家医院临床分离的非重复性肺炎链球菌210株,采用PCR方法进行鉴定和分型,并对实验结果进行分析。结果210株肺炎链球菌主要菌型有19F、19A、6A/6B,分别达到30.0%、16.7%、11.0%;55株成人肺炎链球菌主要菌型有19F、5、19A血清型(群),分别达到18.2%、16.4%、14.5%;155株儿童肺炎链球菌主要菌型有19F、19A、6A/6B血清型(群),分别达到34.2%、17.4%、14.7%;31株侵袭性儿童肺炎链球菌主要菌型有19F、19A、6A/6B、14和1血清型(群),分别达到25.8%、16.1%、12.9%、12.9%、9.7%。结论肺炎链球菌血清型分布在地区之间、儿童与成人之间及侵袭性与非侵袭性菌株之间存在差异,应综合考虑以上因素,合理选用预防疫苗。     

207株绿脓杆菌的生物学特性及血清学分型

近年来,由绿脓杆菌引起的医院内感染在不断增加,严重地威胁着医院内抵抗力低下患者的健康。为此,国内外均在对其进行研究,以期达到控制绿脓杆菌引起人类各种机会感染的目的。本文将近来分离的207株绿     

保定市肺炎链球菌基因分型与耐药性研究

目的了解保定市肺炎链球菌血清型和耐药性特征,指导临床用药。方法收集2013-2015年保定市3家医院临床分离的非重复性肺炎链球菌210株,对这些菌株采用多重PCR方法进行分型,再用K-B法判定药物的敏感性,分析不同血清型SP的耐药性。结果 210株肺炎链球菌菌型主要有4种,分别为血清型19F(30.0%)、19A(16.7%)、6A/6B(11.0%)、5(5.2%)。≤5岁年龄组患者PRSP(口服折点)的发生率最高达到48.4%,其阿莫西林耐药率高于其他年龄组(20.0%、17.6%),差异有统计学意义(χ2=6.103,P0.05)。不同年龄组对氟喹诺酮类药物都保持很高的敏感率(100.0%)。血清型19F和19A的PNSP菌株对阿莫西林、头孢曲松的不敏感率显著大于PSSP菌株(P0.05);19F、19A、6A/6B和5型对美罗培南的不敏感率PNSP菌株均显著大于PSSP菌株(P0.05)。左氧氟沙星、氧氟沙星、万古霉素、莫西沙星对各血清型都有很高的敏感性。结论目前SP耐药形式严峻,应及时监控肺炎链球菌的血清分型和耐药性变化。     

92株肺炎链球菌的耐药分析

目的了解肺炎链球菌的耐药情况,为临床用药提供依据。方法对浙江大学医学院第一附属医院2008年1～12月间从临床分离出的92株肺炎链球菌采用K—B纸片扩散法检测其对6种抗生素的敏感度。结果肺炎链球菌对青霉素的耐药率为46．7％,提示耐青霉素的肺炎链球菌较以往有所增加。对红霉素、克林霉素、复方新诺明有较高的耐药率,分别为87％、82．6％、69．4％,对莫西沙星的耐药率较低为7．7％,未检出对万古霉素耐药的菌株。结论该院分离的肺炎链球菌耐药较为严重,耐青霉素的肺炎链球菌不断上升,有必要对其进行耐药性监测,指导临床合理选择抗菌药物。     

133株肺炎链球菌耐药性分析

目的 了解本院肺炎链球菌分布和耐药情况.方法 对本院2005年1月-2007年7月从临床分离的133株肺炎链球菌采用K-B纸片扩散法检测其对青霉素等7种抗生素的敏感度,用E-test法检测对苯唑西林耐药的肺炎链球菌青霉素的MIC值.结果 青霉素的耐药呈上升趋势,尤其是2007年上半年.肺炎链球菌对四环素(TCY)、红霉素(ERY)、克林霉素(CLI),有较高的耐药率,分别为63.2%、59.4%、51.9%,对青霉素(PEN)、氯霉素(CHL)、左旋氧氟沙星(LEV)的耐药率较低,分别为15.0%、12.8%、3.0%,未检出对万古霉素耐药的菌株.青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSSP)的E-test检测结果以中介菌株为主,PNSSP的MIC值最高达到6μg/ml.结论 本院分离的肺炎链球菌耐药较为严重,耐青霉素的肺炎链球菌不断上升,有必要对其进行耐药性监测,指导临床合理选择抗菌药物.     

肺炎链球菌血清型鉴定的分子生物学检测方法

荚膜基因控制肺炎链球菌荚膜的生成,该基因是分子生物学方法检测血清型的基因基础,以不同分子生物学为基础的血清型检测方法针对荚膜基因的区域不一致。多重聚合酶链反应(PCR)、多重PCR反向线性杂交和基因芯片针对血清型特异性区域对血清型进行检测。限制性片段多态性和测序为基础的血清型检测方法利用相对保守区域的基因多态性和血清型相关对血清型进行检测。该文总结了多重PCR、多重PCR反向线性杂交、基因芯片、限制性片段多态性和测序检测血清型的方法。     

98株肺炎链球菌耐药性调查

目的了解本院住院患者鼻咽部链球菌耐药性。方法对本院2008年1—12月分离的98株肺炎链球菌进行药敏试验。结果青霉素耐药率8．2％,苯唑西林耐药率77．6％,耐苯唑西林同时也耐红霉素、林可霉素。结论肺炎链球菌耐药性上升迅速,且耐药程度高。加强对肺炎链球菌耐药性监测,采取合理有效的用药措施,减小耐药株的产生,是细菌检验工作与医院感染监测工作的重要内容。     

118株肺炎链球菌的临床分布及耐药性分析

目的 了解肺炎链球菌的临床分布及耐药情况,为临床合理用药提供依据.方法 浓度梯度法(E-test)检测青霉素和头孢噻肟的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),其他11种抗生素采用纸片扩散法进行药敏试验.结果 共检出118株(118例)肺炎链球茵.标本来源以痰、眼分泌物、咽拭子为主,分别占50.8％、30.5％、16.1％;病区分布主要在儿科、眼科,分别为51.7％、30.5％.其对青霉素、头孢噻肟、万古霉素、奎奴普汀/达福普汀、利福平、利奈唑胺耐药率为0.0％;对左氧氟沙星、氧氟沙星和氯霉素耐药率分别为1.7％、1.7％和11.0％,对克林霉素、四环素、复方新诺明、红霉素耐药率均在80.0％以上.结论 118株肺炎链球茵主要来自痰标本,分布在儿科.青霉素、头孢噻肟、万古霉素等抗生素对其有较好的体外抗茵活性.     

儿科痰培养肺炎链球菌耐药性分析

目的分析儿科痰培养肺炎链球菌的耐药情况,为临床合理用药提供参考。方法对本院1560例肺炎患儿进行痰培养,对肺炎链球菌进行药物敏感试验。结果检出肺炎链球菌共120株,以婴幼儿多见。头孢霉素、四环素以及氯霉素随着青霉素的最低抑菌浓度（MIC）升高而对肺炎链球菌的敏感性下降。青霉素敏感株的7.54%、中度耐药株的94.11%和高度耐药株的100%对1种以上的其他抗生素耐药。结论肺炎链球菌耐药性上升迅速,且耐药程度高,临床上应该注意避免盲目用药,应该及时行药物培养并根据药敏结果酌情用药。     

肺炎链球菌表面粘附素A蛋白抗原表位的预测筛选及确定

[目的]确定肺炎链球菌表面粘附素A(PsaA)蛋白抗原的B细胞、CD4 T细胞和CD8 T细胞表位.[方法]通过生物信息学方法预测肺炎链球菌PsaA蛋白分子小鼠B细胞线性表位、MHC-Ⅰ结合肽(CD8 T细胞表位)及MHC-Ⅱ结合肽(CD4 T细胞表位)并人工合成相应肽段;克隆重组质粒BL21/pET/PsaA并得到纯化的rPsaA蛋白用以免疫小鼠;分离每只免疫组和对照组小鼠的血清分别与人工合成的候选B细胞表位肽段进行间接ELISA检测,筛选B细胞表位;分离小鼠脾及淋巴结细胞并分别与人工合成的T细胞候选表位肽段体外共培养,取上清进行双夹心ELISA检测IFN-γ的量进行初步筛选.用初筛到的表位多肽刺激小鼠的脾及淋巴结细胞并进行细胞内染色及细胞流式检测,确定PsaA蛋白分子T细胞表位.[结果]分析PsaA蛋白分子的B细胞表位及MHC-Ⅰ结合肽、MHC-Ⅱ结合肽;得到候选B细胞表位肽10条,MHC-Ⅰ结合肽21条,MHC-Ⅱ结合肽7条,并进行了人工合成.利用分子生物学技术获得了rPsaA蛋白并成功免疫了小鼠.间接ELISA结果显示:肽段PB2、PB6,PB7与rPsaA免疫小鼠的血清发生反应,其OD450nm读数比相应的阴性对照小鼠显著升高;双夹心ELISA结果初步提示:肽段PⅠ 10、PⅠ 14、PⅠ 17、PⅠ 18、PⅠ21以及肽段PⅡ2、PⅡ5、PⅡ6刺激免疫小鼠细胞产生的IFN-γ量比相应的对照小鼠显著升高.细胞流式结果进一步确定:经肽段PⅡ2、PⅡ5刺激后,免疫小鼠细胞中IFN-γ和CD4双阳性细胞百分比较对照小鼠细胞显著升高;经肽段PⅠ 14、PⅠ 17、PⅠ21刺激后,免疫小鼠细胞中IFN-γ和CD8双阳性细胞的百分比较对照小鼠细胞显著升高.[结论]确定了肺炎链球菌PsaA蛋白分子的3个B细胞线性表位;2个CD4 T细胞表位;3个CD8 T细胞表位.     

儿童肺炎链球菌的血清型及对抗生素的耐药性

目的　对本校儿科医院住院病例进行肺炎链球菌的血清型和耐药性监测。方法　收集因呼吸道感染而住院的病例痰标本和病史资料 ,同时采集部分患儿的血标本 ,分离与鉴定标本中的肺炎链球菌。荚膜肿胀试验进行血清分型 ;E test测定对青霉素的最低抑菌浓度。结果　共收集到 10 13例患儿的资料 ,分离出 112株肺炎链球菌。 19F、2 3F、6A、14和 6B等 5种血清型占 81.3% ( 91/112 ) ,其他类型的血清型占 11.6 % ( 13/112 )。另有 7.1% ( 8/112 )的肺炎链球菌不能分型。只有 1例血标本检测到肺炎链球菌 ,这可能与患儿入院前的抗菌素广泛使用有关。对青霉素中度和高度耐药的肺炎链球菌比例分别为 5 0 .9%和 8.0 % ;对氨苄青霉素、头孢唑林、头孢克洛、头孢曲松、红霉素、氯林可霉素和氯霉素的耐药率分别为 5 8.6 %、6 .6 %、2 5 .0 %、6 .6 %、85 .7%、6 6 .7%和 2 8.2 %。在 6 6例对青霉素耐药的菌株中 ,以 9F血清型最为多见 ,其次为 2 3F和 14。结论　肺炎链球菌是导致上海地区儿童呼吸道感染的重要病原菌 ,主要由 5种血清型组成 ,该菌株对各类抗菌素的耐药性普遍较高     

肺炎链球菌耐药性和TEM基因的研究

目的 :分析肺炎链球菌感染的耐药及其机制 ,以有效的指导临床进行合理的治疗与用药。方法 :对 2 0 0 3年 7月 1日至 2 0 0 3年 12月 31日就诊于儿童医院的上呼吸道感染儿童 ,进行的咽拭子培养 ,对分离出的肺炎链球菌 ,再进行耐药性方面的检测 ,用套式 PCR对 TEM基因进行检测。结果 :32例标本中对青霉素敏感的为 16 6 % ,安灭菌31% ,头孢呋肟 91% ,头孢噻肟 88% ,菌必治 94 % ,红霉素 34% ,复方新诺明 4 4 % ,氯霉素 97% ,万古霉素 10 0 % ,环丙沙星 91% ,克林霉素 2 5 % ,阿奇霉素 31% ,同时对其中 2 0例标本的 TEM基因进行检测 ,其阳性率为 5 0 %。含有 TEM基因的肺炎链球菌 ,其对β-内酰胺类药物中的青霉素耐药性较强 ,耐药率达到 90 % (9/ 10 ) ;TEM基因阴性的标本 ,其对β-内酰胺类药物的青霉素耐药性就比较弱 ,敏感率为 90 % (9/ 10 ) ,中介率 10 % (1/ 10 )     

儿童社区获得性肺炎病例肺炎链球菌分离株的耐药分析

目的 分析昆明地区社区获得性肺炎住院病例中肺炎链球菌感染的耐药状况.方法 对2007年1月至2010年12月间年龄28d～8岁的4 780例诊断为社区获得性肺炎(CAP)住院患儿进行痰培养,采用链球菌细菌鉴定板鉴定,并行药敏试验.结果 从所检测CAP患儿痰液中培养分离出344株肺炎链球菌,它们对青霉素不敏感率为45.6％; 2007年至2008年肺炎链球菌对青霉素、红霉素、克林霉素、头孢噻肟、头孢曲松、氧氟沙星的耐药率分别为38.5％、38.3％、4.8％、16.0％、16.4％、3.6％; 2009年至2010年SP对上二述药物的耐药率分别为60.9％、68.0％、42.6％、36.7％、32.3％、3.1％;未检出对万古霉素耐药的菌株.青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSSP)对红霉素、克林霉素、头孢噻肟、头孢曲松、氧氟沙星的耐药率均高于青霉素敏感肺炎链球菌(PSSP).结论 CAP患儿住院病例中分离到的肺炎链球菌对万古霉素、氧氟沙星的敏感性极高,对青霉素、红霉素、克林霉素、头孢噻肟、头孢曲松的耐药率出现逐年增加的趋势.     

重庆地区健康幼儿肺炎链球菌携带率及耐药性的调查分析

目的 :调查重庆地区健康幼儿的肺炎链球菌携带率及其对 8种抗菌药物的体外抗菌活性 ,用以评估社区耐药发生率及预测临床株耐药性。方法 :采用琼脂扩散法与定量琼脂稀释法。结果 :从 4 0 0例健康幼儿鼻腔中取鼻咽拭子 ,分离到 76株肺炎链球菌 ,幼儿携带率为 19% ,通过定量琼脂稀释法确认 76株肺炎链球菌中有 6株耐青霉素肺炎链球菌 (Pencillin Resistance to Pneumonia,PRP)。结论 :与其他地区相比 ,重庆地区健康幼儿的肺炎链球菌携带率不高 ,但随着抗生素的广泛使用 ,耐药株有可能增加 ,应引起高度重视